1.

INTRODUCCION

En bioquímica mantener el pH del organismo en equilibrio es vital para las células

de todos los seres vivos, por este motivo nuestro sistema tiene una serie de
mecanismos para mantener nuestro pH constante, y entre uno de ellos están las
soluciones amortiguadoras.
Los amortiguadores Representan la principal línea de defensa ante los cambios
desfavorables de pH gracias a la capacidad que tienen para captar o liberar
protones de modo inmediato en respuesta a las variaciones de pH que se
produzcan.
Esto llevado a la práctica busca demostrar la capacidad tampón de un sistema
amortiguador, empleando un ácido débil y su sal conjugada, para estudiar la
curva de titulación.

2.OBJETIVO
La presente práctica es demostrar:
 preparar soluciones como amortiguador ácido acético (CH3-COOH) y
como base hidróxido de sodio (NAOH) a un pH determinado
 determinar el valor de pH de las soluciones amortiguadores utilizando
papel del pH indicador acido-base y el pH metro
 indicar la variación del pH en soluciones amortiguadoras al agregarle
pequeñas cantidades acido o bases fuertes
 Comparar el cambio pH en una solución amortiguadora con un sistema
no amortiguador
 Observar el efecto amortiguadores de las soluciones buffer al agregar
acido-base.
3. MARCO TEÓRICO
3.1. El pH
Es el logaritmo negativo de la concentración de Ion de Hidrogeno Es una medida
de acides o alcalinidad de una disolución, significa potencial de hidrógeno. Se
halla como:
pH = - Log [ H+ ]

La concentración de H+ libres en una solución tiene consecuencias biológicas

significativas.
Toda sustancia con pH 7, el correspondiente al agua, se denomina neutra. Las
de valor inferior a 7, se consideran ácidas y las superiores a 7 básicas o alcalinas.

3.2. Amortiguadores, buffer o tampones

El pH de los medios biológicos es una constante fundamental para el
mantenimiento de los procesos vitales. La acción enzimática y las
transformaciones químicas de las células se realizan dentro de unos estrictos
márgenes de pH.
En humanos los valores extremos compatibles con la vida y con el
mantenimiento de funciones vitales oscilan entre 6,8 y 7,8; siendo el estrecho
margen de 7,35 a 7,45 el de normalidad. También en el trabajo de laboratorio,
es imprescindible el mantenimiento de un pH para la realización de muchas
reacciones químico-biológicas. Los sistemas encargados de evitar grandes
variaciones del valor de pH son los denominados “amortiguadores, buffer, o
tampones”. Son por lo general soluciones de ácidos débiles y de sus bases
conjugadas o de bases débiles y sus ácidos conjugados. Los amortiguadores
resisten tanto a la adición de ácidos como de bases
Los amortiguadores más sencillos están formados por mezclas binarias:
 un ácido débil y una sal del mismo ácido con una base fuerte (por
ejemplo, ácido acético y acetato sódico)
 una base débil y la sal de esta base con un ácido fuerte (por ejemplo,
amoníaco y cloruro amónico)
3.3. Tampones fisiológicos
Son los sistemas encargados de mantener el pH de los medios biológicos dentro
de los valores compatibles con la vida. Permitiendo con ello la realización de f
unciones bioquímicas y fisiológicas de las células, tejidos, órganos, aparatos y
sistemas. Según su naturaleza química, los amortiguadores se clasifican en
orgánicos e inorgánicos y, así mismo, atendiendo a su ubicación, se distribuyen
en plasmáticos y tisulares.

3.3.1. Tampón fosfato

El tampón fosfato es un sistema muy eficaz para amortiguar ácidos. La
concentración de fosfato en la sangre es baja, por lo que tiene escasa capacidad
de tamponar si lo comparamos con otros tampones (el bicarbonato). En cambio,
a nivel intracelular, las concentraciones de fosfato son elevadas lo que le
convierte en un tampón eficiente. Las grandes cantidades de fosfato dentro de
las células corporales y en el hueso hacen que el fosfato sea un depósito grande
y eficaz para amortiguar el pH.
3.3.2. Tampón hemoglobina
Es un tampón fisiológico muy eficiente debido tanto al cambio de pK que
experimenta al pasar de la forma oxidada a la reducida, como a la gran
abundancia de esta proteína en la sangre (15 % del volumen total sanguíneo).
HbH + O2 → HbO2 + H+
Esta propiedad de la hemoglobina, de cambiar su valor de pK, demuestra el
efecto tampón, permite el transporte de una determinada cantidad de CO₂
liberada en los tejidos. La hemoglobina oxigenada que llega a los tejidos se
disocia liberando O₂, un proceso que está favorecido por el estado de los tejidos

3.3.3. Tampón bicarbonato

El bicarbonato es un tampón fundamental en el organismo y normalmente está
presente en los fluidos biológicos como bicarbonato sódico (siendo el sodio el
principal ion positivo en los fluidos extracelulares).

3.3.4. Las proteínas y aminoácidos

Los aminoácidos y proteínas son electrolitos anfóteros, es decir, pueden tanto
ceder protones (ácidos) como captarlos (bases) y, a un determinado pH , tener
ambos comportamientos al mismo tiempo. La carga depende del pH del medio.

En un medio muy básico se cargan negativamente, mientras que en el

fuertemente ácido lo hacen positivamente. Desde el punto de vista fisiológico
este tipo de amortiguador es resulta de especial interés a nivel tisular.
3.4.Ecuación de Henderson-Hasselbalch:
Es una expresión utilizada en química para calcular el pH de una disolución
reguladora, o tampón, a partir del pKa o el pKb (obtenidos de la constante de
disociación del ácido o de la constante de disociación de la base) y de las
concentraciones de equilibrio del ácido o base y de sus correspondientes base
o ácido conjugado, respectivamente.

pH = pK + log ( base ) / ( ácido )

3.5.Ácido Acético (CH3-COOH):

También llamado ácido etanoico o ácido metilencarboxílico, es un ácido orgánico
de dos átomos de carbono, se puede encontrar en forma de ion acetato. Su
fórmula es CH3-COOH (C2H4O2), siendo el grupo carboxilo es el que le confiere
las propiedades ácidas a la molécula Como líquido, el ácido acético es
transparente y viscoso, mientras que como sólido, el ácido es incoloro y algo
vidrioso.

3.6.Hidróxido de Sodio (NaOH):

Es una sustancia química compuesta por sodio, hidrógeno y oxígeno altamente
corrosiva cuya fórmula es NaOH. En su forma pura y a temperatura ambiente, el
hidróxido de sodio es un sólido de color blanco y sin olor.
Es una sustancia muy alcalina con alta solubilidad en agua, característica que
la hace apropiada para muchos productos líquidos. En la industria química y
farmacéutica se utiliza ampliamente como materia prima en muchas reacciones
de síntesis o para ajustar el pH de soluciones.
4.MATERIALES
 Vaso de precipitación de 100 ml.
 Pipetas de 5 ml
graduadas.
 Tiras de pH.
 Baguetas de vidrio.
 Papel milimetrado.
 Perilla de goma.
 Vasos descartables.

REACTIVOS
 Solución de CH3-COOH
 Solucion de NaOH

 CH3-COOH (ácido acético)

  NaOH (hidróxido de sodio)

5.PROCEDIMIENTO

 CUADRO DE GUIA
Vasos Ácido Acético NaOH Agua Destilada
pH
N° 0.1 N (ml) 0.1 N (ml) (ml)
1 10 0 10 ¿?
2 10 1 9 ¿?
3 10 2 8 ¿?
4 10 3 7 ¿?
5 10 4 6 ¿?
6 10 5 5 ¿?
7 10 6 4 ¿?
8 10 7 3 ¿?
9 10 8 2 ¿?
10 10 9 1 ¿?
11 10 10 0 ¿?
1. Con la pipeta agregamos 10 ml de ácido acético (CH3-COOH) a cada uno
de los once vasitos.

2. Seguidamente agregamos agua destilada a cada uno de los vasos de

acuerdo a las medidas que se nos dio en el cuadro de guía.
3. Posteriormente agregamos hidróxido de sodio (NaOH) al primer vaso,
con ayuda de la bagueta mezclamos la solución rápidamente para luego
medir el Ph, y así sucesivamente se le agrega hidróxido de sodio a cada
uno de los once vasitos de acuerdo a las medidas del cuadro de guía para
luego medir el pH.

 RESULTADOS DE LA MEDIDA DEL pH

Vasos Ácido Acético NaOH Agua Destilada
pH
N° 0.1 N (ml) 0.1 N (ml) (ml)
1 10 0 10 4
2 10 1 9 4
3 10 2 8 4
4 10 3 7 4
5 10 4 6 4
6 10 5 5 4
7 10 6 4 4
8 10 7 3 4
9 10 8 2 5
10 10 9 1 5
11 10 10 0 6
6. Conclusiones
 Una sustancia amortiguadora ayuda al pH de una reacción, a que este se
mantenga constante, por lo que da un equilibrio químico durante la reacción.
 El cuerpo humano tiene diferentes tipos de amortiguadores para protegernos
de una alteración brusca de pH, de manera intracelular y extracelular.
 La variación de pH en la base en el ácido acético (CH3-COOH) solo mostro un
cambio de +1 en relación al aumento de Hidróxido de Sodio (NaOH), de esta
manera se puede decir que el sistema amortiguador se mantuvo hasta el vaso
“n° 10”
 En el vaso “N° 11” el pH llego hasta índices de 6, indicando q la solución perdió
su sistema amortiguador en este punto.
 El sistema amortiguador va perdiendo su eficacia a medida que la relación
entre hidróxido de sodio (NaoH) y el agua destilada va variando entre si.

7. Bibliografía
 http://slideplayer.es/slide/6918082/
 https://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-
mol/pdfs/06%20pH%20AMORTIGUADORES.pdf
 http://www.ehu.eus/biomoleculas/buffers/buffer.htm
 https://previa.uclm.es/profesorado/pablofernandez/QG-05-
equilibrio%20acido%20base/equilibrio%20acido%20base.pdf
 Libro HARPER “Bioquímica Ilustrada”. Edición 28 (pag. 6-15)
CUESTIONARIO
2.- identificar el punto de semi-valoración y máxima capacidad
El punto de semi-valoración es:
𝑠𝑢ma del pH 49
= = 4.45
𝑛𝑢mero de vasos 11

Después de ver los cambios de pH en la tabla se concluye

pH
4
4
4
4
4 Este es el punto
4 máximo capacidad
4 amortiguador
5
5
5
6

3.- explique que es un par tampón, como funciona y porque las proteínas
sanguíneas son amortiguadores
Son sustancias químicas que afectan a la concentración de los iones
de hidrógeno en el agua. Siendo que pH no significa otra cosa que
potencial de hidrogeniones, un tampón (o "amortiguador") lo que hace es
regular el pH.
Las proteínas sanguíneas son amortiguadores porque permite el
transporte de una determinada cantidad de CO2 liberada en los tejidos. La
hemoglobina oxigenada que llega a los tejidos se disocia liberando O2, un
proceso que está favorecido por el estado de los tejidos (baja pO2, menor
pH y alta pCO2).