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Celulosas, hemicelulosas
y pectinas
• Método cromatográficos
ANÁLISIS DE LOS • Polarimétricos
CARBOHIDRATOS • Refractométricos
REPRESENTATIVOS DE LOS • Enzimáticos
ALIMENTOS • Químicos de oxidación del grupo
aldehído/cetona (disolución alcalina)
MÉTODOS QUÍMICOS con agentes oxidantes como el Cu.
MÉTODO REDUCTOMÉTRICO • Espectrofotométricos
Se basan en la propiedad reductora de los azúcares sobre
disoluciones alcalinas de metales pesados, sobre todo cobre.
Los métodos reductométricos determinan la totalidad de azúcares
reductores presente en una muestra, para determinar los azúcares
no reductores, estos deben escindirse primero por hidrólisis ácida
a compuestos reductores (que en el caso de la sacarosa se conoce
como inversión).
La cantidad de azúcar no reductor se saca por diferencia entre la
cantidad de azúcar presente antes y después de la inversión. Antes
de la dosificación de azucares es esencial hacer una identificación
de los mismos mediante reacciones básicas como la de Molish,
Fheling, etc.
ANÁLISIS DE LA ACIDEZ
ES IMPORTANTE EN EL ANÁLISIS DE
ALIMENTOS
DETERMINACIÓN:
SU PRESENCIA EN AGUAS EMBOTELLADAS: • Titulación directa con
NIVELES QUE SUPERE CONTAMINACIÓN CON AgNO3 (Método de
LA NORMA EN LOS AGUAS RESIDUALES Mohr)
REQUISITOS FIJADOS • Valoración por retroceso
POR LA NTE INEN LECHE PROVENIENTE DE de los iones de plata con
VACAS CON MASTITIS: tiocianato de K (Método
LACTOSA Y LOS CLORUROS de Volhard)
PRÁCTICAS FRAUDULENTAS EN LA
ELABORACIÓN DE QUESOS Y MANTEQUILLAS:
NaCl (efectos conservadores)
ANÁLISIS DE LOS HIDRATOS DE CARBONO
POLISACÁRIDOS NO FIBRA DIETÉTICA
DIGERIBLES: TODOS
LOS POLISACÁRIDOS
• VOLUMEN
QUE NO SON
• CUERPO
ALMIDÓN • VISCOSIDAD
• ESTABILIDAD DE LAS EMULSIONES Y LAS ESPUMAS
• CAPACIDAD DE RETENCIÓN DE AGUA
HIDRATOS DE PROPORCIONAN
• ESTABILIDAD FRENTE A LA CONGELACIÓ-DESCONGELACION
CARBONO • PARDEAMIENTO
ALIMENTOS • SABORES
• AROMAS
• TEXTURAS (DESDE LA MÁS CRUJIENTE HASTA LA SUAVIDAD Y LA
BLANDURA DE LOS GELES
• SENSACIÓN DE SACIEDAD
PRODUCEN ENERGÍA
Al menos el 90% de los HC en la POLÍMEROS
naturaleza son polisacáridos DEL ALMIDÓN
EVITAR ADULTERACIONES
EVOLUCIÓN DE LOS MÉTODOS ANALÍTICOS PARA
LOS HIDRATOS DE CARBONO
El método 931.02C de la AOAC indica que para la purificación de los extractos de etanol
de debe seguir el siguiente procedimiento:
• Introducir 50 ml de extracto etanólico en un matraz erlenmeyer de 250 ml.
• Añadir 2 g de resina de intercambio catiónico (forma ácida) y 3 g de resina de
intercambio aniónico (forma hidróxido).
• Dejar reposar durante 2 horas
• Agitar de vez en cuando.
• El alcohol acuoso del extracto con alcohol se elimina bajo presión reducida en un rota
vapor a una temperatura de 45 a 50°C
• El residuo se disuelve en una cantidad conocida y medida de agua
• Se filtra si fuese necesario (algunos métodos indican pasar la muestra por un cartucho
StepPak C18, para eliminar todos los lípidos, proteínas, pigmentos residuales, o
combinación de los mismos, esto si los componentes mencionados no fueron
eliminados en las etapas anteriores)
CONTENIDO TOTAL DE HIDRATOS DE CARBONO: MÉTODO DEL FENOL-ÁCIDO SULFÚRICO
FUNDAMENTO
• Los HC son destruidos por ácidos fuertes, o a
temperaturas altas o por ambos.
• Se condensan consigo mismas o con otros
compuestos fenólicos (fenol, resorcinol,
orcinol, α-naftol, aminas aromáticas: anilina, p-
toluidina) formando compuestos coloreados
que se utilizan para cuantificar HC)
• Este método implica la condensación con
fenol, más barato, fácil de obtener y estable.
• El método es exacto hasta ±2%.
• Se debe realizar una curva de calibrado, con los
mismos azucares presentes en la muestra
problema (generalmente D-glucosa)
Bosquejo del método
FUNDAMENTO
SE BASA EN EL CARÁCTER REDUCTOR QUE
PRESENTAN LOS AZÚCARES.
EL MÉTODO MÁS USADO ES EL DE SOMOGYI-
NELSON.
• Se basa en la reducción de los iones Cu (II) a
iones Cu(I) por los azúcares reductores.
• Luego los iones Cu(I) reducen a un complejo
arsenomolibdato, preparado haciendo reaccionar
molibdato de amonio[(NH4)6Mo7O24 ] y
arseniato de sodio (Na2HAsO7) en H2SO4.
• La reducción da un complejo de arsenomolibdato
de color azul que se mide
espectrofotométricamente
• Se usa una curva de calibrado D-glucosa
ESBOZO DEL PROCEDIMIENTO
1. Se adiciona, por medio de pipeta, una
disolución de sulfato de cobre (II) y una
disolución amortiguadora alcalina a una
disolución de uno o más azúcares y a un
blanco del agua.
2. La disolución resultante se calienta en un
baño de agua hirviendo.
3. Se añade un reactivo preparado mediante la
mezcla de disoluciones de molibdeno de
amonio acidulada y de arseniato de sodio.
4. Después de mezclar, diluir y mezclar
nuevamente, se mide la absorbancia a
520nm.
5. Después de sustraer la absorbancia del
blanco del reactivo, la A250 se convierte a
los equivalentes de glucosa, utilizando una
gráfica de calibrado de los microgramos de
glucosa frente a la absorbancia.
OTROS MÉTODOS PARA LA DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE AZÚCARES REDUCTORES
CROMATOGRAFÍA DE GASES
O CROMATOGRAFÍA GAS-LÍQUIDO
OH-
H+
D-glucono-1,5-lactona
Peroxidasa
H2O2 + tinte incoloro Compuesto coloreado + 2H2O
El grado de gelatinización se
Con los almidones gelatinizados se desramifican a la amilopectina y determina mediante la medida de la
a cualquier molécula de amilosa ramificada. cantidad de azúcar reductor formado
DETERMINACIÓN DE GOMAS O HIDROCOLOIDES
LOS POLISACÁRIDOS AÑADIDOS Muestra
JUNTO CON LAS GELATINAS Liofilizada
PROTEÍNICAS COMPONEN EL Muestra seca
GRUPO DE GOMAS O Extraiga los lípidos
HIDROCOLOIDES ALIMENTARIOS Muestra exenta de grasas Extracto con etanol acuoso Azúcares solubles,
otros compuestos de bajo PM y cenizas
Digiera con una proteasa
Se usan para todo: desde productos Muestra exenta de proteínas
cárnicos hasta chocolates, desde los añada etanol
helados hasta los aliños para las Precipitado de polisacáridos
ensaladas elimine el almidón mediante digestión
Muestra exenta de almidón
Su determinación es importante: centrifugación
• Determinar la pureza del Residuo Solubles (fibra soluble + productos de la hidrólisis del almidón)
producto Fibra insoluble
• Declaraciones de la etiqueta añada etanol
• β-glucano en la harina de avena o precipitado de polisacáridos (someta a diálisis)
de cebada. Extracto de polisacáridos (liofilice)
• El contenido de arabinoxilano Extracto de polisacáridos secos (hidrolice)
• NO EXITE UN MÉTODO Derivatice
ÚNICO Análisis mediante HPLC Análisis mediante GC
PECTINA
No se han establecido métodos oficiales para su determinación. Los métodos más comunes suponen
la precipitación con alcoholes a partir de las mermeladas, las jaleas, etc., en las cuales éste es el
único polisacárido presente.
El método involucra un proceso de saponificación con hidróxido de sodio seguida por la acidulación
y la adición de Ca2+ para precipitar a la pectina. El pectato de Ca se recoge, se seca, y se mide
gravimétricamente.
Valorar una dispersión del ácido pectínico en agua, frente a una base diluida (tal
como una solución de NaOH). Para determinar el % de grupos ésteres carboxílicos
no esterificados.
Un método permitido para el etiquetado nutricional para la determinación de las Kcal de un producto
alimentario supone la sustracción de la cantidad de fibra dietética insoluble del valor obtenido para el
contenido total de hidratos de carbono, antes de calcular las Kcal basadas en el contenido de
proteínas, grasas e HC. Este método ignora el hecho de que los 2 tipos de fibra son calóricas (en el
colon una pequeña cantidad de calorías puede ser absorbida a través de los procesos de fermentación
de AGLc)
DETERMINACIÓN DE FIBRA DIETÉTICA
FIBRA DIETÉTICA
ES LA PARTE COMESTIBLE DE LAS PLANTAS O HC ANÁLOGOS QUE SON RESISTENTES A LA
DIGESTIÓN Y A LA ABSORCIÓN EN EL INTESTINO DELGADO HUMANO
HC ANÁLOGO
SON AQUELLOS INGREDIENTES ALIMENTARIOS BASADOS EN LOS HIDRATOS DE CARBONO
QUE NO SON DIGESTIBLES NI ABSORBIBLES, PERO QUE NO SON COMPONENTES
NATURALES DE LAS PLANTAS (LAS CERAS (LA SUBERINA Y LA CUTINA))
MÉTODOS DE DETERMINACIÓN DE FIBRA
MÉTODO DETERGENTE
Métodos de la fibra del detergente ácido y de la fibra del detergente neutro se desarrollaron para
medir exactamente la cantidad de lignina, celulosa y hemicelulosa en los piensos de animales.
La fibra del detergente ácido mide la lignina y la celulosa en la muestra. La fibra del detergente
neutro contiene la fibra del detergente ácido más las hemicelulosas.
Pero no se incluye a las pectinas o gomas alimentarias.
DIAGRAMA DE FLUJO DEL MÉTODO 991.43 DE LA AOAC PARA DETERMINAR LA FIBRA DIETÉTICA
INSOLUBLE, LA SOLUBLE Y EL CONTENIDO TOTAL
MUESTRA
digerida con α-amilasa Contenido total de fibra= fibra soluble + insoluble
digerida con proteasas
digerida con glucoamilasa
Filtre y lave