Siguiendo las instrucciones de la
etiqueta del medio de cultivo agar y
PREPARACIÓN DE
MEDIOS DE CULTIVO
Cuidadosamente, lleve a ebullición
el agar agitando continuamente
para evitar el sobrecalentamiento
del medio o que se queme. Use
una franela para proteger la mano
del calor.
PRECAUCIÓN: Los medios de cultivo
deshidratados que contienen agar,
especialmente los que contienen poco
agar, pueden hervir súbitamente y
derramarse del recipiente (como al
hervir leche). Agite suave y
frecuentemente a medida que el
medio se acerca a su punto de
ebullición y el agar empieza a
disolverse
caldo, calcule la cantidad de medio de
cultivo deshidratado suficiente para
plaqueo en cajas Petri de 9 cm de
diámetro y tubos en agar inclinado
(slant, pico de flauta). Una caja
requiere 15-18mL de medio. Un tubo
5mL.
Agite el recipiente para
homogenizar la mezcla. El caldo no
requieren ser hervidos pues se
disuelven fácilmente mediante la
agitación
Distribuir 3 mL de caldo en
tubos de ensayo limpios
Pese la cantidad calculada, y
colóquelo en un recipiente
limpio 2 o 3 veces más
grande que el volumen final
del medio
Añada la cantidad de agua
requerida
Colocar el tapón flojamente de manera que
permita la entrada y salida del vapor. EN CASO
DE QUE EL TAPÓN QUEDE CERRADO
HERMETICAMENTE, ESTE PUEDE SER
EXPULSADO DE MANERA VIOLENTA AL
MOMENTO DE SALIR DEL AUTOCLAVE O AL
MOMENTO DE DESTAPARSE CON PELIGRO DE
SER ALCANZADO POR EL LIQUIDO HIRVIENTE
 PLAQUEO DEL MEDIO EN CAJAS Enfriar el medio de cultivo a 45-50 En condiciones asépticas, plaquear
PETRI grados Celsius antes de plaquear en cajas Petri, añadiendo el medio
para evitar la acumulación de vapor cuidadosamente hasta cubrir el
Para el agar en las cajas Petri fondo de la caja Petri

En los tubos colocar

aproximadamente 5 mL. Dado que
el medio esta estéril, medir 5 mL
Dispensar aproximadamente 5 mL de agua y colocar en un tubo no
de medio de cultivo en los tubos de estéril. Poner este tubo en una
Para el caldo
ensayo. Tapar los tubos con gradilla junto al tubo donde se va a
tapones estériles. colocar el medio de cultivo estéril.
Usar esto como medida /
referencia para medir por
comparación.

Tapar cuidadosamente los tubos, invertir las cajas

Petri y colocarlas en el empaque de papel o tela en la
ALMACENAMIENTO DE LOS MEDIOS cual se esterilizo, o en la bolsa de plástico en la que
PREPARADOS vino estéril. Colocar en el refrigerador debidamente
identificado: el medio usado, fecha de preparación,
semestre