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Curso: Microbiología
• Se trata de virus cuyo material genético está compuesto por ARN y que
poseen una enzima, la transcriptasa inversa (TI), que permite la síntesis
de ADN complementario a partir del genoma vírico tras la infección de la
célula huésped.
VIH-1, VIH-2
LENTIVIRUS SON VIRUS LENTOS
PRODUCEN TRASTORNOS NEUROLÓGICOS E INMUNODEPRESORAS.
NC Nucleocapside Proteina de la capside (gen gag); protege al genoma, forma parte del core.
RT Transcriptasa Reversa Retrotranscripción del RNA genómico, también tiene actividad RNAsaH
IN Integrasa Codificada por el gen pol, es necesaria para la integración del provirus
Glicoproteínas de Proteínas externas de la envoltura; Antigeno viral muy importante. Interviene en la
SU
superficie union al receptor.
Proteina
TM Glicoproteinas internas de la envoltura madura
transmembrana
RETROVIRUS
p7 (NC)
p66,p51
(RT)
p32 envolt
(IN) ura
gp120
gp 41 (SU)
(TM)
VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA
(VIH)
VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA
(VIH)
Subfamilia Orthoretrovirinae
Género Lentivirus
Proteínas de Superficie
gp120-gp41 // gp105-gp36
R U5 U3 R
5’ Poly A 3’
gag pol env
Células blanco:
Linfocitos T CD4, Monocitos, Macrófagos, Cél de Langerhans, Cél dendríticas
CICLO DE VIDA DEL VIH
Usando una enzima en su
núcleo, la célula CD4 produce
Usando la integrasa el VIH ARN viral y mARN
inserta su ADN-VIH en el ADN
celular
Células blanco:
Linfocitos T CD4, Monocitos, Macrófagos, Cél de Langerhans, Cél dendríticas
CICLO DE VIDA DEL VIH
Las largas cadenas
de proteínas
Las enzimas del la célula
emigran hacia las
producen largas cadenas de
membranas de la
proteínas que contienen las
célula CD4
piezas del vih
Células blanco:
Linfocitos T CD4, Monocitos, Macrófagos, Cél de Langerhans, Cél dendríticas
CICLO DE VIDA DEL VIH
Células blanco:
Linfocitos T CD4, Monocitos, Macrófagos, Cél de Langerhans, Cél dendríticas
CICLO
REPLICATIVO
VIAS DE TRANSMISIÓN DEL VIH
HISTORIA NATURAL DE LA
INFECCIÓN POR EL VIH
HISTORIA NATURAL DE LA INFECCIÓN POR EL VIH
Síntomas de la retroviremia
aguda en VIH
Test de Tamizaje
- ALTAMENTE SENSIBLES para poder detectar los Ac. De la muestra.
- Detectan anticuerpos para VIH-1 y VIH2 (sin lograr discriminar)
- Antígenos: Lisado total del virus, proteinas recombinantes, péptidos
sintéticos.
Test Confirmatorios
- ALTAMENTE ESPECIFICOS para confrmar con certeza la presencia de Ac.
Específicos contra VIH.
- Pueden discriminar infección por VIH-1 y VIH-2.
PRUEBAS DE TAMIZAJE
ELISA
• Las técnicas inmunoenzimáticas metodología relativamente simple.
• Alta sensibilidad
• Nivel de automatización y diseño para realizar un gran número de tests de
forma simultánea.
PRUEBAS DE TAMIZAJE
ELISA
PRUEBAS DE TAMIZAJE
ELISA
PRUEBA RÁPIDA
• Principio: inmunocromatografía.
• Sensibilidad y especificidad: 97-100%.
• Cuando? Embarazada con trabajo de parto sin control previo para VIH, en
lugares que no cuentan con otra metodología.
• Por qué? Evaluar y decidir rápidamente la utilización de profilaxis
medicamentosa.
PRUEBA CONFIRMATORIA
WESTERN BLOT
PRUEBA CONFIRMATORIA
WESTERN BLOT
PRUEBA CONFIRMATORIA
WESTERN BLOT
PRUEBA CONFIRMATORIA
WESTERN BLOT
INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA
DETECCIÓN DE ACIDOS
NUCLEICOS
• Se realiza mediante la reacción de PCR.
• Altamente sensible y específico
• Dirigido específicamente a las secuencias nucleicas virales.
• Los análisis basados en ácidos nucleicos capturan porciones del ARN del
VIH o ADN pro viral y las amplifican para facilitar la detección del virus.
• Involucra tres etapas:
1.Extracción o captura del genoma viral
2.Amplificación
3.Detección
Inhibidores de la
retrotranscripción
Inhibidores
de la Fusión
Inhibidores de
la Proteasa
Inhibidores de
la Integrasa
FARMACOS ANTIRETRIVIRALES
ALGORITMO PARA EL DIAGNOSTICO DE
INFECCION POR VIH
HTLV
TAXONOMIA
• Família Retroviridae
• Sub-família Oncovirinae
• 1980 – HTLV-1
• 1982 – HTLV-2
• 2005 – HTLV-3
• 2005 – HTLV-4
EPIDEMIOLOGÍA
•HTLV:Primer retrovirus descrito en humanos
Esta distribuido en varias partes del mundo, las zonas con mas alta
prevalencia de HTLV-1 son el sur este de Japón, África, y las islas
del caribe. También es endémico en el sur de América.
HTLV-2
HTLV-1
SEROPREVALENCIA:
- Región geográfica.
- Características Sociodemográficas.
- Composición de la población
- Comportamiento de riesgo de individuos.
VIAS DE TRANSMISIÓN
PERIODO DE
INCUBACIÓN 20-30 AÑOS
PATOGENICIDAD E INMUNIDAD
• Una vez dentro de la célula, la enzima Transcriptasa reversa a partir del ARN viral
sintetiza el ADN viral.
2
TEMA: PRIONES
DOCENTE:
Dra. Janet M. Quispe Quispe
TEMA: PCR
DOCENTE:
Dra. Janet M. Quispe Quispe
SANGRE BACTERIAS
MUCOSA HONGOS
TEJIDO PARÁSITOS
ORINA VIRUS
HECES MUTACIONES EN GENES
LCR AUSENCIA/DELECCIÓN DE
GENES
FUNDAMENTO DE LA PCR
Es la amplificacion. enzimática de un fragmento de ADN flanqueado por
dos secuencias de oligonucleótidos que hibridan en la cadena
complementaria de la molécula molde que se va a amplificar
(cebadores o “primer”) y que son utilizados por una DNA polimerasa
termoresistentepara copiar la secuencia de la misma.
ASPECTOS GENERALES
Ampliamente sensible, detecta mínimas cantidades de un gen o
secuencia.
Rápida. En pocas horas permite obtener resultados
Múltiples aplicaciones
FUNDAMENTO DE LA PCR
PASOS DE LA PCR
REACCIÓN EN CADENA DE
POLIMERASA
CARGA VIRAL - VIH
PRE ANALITICO
• NO MAS DE 48 HORAS PARA SU PROCESO.
• SE REQUIERE PLASMA.
• VOLUMEN DE 1ml DEPENDIENDO DEL
EQUIPO.
CARGA VIRAL
- Es la cuantificación de VIH-1 que se
encuentra en el plasma o cuantificación del
RNA vírico que existe en una muestra.
- El método empleado consiste en técnicas de
biología molecular o de diagnóstico genético,
usando la reacción en cadena de la
polimerasa.
- La carga viral resulta un marcador de la
actividad del VIH-1 y junto con la
determinación de CD4 miden la competencia
del sistema inmune
ANALISIS DE CARGA VIRAL
Determinan el numero de partículas de VIH en
una muestra de sangre. Esto se lleva a cabo
comprobando los genes del VIH, llamado ARN por
mililitro