UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE INGENIERÍA, CIENCIAS FÍSICAS Y

MATEMÁTICA

LABORATORIO DE QUÍMICA SANITARIA

Profesora: Ing. Susana Guzmán R. MSc.

Práctica No: 07 Grupo: 01 Curso: Octavo Paralelo 3

Tema: Análisis MIcrobiológico

Nombre del autor: Campoverde, A. G., Narváez, D., Pulles, L., Ramones, K. A.,
Zambrano, J.
Fecha de realización: 26-01-2016

1. Introducción Teórica.
Microorganismos

Los microorganismos como las Levaduras son organismos vivos microscópicos unicelulares
pertenecientes al reino de los hongos y al dominio eucariota, se alimentan principalmente de
azúcar produciendo fundamentalmente dióxido de carbono y alcohol; su forma puede ser desde
esférica, ovoide o alargada. Las dimensiones varían entre 2 y 4 µm de ancho y 2 a 8 µm de
largo, se encuentran levaduras alargadas de 10, 15 o 25 µm de longitud. Poseen pared
celular,membrana fundamental, citoplasma y núcleo.
“Las levaduras son muy importantes debido a que contribuyen en la elaboración de procesos
fermentativos, Un ejemplo claro es la Saccharomyces cerevisiae, que es empleada
industrialmente en la fabricación de pan, cerveza y vino. Se forma de nutrición varía desde los
carbohidratos hasta los aminoácidos. Entre los azúcares que pueden utilizar están los
monosacáridos como la glucosa, fructosa y galactosa,también puede emplear disacáridos como
la maltosa y la sacarosa.Para identificar una levadura se parte de cultivos puros, y se tienen en
cuenta ciertas características”(Madigan, 2000)
● Morfológicas: Forma, medida, reproducción asexual
● Características de reproducción sexual
● Características fisiológicas y bioquímicas
Con lo anterior ya mencionado es necesario que los microorganismos para reproducirse
necesitan de medios de cultivo, ser aislados y a su vez identificados por medio de pruebas de
coloración como la Gram y pruebas bioquímicas como se mencionan a continuación.
(Madigan, 2000)

Medios de Cultivo
Los medios de cultivo son soluciones compuestas por nutrientes específicos para que así los
microorganismos puedan desarrollarse en un laboratorio. La composición precisa dependerá
de la especie que se quiera cultivar, ya que las necesidades nutricionales varían
considerablemente. Se pueden clasificar de acuerdo a su estado, complejidad, y aplicaciones.En
cuanto al estado se encuentran medios sólidos, semisólidos y líquidos, los sólidos contienen
una sustancia gelificante conocida como agar-agar, los semisólidos contienen una menor
concentración de agar-agar (0.5 a 0.7%) y los líquidos no contienen agar-agar, debido a su
naturaleza los medios sólidos o agares se sirven en cajas de Petri mientras que los medios
líquidos o caldos de cultivo y los semisólidos se sirven en tubos de ensayo. Según las
aplicaciones de los medios de se clasifican en enriquecidos, selectivos, diferenciales.
Para la preparación de cultivos se requieren de ciertas condiciones generales tales como la
disponibilidad de nutrientes adecuados, la consistencia adecuada del medio, presencia (o
ausencia) de oxígeno y otros gases, condiciones adecuadas de humedad, luz ambiental, pH,
temperatura y esterilidad del medio. (Madigan, 2000)

2. Objetivos.

● Aplicar la técnica del conteo normal en placa para realizar el análisis microbiológico
de muestras de agua cruda
● Cuantificar la presencia de hongos en la muestra de agua a través del conteo de mohos
y levaduras.
● En base a los resultados interpretar la calidad sanitaria de la muestra del agua

3. Datos de la Muestra

Lugar de muestreo: Quitumbe

Tipo de fuente: Agua lluvia

Temperatura en el momento del muestreo: 13 grados

Fecha y hora del muestreo: 26 de enero del 2015 6:00 am

Condiciones de Transporte: Se transportó a 4 grados C la muestra

4. Equipo y Materiales.
EQUIPOS
● Horno: En el horno se esteriliza los materiales que se van a usar en la práctica
● Incubadora: Se utiliza para dar temperatura adecuada a los microorganismos y se
puedan reproducir más fácilmente.
● Baño Maria: Con este equipo se procede a derretir el agar colocado dentro de los
tubos de ensayo
 ● Contador de colonias: Es un aparato que mediante la iluminación de la placa y una
lupa, nos permite observar con mayor nitidez las colonias y por tanto facilita su
recuento.

MATERIALES
● Caja petri: Se utiliza para el cultivo de las muestras con el agar
● Tubo de ensayo: Se usa para derretir el agar y poder realizar el cultivo en la caja petri
● Pipetas graduadas: Sirven para poder tomar cantidades de la muestra a analizar
● Mechero: Se lo mantiene encendido durante toda la práctica y usamos para esterilizar
la punta de las pipetas.
● Guantes de manejo: Como se trabaja con ensayos microbiológicos se debe tener
cuidado al rato de manipular las muestras.
● Mascarilla: Se debe proteger de inhalar gases que puedan desprender la muestra.
● Alcohol industrial: Sirve de combustible para encender el mechero
● Alcohol antiséptico: Se usa para esterilizar la mesa de trabajo.

5. Reactivos.
No se usaron reactivos en esta práctica

6. Representación del procedimiento de la práctica.

1. Limpiamos el ambiente de trabajo y procedemos a ubicar las 3 cajas de Petri las cuales
van a estar nombradas para para el cultivo de muestras.
2. Procedemos a determinar el pH y la temperatura de la muestra.

3. A su vez alistamos el mechero que ha sido dispuesto con alcohol industrial para poder
esterilizar las pipetas graduadas.

4. Luego de esterelizar las pipetas tomamos una porción de la muestra de agua y la colocamos
refrente a la cantidad de muestra que esta nombrada en la caja de Petri haciéndolo para
(0.1;1 y 10)ml
5. Finalmente colocamos peptona para estimular el crecimiento microbiológico
esperamos que se enfrie el recipiente y procedemos con la observación a partir de las
24 horas.

7. Resultados.

Dia 1 Dia 2

Cantidad microbiológica en todas los muestra 0.1

volúmenes (0.1; 1;10) ninguno
muestra 1
no se encontraron levaduras, ni hongos ni ninguno
mohos. muestra 10

17 levaduras
3 hongos

8. Cálculos Tipo.

No se realizaron cálculos tipo.

9. Análisis de los resultados.

CAMPOVERDE ANGEL

Como resultado de la visualización y conteo de placas para el análisis microbiológico en la

muestra de agua lluvia estancada obtuvimos un incremento solo en la muestra 10 de hasta 17
levaduras de un tamaño estimado de 4mm. Esto demuestra la proporcionalidad entre colonias
y volumen de muestreo.

PULLES LEONARDO
Se logró determinar mediante el análisis visual que la la formación de colonias fue levemente
proporcional al paso de los días.

10. Medidas de Seguridad.

● Como se trabajó en cultivo de microorganismos, debemos tener cuidado al rato de su
manipulación usando siempre guantes de manejo y mascarilla para protegerse de
posibles contaminaciones.
● Luego de realizar la práctica se debe depositar en el basurero los guantes de manejo y
toallas de papel utilizadas y lavarse adecuadamente las manos, posteriormente usar gel
antiséptico para eliminar bacterias.
● El sobrante de las muestras se les debe echar por el desagüe con abundante agua para
asegurarnos de que no queden residuos en las paredes de las tuberías.

11. Conclusiones.
RAMONES KLEINER
● Como la muestra analizada se trata de una agua lluvia, no se encontraron gran cantidad
de microorganismos por lo que las lecturas a las 24 horas eran de cero, y apenas a las
72 horas en el cultivo de muestra de 10 ml se observan pequeñas levaduras.

CAMPOVERDE ANGEL

● La muestra tomada no estuvo tan contaminada de microorganismos microbiológicos

debido a que es una muestra de agua lluvia estancada.
● La peligrosidad de esta agua no es muy incidente como para producir enfermedades
de origen hídrico apenas presenta 17 levaduras en incubación a las 48h.

PULLES LEONARDO
 Mediante la observación de las colonias se determinó que la temperatura puede
aumentar o disminuir el contenido bacteriano, por lo que es necesario mantener una
temperatura constante en el lugar de observación para mejores resultados.
 Comparando los resultados obtenidos con los de la norma el agua de la muestra una
ligera contaminación bacteriana.

12. Recomendaciones.
 ● Al rato de manipular las pipetas se debe tener cuidado de no tocar la punta de las mismas
ya que se pueden contaminar y alterar la muestras a realizar el cultivo.
● Todo el procedimiento se debe realizar lo más rápido posible y es totalmente prohibido
la entrada o salida de personas al laboratorio porque se puede alterar la muestra.
13. Bibliografía.

● “Biología de los Microorganismos” Michael Madigan, John Martinko y Jack Parker. 8°

edición, Prentice Hall, pag. 786-789.

14. Material complementario.

(NTE INEN 1108)

Interpretación:
Esta tabla es una parte de la Norma de Agua potable lo que no compete con el análissi de agua
cruda q realizamos pero nos da una idea de a donde llegar para tener una agua considerada
como apta para consumo.

15. Anexos:

ANEXO A