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Rev. Colombiana Cienc. Anim.

1 (2) 0,2009 ORIGINAL

EVALUACIÓN DE LA PRODUCCIÓN Y la actividad antimicrobiana DELA aceites esenciales


de: Eucalyptus globulus, Cymbopogon citratus y
Rosmarinus officinalis EN DISTRITO Mbarara (Uganda)

EVALUACION DEL RENDIMIENTO Y LA ACTIVIDAD DE LOS antimicrobiana aceites esenciales DE Eucalyptus


globulus, Cymbopogon citratus y
Rosmarinus officinalis EN EL DISTRITO DE Mbarara (Uganda)

CUÉLLAR CUÉLLAR, ARMANDO 1 * Ph.D., HUSSEIN Yunus, RAHMA 2 BCH.


Pharm.
1* Profesor del Departamento de Farmacia, Universidad de La Habana y en la Universidad de Mbarara

de Ciencia y Tecnología, Uganda 2 * Licenciado en Farmacia,


Universidad Mbarara de Ciencia y Tecnología, Uganda.

* Póngase en contacto con: * mandyc@infomed.sld.cu

Abstracto

Los aceites esenciales constituyen un grupo relativamente común de productos naturales presentes en
plantas medicinales aromáticos. Son líquidos volátiles generalmente con olores agradables y, a veces
intensivos (aroma) .En el distrito de Mbarara (Uganda) existen diferentes plantas que producen aceites
esenciales, pero ningún estudio particular, se ha hecho para indicar el rendimiento y la evaluación de la
actividad antimicrobiana de los esenciales oilsThe país se ha deforestado muy rápido porque las personas
necesitan la madera como aceite para demostrar que esos aceites esenciales podían permitirse actividades
biológicas útiles
para el tratamiento de Las infecciones pueden alertar al
preservación de las especies de rendimientos plants.The de los aceites esenciales obtenidos en el presente
estudio fueron: R. oficcinalis 1,005% similar a la literatura. C. citratus
0.645% mayor que la literatura. E. glóbulos 0,205% inferior a la literatura. Los tres aceites esenciales
mostraron actividad antimicrobiana frente a los tres microorganismos ensayados más del 40% en
comparación con los fármacos estándar utilizados como prueba positiva y es importante destacar que las
diluciones de los aceites esenciales eran más activos que los puros.

Palabras clave: Aceites esenciales, citratos, Cymbopogon Rosmarinus officinalis, glóbulos de eucalipto, actividad
antimicrobiana.

Resumen

Los Aceites Esenciales constituyen ONU Grupo de metabolitos Secundarios comunmente Presentes
en plantas aromáticas. Son sustancias volátiles Líquidos de Gran Complejidad química generalmente
con olores Agradables A Veces Intensos

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Llamados aromas. En el Distrito de Mbarara (Uganda) Crecen Diferentes plantas Que Producen
Aceites Esenciales Pero, no se INFORMAN Estudios Científicos Que avalen el Rendimiento de los
Mismos y / o su efecto antimicrobiano. El País this Sufriendo Una deforestación acelerada pues las
Personas utilizan La Madera Como combustible barato y accesible por Lo Que demostrar Que los
Aceites Esenciales pueden Ser Una fuente de Tratamiento para Enfermedades Infecciosas PUEDE
favorecer la Preservación de Especies en ALGUNAS El Territorio. Con El Presente Trabajo sí
Demuestra Que los Rendimientos de los aceites esenciales de tres plantas hijo los Siguientes: oficcinalis
R. 1,005% similar a los Informes de la literatura, C. citratus 0,645% superiores a los Informes de la
literatura y E. globulus 0,205% inferiores a los Informes de la literatura. Los tres mostraron Aceites
Esenciales in vitro Actividad antimicrobiana del 40% frente a Los Tres microorganismos evaluados
observándose Que las diluciones de Los Mismos FUERON MAS Activas Que Los Aceites Puros
evaluados.

Palabras clave: Aceites Esenciales, citratos Cymbopogon, Rosmarinus officinalis, glóbulos de


eucalipto, Actividad antimicrobiana.

Introducción

Los aceites esenciales constituyen un grupo relativamente común de productos naturales presentes en
plantas medicinales aromáticos. Son líquidos volátiles generalmente con olores agradables y, a veces
intensivos (aroma). También se refieren a los aceites volátiles, como los aceites etéreos, o esencias de
muchas plantas. La composición química es muy diferente de una planta a otra y el componente químico
principal determina el aroma y sus actividades biológicas. Terapéuticamente, ejercen un amplio espectro
de actividades biológicas tales como: antiséptico (para evitar infecciones), estimulante, carminativo,
diurético, antihelmíntico, analgésico y muchos otros de acuerdo con la composición química (IKAM,
1969).

En Mbarara District (Uganda) hay diferentes plantas que producen aceites esenciales pero ningún estudio
particular, se ha hecho para indicar el rendimiento y la evaluación de la actividad antimicrobiana de los
aceites esenciales. En el Distrito, infecciones de la piel y las heridas son comunes y por lo tanto la razón de
este estudio para ver cómo es evaluar si estos aceites esenciales tienen actividad antimicrobiana para ser
utilizado como un tratamiento alternativo para infecciones externas.

Alrededor del 80 por ciento de la población de Uganda se basa en la medicina tradicional porque el personal
médico formados en occidente están limitados o no muy aceptados por la comunidad, y los curanderos
tradicionales son fácilmente consultadas, que viven en la misma comunidad. El país importa la mayoría de sus
medicamentos desde el extranjero y, a menudo experimenta una grave escasez. Esto apunta a la demanda de
practicantes de la medicina tradicional (PMT) para las plantas medicinales y el hecho de que la mayoría

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de las personas, rurales y urbanas por igual, dependerá en gran medida de las hierbas medicinales para tratar una
variedad de enfermedades. Esta dependencia se debe principalmente al alto costo de la medicina convencional y la falta
de acceso a los centros de salud modernos en la mayoría de las áreas. OMS (2002-2005).

Un aceite esencial es un líquido concentrado, hidrófobo que contiene compuestos aromáticos volátiles de las
plantas. También son conocidos como aceites volátiles o etéreos. Los aceites volátiles o esenciales
corresponden a una mezcla de hemiterpenoids, monoterpenoides y algunos sesquiterpenoides que están en
conjunción con el petróleo. La mezcla es altamente volátil cuando se expone al aire a temperatura ambiente
por lo tanto el nombre de aceites etéreos. El olor y el sabor de un aceite esencial se determina por el
principal constituyente químico de la mezcla. Son casi insoluble en agua y soluble en alcohol y generalmente
más ligeros que el agua. Tienen un alto índice de refracción y muchos de ellos son ópticamente activos. Los
aceites esenciales son generalmente extraídos por destilación.

Eucalyptus globulus Es un árbol de hoja perenne. Las hojas son de vapor destilada para extraer aceite
de eucalipto. El aceite tiene terapéutico, perfumería, condimento,

antimicrobianos y biopesticidas propiedades. El eucalipto se utiliza internamente y externamente como


expectorante, y para tratar infecciones y fiebres. También se utiliza por vía tópica para el tratamiento de
dolores musculares y reumatismo. Una combinación tópica de Eucalyptus y menta se muestra
prometedor como analgésico. El componente principal del aceite de eucalipto es la sustancia volátil 1,
8-cineol (cineol). ( http://www.thefreelibrary.com/Eucalyptus )

(Rosmarinus officinalis Romero) es un woody, hierba perenne con hojas aciculares fragante de hoja perenne.
Es originaria de la región mediterránea. Actualmente en Uganda, Rosemary se utiliza principalmente como un
refuerzo de la memoria en forma de un polvo y como agente aromatizante en los productos alimenticios. La
producción a gran escala está empezando a florecer, pero se cultiva previamente en una pequeña escala. Las
partes de las plantas utilizadas en la medicina son las sumidades floridas, que tienen un poderoso difusiva, olor
camphoraceaous, y un sabor amargo aromático. Ellos dan sus propiedades al agua o espíritus pero más
eficazmente a alcohol. Las hojas se comportan de manera similar. La edad y morir olor deterioran y propiedades,
que se deben a los aceites volátiles. Las hojas de las plantas también son masticadas por los pacientes que
tienen tos.

Cymbopogon citratus, comúnmente conocida como hierba de limón, así como la hierba de aceite, es una planta
tropical. Es una hierba perenne de altura. Sus hojas se utilizan para hacer té que puede aliviar problemas
estomacales e intestinales. También puede actuar como un antidepresivo y como un potenciador del estado de
ánimo. Cymbopogon citratus contiene ingredientes activos como mirceno , Un calmante para antibacteriano y el dolor,
citronelal, citronelol
y geraniol.
Se estima que alrededor del 80% de la población mundial reside en las vastas áreas rurales de los países en
desarrollo y en los países desarrollados todavía se basan principalmente en
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plantas medicinales. Las plantas medicinales son la única fuente asequible y accesible de la atención primaria de
salud para ellos, sobre todo en la falta de acceso a las instalaciones de la medicina moderna. Los estudios
revelan que hay proveedores de medicina más tradicional que los proveedores alopáticos sobre todo en las
zonas rurales de la OMS (2002-
2005)

Ugandeses tienen mayor acceso a la tradicional que a la atención médica occidental. Los curanderos
tradicionales son una parte integral de la cultura local y son apreciados como fuentes clave y sostenibles de
cuidado y conocimiento sobre la enfermedad y la enfermedad. (La Fundación de la Cruz-Cultural de Uganda,
2008). En Mbarara District (Uganda) hay diferentes plantas que producen aceites esenciales pero ningún
estudio particular, se ha hecho para indicar el rendimiento y la evaluación de la actividad antimicrobiana de los
aceites esenciales.

La propagación de agentes patógenos resistentes a los medicamentos es una de las amenazas más graves para el
éxito del tratamiento de enfermedades microbianas. A lo largo de los siglos los aceites esenciales y otros extractos
de plantas han suscitado interés como fuentes de productos naturales. Ellos han sido seleccionados por sus
posibles usos como remedios alternativos para el tratamiento de muchas enfermedades infecciosas. La
Organización Mundial de la Salud (OMS) señaló que la mayoría de la población del mundo depende de la medicina
tradicional para la atención primaria de salud. Las plantas medicinales y aromáticas se usan ampliamente como
medicina y constituyen una fuente importante de compuestos orgánicos naturales. (SEENIVASAN et al., 2006).

Una encuesta del uso y el valor de las plantas medicinales y otros en la medicina tradicional distrito de Kasese,
Uganda está llevando a cabo lentamente. 492 miembros de grupos de apoyo y centros de atención de salud se
llevó a cabo en un ambiente de grupo: 23 grupos con un tamaño medio de 21 años, rango de edad 4-53, lo que
representó 0,1% de la población, que abarca nueve de las 20 sub-condados, tanto en las lenguas nativas y en
Inglés, utilizando fotografías y las muestras de 12 plantas. La mayoría admitido el uso de las plantas en algun
tiempo; 81% para el auto, 77% para sus hijos; 45% admitió usar sanadores tradicionales como una fuente de
información acerca salud. La mayoría de las plantas se cultivaron casa o disponibles a nivel local. Medicinal las
plantas se utilizaron para las infecciones respiratorias, fiebre, la malaria y diarrea / vómitos (CHALLAND, 2005).

materiales y métodos

Materiales vegetales

planta fresca hojas de Eucalyptus globulus, Cymbopogon citratus y


Rosmarinus officinalis fueron cada uno recoge en el mismo mes (marzo de 2009), una hora antes de
la destilación del aceite esencial, desde el jardín de Mbarara

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Universidad de Ciencia y Tecnología ( DEBE). Las hojas de las plantas fueron llevadas al Laboratorio de
Farmacia de la Universidad de Mbarara de Ciencia y Tecnología para la extracción. Todo el material vegetal
fue autenticado en el Departamento de Biología de la Universidad de Mbarara de Ciencia y Tecnología (Figura
1).

Figura 1. Las plantas de Eucalyptus globulus ( UN), Cymbopogon citratus ( SEGUNDO),

(Rosmarinus officinalis DO).

Procedimiento para la preparación de aceites esenciales

El aparato de destilación era un uno Clevenger.

Cada una de las tres plantas se recogió temprano por la mañana a las 7:00 antes de que el sol estaba
alto en el cielo en el día programado para la extracción del aceite esencial. Cymbopogon citratus se
recogió primero, seguido de Rosmarinus officinalis al día siguiente y, finalmente, Eucalyptus globulus en
el último día y en la misma semana de marzo de 2009. Las hojas fueron cortadas por un par de tijeras
con una pequeña parte de la rama de apoyo del Jardín de la Universidad Mbarara de Ciencia y
Tecnología. Las plantas se llevaron al laboratorio en una bolsa de plástico. Las hojas se cortaron en
trozos más pequeños por las tijeras para aumentar la eficiencia de la extracción y aumentando de
este modo el rendimiento a obtener. Las hojas cortadas se midieron entonces utilizando una balanza
de medición electrónico y se pusieron en el matraz de fondo redondo de los equipos con suficiente
agua y establecieron en el resto del aparato.

por Rosmarinus officinalis sin embargo, las hojas eran ya pequeña no había necesidad de una mayor reducción
del tamaño mediante corte, solamente separándolas de la rama de soporte mediante una firma de movimiento de
la mano de deslizamiento. El manto calefactor se enciende y el proceso de extracción se fijó para comenzar.
Después de aproximadamente una hora, el 1 S t la extracción se obtuvo en la columna de la recogida, la cantidad
del aceite se lee directamente de la columna graduada y registrada. Las hojas son utilizadas

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a continuación se vertió y se utiliza un nuevo conjunto de hojas y una vez más el proceso se repitió para otro
lote de hojas y así sucesivamente.

Para los lotes precedentes de la misma planta el agua utilizada en el 1 S t


proceso de extracción no fue derramado, en lugar se retuvo y se utiliza para el siguiente lote de la misma
planta, ya que se saturó en el 1 S t procedimiento, esto aumenta aún más la eficiencia del proceso y consume
menos tiempo. El aceite esencial se recoge mediante el control de un grifo conectado a la columna de la
recogida, el agua se drena 1 S t luego la parte superior posterior que contiene el aceite esencial se recogió en
botellas pequeñas, cubiertos, etiquetados y almacenados en la nevera, para evitar la evaporación del aceite
esencial, listo para la prueba antimicrobiana.

Los vapores condensados ​aparecieron en dos capas, donde la capa inferior era de agua y el superior se la
capa de aceite esencial. Los aceites esenciales se midieron directamente desde el aparato para calcular el
rendimiento y luego decantaron en las botellas de almacenamiento.

a continuación, se tomaron Los aceites esenciales para las pruebas de antimicrobianos en el Laboratorio de Microbiología de

la Universidad de Mbarara de Ciencia y Tecnología.

pruebas antimicrobianas

microorganismos de prueba se obtuvieron del Departamento de Microbiología de la Universidad de Mbarara de


Ciencia y Tecnología y fueron los siguientes: 1- Staphylococcus aureus ( ATCC 25923),

albicans 2- (Candida era un aislado de un paciente) y

3- Escherichia coli ( ATCC 25922)

Se han usado antibióticos de control (Gentamicina para las bacterias y nistatina para los hongos).

Preparación de soluciones madre

Las soluciones madre de etanol y el aceite esencial se prepararon disolviendo 1 ml de los aceites
esenciales en 1 ml de etanol. De las soluciones madre se hicieron diluciones seriadas para obtener las
soluciones de ensayo de ½ concentración, 1/4, 1/8, 1/16, 1/32, 1/64, 1/128. El puro (puro aceite esencial)
también se incluyó en las pruebas.

Procedimiento para las pruebas antimicrobianas

El método utilizado fue el método de difusión en pocillo.

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Candida albicans se incubaron en Saborid Dextrosa Agar (SDA),


Staphylococcus aureus y Escherichia coli se cultivaron en agar Mueller-Hinton que había sido extendido con
microorganismos a una densidad ajustada a 0,5 estándares McFarland (108 unidades formadoras de
colonias [UFC] / ml).

ensayo antimicrobiano: El ensayo antimicrobiano se realizó mediante el método de difusión en agar. El


agar se funde, se vierte sobre la placa de Petri y se deja solidificar. El uso de hisopos estériles, los
organismos se unta en el agar solidificado.

Para el método de difusión en pocillos de agar, un pozo se preparó en las placas con la ayuda de
corcho-barrenador (6 mm). 100? L de diferentes concentraciones del compuesto de ensayo se introdujo en los
pocillos. Las placas se incubaron durante 24 horas a 37ºC.

Candida albicans se incubó durante setenta y dos horas a 27ºC.

Para cada especie microbiana, se mantuvo control negativo donde se utilizó 100? L de etanol solo, sin el
fármaco para el extracto de etanol. También, se utilizaron los fármacos convencionales para los controles
positivos. En el orificio central de las diferentes placas de Petri, el control se puso para cada organismo,
gentamicina para E. coli y
Staphylococcus aureus y nistatina para Candida albicans.

Los resultados se registraron mediante la medición del diámetro de las zonas de inhibición de
crecimiento que rodea los pozos (cilindros). El efecto neto de los extractos de drogas se obtuvo
restando el diámetro de la zona de inhibición debido etanol solo a partir del diámetro de las zonas de
inhibición debido al extracto de fármaco más etanol (Biavati et al., 2008).

resultados

El rendimiento de aceite esencial del material de planta (Tablas 1a, 1b, 1c):

Tabla 1a. El rendimiento de los aceites esenciales de Cymbopogon citratus

Primera extracción segunda extracción


Peso de las hojas (g) 184 160
Volumen después de una hora de destilación (ml) 1.1 1.1
Porcentaje de rendimiento (% ml / g) 0.60 0.69
El rendimiento promedio (% ml / g) 0,645

Tabla 1b. El rendimiento de los aceites esenciales de Rosmarinus officinalis

Primera extracción segunda extracción


Peso de las hojas (g) 84 107
Volumen después de una hora de destilación (ml) 0.75 1.2
Porcentaje de rendimiento (% ml / g) 0.89 1.12
El rendimiento promedio (% ml / g) 1.005

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Tabla 1c. El rendimiento de los aceites esenciales de Eucalyptus globulus

Primera extracción segunda extracción


Peso de las hojas (g) 296 240
Volumen después de una hora de destilación (ml) 0.6 0.5
Porcentaje de rendimiento (% ml / g) 0.20 0.21
El rendimiento promedio (% ml / g) 0,205

resultados de actividad antimicrobiana

Tabla 2a. Resultados para la actividad antimicrobiana de Cymbopogon citratus esencial


petróleo

Zona de inhibición / mm
Dilución en Staphylococcus aureus E. coli Candida albicans
serie
diluciones diluciones diluciones diluciones alcohol diluciones
alcohol alcohol diluciones
½ 0 Sin crecimiento 0 26 0 Sin crecimiento

¼ 0 Sin crecimiento 0 24 0 Sin crecimiento

1/8 0 Sin crecimiento 0 24 0 Sin crecimiento

1/16 0 dieciséis 0 22 0 Sin crecimiento

1/32 0 28 0 15 0 Sin crecimiento

1/64 0 18 0 14 0 Sin crecimiento

1/128 0 12 0 10 0 Sin crecimiento


gentamicina - 58 - 40 - Sin crecimiento

nistatina - - - - 17 Sin crecimiento


ordenado - 50 - 18 - Sin crecimiento

Tabla 2b. Resultados para la actividad antimicrobiana de Rosmarinus officinalis


aceite esencial

Zona de inhibición / mm
Dilución en serie Staphylococcus aureus E. coli Candida albicans
diluciones alcohol diluciones diluciones alcohol diluciones alcohol diluciones diluciones
½ 0 36 0 24 0 26
¼ 0 48 0 30 0 20
1/8 0 40 0 24 0 18
1/16 0 12 0 12 0 14
1/32 0 8 0 10 0 9
1/64 0 0 0 6 0 9
1/128 0 0 0 6 0 8
gentamicina - ? - 40 - -
nistatina - - - - 17 24
ordenado - 46 - 24 - 20

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Tabla 2c. Resultados para la actividad antimicrobiana de Eucalyptus globulus esencial


petróleo

Zona de inhibición / mm
Dilución en serie Staphylococcus aureus E. coli Candida albicans
diluciones alcohol diluciones diluciones alcohol diluciones alcohol diluciones diluciones
½ 0 32 0 32 0 60
¼ 0 38 0 29 0 dieciséis

1/8 0 22 0 18 0 26
1/16 0 10 0 18 0 14
1/32 0 9 0 14 0 10
1/64 0 9 0 12 0 10
1/128 0 8 0 12 0 9
gentamicina - 58 - 40 - -
nistatina - - - - - 30
ordenado - 32 - dieciséis - 44

Discusión

El rendimiento de cada aceite esencial se calculó y se representó en las Tablas 1a, 1b y 1c. Es evidente de los
resultados que diferentes plantas que contienen aceites esenciales tienen diferentes cantidades o rendimiento de
aceites esenciales e incluso dentro de la misma especie de plantas el rendimiento exacto no es reproducible, pero
es más o menos similar. Por lo tanto, no es correcto comparar los rendimientos entre las tres especies de plantas,
pero para los propósitos de la presentación Rosmarinus officinalis tenido el mayor rendimiento con una media de
1,005% de rendimiento ml / g en las mismas condiciones (duración de la extracción, la temperatura ajustada por
un botón en la repisa de calentamiento de trabajo, el medio ambiente, seguido de Cymbopogon citratus con un
rendimiento promedio de 0.645% ml / g y finalmente Eucalyptus globulus con un rendimiento promedio de 0.205%
ml / g.

La actividad antimicrobiana del aceite esencial de Cymbopogon citratus:


Staphylococcus aureus: la ordenada tenían un efecto de 87% con respecto a la norma de gentamicina
y la dilución 1/32 tenía el mejor efecto con el 48% con respecto a la norma. E. coli: la ordenada tenían
un efecto de 45% con respecto a la norma de gentamicina y las diluciones eran todos más activo
hasta 1/16 con 55% de la actividad. Candida albicans: los ensayos se repitieron tres veces y el
microorganismo no crecieron. Es posible observar que el mismo microorganismo se utilizó para los
otros ensayos y growed muy bien, por lo que es posible que la concentración del vapor en el interior
de la placa de Petri es muy activo y evitar el crecimiento de la cepa.

La actividad antimicrobiana del aceite esencial de Rosmarinus officinalis:

Staphylococcus aureus: la ordenada y las tres diluciones superiores eran muy activos, pero no se
obtuvo la inhibición estándar de gentamicina por lo tanto, no estaba disponible para la comparación. E.
coli: la ordenada tenían un efecto de 60% con respecto a la norma de gentamicina y los ½ diluciones, ¼,
1/8 casi tenía la misma

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efecto pero ¼ tenían una inhibición de 15% por encima de la ordenada. Candida albicans: la ordenada tenido un
efecto del 83% con respecto a la norma de nistatina y la primera dilución ½ tenido una inhibición de 30% por encima
de la ordenada.

La actividad antimicrobiana del aceite esencial de glóbulos de Eucalipto: Staphylococcus aureus: la


ordenada tenido un efecto de 55% con respecto a la norma de gentamicina y los ½ diluciones, ¼, 1/8,
tenía una actividad similar y bueno pero dilución ¼ tenido una inhibición de 18% sobre la ordenada. E.
coli: la ordenada tenían un efecto de sólo el 40% con respecto a la estándar, pero las diluciones ½, ¼, 1/8
y 1/16 dio una mayor actividad y ½ duplicando la actividad con respecto a la inhibición ordenada y 80%
con respecto a la La gentamicina estándar. Candida albicans: La ordenada fue más activo que el estándar
Nystatin por una inhibición de 46%, pero la dilución ½ duplicando la actividad con respecto a la norma.

En las conclusiones de este estudio es posible afirmar que los tres aceites esenciales llevan variable de
actividad antimicrobiana de acuerdo con los microorganismos y en todos ellos las diluciones alcohol eran
más activos que la ordenada, tal vez porque no era mejor difusión en agar o debido a la menor pérdida
debida a la evaporación durante el tiempo de incubación y su temperatura más alta.

referencias

Biavati, RB; PICEAGLIA, M .; MAROTTI, A. 2008. La actividad antimicrobiana de los aceites esenciales de
plantas. Dep. De Ciencia y Tecnología del medio ambiente agro
Universidad de Bolonia. De Google.co.ug. Marzo de 2008.

CHALLAND, S. 2005. Un estudio de la utilización de plantas medicinales y otros en la medicina


tradicional distrito de Kasese, Uganda. Doctor Tropical 35 (4 ): 222-
224.

IKAM, R.1969. Productos naturales: una guía de laboratorio. Capítulo V. Publicación Elsevier, Londres.

SEENIVASAN, P .; MANICKKAM, J .; Savarimuthu I. 2006. In vitro


actividad antibacteriana de algunos aceites esenciales de plantas. BMC Medicina Complementaria y
Alternativa 6: 39. Extraído de www.biomedcentral.com

LA FOUNDATION transcultural de Uganda. 2008 promover la medicina herbaria en Uganda)


extraídos de www.crossculturalfoundation.or.ug .

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