LABORATORIO DE BIOLOGÍA CELULAR

INFORME No. 5

TEMA: Identificación de las fases de la mitosis en raíces de cebollas (hortaliza)

mediante observación microscópica.

INTEGRANTES:

 ESTEFANÍA ABARCA

 GISSELA TIBÁN

PROFESORA: ING. KARINA PONCE

FECHA: 2013-11-30
 1. INTRODUCCIÓN

El ciclo celular es un conjunto ordenado de eventos que culmina con el crecimiento de la

célula y la división en dos células hijas. Existen dos fases bien definidas del ciclo celular:
la interfase y la división celular. Las etapas de la interfase son G1, S y G2

En interfase la célula está ocupada en la actividad metabólica preparándose para la

mitosis. Los cromosomas no se disciernen claramente en el núcleo, aunque una mancha
oscura llamada nucléolo, puede ser visible. La célula puede contener un par de centriolos
los cuales son sitios de organización para los microtúbulos.

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Fases de la división celular:

Profase: comienza con la conversión de la cromatina en cromosomas por un proceso de

espiralización de las cadenas, se duplican los centriolos, la membrana nuclear
desaparece, Cuando ya ha desaparecido la membrana nuclear, los centriolos migran
hacia los polos de la célula. Los cromosomas ya formados se mueven y se unen a una
fibra del huso por su centrómero de manera que las cromátidas migran hacia los polos de
la célula. En la célula vegetal no existen centriolos y a veces no se ve el huso acromático.

Metafase: Es una fase breve en la que todos los cromosomas dobles se encuentran
situados en la zona ecuatorial de la célula, formando una figura muy característica
llamada placa ecuatorial. Los cromosomas son dirigidos por las fibras del huso.

Anafase: Las cromátidas se separan por el centrómero y se desplazan hacia los

extremos, mientras desaparecen las fibras del huso. En este momento ya se ha repartido
el material hereditario de forma idéntica en dos partes.

Telofase: es la última etapa de la mitosis, los cromosomas toman la forma de hilos, se

alargan y quedan como estaban al comienzo de la profase. El huso mitótico se rompe,
reaparece el nucléolo y se forma una membrana nuclear alrededor de los cromosomas,
los cuales pasan a un estado no condensado o cromatina.

En la telofase se forman dos núcleos hijos (cariocinesis) y el citoplasma también completa

su división (citocinesis) mediante un plegamiento de la membrana que comienza desde la
periferia en la parte media y progresa hacia el centro de la célula, de tal manera que
finalmente se obtienen dos células hijas con igual dotación de cromosomas y citoplasma
(división ecuatorial).

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2. OBJETIVOS:

 Evaluar con criterio y en forma grupal, la información investigada acerca de mitosis.

 Seleccionar y definir los pasos necesarios, para realizar la técnica de laboratorio
adecuadamente en forma individual y grupal.
 Realizar correctamente el montaje de la muestra seleccionada.
 Emplear reactivos y materiales de laboratorio para el montaje y observación de las
muestras,
 respetando normas de bioseguridad y el medio ambiente.
 Identificar y diferenciar mediante observación microscópica las fases de la mitosis
comparándolas con una galería de imágenes desde bibliografía confiable.
 Identificar los cambios morfológicos en cada una de las fases de la mitosis en base a
bibliografía confiable.
 Distinguir correctamente los cromosomas y su disposición dentro de cada fase de la
mitosis.
 Discutir sobre la función de cada uno de los reactivos utilizados en la preparación de
muestras con fundamento científico.
 Manipular correctamente el microscopio óptico de campo claro, respetando normas
universales.
 Mantener apropiadamente el cuaderno de laboratorio con información científica
actualizada de la práctica y sus resultados.
 Redactar correctamente un informe con uso de método científico en base a la práctica
de laboratorio.

3. MATERIALES Y REACTIVOS

MATERIALES

 Placas portaobjetos
 Cubre objetos
 Bisturís o tijeras
 Pinzas de metal
 Pinzas de madera
 Picetas
 Erlenmeyers 200ml
 Vidrios reloj
 Mecheros de alcohol
 Pipetas desechables o goteros
 Pinzas de madera
 Papel especial para limpieza de microscopios
 Torundas de algodón
 Papel toalla.
REACTIVOS

 Ácido clorhídrico al 10%

 Ácido acético al 45%
 Orceína acética clorhídrica (A)
 Orceína acética B
 Solución fijadora de Carnoy
 Acetocarmín
 Aceite de inmersión
 Alcohol potable para mecheros de alcohol
 Agua destilada.

4. PROCEDIMIENTO:

Preparación de cebolla, una o dos semanas antes

1. Colocar una cebolla roja (paiteña) o perla en un recipiente con agua de tal forma que
solo las raíces tengan contacto con el agua.

2. Mantener la cebolla en el recipiente aproximadamente una semana, hasta el día de la

práctica de laboratorio.

Preparación de muestras de raíces

1.-Cortar con bisturí o tijera, aproximadamente 0.5 a 1 cm de los ápices de las raíces de la
cebolla.

Tinción de muestras

Procedimiento 1 (Ácido clorhídrico, Orceína B):

1. Colocar 2 gotas de una solución de ácido clorhídrico al 10% en un vidrio reloj y calentar
a la llama del mechero hasta 40ºC aproximadamente, tomando el vidrio reloj con una
pinza de madera.

2. Depositar los ápices de raíces en el vidrio reloj conteniendo las dos gotas de ácido
clorhídrico al 10% (caliente), durante 7 minutos.

3. Con una pinza retirar los ápices del vidrio reloj que los contiene y trasladarlos a otro
vidrio reloj conteniendo una gota del colorante aceto-orceína (Orceína B), durante 3
minutos.

4. Depositar los ápices en una placa portaobjetos, agregar 1 gota de ácido acético al 45%
y cubrir con una placa cubreobjetos.
5. Hacer una ligera pero firme presión sobre la placa cubre objetos, para obtener una
extensión de la muestra, quedando prácticamente transparente.

6. Observar en el microscopio a 4, 10, 40 y 100x e identificar las fases de la mitosis.

Procedimiento 2 (Orceína A y B):

1. Depositar los ápices de las raíces en un vidrio reloj conteniendo 2 a 3 gotas de Orceína
acética clorhídrica (Orceína A), durante 7 minutos.

2. Calentar suavemente el vidrio reloj a la llama del mechero de alcohol, con la ayuda de
una pinza de madera, evitando la ebullición, hasta que emita vapores tenues. Dejar enfriar
y repetir el proceso.

3. Depositar con la ayuda de una pinza los ápices en una placa portaobjetos, verter 1 gota
de Orceína acética (Orceína B) y cubrir con cubreobjetos.

4. Proceder de la misma forma que en los pasos 5 y 6 del procedimiento 1.

Procedimiento 3 (Carnoy y Acetocarmín):

3. Depositar los ápices de raíces en un vidrio reloj conteniendo dos gotas de solución
fijadora de Carnoy (3 metanol: 1 ácido acético), durante 10 minutos.

4. Trasladar con la ayuda de una pinza, los ápices a otro vidrio reloj que contenga ácido
clorhídrico al 10%, durante 7 minutos.

5. Colocar los ápices en un vidrio reloj que contenga agua para lavar, por 3 minutos.

6. Depositar los ápices en un vidrio reloj conteniendo Acetocarmín, durante 15 minutos.

7. Con la ayuda de una pinza, depositar los ápices en una placa portaobjetos y cubrir con
una placa cubreobjetos.

8. Proceder de la misma forma que en los pasos 5 y 6 del procedimiento 1.

5. RESUlTADOS
 Metafase y Profase
40x

Anafase
40x

Metafase Telofase y Profase

40
6. DISCUSIÓN

Al realizar la práctica pudimos observar en las raicillas de la cebolla una de las fases de la
mitosis; esta era la anafase. En las tres muestras que preparamos observamos la misma
fase: la anafase, los cromosomas se dividían y se iban a los polos. En la anafase los
microtúbulos no asociados a cinetocoros se alargan, empujando a los centrosomas (y al
conjunto de cromosomas que tienen asociados) hacia los extremos opuestos de la
célula.Estos dos estadios se denominan a veces anafase temprana (A) y anafase tardía
(B). La anafase temprana viene definida por la separación de cromátidas hermanas,
mientras que la tardía por la elongación de los microtúbulos que produce la separación de
los centrosomas. Al final de la anafase, la célula ha conseguido separar dos juegos
idénticos de material genético en dos grupos definidos, cada uno alrededor de un
centrosoma.

7. CONCLUSIONES

La mitosis es un proceso por el cual a partir de una célula se obtiene dos idénticas con la
misma cantidad de cromosomas que la célula de origen, ocurre en todas las células que
tienen núcleo y su función es: en organismos pluricelulares permite el crecimiento y la
reparación de tejidos, mientras que en los organismos unicelulares permite su
reproducción.

8. BIBLIOGRAFÍA

http://informesdequimica.wikispaces.com/%E2%80%9COBSERVACI%C3%93N+DE+LA+MITOSIS+E
N+EL+%C3%81PICE+DE+RAICES+DE+CEBOLLA%E2%80%9D

http://pattybiologia303.blogspot.com/2012/02/mitosis-practica-1.html

http://es.wikipedia.org/wiki/Mitosis

http://benitobios.blogspot.com/2009/05/fases-de-la-mitosis.html