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Aglutinación
El campo de la inmunología ha progresado rápidamente en los últimos años. Y los avances se han
dado no solamente en el área de la inmunología básica, sino también en el campo del diagnóstico.
En la actualidad, está disponible una gran gama de pruebas de laboratorio para analizar, de
manera simple, cualquier componente del organismo. Independientemente de la metodología
utilizada, las pruebas inmunológicas de laboratorio tienen como fundamento principal la reacción
antígeno – anticuerpo, reacción que puede producirse tanto in vivo como in vitro. “La reacción in
vivo generalmente coincide con la invasión del organismo por antígenos extraños contra los que
reacciona por medio de anticuerpo, tal como sucede en la reacción hemolítica transfusional o
mediante la transferencia pasiva de anticuerpos, como es el caso de la enfermedad hemolítica del
recién nacido”1. La naturaleza específica de estas reacciones depende las múltiples variables
relacionadas principalmente con las condiciones de reacción, así como de las características tanto
de los antígenos como de los anticuerpos, obteniendo criterios como “especificidad, reacción de
moléculas enteras, es un fenómeno de superficie que no altera estructuras, y se conoce como una
reacción rápida”2
Las reacciones de aglutinación, al igual que las reacciones de precipitación, involucran una
interacción entre Ag-Ac que llevará a la aparición de un aglutinado que se visualiza como grumos.
Para ambos tipos de reacciones los principios fisicoquímicos que gobiernan la formación del
aglutinado son los mismos, en otras palabras, es de suma importancia considerar la zona de
exceso de antígeno, la zona de equivalencia y la zona de exceso de anticuerpo. La gran diferencia
entre ambas reacciones es la característica del antígeno, como se menciona anteriormente,
depende de las múltiples variables involucradas en la reacción, en la aglutinación, “el antígeno es
particulado, se encuentra en la superficie de una célula o una partícula inerte que tiene adherida en
su superficie en antígeno o el anticuerpo”3.
La reacción de aglutinación ocurre en dos fases: “en la primera, el antígeno se combina con el
anticuerpo (unión epitopo-paratopo) que se lleva a cabo en cuestión de milisegundos; y en la
segunda, la producción de complejos antígeno-anticuerpo. Las fases generalmente se sobreponen
en tiempo, pero en la medida en que se forman los complejos la reacción se hace visible”4.
Los principales tipos de aglutinación son tres; directa, indirecta y pasiva. La aglutinación directa
corresponde al antígeno particulado con suficientes determinantes antigénicos para que el
antisuero produzca de manera espontánea la aglutinación. La aglutinación indirecta, es para
reducidos determinantes antigénicos o cuando el anticuerpo no es suficiente por lo que se requiere
de otro reactivo como el anticuerpo anti-inmunoglobulinas. La aglutinación pasiva corresponde a la
utilización de antígenos solubles que se absorben de manera covalente en la superficie de las
partículas.
Edición. Centro Editorial Universidad del Rosario. Bogotá D.C. Colombia. 2006.
4 Fiorentino, Susana. La inmunología en el diagnóstico clínico. 1a Edición. Centro Editorial
Durante el desarrollo del laboratorio, se realizarán dos tipos de determinaciones, una a partir de
cinco muestras problemas, donde se debe determinar el grupo sanguíneo ABO que presenta y
también, el antígeno D. En la otra determinación, se realizará el mismo procedimiento pero la
muestra proviene de un alumno, al cual se le realiza una punción capilar para determinar su grupo
ABO y la presencia o ausencia del antígeno D. Para esto se observan las aglutinaciones sobre la
placa luego de ir agregando los antisueros anti A, B, AB y O que reaccionarán con los anticuerpos
en la gota de sangre, produciendo la aglutinación, si es que la interaccion Ag-Ac ocurre
correctamente.
Los antígenos situados en la membrana de los glóbulos rojos reaccionan con los anticuerpos y el
resultado de la reacción es la formación de grumos de hematíes o aglutinados. La distancia que
han de salvar los anticuerpos para producir aglutinación es la que guardan entre sí los glóbulos
rojos en suspensión en su propio suero o plasma o en un medio salino isotónico, distancia que
viene impuesta por las fuerzas de repulsión existentes entre los hematíes. La superficie de los
hematíes tiene cargas eléctricas negativas debidas a los carboxilos del ácido siálico de la
membrana. Si los eritrocitos están en suspensión en un medio que contiene iones libres, los
cationes forman una envoltura de cargas positivas alrededor de aquellos convirtiéndolos en
partículas cargadas de electricidad del mismo signo experimentando una fuerza de repulsión entre
ellas. Esta fuerza de repulsión se denomina potencial Zeta.
Las reacciones de aglutinación poseen varias ventajas desde el punto de vista de su utilidad en el
laboratorio; son sencillas de realizar, no requieren de equipamiento para su lectura, son rápidas y
fáciles de implementar. Es por esto, que lo mencionado hace de estas reacciones una valiosa
herramienta para diversos estudios serológicos, es decir, en la búsqueda de anticuerpos
específicos contra agentes patógenos, así como también, para la detección de antígenos en fluidos
biológicos.
OBJETIVOS
5
Palomo, Iván. Fundamentos de Inmunología Básica y Clínica. 1 a Edición. Editorial Universidad de
Talca. Talca, Chile. 2002.
MATERIALES Y PROCEDIMIENTOS.
Materiales:
1. Glóbulos rojos A-B-O
2. Suero fisiológico
3. Set de antisueros para grupos sanguíneos
4. Kit comercial para aglutinación
5. Placas de aglutinación
6. Pipetas Pasteur
7. Bagueta
Procedimiento:
-Las reacciones se realizaron en placas de vidrio, las cuales deben estar limpias, posteriormente se
rotuló para dimensionar el espacio que sería asignado para cada muestra.
-Sobre una placa se depositò separadamente una gota de sangre de las muestras entregadas en
laboratorio, estas tenían una identificación correspondiente la cual era 33, 53, 12, 40, 46 y muestra
sanguínea de un integrante de nuestro grupo.
-Al lado de cada gota de sangre se agregó una gota del antisuero correspondiente.
-Se observó la aparición de pequeños grumos de células a contra luz, cuando la reacción es
positiva antes de un minuto.
-Se anotó y se analizaron los resultados obtenidos en relación a especificidad de cada reacción
inmunológica.
RESULTADOS.
6
Estrada, mariano. Fisiología II: practicas. 1ª edición. Editorial BUHO. Santo Domingo, República
Dominicana. 1999.
7
Garibay, Mariana. Manual de practicas de inmunología. 1ª edición. Editorial UniSon. Sonora,
México. 2006.
CONCLUSION.
Al finalizar, se concluye que la determinación del grupo sanguíneo se hace para que poder recibir
una transfusión de sangre o un trasplante de manera segura, ya que al no ser del grupo sanguíneo
correspondiente puede generar algún tipo de daño, como la coagulación de la sangre del donante
en los vasos sanguíneos de la persona receptora, ya que, si los tipos de sangre no coinciden, su
sistema inmunitario verá a los glóbulos rojos donados como extraños, y se atacarán a estas células
sanguíneas.
Además, la determinación de grupos sanguíneos da una orientación en las pruebas de paternidad
para determinar o comprobar la compatibilidad de ambos individuos.
Por último, se cumplieron los objetivos planteados al inicio.
BIBLIOGRAFIA.
- Estrada, mariano. Fisiología II: practicas. 1ª edición. Editorial BUHO. Santo Domingo,
República Dominicana. 1999.
- Fiorentino, Susana. La inmunología en el diagnóstico clínico. 1a Edición. Centro Editorial
Javierano CEJA. Santafé de Bogotá, Colombia. 1994.
- Forbes, Betty. Diagnóstico Microbiológico. 12a Edición. Editorial Médica
Panamericana. Buenos Aires, Argentina. 2009.
- Garibay, Mariana. Manual de prácticas de inmunología. 1ª edición. Editorial UniSon.
Sonora, México. 2006.
- Palomo, Iván. Fundamentos de Inmunología Básica y Clínica. 1 a Edición. Editorial
Universidad de Talca. Talca, Chile. 2002.
- Siachoque, Heber. Inmunología, Diagnóstico e interpretación de pruebas de
laboratorio. 1a Edición. Centro Editorial Universidad del Rosario. Bogotá D.C.
Colombia. 2006.