METODOS DE ANALISIS INSTRUMENTAL

7.1 INTRODUCCIÓN
Hoy en día análisis químico significa análisis instrumental, resolver los nuevos problemas del
análisis químico y los antiguos, el químico analítico moderno tiene a su disposición una variedad
de instrumentos y su labor sería imposible sin ellos. Por tanto el estudiante de química debe
aprender instrumentación analítica y tener cierta experiencia práctica en el uso de instrumentos.

Los instrumentos analíticos son caros y alguno de ellos muy caros. Sin embargo no es necesario
que un estudiante trabaje con todas las clases de instrumentos existentes, los que es importante
es adquirir cierto sentido de los instrumentos. Por ejemplo conocer en que se basa su
funcionamiento y que puede conseguirse de ellos.

Debe ver por si mismo, por su propia experiencia práctica que proporcionan información útil para
resolver problemas prácticos importantes.

Los químicos analíticos resuelven problemas de composición química con los métodos más
sencillos y efectivos que disponen: Hay muchos casos en que la valoración o un simple ensayo
cualitativo realizando en tubos de ensayo podrán dar la información que se necesita. Los métodos
gravimétricos y volumétricos no han caducado, pero son lentos, para satisfacer las necesidades
de la industria moderna.

En este capítulo describiremos los instrumentos analíticos más sencillos, pero útiles.

7.2 DEFINICIÓN
Basado en la interacción de la materia y la energía electromagnética, cuyas respuestas son
características físicas y químicas de un analito. Estas características obedecen a las leyes
fundamentales de la física y la química.

7.2.1 La espectrofotometría
Es un conjunto de técnicas que utilizan la luz para medir concentraciones
químicas.
- Propiedades de la luz.- Las hondas de la luz constan de campos eléctricos y magnéticos
que oscilan en planos perpendiculares entre sí , Figura 1

la fig 1. Muestra una onda polarizada en el plano,

El campo eléctrico se encuentra en el plano x - y , el campo magnético en el plano x -z. En la fig

2 , se observa las oscilaciones del eléctrico: donde la longitud de onda, λ, es la distancia entre
las crestas de dos ondas.

La frecuencia, ʋ, es el número de oscilaciones completas de una onda en un segundo. La unidad

es el inverso de los segundo, s-1.

La relación entre ʋ y λ :

ʋ λ = C 1
Dónde: C= Velocidad de la luz (2,998 x 10 8 m/s en el vacío).

En un medio distinto del vacío, la velocidad de la luz es C/n, n, es el índice de refracción en ese
medio.

Para λ en el visible la mayoría de las sustancias es n > 1. Así la luz visible se propaga más
lentamente a través, de la materia que en el vacío. fig 3

Desde el punto de vista de la energía, la luz definimos como fotones. Cada fotón transporta la
energía, E.,
-34
E=hʋ h = constante de Planck (6,626 x 10 J-s) 2

De ec.1 ʋ = C/λ 3

Sust. en ec.2: E = h C / λ ;

E = h C ʋ’ 4

En la ec. 1 desp. λ = C/ʋ 5

Sust. en ec. 3 λ = C ʋ’ donde ʋ’ n° de onda 6

Donde ʋ’ (= 1/ λ ), es N° de onda. La energía es inversamente proporcional a la λ pero,

directamente proporcional al N° de onda, ʋ´, su unidad es cm -1.

7.2.2 Regiones del espectro electromagnético

No hay cambios bruscos en las características de la radiación electromagnética cuando

pasamos de una región a otra. Estas regiones se mostraran en fig 3
.
La región UV, se extiende desde 10 – 380 nm
La región más útil en el análisis es de 200 – 380 nm.

La región UV cercano o UV – cuarzo: < 200 nm o región UV al vacío.

Región Visible desde 380 – 780 nm, es una parte muy pequeña del espacio electromagnético.

Es la región de λ que puede ver el ojo humano, la luz aparece como color.

La región IR desde 0,78 – 300 µm, el intervalo que se usa para el análisis es de 2,5 – 1,5 µm:

IR, cercano es de 0,8 - 2,5 µm.

IR , medio , 0,8 - 2,5 µm
IR, lejano, la λ es > a 16

7.2.3 Absorción de la luz o radiación

En la región visible: se ven los objetos con color porque transmiten una parte de la luz.
La luz blanca o policromática que es el espectro de λ en la región visible atraviesa un objeto. El
objeto absorberá una cierta λ y transmitirá las λ que no absorban. Estas λ residuales transmitidas
se percibirán como color, este color es complementario a los colores absorbidos.
Los objetos opacos también absorberán ciertas λ y dejan que el color residual se refleje y se vea.
7.2.3. 1 Absorción molecular
Puede absorber una radiación la molecula. Cuando una molecula absorbe un fotón aumenta
la energía de la molecula, Es decir la molecula ha pasado a un estado excitado. Si una molecula
emite un fotón disminuye la energía de la molecula, ver la fig 4.

Energá

Absorción Emisión Estado

fundamental
El estado de mínima energía de una molécula es el estado fundamental.

La radiación de microondas estimula el movimiento rotacional de las moléculas al absorber esa

radiación.

La radiación de IR estimula el movimiento vibracional de las moléculas cuando la absorben.

La radiación VIS- UV hacen que los e- pase a orbitales de mayor energía.

Los rayos x y radiación UV de λ corta rompen enlaces químicos y ionizan a las moléculas.

Los rayos x que se utilizan en medicina pueden ser perjudiciales para el cuerpo humano y deben
ser reducidos al mínimo.

7.2.2.2 Cálculos

La fracción de radiación que absorbe una solución de un analito se puede relacionar

cuantitativamente con su concentración.

Cuando una muestra absorbe luz, la irradiancia (energía), de haz de luz por unidad de tiempo y
de área, vatios /m2,(W/m2),disminuye. ver fig 5 .

Fuente de luz Selector de λ P° Muestra p Detector de luz

b
Observamos la luz monocromática, con una irradiancia p° incide en una muestra de λ b. La
irradancia del haz de luz que emerge por el lado opuesto de la muestra es p.

Transmitancia, T, es la fracción de la luz incidente que pasa a través de la muestra:

T = P/P° = 10- k b 7

Donde: T, transmitancia, su valor es 0 - 1,0

%T es 100T, su valor es de 0 - 100%

Aplicando log:
 log T = log P/P° = -k b 8

Ley de Beer y colaboradores establecieron que una ley similar rige la dependencia entre T y c
(concentración)
- k’ c
T= P/P° = 10 9

Aplicando log: logT = log p/p° = - k’ c 10

Al combinar las ecuaciones 7 y 9 se obtiene la ley de Beer que describe la dependencia de T

respecto a la trayectoria recorrida, a través de la muestra, b y la concentración, c:

T10 –k b T = 10 -k´ c 11

(a) (b)

Aplicando log: log T = - k b y log T = - k’ c 12

Igualando y cambiando de signo:

K b = k’ c 13

b = k’ c / k 14

donde k’/k = a (absortividad molar o ԑ )

entonces:
b=ac 15

Remplazando en ecu. 11(b), se tiene:

T = 10 – a b c 16

Por tanto T = P/P° = 10 – a b c 17

Aplic. log: log T = log p/p° = - a b c 18

Omitiendo el signo: log T = log p/p° = a b c 19

El % de transmitacia se define:

% T = P/P° X100

Un reacomodo de la ecuación de la ecuación 19

T = % T/ 100

En ecuación 19 sustituimos: T%T/ 100

A = -log T = log 1/ T
A = log 1/ %T/ 100 = log 100/ % T = log 100- log%T
A log 100 – log % T

Resolviendo:

A = 2 – log%T

Despeja % T : %T = antilog (2,0 - A)

Absorbancia:
A = - log T 20

o´

A = 1 / log T 20’

Sustituyendo ec. 18 en ec. 20’

A = log 1 / p/ p°

A = log P° /P = ԑ b c (a = ԑ) 21

A = log 1/ T = log P° / P = ԑ b c 22

Ec. 22, es la segunda Ley de Beer

Se observa la ecuación 22: la absorbancia es directamente proporcional a la concentración y es

adimensional.

La concentración de la muestra, c, es en g / L 0’ mol/L

El camino óptico, b, en cm, en espectrometria UV-VIS es, 1,0 cm

-1
ԑ, ( epsilón), es la absortividad molar, en M cm -1 , así el producto, ԑ b c es adimensional.

El producto ԑ b c, es adimensional.
La absortividad molar, es la característica de una

Resumen de símbolos

Absorbancia A
Absortividad(a): cm-1 g/L

Longitud de la trayectoria (b) , cm

Transmitancia, T

Longitud de onda en nm
Concentración en g/ L

La longitud de la trayectoria, b (ancho de celda), en cm

a, es la constante absotividad y depende de λ y de la naturaleza del material absorbente

En un espectro de absorción, la absorbancia varia la λ en proporción directa de a ( con b

constantes)

La absortividad, a se puede emplear en otras unidades que no sea cm-1 g/L , ejemplo en ppm.

El Producto de la absortividad x PM de la sustancia absorbente se llama absortividad molar : ԑ

A =ԑbc

Donde c = mol L
d = 1,0 cm en UV- Visible
ԑ = cm-1 mol-1 L

Ejemplo de Aplicación

1- El porcentaje de transmitacia de una muestra el del 50%. Cuál será su absorbancia)

%T = 50 A = - log T

T = 0,50 A = - log 0,50

A = 0,301

Ejemplo 2

La absortividad molar del Mno4- disuelto en agua es 2 500 cm -1 x 1 x mol-1 a 525 nm. ¿Cuantos
mg de Mn presentes en forma de MnO 4- en un litro de solución darían una absorbancia 0,50 en
una cubeta de 1 cm?

Datos Solución
ԑ = 2500 cm -1 x 1 L x mol -1
A = ԑcb
λ = 525
c = A/ԑb
Mn = mg

A = 0,50 (a) c = 0,50/ 2500 cm -1 x1 cm x mol -1

-4
b = 1 cm c = 2 x 10 M

(b) 55 g Mn - 1M - 1,000L
-4
X - 4 X 10 - 1,000 L

X = 0,011 g/ L
 X= 11 mg/L de Mn

7,3 Instrumentation Spectroscopic

El espectrómetro que descompone la radiación policromática en distintas longitudes de onda,

λ.

7, 3,1 Diagrama de bloques

Fuente → Monocromador → Muestra → Detector →

Dispositivo
de lectura

(Registrador)

Fuente, Debe tener una producción de radiación fácilmente detectable en la región de λ, para lo
cual está diseñado el instrumento. Sin embargo ninguna fuente tiene una emisión espectral
constante.

• La fuente más empleado para la región visible es una lámpara incandescente de filamento de
tungsteno fig. 6. El espectro de emisión de esa lámpara:

Energía relativa

De salida

λ (nm)

El intervalo útil varía de 325 ó 350 nm a 3 µm

Para la región UV, se usa como fuente un tubo de descarga de h2 o de deuterio a baja presión.
Así se usa desde 185 nm hasta 375 nm. La fuente debe tener una ventana de cuarzo.

La radiación IR es de calor por ello como fuente se usa alambres calientes, focos luminosos o
cerámicas incandescentes. La distribución de energía de fuentes de cuerpo negro llega entre 100
y 2000 nm, en el IR cercano.

Los espectrómetros para IR operan entre 2 – 15 µm.

Una fuente característica para IR es el radiador de Nernst que es una varilla formada por óxidos
de tierras raras.
Otra fuente de IR es el globar, es una varilla de carburo de silicio, para λ de > 15 µm

Para espectrometría de florescencia se usa una laser.

Monocromadores.-Está formado por lentes o espejos que enfocan la radiación por rendijas de
entrada y salida que restringen la radiación indeseable, y controlan la fuerza espectral que emite
el monocromador y cuenta con una dispersante para separar las λ de la radiación policromática
que procede de la fuente.

Entre los dispensadores podemos enumerar a:

Prismas, rendijas de difracción de rayos X y filtros ópticos

Prismas.- Cuando la radiación electromagnética atraviesa un prisma se refracta , porque el

índice de refracción del material del prisma es diferente al del aire.

Las longitudes de onda cortas se refractan más que los de mayores.

El efecto de la radiación de la refracción es dispersar la radiación en diferentes longitudes de

onda.

El rayo de color roja es de > λ

El rayo Azul es de < λ

Al girar el prisma por una rendija de salida pasan diferentes longitudes de onda y llegan a la
muestra:

En la región visible se pueden usan prismas y lentes de vidrio.

En la región UV, se pueden usar de cuarzo o sílice fundido. También de halogenuros: NaCl es
útil para toda la región de 2,5 – 15,4 µm.

Rejillas de difracción. Contienen gran cantidad de líneas paralelas trazadas en una superficie
muy pulida, ejemplo el aluminio, Al

Al, para las regiones UV- Vis, son 1500 a 30,000 líneas/ pulg. Estas líneas o ranuras funcionan
como centros de dispersión para los rayos que llegan a la rejilla. El resultado es una dispersión
igual para toda las λ con determinado orden.
El rayo de color negro en la fig. es el rayo incidente sobre la superficie de la rejilla y de aquí se
refractan rayos de diferente λ.

El poder de resolución de las rejillas es mejor que el de los prismas y las rejillas se pueden usar
en toda las regiones del espectro.

Se prefieren a la región IR por su dispersión homogénea de las λ grandes.

Filtros ópticos:
Su función es aislar ciertas λ luminosas, hay de diferentes tipos:

. Filtros de banda angosta y filtros de corte fino, son de vidrio que absorben toda la radiación,
excepto la que se desea que pase.
. Filtros de interferencia, hay de dos tipos, son de vidrio. La radiación llega al filtro, sufre
interferencia destructiva Excepto en una banda estrecha de λ que es la que pasa.

Celda o cubeta

Las celdas que contiene la muestra deben ser transparentes en la región de λ que se esté
midiendo.

UV-VIS, Son prismas rectangulares huecos de 1 cm de ancho entre sus paredes paralelas
internas.

IR es más común una ceda con ventana de NaCl (sal gema), son higroscópicos, por lo que debe
protegerse de la humedad, soluble en agua, es de bajo costo.

Detectores
- UV- VISIBLE, varían en función de la región de λ que se va a medir, es común el fototubo.

Fototubo, consiste de un de un cátodo fotoemisor y un ánodo. Se aplica un alto voltaje

entre cátodo y ánodo

Cuando un fotón entra por la ventana del tubo y llega al cátodo se emite un e- que es
atraído hacía el ánodo, haciendo que pase una corriente que se puede ampliar y medir.

La respuesta del material del fotoemisor depende de λ y se dispone de diversos fototubos

para diferentes regiones del espectro, ejemplo:

Se puede usar unos para la parte UV y otra para la región vis del espectro.

Tubo fotomultiplicador, Es más sensible en las regiones UV – VIS. Se compone de un

cátodo foto emisor con el que choca un fotón o llega un e- a la superficie del foto emisor
que emite un e- primario. Este se acelera hacia una serie electrodos y de aquí se generan
muchos e- secundarios, que son acelerados hacia el siguiente electrodo, donde cada e-
secundario libera más e- y así sucesivamente hasta alcanzar unas 10 etapas de
amplificación.

Por último los e- se colectan en el ánodo y a su salida del fotomultiplicador se amplía

eléctricamente para leerlo.

Los espectrometros que usan fototubos o fotomultiplicadores como detectores se

denominan espectrómetros y la técnica espectrometria.

7.4 ESPECTROMETRO

Definición: Se define como como el espectrómetro que mide la relación de la potencia

radiante de dos haces: P/p° por tanto, entonces mide la absorbancia.

Los dos rayos se puede medir simultáneamente o por separado en un instrumento de

doble haz o de único haz.

7.4.1 Espectrómetro de un solo haz.- Son los espectrómetros más comunes y con ellos
se pueden obtener excelentes resultados, ejemplo espectronic 20 de Bausch y Lamb (es
instrumento de fototubos)

7.4.2 Espectrometros de haz doble.- Son complejos, pero tienen varias ventajas, se
usan como instrumentos registradores o sea donde se varía automáticamente la λ y
registra la Absorbancia, A, en función de la λ.
El instrumento tiene dos trayectorias de luz. Una para la muestra y otra para el testigo o
referencia.

El haz procedente de una fuente llega a un espejo irracional o rotatorio en forma alternada
hace pasar el rayo a través de la celda de referencia y la celda de la muestra y desde cada
una hasta el detector. Y su salida es proporcional a la relación de las intensidades de los
dos haces p/P°.

7.4.3 Espectrómetros miniatura de fibra óptica.- Son poco costosos que usan fibras
ópticas para la transmisión de la luz ya sea a través de una celda de cubeta o con
sensores de fibra óptica.
El instrumento produce todo el espectro sobre la λ de operación y tiene programas
informáticos para analizar los espectros.
PRISMAS O PORTA MUESTRAS
7.5 - ESPECTROSCOPIA DE ABSORCIÓN ATÓMICA
7.5.1 PRINCIPIO.- La solución de la muestra se aspira y se introduce en una flama; el
elemento en la muestra se convierte en vapor atómico, de manera que la flama contiene
átomos del elemento, algunos son excitados térmicamente por la temperatura de la flama.
Pero casi todos ellos permanecen en estado fundamental. Estos átomos en estado
fundamental absorben radiación de determinada λ producida en una fuente que contenga a
ese mismo elemento.

Las λ de la radiación emitida por la fuente son las mismas que absorben los átomos en el
plasma.

La técnica de absorción atómica es igual a la Ley de Beer, es decir la absorbancia es

directamente proporcional a la λ de la trayectoria de la flama y a la concentración de vapor
atómico contenida en ella. Ambas variables es difícil de determinar, pero se puede
mantener constante la longitud de la trayectoria, y entonces la concentración del vapor
atómico será directamente proporcional la concentración del analito en la solución que se
aspira.

La desventaja de las mediciones por absorción atómica es que para cada elemento se
requiere una fuente diferente.

7.5.2.- INSTRUMENTACIÓN.
7.5.1 Lámpara de cátodo hueco:
Procesos que tienen lugar en la atomización:

Disolución
de analito
 ↓ Nebulización

Niebla → Moléculas excitadas → Átomos Iones

Iones excitados excitados

↓ ↑ ↑ ↑

Aerosol Moléculas → Átomos → Iones

Sólido/ gas → gaseosas atómicos

Volatilización Disolución Ionización

( reversible) ( reversible)

La fuente: lámpara de cátodo hueco. Emite un rayo de luz intensa y estable de una longitud
de onda determinada; cada elemento que se analiza posee una longitud de onda

característica.

La fuente de luz emite un rayo de luz intensa y estable, de una longitud de onda
característica.

Consiste de un cátodo cilíndrico hueco hecho del elemento que se va a determinar y un

ánodo de tungsteno. Ambos encerrados en un tubo de vidrio que tiene una ventana de
cuarzo porque las líneas de interés están en la región UV. El tubo se encuentra a presión
reducida relleno de un gas inerte: Argón o Neón.

Entre los electrodos se aplica un alto voltaje que causa ionización de los átomos del gas en
el ánodo. Estos iones (+) son acelerados hacia el cátodo (-) y cuando lo bombardean
hacen que algo del metal se desprenda y se evapore. El metal vaporizado se excita a
niveles electrónicos más altos, debido a las continuas colisiones con los iones gaseosos de
alta energía.

Cuando los electrones regresan al estado fundamental emiten las líneas características de
ese elemento metálico. Estas líneas emitidas por la lámpara de cátodo hueco atraviesan la
flama y son absorbidos por el elemento que se analiza debido a que poseen exactamente
la energía necesaria para producir transiciones electrónicas discretas.

A veces es posible usar una aleación de varios elementos para fabricar el cátodo hueco y
con esas lámparas se emiten las líneas de todos los elementos; éstas se conocen como
lámparas multielementos de cátodo hueco y pueden usarse como fuente para dos o tres
elementos.

La desventaja es que estas lámparas tienen menor vida útil que las lámparas de un solo
elemento, debido a la volatilización selectiva de uno de los elementos del cátodo el cual se
condensa en las paredes de la lámpara.

7.5.2 Nebulizador

Quemador de Ranura o Flujo laminar con cámara de nebulización.

 El quemador con cámara de pre mezcla o quemador de flujo laminar.

El combustible y los gases de soporte se mezclan en una cámara antes de entrar a la

cabeza del quemador y pasan a través de una rendija al cabezal del quemador donde se
queman.

La solución de la muestra se aspira a través de un capilar gracias a un efecto venture

creado por el gas de soporte para la aspiración de aire. El aire crea un vació al final del
capilar y succiona por éste. La muestra se divide en forma de una aspersión fina en la
punta (nebulizador).

Las gotas más grandes del aerosol que se produce, se condensa y drena de la cámara.
Las restantes se mezclan con los gases de combustión y entran en la flama. Hasta el 90 %
de las gotas se condensan y salen y el 10 % entra en la flama.

El quemador Boling, tiene tres ranuras que produce una flama más amplia que causa
menor distorsión de la radiación, cuando atraviesa las orillas de ésta. Precaución, este
quemador se deforma por lo que no sobrecalentar.

7.5.3 Flamas

7.5.4 INTERFERENCIAS

- Interferencias Espectrales.- Es cuando otra línea de emisión o banda de emisión

molecular está cerca de la línea emitida por el elemento analizado y el monocromador no
es capaz de resolverlas. Esta interferencia se presenta si el equipo usa corriente directa,
por tanto se elimina esta interferencia con corriente alterna.
 También la dispersión o absorción de la luz o por partículas sólidas, gotitas de disolvente
no vaporizado o especies moleculares en la flama causa una interferencia (+). Este
problema se presenta a longitudes de onda menores a 300 nm o cuando se aspiran
soluciones salinas de alta concentración.
La medición debe realizarse a dos bandas espectral alejada a la línea de absorción.

- Interferencia por ionización.- Las flamas muy calientes pueden ionizar fracciones de
elementos alcalinos, alcalinotérreos y otros. Se miden átomos, por lo que los átomos
ionizados pueden disminuir las señales de absorción.

Se solucionará este inconveniente agregando a la muestra elementos fáciles de ionizar,

así se adicionará electrones libres a la flama y eliminará la ionización del elemento que se
analiza. El resultado es una mayor absorción. Ejemplo: Se agrega la misma cantidad del
elemento que interfiere a las soluciones estándar, así se para los halogenuros se adiciona
CsCl.

Formación de compuestos refractarios

La solución de muestra problema puede contener una sustancia que podría formar en la
flama un compuesto refractario con el elemento que se analiza, ejemplo:

PO4 3- + Ca 2+ → Ca3 (PO4)2 → Ca2P2O7

Este pirofosfato causa una reducción en la absorbancia, porque el calcio debe estar en
forma de átomo para absorber su línea de resonancia. Entonces para reducir este
inconveniente se agrega a los estándares 1 % de La (NO3)3 o SrCl2. El La o Sr se
combina con el PO43- y evitará que reaccione con el calcio.

- Interferencia Física
Los parámetros que afectan la rapidez de flujo de la muestra al quemador, son:
. Viscosidad de la muestra debido a la temperatura o el disolvente
. Un alto contenido de sólidos
. Cambios de temperatura en la flama.

Estas interferencias se pueden compensar calibrando con frecuencia y utilizando

estándares internos.

7.5.5 Preparación de la muestra

Elección del método Preparación de la muestra

Obtención de la muestra

Extracción del analito a la No ¿Se encuentra el analito disuelto?

fase líquida
Sí
 Cambio de la forma No ¿Es mensurable la propiedad analítica?
química del analito

Sí

Eliminar interferencias si las hubiere

Estimar la fiabilidad de los Calcular los resultados

resultados Medir la propiedad analítica

Informe Conclusiones

7.6 CURVAS DE CALIBRADO

Existen tres métodos instrumentales de análisis.

7.6.1 Curvas de calibrado con estándar externo.- Para realizar el método de la curva de
calibrado se introducen varios patrones que contienen concentraciones exactamente
conocidas del analito y se registra la señal instrumental. Esta señal se corrige con la
correspondiente señal obtenida con el blanco. El blanco contiene todos los componentes
de la muestra original excepto el analito

Las representaciones graficas que son lineales tienen un amplio intervalo de

concentración.

Con la ecuación de la curva de calibrado por el método de mínimos cuadrados, se calcula

directamente la concentración de las muestras.
y = a + bx
Donde a= ordenada en el origen
b = pendiente de la recta

7.6.2 Adición estándar interno.- Este método se utiliza cuando es difícil duplicar la matriz
de la muestra. o minimizar errores debido a factores de fluctuaciones en los flujos de gas
y la rapidez de la aspiración de la muestra. Lo que se corrige, adicionando a la muestra
una cantidad conocida de una disolución estándar del analito.
Una porción se mide y en la segunda porción se le agrega una cantidad conocida de la
disolución estándar de analito. Ambas respuestas se utilizan para calcular la concentración
 desconocida, suponiendo una relación lineal entre la respuesta y la concentración del
analito, Ejemplo en espectrometria de emisión de flama diseñado para mediciones de Na, y
K simultáneamente en suero, usando longitudes de onda fijas y dos detectores separados.
Contendrán un 3° canal detector de longitud de onda fija para el litio. Se agrega una
concentración de litio fija a todos los estándares y a todas las muestras. El instrumento
registra y determina las relaciones de K/Li y Na/ Li. Asi si la rapidez de aspiración fluctúa,
cada señal se altera en el mismo grado, y la relación a determinada concentración de
potasio y sodio permanece constante..
El método de estandar interno elimina las interferencias físicas.

7.6.3 Calibración por adición de estandar. La muestra se mide en forma habitual para
producir determinada señal. Se toma una porción separada de muestra y se agrega una
cantidad conocida de un estandar y creciente del elemento deseado y se mide el
incremento de la señal., se somete a la misma matriz que el analito y el aumento de la
señal se debe al estandar y la señal original del analito.
Este método minimiza errores debido a la matriz de la muestra, que puede ser de alta
viscosidad o puede entrar en reacción con el analito.
para los cálculos:
Muestra: X
Concentración del estandar agregado. S :

[X ] / [X] +[ S] = A x / A x + X

DONDE: A x = absorbancia de la muestra

Ax + X = A b S del estimado más la muestra

Si las respuestas analíticas para un mismo valor de CA en la

disolución
estándar y en la muestra son diferentes:

Si las respuestas analíticas para un mismo valor de C A en la disolución

MétodoCdel
estándar Ay enConcentración
estándar
la muestra
interno de analito en la muestra
son diferentes: MétodoSde CA estándar
A adiciones añadida a la muestra
Se agregan cantidades conocidas de analito
a la muestra