UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE GROHMANN 2015

Práctica Nº6:

IDENTIFICACION DE HONGOS

1.- OBJETIVOS:

 Realizar adecuadamente la identificación de los hongos

 Saber cómo realizar y/o preparar una muestra para poder identificar hongos.

2.- MARCO TEORICO:

Los hongos suelen definirse como organismos eucariontes sin clorofila y por
lo tanto heterótrofos, uni o multicelulares, de nutrición absortiva, con paredes
celulares que está compuesta fundamentalmente por polisacáridos y por diversas
proteínas. Los polisacáridos más importantes son la quitina (polímero de n-acetil
glucosamina), el manano (polímero de manosa) y
el glucano (polímero de glucosa). La mayoría de los hongos conocidos vive sobre
materia orgánica muerta y por ende su principal rol ecológico es la
degradación o descomposición de estos sustratos. Los hongos se aprovechan
directamente como alimento (por ejemplo los champiñones) e indirectamente en la
elaboración de cerveza, vino y pan (Saccharomyces cerevisiae o especies
relacionadas con ésta). Además de la producción de alimentos, los mohos
producen ácido cítrico (Aspergillus niger), la penicilina (Penicillium notatu y
Penicillium chrysogenum). Existen otros
antibióticos producidos por mohos estos son
las cefalosporinas, griseofulvina, ácido
fusídico.

Los hongos presentan básicamente dos

tipos de morfologías: una multicelular
denominada filamentosa y otra unicelular
denominada levaduriforme. Los hongos filamentosos (miceliares o mohos),
representan el crecimiento más típico de los hongos microscópicos. En medios de
cultivo sólidos y también sobre cualquier superficie
en la que se desarrollen, por ejemplo frutas u otros alimentos, producen
colonias algodonosas o pulverulentas que son muy características.

Fisiológicamente los hongos se adaptan a condiciones más severas que las

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bacterias. Por ejemplo, los mohos se desarrollan en sustratos con concentraciones

de azúcar que las bacterias no pueden tolerar ya que, los hongos no son tan
sensibles a la presión osmótica elevada. Los hongos toleran y se desarrollan
en concentraciones de acidez elevadas, soportan escalas de pH entre 2 a 9
pero el pH óptimo es 5.6. Aunque necesitan humedad para su desarrollo y
pueden obtener agua de la atmósfera y del medio, los hongos pueden
vivir en ambientes deshidratados que serán inhibitorios para la mayor parte de
las bacterias.

Casi todos los hongos son estrictamente aerobios, pero su crecimiento se aumenta
por la presencia de oxígeno (las levaduras son facultativas y los mohos u
hongos filamentosos son estrictamente aerobios, con algunas excepciones); se
desarrollan en condiciones de temperatura muy variadas pero entre 22-30ºC es
la temperatura óptima. La glucosa es una fuente de carbono muy aprovechada
por muchos hongos; otros azúcares como, sacarosa y maltosa y muchos
carbohidratos más complejos como almidón y celulosa son utilizados por muchas
especies.

El nitrógeno inorgánico es aprovechado por algunas especies en forma de

amonio o nitratos; otras especies necesitan sustratos con Nitrógeno orgánico que,
frecuentemente se proporciona a los medios artificiales en forma de peptona.

La mayoría de los hongos presentan reproducción sexual y asexual. En algunas

especies coexisten las dos formas de reproducción, denominándose holomorfo. El
holomorfo, tiene a la vez una forma de multiplicación asexuada, conocida como
anamorfo o mitospórico (o estado imperfecto), y una sexuada, conocida como
teleomorfo o meospórico (o estado perfecto). Es relativamente común que un
mismo hongo tenga dos nombres, el del estado anamorfo y el del estado
teleomorfo, ya que suelen haberse descubierto y nombrado de forma
independiente.

En un grupo importante de hongos solamente se conoce la reproducción

asexual, bien porque no se conocen las condiciones adecuadas para que se
desarrolle la forma sexual o porque ésta se ha perdido a lo largo de la
evolución. La reproducción asexuada, puede ocurrir por propagación
vegetativa a partir de fragmentación de las hifas, ya que cada fragmento
puede producir una nueva colonia, o por l a formación de esporas. Las esporas
asexuales generalmente se producen en hifas especializadas y se denominan de
diferente forma según su morfología. Los Zygomycota producen
esporangiosporas en el interior de una estructura en forma de saco
denominada esporangio. Los Ascomycota y, en menor grado, los Basidiomycota,
producen esporas asexuales denominadas conidios que se desarrollan a partir de
una estructura denominada conidióforo. Según su tamaño se diferencian en
macroconidios y microconidios. Existen distintos tipos de esporas
asexuales:

Clamidosporas: esporas esféricas u

ovoides de pared gruesa que se
forman dentro de las hifas somáticas.
Son más resistentes al calor y a la
desecación que las otras
esporas asexuales.

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Conidiosporas: Son esporas

delgadas que se encuentran en
grupos o solas sobre hifas
especializadas llamadas
conidióforos. Algunos autores
llaman conidiosporas a todas las
esporas asexuales.

Esporangiosporas:
Son esporas que se
forman dentro de una
estructura en forma
de saco denominada
esporangio. La
hifa que porta el
esporangio se
denomina
esporangióforo.

Astrosporas u Oidio: Son esporas de paredes delgadas que se

forman por fragmentación de las hifas.

Blastosporas: Son esporas que se forman por

gemación.

Las esporas sexuales se producen tras la fusión de los núcleos de dos hifas
sexualmente compatibles o de dos levaduras y posterior meiosis. De este proceso
de reproducción sexual resultan las esporas sexuales, las cuales son usualmente
más resistentes al calor que las esporas asexuales, pero sin llegar a tener la
extremada resistencia al calor que presentan las endosporas bacterianas y
presentan latencia, es decir ellas sólo germinan cuando son activadas ya
sea por un calentamiento suave o por ciertas sustancias químicas. La
morfología de las esporas sexuales es muy variada y tiene gran interés para la
identificación fúngica, ya que presentan diferencias características. Los
hongos del Phylum Basidiomycota producen basidiosporas

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en el exterior de una estructura

denominada basidio, los
Ascomycota producen
ascosporas en el interior de
una estructura en forma de saco
denominada asco y los
Zygomycota producen
zigosporas.

Existen varios tipos de

esporas sexuales:

Zygosporas: Son esporas

grandes de pared gruesa que
resultan de la fusión de 2
gametos similares

Ascosporas: Se producen en una estructura en forma de

saco, llamada asca, después de la unión de 2 núcleos.
Las ascosporas se forman frecuentemente por procesos
de cariogamia de dos núcleos distintos; generalmente se forman ocho
ascosporas, aunque pueden formarse de dos o cuatro. A su vez, las ascas pueden
estar incluidas o no dentro de un ascocarpo.

De acuerdo a la forma en la cual se desarrolla el ascocarpo y el cual es utilizado

como carácter taxonómico de identificación, se definen:

Los apotecios, son cuerpos fructíferos con forma de copa, normalmente de

colores marrones claros, se pueden producir a partir de la germinación de
esclerocios o del mismo material vegetal invadido por el hongo. Algunos
alcanzan más de un centímetro de diámetro y dentro de él, se encuentran las
ascas conteniendo ascosporas.

Los cleistotecios, son cuerpos fructíferos con forma esférica y que no poseen
abertura para la salida de las ascosporas, por lo tanto deben romperse para
que estas se liberen. Generalmente se producen sobre el tejido vegetal
colonizado por el hongo. A simple vista pueden observarse como puntos negros.
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Los peritecios, son cuerpos fructíferos con

forma de pera y con una abertura para
la salida de las ascosporas. Generalmente
se producen sobre el tejido vegetal colonizado
por el hongo y a simple vista pueden observarse
como puntos negros.

Basidiosporas: Resultan de la unión de 2

núcleos sobre una estructura especializada en
forma de maza conocida como basidio.
Generalmente hay 4 por basidio.
.
Si bien la estructura microscópica es decisiva para
la clasificación, para el micólogo experimentado
las características visibles son muy importantes
debido a que, a simple vista, el aspecto de las
colonias es a veces tan característico que le
permite identificar enseguida el tipo de hongo. Sin
embargo, es indispensable para la clasificación
final determinar las peculiaridades del hongo al
nivel microscópico que presentan estos
microorganismos.

3.- DESARROLLO:

A. EQUIPOS Y MATERIALES:
 TUBOS DE ENSAYO
 MUESTRA CON HONGO
 ASA DE KOLLE
 PLACAS PETRI
 MICROSCOPIO
 PORTAOBJETO
 CUBREOBJETO
 ALGODON

MEDIOS DE CULTIVO Y DILUYENTES

 AGUA DESTILADA
 AGAR

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B. PREPARACIÓN

Un dispositivo para cultivo en cámara húmeda es un sistema que

consta de una placa petri conteniendo un disco de papel filtro y una varilla
de vidrio de “U”que soporta dos laminas porta y cubre objetos.
Asépticamente se selecciona una pequeña porción de medio de cultivo
estéril (Agar Saboraud), y se coloca sobre la lámina porta objetos.
Realizada la siembra del hongo en estudio, la preparación se cubre
con la otra lamina y el papel filtro humedece conservándola asepsia. La
placa es incubada a temperatura ambiente (20 – 25º C) por 4 a 5días.

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MUCOR

HIFAS LARGAS

ESPORANGIOS

HIFAS NO SEPTADAS

ESPORANGIOS

ESTOLON NO SEPTADO

ALTERNARIAS

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HIFAS NO SEPTADAS

RYZOPUS

ALTERNARIA

MUCOR

CLADOSPORIUM

4.- CONCLUSIONES:
El estudio de los hongos, tiene una gran importancia; ya que desempeñan un
papel en la descomposición de materia vegetal de origen terrestre que cae al
agua, influyendo de manera decisiva en el transporte de materiales entre el
medio terrestre y el acuático.

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