4500-NH3 NITROGÊNIO (AMÔNIA)

1 SELEÇÃO DO MÉTODO

Os principais fatores que influenciam a escolha do método para determinar

amônia é a concentração e a presença de interferências. Em geral, a determinação não
automatizada de baixas concentrações de amônia se limita à água potável, água de
superfície limpa ou subterrânea, e efluente nitrificado com baixas concentrações de
nitrogênio amoniacal. Em outros casos, quando se necessita de uma maior precisão,
uma etapa da destilação preliminar (B) é necessária.
São apresentados no Standard Methods, alguns métodos que podem ser usados
com ou sem destilação da amostra. A amônia pode ser determinada pelo método da
titulação, pelo eletrodo seletivo de amônia, pelo eletrodo seletivo de amônia utilizando
uma adição conhecida, pelo método de fenato, além de duas versões automatizadas do
método de fenato.
A Nesslerização foi descartada como um método padrão, apesar de ter sido
considerada uma medida clássica da qualidade da água por mais de um século. O uso de
mercúrio neste teste é descartado por causa dos problemas de disposição dos resíduos da
análise.
O processo de destilação e titulação é utilizado especialmente para
concentrações de NH3-N superior a 5 mg/L. Use ácido bórico seguido da destilação para
receber o destilado a ser titulado. O método do eletrodo seletivo de amônia é aplicável
na faixa de 0,03 a 1400 mg de N-NH3/L.
O método não automatizado de fenato é aplicável à água doce e água do mar e é
linear até 0,6 mg NH3-N/L. Destila-se em ácido sulfúrico (H2SO4) como absorvente
para o método do fenato quando estão presentes interferências.
O método do fenato automatizado é aplicável na faixa de 0,02 a 2,0 mg de N-
NH3/L.

2 INTERFERÊNCIAS

Glicina, ureia, ácido glutâmico, cianato, e acetamida são hidrolisados lentamente

em solução em repouso, entretanto, destas substâncias, apenas a ureia e os cianatos
serão hidrolisados na destilação a um pH de 9,5. Neste pH a hidrólise eleva-se a cerca
de 7% para a ureia e cerca de 5% para os cianatos. Compostos alcalinos voláteis, tais
como hidrazina e aminas vão influenciar os resultados da determinação por titulação.
Cloro residual reage com amônia; podendo este interferente ser removido da amostra
durante um pré-tratamento. Se for provável a presença de cloro residual, tratar com
agente desclorante, imediatamente após a coleta.

3 ACONDICIONAMENTO DAS AMOSTRAS

Resultados mais confiáveis são obtidos em amostras frescas. Se as amostras não

puderem ser analisadas antes de 24 horas da coleta, refrigerar as amostras a 4 ºC
previamente acidificadas. Para a preservação por até 28 dias, congelar a -20 °C as
amostras não acidificadas, ou preservar amostras por acidificação até pH < 2 e
armazenar a 4 ° C. Se a preservação com ácido for usada, neutralizar as amostras com
NaOH ou KOH, imediatamente antes de efetuar a determinação.
CUIDADO: Embora a acidificação seja apropriada para certos tipos de amostras,
a acidificação produz interferências quando o amônio permutável está presente
nos sólidos não filtrados.
 4500-NH3 B. ETAPA DA DESTILAÇÃO PRELIMINAR

1 DISCUSSÃO GERAL

A amostra é tamponada a pH 9,5 com um tampão de borato para diminuir a

hidrólise de cianatos e compostos orgânicos nitrogenados. Ela é destilada com uma
solução de ácido bórico quando é utilizada o método da titulação ou em H2SO4 quando
o método utilizado é o fenato. A amônia no destilado pode ser determinado por
colorimetria pelo método do fenato ou por titulação com solução padrão de H2SO4 e um
indicador misto ou um medidor de pH. A escolha entre o colorimétrico e o método
acidimétrico depende da concentração da amônia. A amônia no destilado pode ser
também determinada pelo método do eletrodo seletivo para amônia, utilizando H2SO4
0,04N como solução receptora da amônia.

4500-NH3 C. DETERMINAÇÃO PELO MÉTODO TITULOMÉTRICO

1 DISCUSSÃO GERAL

O método da titulação é usado apenas em amostras que foram realizadas a

destilação preliminar. A Tabela 1 é útil na seleção do volume da amostra para o método
da destilação e titulação.

Tabela 1 – Seleção do volume de amostra a ser destilada de acordo com a concentração.

Nitrogênio amoniacal na amostra (mg.L-1) Volume da amostra (mL)
5-10 250
10-20 100
30-50 50,0
50-100 25,0

2 EQUIPAMENTOS

a) Aparelho Destilador
b) ph metro.
3 REAGENTES

a) Água livre de amônia: Preparada por métodos de troca de íon ou de destilação:

a.1) Troca iônica - Prepare a água livre de amônia passando a água destilada através de
uma coluna de permuta iônica contendo uma resina de troca catiônica fortemente ácida.
Escolher resinas que removerão compostos orgânicos que interferem com a
determinação da amônia. Algumas resinas de permuta aniônica tendem a liberar
amônia. Se isto ocorrer, preparar a água livre de amônia com uma resina de troca
catiônica fortemente ácida. Regenerar a coluna de acordo com as instruções do
fabricante. Verificar na água a presença de amônia para evitar a possibilidade de
brancos com valores elevados.

a.2) Destilação - Eliminar traços de amônia na água destilada, adicionando 0,1 mL

H2SO4 concentrado para 1000 mL de água destilada e redestilada. Alternativamente,
tratar a água destilada com bromo ou cloro o suficiente para produzir um residual de
halogênio livre de 2 a 5 mg/L e redestilar após repouso de pelo menos 1 h. Descarte os
primeiros 100 mL destilado. Verificar na água redestilada a possibilidade de um valor
elevado no branco.
É muito difícil de armazenar água livre de amônia no laboratório sem a
contaminação a partir de amônia na forma gasosa. No entanto, se o armazenamento for
necessário, guarde em um recipiente de vidro hermeticamente fechado ao qual se
adiciona cerca de 10 g de resina de permuta iônica (de preferência uma resina de troca
catiônica fortemente ácida) por litro de água isenta de amônia. Para o uso, deixe
assentar a resina até decantar na água livre de amônia. Se um elevado valor do branco é
produzido, substitua a resina ou prepare água fresca sem amônia. Use água destilada
sem amônia para a preparação de todos os reagentes, lavagem e diluição da amostra.

b) Solução tampão de borato: Adicionar 88 mL de solução NaOH 0,1 N a

aproximadamente 500 mL de tetraborato de sódio 0,025 M (Na2B4O7) (9,5 g Na2B4O7.
10 H2O/L) e diluir até 1 L.

c) Hidróxido de sódio 6N: Dissolver 240 g de NaOH em 400 mL de água destilada,

deixar esfriar e completar o volume para 1000 mL.
d) Reagente desclorante: Dissolver 3,5 g de tiossulfato de sódio (Na2S2O3. 5H2O) em
água e diluir a 1 L. Prepare semanal fresco. Use 1 mL do reagente para remover 1 mg/L
de cloro residual em 500 mL de amostra.

e) Agente neutralizador:
1) Hidroxido de sódio, NaOH, 1N. Dissolver 40 g de NaOH em 400 mL de água
destilada, deixar esfriar e diluir para 1000 mL em água destilada.
2) Ácido sulfúrico, H2SO4, 1N. Diluir 28 mL de H2SO4 concentrado a 1 L.

f) Solução absorvente simples de acido bórico: Dissolver 20 g de H3BO3 em água e

diluir a 1 L.

g) Solução indicadora de ácido bórico:

- Solução mista com indicadores: Dissolver 0,2 g de vermelho de metila em 100 mL de
álcool etílico 95 % ou álcool isopropílico. Dissolver 0,1 g de azul de metileno em 50
mL de álcool etílico 95 % ou álcool isopropílico. Combine as soluções. Prepare
mensalmente.
- Solução indicadora de ácido bórico: Dissolver 20 g de H3BO3 em água destilada,
adicionar 10 mL da solução mista de indicadores, e diluir para 1 L. Prepare
mensalmente.

h) Ácido sulfúrico 0,04N: Diluir 1,1 mL de H2SO4 concentrado a 1000 mL.

i) Solução padrão de ácido sulfúrico 0,02N: Diluir 200 mL da solução ácido sulfúrico
0,1 N ácido para 1000 mL de água destilada ou deionizada em balão volumétrico.

Padronização: A normalidade real da solução de ácido sulfúrico (C1) é obtida com

precisão pela reação com uma solução do padrão primário carbonato de sódio 0,05 N
(C2). Para isso, medir um volume conhecido da solução de carbonato de sódio (V2) e
fazê-la reagir sob leve agitação com a solução titulante de ácido sulfúrico (V1). No
Laboratório de Controle Ambiental tem sido usado um volume de 50 mL da solução de
carbonato de sódio 0,05 N com o processo realizado em triplicata (1 mL = 1,0 mg de
CaCO3).
 C1= C2 x V2
V1

Onde:
C1 = normalidade real do ácido sulfúrico (N);
V1 = volume de ácido gasto durante a padronização (mL);
C2 = concentração de carbonato de sódio (0,05 N);
V2 = volume da solução de carbonato de sódio.

4 PROCEDIMENTOS

- Medir 25 mL da amostra no tubo de digestão, procedendo a diluição para

concentrações de amônia maiores que 100 mg.L-1.
- Já próximo ao destilador adicionar 1,5 mL de tampão de borato e 0,5 mL da solução
de NaOH 6N.
- Levar para o destilador imediatamente após a adição da solução de NaOH e destilar,
recebendo o destilado em 10 mL da solução receptora (uma solução de cor roxa),
adicionada previamente em erlenmeyer de 125 mL.

- Coletar de 30 a 40 mL do destilado (a cor da solução receptora mudará da cor roxa

para verde caso tenha amônia).
- Titular com ácido sulfúrico 0,02N (a solução na titulação voltará para a cor roxa,
sendo esse o ponto de viragem e anotar o volume gasto).

IMPORTANTE
 Antes da destilação das amostras proceder a destilação do branco usando 25 mL de água
destilada no lugar amostra seguindo o mesmo procedimento. Caso ocorra a mudança de
coloração para verde indicativo da presença de amônia, realizar outro branco ou a troca
da água da caldeira até o destilado do branco permanecer com a coloração roxa.
 Para avaliar a recuperação da amônia no aparelho, realizar junto com as amostras a
destilação de um padrão de amônia de 50 mg.L-1.
5 CÁLCULO

AMÔNIA = (VG x N x 1000 x 14)

VA
VG = Volume Gasto
VA = Volume da amostra
N = Normalidade do Ácido Sulfúrico após padronização
14 = Massa molar do nitrogênio
1000 = fator de conversão de g.L-1 para mg.L-1

DESTILAÇÃO PRELIMINAR PARA A DETERMINAÇÃO PELO MÉTODO

DE FENATO

- Medir 25 mL da amostra no tubo de digestão, procedendo a diluição para

concentrações de amônia maiores que 100 mg.L-1.
- Já próximo ao destilador adicionar 1,5 mL de tampão de borato e 0,5 mL da solução
de NaOH 6N.
- Levar para o destilador imediatamente após a adição da solução de NaOH e destilar,
recebendo o destilado em 5 mL da solução da solução de ácido sulfúrico 0,04 N,
adicionada previamente em erlenmeyer de 125 mL.
- Coletar de 30 a 40 mL do destilado, e em seguida neutralizar com solução de NaOH
1N.
- Completar o volume para 50 mL com água isenta de amônia, utilizando balões
volumétricos.
- O próximo passo deve seguir o método utilizado para a determinação de amônia pelo
método de fenato.
 4500 - NH3 F. MÉTODO DE FENATO

1 DISCURSÃO GERAL

a) Principio: O azul intenso do composto indofenol, é formado pela reação de amônia,

hipoclorito de sódio e fenol catalisada por nitroprussiato.

b) Interferências: O complexo de magnésio e cálcio com citrato elimina as interferências

produzidas pelo precipitação desses íons em pH alto. Não há nenhuma interferência de
outras formas de nitrogênio trivalente. Remover a interferência da turbidez por
destilação ou filtração. Se sulfureto de hidrogênio estiver presente, remova por
acidificação das amostras para pH 3,00 com adição de HCl e aerar vigorosamente até
que o odor do sulfureto já não possa ser detectado.

2 MATERIAIS E EQUIPAMENTOS

Espectrofotômetro calibrado para leitura no comprimento de onda de 640 ηm com o

caminho de luz de 1 cm ou maior.

3 REAGENTES

a) Solução de Fenol: Misturar 11,1 mL de fenol liquefeito (≥ 89%) com álcool etílico a
95%, que o volume final seja de 100 mL. Preparo Semanal.
CUIDADO: Usar luvas e óculos de proteção ao manusear fenol; usar boa ventilação
para minimizar a exposição a todas as pessoas desta substância tóxica e volátil.

b) O Nitroprussiato de Sódio, 0,5% p/v: dissolver 0,5 g nitroprussiato de sódio em 100

mL água deionizada. Conservar em um frasco âmbar por até 1 mês.

c) Citrato alcalino: Dissolver 200 g citrato trissódico e 10 g de hidróxido de sódio em

água deionizada. Diluir a 1000 mL.

d) Hipoclorito de sódio: Solução comercial, a cerca de 5%: Esta solução se decompõe

lentamente quando o selo da tampa do frasco é aberto. Substituir a cada 2 (dois) meses.
e) Solução oxidante: misturar 100 mL solução citrato alcalino com 25 mL hipoclorito de
sódio. Prepare a solução diariamente.

f) Solução Estoque de Amônia: dissolver 3,819g de NH4Cl anidro (seco a 100 °C) em
água e diluir a 1000 mL, 1,00 mL = 1,00 mg N = 1,22 mg NH3.

g) Solução Padrão de Amônia: utilizar a solução estoque de amônio água para preparar
a curva em um intervalo adequado para as concentrações das amostras.
Usualmente no laboratório são preparados curvas com 0,1; 0,2; 0,4; 0,6; 0,8 e 1,0 mg
N-NH3/L.

4 PROCEDIMENTO

Para 25 mL de amostra em um erlenmeyer de 50 mL, adicionar promovendo a

mistura após cada adição reagente, 1,0 mL da solução de fenol, 1,0 mL da solução de
nitroprussiato de sódio, e 2,5 mL da solução oxidante. Cobri amostras com plástico,
deixar em ambiente de pouca luz e deixar a cor desenvolver por pelo menos 1 h. A cor
é estável por 24 horas. Medir a absorbância em 640 nm. Preparar um branco e, pelo
menos, dois outros padrões diluídos da solução estoque de amônia com valores
próximos do intervalo de concentração amostra. Trate o branco e os padrões como às
amostras.

5 CÁLCULO

Elaborar uma curva padrão, traçando um gráfico das leituras absorbância dos
padrões contra, as concentrações de amônia dos padrões. Compute a concentração
amostra, comparando a absorbância da amostra com a curva padrão.