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Equipo: 1
Integrantes del equipo: Cruz Camargo César Alonso
Freitez Diez Adriana
Sánchez Cid Mariana
Sinisterra Sierra María Camila
Los volúmenes captables por estos instrumentos varían según el modelo: los más habituales,
denominados p20, p200 y p1000, admiten un máximo de 20, 200 y 1000 μl, respectivamente.
Es de destacar que el uso de micropipetas permite emplear distintos líquidos sin tener que lavar el
aparato: para ello, se emplean puntas desechables, de plástico, que habitualmente son estériles.
Existen varios tipos de puntas: por ejemplo, las amarillas para pipetear volúmenes pequeños (por
ejemplo, 10 μl), y las azules para pipetear volúmenes grandes (por ejemplo, 800 μl).
El volumen a aspirar se fija girando un botón en su parte superior que está conectado a un sistema
analógico de confirmación de volumen, y automáticas, en las cuales dicho sistema es digital.
Debemos asegurarnos que estamos usando la micro pipeta correcta para el volumen que necesita.
También que la micro pipeta está realmente lista para el volumen que necesita revisando la
“ventana de volumen”, y, si es necesario, cambiando el volumen mediante el “dispositivo” del
control o mando del volumen hasta que la micro pipeta corrija el volumen
No se debe tratar de colocar la micro pipeta para volúmenes mayores que el máximo, o para
volúmenes menores del cero, esto descalibrará y dañará la micro pipeta. Toda micro pipeta utiliza
puntas desechables (no se debe utilizar la pipeta sin usar la punta apropiada, hacer esto
contaminará la micro pipeta y la puede dañar).
Al poner la punta, asegúrese que la punta sea del tipo correcto y que esta correctamente ajustada.
Generalmente para P1000 las puntas son azules, para P200 son amarillas y para P20 pueden ser
amarillas o blancas.
Oprimir el émbolo hasta el primer tope y colocar la punta dentro del líquido hasta una
profundidad de 2 a 3 mm. De una manera lenta y controlada, disminuya la presión del émbolo
para permitir que se desplace hacia arriba. No suelte el émbolo abruptamente, al permitirlo
causará que el líquido pueda salpicar dentro de la punta produciendo volúmenes inexactos y
generando contaminación de la pipeta. Una vez el émbolo se haya desplazado hasta arriba
mantenga la micro pipeta en el líquido durante un segundo, esto evita que se aspire aire en la
parte final.
Expulsión de la muestra
Llevar la micro pipeta al envase en el cuál quiere añadir el líquido. Se apoya la punta en la pared
del recipiente sin evitar la salida de la muestra. Oprima el émbolo hasta el primer tope y luego
hasta el segundo tope. Haga este procedimiento a una velocidad moderada, hacerlo muy rápido
hará que queden gotas de muestra en la punta. Si observa cuidadosamente, entonces notará que
al oprimir hasta el segundo alto se expele todo el líquido de la punta.
OBJETIVOS
Conocer las partes y el funcionamiento de las micro pipetas
Adquirir destreza en la utilización de pipetas para la medición de volúmenes entre 1 y
1000 µl.
Aprender a usar la micro pipeta de tamaños diversos medir su exactitud, precisión y
calibración.
MATERIALES
Juego de micro pipetas
Agua
Glicerina o glicerol
Etanol
Balanza Analítica
Puntas para las micro pipetas (amarillas y azules)
PROCEDIMIENTO
Para cada micro pipeta revisar el porcentaje de exactitud (E%) y la desviación estándar, para la
micro pipeta de (20-200) y (50-200) se medirá 65 micro litros y 700 micro litros para la pipeta de
(100-1000) , además se hará una medición de 325 micro litros con una pipeta de cualquier
volumen y se repetirá, para el etanol y el glicerol se tomara el volumen de 50 y 250 micro litros
para cada una y se medirá la masa con la fórmula de densidad
3. Tome el volumen de agua destilada con la micro pipeta y dispénselo en el vaso de precipitados.
Registre el peso del agua añadido.
Los valores de las pesadas del control gravimétrico son sólo la masa del volumen dosificado. Para
obtener el volumen real se debe efectuar un cálculo corrector. El cálculo corrector se realiza por
multiplicación del valor medio de los valores de las pesadas (x) con el factor Z (mL/g que es lo
mismo que µl/mg), que toma en consideración la densidad del agua, la temperatura de control y la
presión atmosférica. Z es igual a 1,0032 µl/mg, referido a 21,5 ° C, 1013 mbar (hPa) y a la
utilización de agua destilada o z es igual a 1,0029 µl/mg, referido a 20 5 ° C y 1013 mbar (hPa). El
factor Z es igual a 1/densidad.
RESULTADOS
Utilizando las pipetas proporcionadas se obtuvieron los siguientes resultados:
Tabla 1 " Mediciones con agua" Equipo 1
CONCLUSIONES
Las micropipetas son instrumentos de medición de volúmenes que son muy útiles para la
biotecnología molecular pero es necesario conocer su correcto uso y los cuidados necesarios para
que tengan una vida útil larga, nos puedan aportar resultados confiables y minimizar los errores en
el experimento debido al factor humano, el que puede producir el pipetear volúmenes pequeños y
de cualquier otro instrumento que podamos estar utilizando. También es importante conocer
cómo se utilizan con sustancias de distintas características como las de alta viscosidad que
requieren de un mayor tiempo de espera al ser pipeteadas o los líquidos volátiles para los cuales
es necesario saturar la cámara de la micropipeta antes de tomar el volumen del líquido.