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Microbiología industrial
I.- BIOREACTOR
•Recipiente en el que se lleva a cabo una transformación bioquímica. Es el
componente principal de un bioproceso.
•En estos recipientes se crean condiciones ambientales propicias (temperatura, pH,
aireación etc.) para que los agentes biológicos puedan desarrollarse, y producir las
máximas cantidades del producto deseado.
• Por lo general se busca conocer el tamaño y tipo de reactor, así como el método de
operación.
II.- FACTORES DE EFICIENCIA
•Pasos:
•1- Difusión del seno del gas a la interfase
gas-líquido.
•2- Movimiento a través de la interfase G-L
•3- Transporte convectivo en el seno del
líquido
•4- Difusión a través de la interfase L-Cel.
•5- Transporte a través de la membrana
•6- Difusión intracelular hacia el sitio de la
reacción química
•7- Transporte y reacción química
Transferencia G-L . Modelo de la película
Macroscópicamente, la transferencia de O2 puede explicarse por:
Transferencia de Oxigeno:
RO2 = dCL / dt = KLa (C* -CL)
RO2 o Na: es la velocidad de transferencia de O2, (Kmol/m2.s)
a, es el área superficial de las burbujas/unidad de volumen (m2/m3).
Kla, es el coeficiente volumétrico de transferencia de O2, que incorpora el valor
del área superficial de las burbujas [h-1]
C* es la concentración de O2 en la fase gaseosa (Kmol/m3)
CL, concentración de oxigeno en el liquido (Kmol/m3), que puede aumentar hasta
C*.
Factores que afectan la transferencia de o2
RO2=KLa (C*-CL)
KLa (C*-C)
KLa=D.a
L
•La transferencia de oxigeno depende de dos factores:
•- Kla (que a su vez depende de la agitación, temperatura, viscosidad,
tensioactivos).
-Diferencia de concentraciones de oxigeno C*-CL (depende de la demanda y la
alimentación de aire).
•La transferencia de O2 hacia el seno del líquido se anula cuando C*=CL.
•Cómo aumentar la transferencia de oxígeno?
•1- aumentando el KLa
condiciones de operación (caudal de aire, agitación, etc)
diseño del reactor (paletas, buffles)
reología del cultivo
•2- aumentando la fuerza impulsora. Aumentar C*
TRANSFERENCIA (RO2) - DEMANDA (rO2)
rx µ max. x
rO = =
2
Y x/o Yx/o
mayor transferencia
Si se limita
CL ~ 0
RO2=Kla.C*
Cómo seleccionar el KLa apropiado?
Valores de KLa.
La medida de transferencia de O2 es el KLa (coeficiente volumétrico de
transferencia de oxígeno)
- El tipo de célula: las bacterias, hongos, células animales crecen a distinta μ, por
lo tanto tendrán distintas qO2
•R: cte de los gases 8.314 J / mol ºK ó 0.08206 l atm / mol ºK, T (ºK),
•p0 es la presión parcial de oxígeno, y
•vg es la velocidad de flujo de gas.
•Si se usa aire, es suficiente analizar sólo la composición del gas a la salida.
Sin embargo para bioreactores grandes es importante tener en cuenta la diferencia
de presión a lo largo del reactor. Si se mide también la concentración de oxígeno
disuelto, c0 en el medio, se puede calcular kla de:
•La fuerza por unidad de área aplicada en forma paralela a la superficie de cada
célula (cizallamiento), provoca un esfuerzo de corte o “shear stress” (τ).
•Este τ es proporcional a la diferencia de las velocidades (dv) entre las líneas de
flujo superior e inferior, dividido por la pequeña distancia entre las líneas de flujo
(dv/dy).
•La constante de proporcionalidad es la viscosidad (μ).
•Esta ecuación se cumple siempre y cuando la viscosidad sea constante, sin
importar la velocidad de deformación a la que es sometido el fluido, y esto se
cumple en fluidos newtonianos (Trujillo y Valdez, 2006).
Daño celular y su cuantificación
•Un cultivo celular puede presentar dos tipos de daño:
•a) un daño letal que provoca la muerte por necrosis (lisis celular) o
apoptosis (proceso de muerte programada) en las células, o
•b) daños subletales que se manifiestan en alteraciones metabólicas en los
cultivos.
•Las células vegetales y animales son mas susceptibles al esfuerzo cortante.
•Cuando existen sólo efectos subletales, hay mecanismos de respuesta al
estrés hidrodinámico, o hacia el estrés oxidativo, que afectan las velocidades de
crecimiento, producción y de consumo de nutrientes y los rendimientos celulares
y de productos. (Trujillo y Valdez, 2006)
Determinación del shear stress
•Para cada tipo de cultivo debe determinarse del valor de τ.
•Hay algunos valores para células especificas.
•Así por ejemplo, en cultivos de Escherichia coli a altos valores de energía
de disipación (1.0 KW/kg, valor típico en un biorreactor industrial), E. coli no
refleja cambios morfológicos ni metabólicos.
•En cultivos con valores de energía de disipación de 30 KW/kg (que se
alcanza a aproximadamente 1,200 rpm en un fermentador de laboratorio,
usando turbinas tipo Rushton), los resultados son similares.
•Estos valores de energía de disipación corresponden a tamaños del Eddie
de micro-escala de 30 y 13.5 µm, respectivamente (suponiendo medios de
cultivo con viscosidades cinemáticas cercanas a la del agua).
2.3.- Generación de calor por crecimiento microbiano
•40–50% de la energía
suministrada por las fuentes de
C se convierten en ATP, el resto
se libera como calor.
•YH, es el coeficiente de
eficiencia energética.
•El calor liberado se puede
calcular a partir de las entalpías
de combustión del sustrato ΔHs
y de la biomasa formada ΔHc,
que se relacionan por:
Despejando se tiene:
•Algunos valores típicos:
•ΔHc ~ 20 – 25 kJ/g células
•YH ~0,42 g/kcal (glucosa); 0,30 g/kcal (malato); 0,18 g/kcal (etanol); 0,12 g/kcal
(metanol); 0,061 g/kcal (metano)
•El grado de oxidación del sustrato afecta fuertemente la cantidad de calor
liberado por el metabolismo de las células.
•Para células en crecimiento activo, el requerimiento para mantenimiento es
bajo.
•La velocidad total de generación de calor (Qgenerado) en una fermentación
batch se calcula considerando la velocidad de crecimiento.
•Instrumentación:
•Sensor de temperatura: sonda que mide la temperatura.
•Válvula solenoide: mecanismo que regula el flujo de
líquido por la tubería o línea de paso.
•Un sistema de control de Temperatura, que regula la
acción del motor de las válvulas que regulan el flujo de
líquido frío o caliente.
b.4.- Agitación
•Para lograr la agitación deseada se calcula la potencia del motor en Hp, con el
número de Reynolds (NRe), el número de potencia para los impulsores (Np).
•El número de Reynolds se calcula con la ecuación:
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Sistema de distribución del influente
Diseño mejorado
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Aplicación 2. Fermentador de cerveza
•En el fermentador en forma de
torre los flóculos de levadura se
mantienen en suspensión por el
movimiento ascendente del medio y
las partículas arrastradas son
devueltas por medio de un dispositivo
de sedimentación situado en la parte
superior de la torre.
La levadura es capaz de alcanzar
tamaños de flóculos relativamente
grandes, que no pueden ser
arrastrados por el flujo.
Fermentadores en Cervesur- Arequipa
b.- Biorreactores de membrana
•El Reactor Biológico de Membrana (MBR),
incluye dos procesos: uno de degradación
biológica aerobia o anaerobia y otro proceso de
separación de los sólidos suspendidos y mo,
mediante filtración por membrana (Corado,
2010)
•Un MBR es una modificación del proceso
convencional de lodos activos donde la
separación del lodo se realiza por una filtración
con membranas en vez de un decantador.
•Ventajas: poca área y calidad de efluente, es
posible eliminar el proceso de desinfección.
•La Membrana puede ser:
Microfiltración (MF): Con poros de 0.5 a 0.1 µm.
Ultrafiltración (UF): con poros de 0.1µm a 5 nm
Nanofiltración (NF): presenta poros de 0.01 µm
a 0.001 µm
Ósmosis Inversa (RO): remueve solutos
Tipos De Materiales De La Membrana
Los polímeros mas usados son:
• Polifluoruro de Vinilideno (PVDF)
• Polietilsulfonas (PES)
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• Polietileno (PE)
• Polipropileno (PP)
Configuración De La Membrana
• Placa Plana (1)
• Enrollada En Espiral (2)
• Tubular (3)
3
• Fibra Hueca (4)
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1
c.- Lecho con goteo
•En el reactor de lecho con goteo
(en inglés, trickle bed), el líquido
es rociado en forma de «spray»
sobre la parte superior del
empaquetamiento y las gotas
descienden a través del lecho en
forma de pequeñas corrientes.
•El aire puede introducirse por la
base, y puesto que la fase líquida
no es continua a través de la
columna, el aire se mueve con
relativa facilidad.
•Se utilizan en el tratamiento
aerobio de aguas residuales.
Biofiltros para aguas residuales
•El lecho empacado tiene un perfil de
organismos :
•- En superficie, micro y macro fauna
(macroinvertebrados)
•- En la zona intermedia, diversos tipos
de algas
•- En la zona profunda bacterias,
protozoos y otros organismos
adheridos.
Medios de soporte.
•El lecho puede ser:
De piedras: 25-100 mm (1-4pulg): Porosidad 40- 60%, Superficie especifica 40- 70
m2/m3 o m-1.
De plástico: Superficie especifica de 80 a 160 m2/m3.
•Porosidad 90-95%
•La película adherida aumenta hasta un límite al cual se desprende formando lodo
Torres percoladoras
Pueden tener hasta 12 m de altura.
El relleno suele ser de materiales plasticos
4.4.- Biorreactores de medio solido