ENZIMAS

¿Qué son las enzimas?

Proteínas que aumentan la velocidad de las reacciones químicas, al disminuir la
energía de activación (Ea)
Muchas de las enzimas se encuentran en el citoplasma de la célula, otros están
unidas a otras células como las enzimas respiratorias que catalizan el
metabolismo del ácido láctico.
IMPORTANCIA BIOMEDICA
Sin enzimas, no sería posible la vida que conocemos porque llevan a cabo
funciones definitivas relacionadas con la salud y la enfermedad.
LAS ENZIMAS EN LAS PANTAS
Las enzimas vegetales derivan de las fuentes de material vegetal o
microorganismos, incluidas distintas proteasas, lipasa, celulasa y
carbohidrasa.
Estas enzimas orgánicas consisten en proteínas y aminoácidos y su
función es la de convertir los minerales en alimentos absorbibles. Las
enzimas de la planta controlan la germinación, resistencia a
enfermedades, crecimiento de la planta, maduración de los frutos y la
modificación de la pared celular.
Actualmente se ha incrementado el estudio de las enzimas procedentes de las
plantas, por sus aplicaciones alimentarias, terapéuticas, y comerciales; como por
ejemplo las proteasas: bromelina, papaina ,ficina,etc.
En los últimos años se ha hecho evidente que el estudio de las enzimas
presentes en las plantas es una fuente única para conocer las relaciones de la
estructura-función en los organismos superiores.
EJEMPLOS:
Bromelina: Es una enzima con acción proteolitica para una mejor asimilación de
los aminoácidos que las componen. Cuando es consumida (como parte del fruto
de la piña) por los animales, deshace las proteínas de igual manera que la
pepsina, enzima que forma parte del jugo gástrico. Se encuentra en los tallos y
los frutos.
Papaína: Esta enzima ampliamente estudiada digiere carbohidratos, grasas y
proteínas se encuentra en la papaya. Debido a sus diversos usos, incluyendo el
ser utilizada en el tratamiento de úlceras y como una solución para limpiar lentes
de contacto blandas, la papaína, desde su descubrimiento, se convierte en una
enzima ampliamente utilizada. La papaína también se encuentra en la raíz de la
papaya y se utiliza de esta fuente para inducir abortos
Celulasa: Se encuentra en las naranjas, duraznos y tomates. Comprenden un
grupo de enzimas que ayudan a que las frutas se vuelvan blandas mientras sigue
el proceso de maduración al romper las paredes celulares.
FUNCIONES DE LAS ENZIMAS.
En los sistemas biológicos constituyen las bases de las complejas y
variadas reacciones que caracterizan los fenómenos vitales.
En los vegetales catalizan la fijación de la energía solar y la síntesis de
sustancias alimenticias llevadas a cabo por las plantas.
En los animales, las enzimas les permiten aprovechar los alimentos con
fines energéticos o estructurales.
Las funciones del metabolismo interno y de la vida de relación, como la
locomoción, la excitabilidad, la irritabilidad, la división celular, la
reproducción, etc. están regidas por la actividad de innumerables enzimas
responsables de que las reacciones se lleven a cabo en condiciones
favorables para el individuo.
SISTEMA ENZIMATICO
 Sustrato: sustancia sobre la que actúa el enzima.
 Enzima
 Catalizador: sustancia que, sin consumirse en una reacción, aumenta
notablemente su velocidad. Hacen posible que en condiciones fisiológicas
tengan lugar reacciones que sin catalizador requerirían condiciones
extremas de presión, temperatura o pH. Pueden ser catalizadores
específicos y cofactores.
S + E catalizador E-S Producto(s)+E + c

Algunas enzimas necesitan cofactores: a veces la actividad catalítica

depende de componente químico adicional.
 Cofactor: Metales o iones inorgánicos pequeños, Fe, Mg, Mn, Zn, Co

 Coenzima: Moléculas orgánicas pequeñas

 NATURALEZA QUÍMICA DE LAS ENZIMAS

APOENZIMA: Es la parte proteica de la enzima despojada de los cofactores o

grupos prostéticos. La apoenzima es cataliticamente inactiva.
COFACTOR: Son iones metálicos o moléculas orgánicas, estos son el
componente no proteico y de bajo peso molecular que requiere el apoenzima
para su actividad.
Iones metálicos = metaloenzima
Moléculas orgánicas = coenzimas

Algunos elementos inorgánicos que actúan como cofactores en las enzimas

Cu2+ Citocromo oxidasa
Fe2+ o Fe3+ Citocromo oxidasa, catalasa, peroxidasa
K+ Piruvato quinasa
Mg2+ Hexoquinasa, glucosa -6- fosfatasa, piruvato quinasa
Mn2+ Arginasa ribonucleótido reductasa
Mo Dinitrogenasa, nitrato reductasa
Ni2+ Ureasa
Se Glutatión peroxidasa
Zn2+ Anhidrasa carbónica, alcohol deshidrogenasa,
carboxipeptidasas A y B
 Muchas coenzimas son derivados de vitaminas
VITAMINA COENZIMA
B1 Tiamina Tiamina pirofosfato (*)
B2 Riboflavina FMN, FAD (*)
B3 Ácido nicotínico NAD+, NADP+
B6 Piridoxina Fosfato de piridoxal (*)
B12 Cobalamina 5’ – adenosil-cobalamina (*)
C Ácido ascórbico Ácido ascórbico
H Biotina Biocitina (*)
B5 Ácido pantoténico Coenzima A
BC Ácido fólico Ácido tetrahidrofólico
Ácido lipoico Lipoamida (*)

(*) Grupo prostético

PROPIEDADES DE LAS ENZIMAS

 Centro activo: Parte de la molécula de la enzima por donde se une el
sustrato, está formado por las cadenas laterales de residuos específicos,
lo que ocasiona que tenga un arreglo tridimensional particular, diferente
al resto de la proteína.

PROPIEDADES DE LAS ENZIMAS: sitio activo

 El sitio activo la enzima (E) une al substrato (S) formando un complejo
enzima-substrato (ES). En el complejo ES, E transforma a S en él o los
productos, formando el complejo enzima-producto (EP), finalmente la
enzima libera del sitio activo a P, regenerándose.
E + S  ES  E + P
Esquema de la estructura de una enzima
 Centro activo: Zona de la molécula a la que se une el sustrato y donde
se realiza la catálisis enzimática.

 Centro regulador: Zona en la que se une las sustancias que regulan la

actividad de la enzima.

ENZIMAS: PROPIEDADES
1) Catalizan reacciones químicas en los seres vivos. Aumenta la velocidad
de una reacción química (incrementan desde 106 hasta 1014 veces más
rápido que la misma reacción no catalizada).
2) Actúan en pequeña cantidad y se recuperan indefinidamente (no se
consumen durante la reacción, una vez formados los productos la enzima
puede comenzar un nuevo ciclo de reacción).
3) No llevan a cabo reacciones que sean energéticamente desfavorables,
4) No modifican el sentido de los equilibrios químicos, sino que aceleran su
consecución.
5) Son específicas para un determinado tipo de sustrato
6) Actúan a temperatura y pH fisiológico
7) son de bajo peso molecular
8) son regulables

CARACTERISTICAS DE LAS ENZIMAS: EFICIENCIA

cada molécula de enzima es capaz de transformar cada segundo de 100
a 1000 moléculas de substrato en producto.
El número de estas moléculas transformadas a producto por molécula
de enzima en cada segundo, se conoce como el número de recambio.
Ejm:
Enzima: Anhidrasa carbónica
Velocidad en ausencia de enzima: 1.3 X 10–1
Velocidad de reacción catalizada: 1.0 X 10-6
Rendimiento : 7.7 X 10-6
CARACTERISTICAS DE LAS ENZIMAS: ESPECIFICIDAD
Las enzimas son muy específicas por el substrato de la reacción que
catalizan.
Interactúan con una o muy pocas moléculas y catalizan únicamente un tipo
de reacción, por lo que las moléculas con las que interactúan deben ser muy
parecidas, tanto en composición, como en estructura tridimensional.

Especificidad enzimática: especificidad de función

Un mismo compuesto puede ser sustrato de varios enzimas, que lo
modifican de distinta forma.

ESPECIFICIDAD DE LAS ENZIMAS

Especificidad absoluta, es decir, sólo reconocen a un sustrato.
Especificidad relativa: actúan sobre varios sustratos pero trabajan más
activamente con unos sustratos que con otros.
Para que haya especificidad, es necesario que haya una zona en la
enzima que se va a corresponder con una zona del sustrato sobre la que
va a actuar que se llama centro activo. También tiene que ocurrir que haya
dentro del sustrato algún radical que reconozca alguna zona de la enzima
para que al acoplarse estas dos zonas haga coincidir el centro activo, se
llama centro orientador.

CARACTERISTICAS DE LAS ENZIMAS:

REGULACION: La actividad enzimática puede ser regulada, esto quiere
decir que dependiendo de los requerimientos metabólicos, las enzimas
son activadas o inhibidas, para acelerar o disminuir la velocidad con la
que catalizan la reacción, respondiendo así a las diferentes necesidades
de sus productos en la célula. La regulación más común es modificando
la concentración de su(s) substrato(s).
LOCALIZACION: En los eucariontes, muchas enzimas se localizan en
organelos específicos en la célula. Esta compartamentalización ayuda a
aislar los substratos de la reacción o productos de la misma, de tal forma
que no hay competencia de reacciones, de esta manera se provee un
medio favorable para la reacción, y esto hace posible localizar diferentes
partes del metabolismo en diferentes organelos, haciendo a la célula una
entidad organizada en donde simultáneamente funcionan miles de
enzimas.

Clasificacion de las enzimas

 1. Oxidorreductasas: Reacciones de óxido-reducción

2. Transferasas: transferencia de grupos intactos de una molécula a otra

3. Hidrolasas: Reacciones de hidrolisis (ruptura de enlaces con

participación del agua)

4. Liasas: Adición de grupos a dobles enlaces (sin participación del agua)

5. Isomerasas: Transferencia intramolecular de grupo (aldehído/cetona)

6. Ligasas: Unión de dos sustratos a expensas de la hidrolisis del ATP

MODOS DE ACCION DE LAS ENZIMAS

Las enzimas actúan de dos formas:
1) fijándose mediante enlaces fuertes (covalentes) al sustrato, de modo que
se debiliten sus enlaces y que no haga falta tanta energía para romperlos;
y
2) Atrayendo a las sustancias reaccionantes hacia su superficie de modo
que aumente la posibilidad de encuentro y que la reacción se produzca
más fácil.
Las enzimas, una vez que han realizado la transformación del sustrato o
sustratos en productos, se liberan rápidamente de ellos para permitir el acceso
a otros sustratos.
 MODELOS SOBRE LA FORMA EN QUE SE UNE EL SUSTRATO AL
CENTRO ACTIVO
 El modelo llave-cerradura
 El modelo del ajuste inducido
El centro activo adopta la conformación idónea sólo en presencia del sustrato.
La unión del sustrato al centro activo del enzima desencadena un cambio
conformacional que da lugar a la formación del producto.
 MODELO DEL AJUSTE INDUCIDO
LA ENZIMA ALTERA LIGERAMENTE SU FORMA PARA QUE EL SUSTRATO
PUEDA UNIRSE

E E E E

S entrando Complejo Complejo Productos

al centro enzima- enzima- abandonan
activo de sustrato producto el C.A. de
la E. la enzima
ENZIMAS: MECANISMO DE ACCION
Se denomina estado de transición o estado activado, aquel en el que la molécula
de sustrato tiene debilitados sus enlaces y tiene más probabilidad de convertirse
en producto.
Las enzimas lo que hacen es bajar la energia de activacion. Con lo que aceleran
la velocidad de la reacción.
La energia necesaria para alcanzar el estado de activacion se denomina
ENERGIA DE ACTIVACION.
CINETICA Y REGULACIÓN ENZIMATICA
La cinética enzimática estudia el comportamiento de la velocidad de las
reacciones químicas catalizadas por enzimas y su modificación dependiente de
diferentes agentes físicos y químicos.
 CINETICA QUÍMICA

La velocidad de Los factores que la Los mecanismos o

una reacción modifican etapas mediante
los cuales los
Pueden ser reactivos se
convierten en
productos

Catalizadores Concentración Temperatura pH

Estos estudios proporcionan información directa acerca del mecanismo de la

reacción catalítica (revelando el número y el orden de los pasos individuales
mediante los cuales las enzimas transforman sustratos en productos) y de la
especifidad del enzimas.
CINETICA ENZIMATICA
Las reacciones pueden ser exergónicas si liberan energía libre y endergónicas
si la absorben.
Las enzimas actúan como catalizadores, la velocidad de la reacción enzimática
aumenta de forma lineal hasta alcanzar un máximo en el que se produce la
saturación de la enzima.
REQUISITOS PARA QUE OCURRA UNA REACCIÓN QUIMICA ORDINARIA
• Colisiones efectivas: debido a la correcta orientación entre las moléculas.
• Orientación adecuada: Es la correcta posición entre una molécula A y una
molécula B para que se dé un choque correcto o una colisión efectiva.
• Energía de Activación: o Energía suficiente, es la energía mínima
necesaria para que se produzca una reacción química dada.

REACCIÓN QUIMICA CATALIZADA POR ENZIMAS

 CINETICA DE LA CATALISIS ENZIMATICA

PARÁMETROS QUE INFLUYEN LA VELOCIDAD DE REACCIÓN

ENZIMATICA
 Factores que modifican la actividad enzimática
 Efecto del pH y la temperatura
 Inhibidores
 Inhibicion reversible
Competitiva
No competitiva
 Inhibición competitiva
FACTORES QUE MODIFICAN LA ACTIVIDAD ENZIMATICA
La velocidad de una reacción catalizada por una enzima depende de:
 La concentración de moléculas de sustrato
 Cantidad de enzima
 El pH
 La temperatura
 La presencia de inhibidores

La concentración de sustrato a la que la velocidad de reacción es la mitad de la

velocidad máxima es la constante de Michaelis (Km), este valor también indica
la afinidad de la enzima por el sustrato. Se muestra en esta presentación el
esquema de una reacción enzimática.

• A medida que la concentración del sustrato aumenta , la velocidad se

incrementa hasta alcanzar un valor máximo (Vmax).
• Cuando los aumentos adicionales de sustrato no incrementan más la
velocidad,se dice que la enzima está ”saturada “con sustrato.
 FACTORES QUE AFECTAN LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA
Cantidad de enzima: La V0 es proporcional a la concentración de enzima, al
menos en un determinado rango de concentraciones.

Representación de una enzima en la presencia de una concentración de sustrato

que está por debajo de Km (A), a una concentración igual a Km (B), y a una
concentración bastante por arriba de Km (c). Los puntos A, B y C corresponden
a esos puntos en la figura.
Km de Michaelis, es la concentración de sustrato a la cual, la velocidad inicial (Vi)
es la mitad de la velocidad máxima (Vmax/2) alcanzable a una concentración
particular de la enzima.
Efecto de la temperatura
 Las enzimas poseen una temperatura optima a la cual la enzima presenta
máxima eficiencia catalítica
 Existe un intervalo en el cual son estables

El incremento de temperatura acelera las reacciones químicas: por cada 10ºC

de incremento, la velocidad de reacción se duplica.
Sin embargo, por ser proteínas, las enzimas a partir de cierta temperatura, se
empiezan a desnaturalizar por el calor.
Efecto del pH
 pH óptimo de actuación, a valores superiores o inferiores la velocidad
disminuye
 El pH del medio afecta:
 Catalisis
 Unión al sustrato
 Conformación (estructura espacial) de la enzima
Los enzimas poseen grupos químicos ionizables (carboxilos -COOH; amino -
NH2; tiol -SH; imidazol, etc.). Según el pH del medio, estos grupos pueden tener
carga eléctrica (+), (-) o neutra. Como la conformación de las proteínas depende,
en parte, de sus cargas eléctricas, habrá un pH en el cual la conformación será
la más adecuada para la actividad catalítica. Este es el llamado pH óptimo.
Ejm: pepsina gástrica tiene un pH óptimo de 2, la ureasa lo tiene a pH 7.
Los seres vivos: mantienen pH con amortiguadores fisiológicos
 INHIBICION ENZIMÁTICA
Inhibidores: pequeña moléculas químicas o iones que interfieren con las
reacciones ralentizándolas o deteniéndolas.
Importantes para el estudio de:
 Mecanismo de acción enzimática
 Especificidad de sustrato
 Naturaleza de centro activo
 Identificación residuos fundamentales para la catálisis
Utilidad:
 Determinación rutas metabólicas
 Medicina: antibióticos
1) Irreversible: Desnaturalización de la enzima de manera que se produce
una alteración en el centro activo.
 Reaccionan con un grupo químico de la enzima, modificándola
covalentemente.
Bloquean unión al sustrato
Inhiben actividad

 Sus efectos dependen del tiempo de actuación del inhibidor.

 Por lo general son altamente tóxicos. Casi todos los inhibidores
enzimáticos irreversibles son sustancias tóxicas (naturales o sinteticas).
Penicilina inhibe la síntesis de la pared bacteriana
Aspirina inhibe la síntesis de PG
2) Reversible: Hay 2 tipos:
• Competitivas:
Son inhibidores que tienen estructura química muy semejante al sustrato
específico de la enzima. Pero cuando se forma el Complejo Inhibidor-enzima ya
no se rompe y bloquea a la enzima, por lo que la reacción es débil ya que
disminuye la cantidad de enzima que interviene.
Unión del inhibidor al centro activo del enzima, compite con el sustrato
 • No competitivas:
No compiten sustrato e inhibidor por el centro activo de la enzima, sino que se
bloquea algo impidiendo la unión SE.
Unión del inhibidor a un sitio distinto del centro activo, no compite con el sustrato