GESTION PRODUCTIVA 1.

Integrantes: Lisseth Chuquimarca, Lorena Cárdenas, Arelis Jiménez, Paul Sánchez, Luis
Chamba

EXTRACCION DE ADN

INTRODUCCIÓN

El ADN está organizado en cromosomas. En las células eucariotas los cromosomas son
lineales, mientras que los organismos procariotas, como las bacterias, presentan cromosomas
circulares. Para cada especie, el número de cromosomas es fijo. Por ejemplo, los seres
humanos tienen 46 cromosomas en cada célula somática (no sexual), agrupados en 23 pares,
de los cuales 22 son autosomas y un par es sexual. Una mujer tendrá un par de cromosomas
sexuales XX y un varón tendrá un par XY.

El ADN se compone de dos cadenas, cada una formada por nucleótidos. Cada nucleótido, a
su vez, está compuesto por un azúcar (desoxirribosa), un grupo fosfato y una base
nitrogenada. Las bases nitrogenadas son cuatro: adenina (A), timina (T), citosina (C), y
guanina (G), y siempre una A se enfrenta a una T y una C se enfrenta a una G en la doble
cadena. (Bellet, 2012)

La aplicación de técnicas moleculares inicia con la extracción de ADN y la obtención exitosa

de datos confiables y reproducibles depende, en gran medida, de la extracción de ADN
íntegro y puro. La extracción consiste en el aislamiento y purificación de moléculas de ADN
y se basa en las características fisicoquímicas de la molécula.

Durante la extracción, el ADN cargado negativamente se adsorbe o une a la matriz selectiva

de manera reversible y se mantiene unido a ésta durante la remoción de lípidos, proteínas y
metabolitos secundarios, posteriormente la molécula se libera de la matriz. Los combos
también incluyen soluciones de lisis, unión y lavado que no contienen fenol ni cloroformo
para extraer proteínas, tampoco requieren etanol para precipitar al ADN. Los kits comerciales
disminuyen la extracción a unas cuantas horas porque reducen el número de pasos del
procedimiento y, utilizados bajo las recomendaciones de cada proveedor, garantizan una
extracción de alta pureza ya que tanto la recuperación del ADN como la eliminación de
contaminantes son muy eficientes. (Qiagen, 2005)

DESARROLLO

Procedimiento

Primeramente, se procedió a verificar que los materiales a utilizar estén debidamente

esterilizados y limpios para dar inicio al proceso de Extracción de ADN. Para poder extraer
la sangre de la persona se procede aplicar un torniquete en el brazo; luego con un algodón
con alcohol se desinfecta la zona a extraer. Colocamos la aguja en dirección paralela a la
vena e introducimos en la misma, una vez que esté dentro colocamos el tubo en la jeringuilla
para recoger la muestra. Cuando el tubo este lleno precedemos a retirar el torniquete.

Seguidamente agitamos el tubo y agregamos anticoagulante y con la ayuda de una

micropipeta se extrae 300ul de muestra y se ubica en 2 tubos eppendorf de 2ml +900ul
solución de lisis celular. Posteriormente mezclamos por 10 minutos y cada 2 minutos
agitamos el tubo. Después centrifugamos a 13000rpm por 30 segundos. Finalizado el tiempo
retiramos el sobrenadante con una micropipeta dejando una mínima cantidad de muestra.
Luego para suspender el pellet se añade 300ul SLN + 100ul SPP y otra se centrifuga por 3
min a 13000rpm. Transcurrido se retira de nuevo el sobrenadante a un nuevo tubo.

En este tubo se añade 300ul de etanol y se centrifuga a 13000rpm por 1 min. Luego se vuelve
agitar el sobrenadante y se adiciona 300ul de etanol al 70% para volver a centrifugar por 1
minuto más. Y finalmente se mueve el sobrenadante y se procede a secar bien el pellet hasta
conseguir una solución blanca.

CONCLUSIONES

 La extracción de ADN íntegro y sin contaminantes es esencial para tener éxito en la

obtención de datos genéticos, es el primer paso en la lista de técnicas moleculares que
nos llevarán a comprender mejor y conservar la diversidad biológica a partir del
conocimiento de genes y genomas.
 Los métodos tradicionales constituyen una ventaja por su bajo costo, así como un alto
rendimiento. Sin embargo, en ocasiones el material obtenido está fragmentado.
 También se debe tener en cuenta que estos métodos son susceptibles de
contaminación, variación y errores por los múltiples pasos de manipulación.

BIBLIOGRAFÍA
Bellet, A. (04 de Agosto de 2012). CHILEBIO. Obtenido de http://www.chilebio.cl/el-adn-
los-genes-y-el-codigo-genetico/
Husney, A. (9 de Octubre de 2017). North Shore. Obtenido de
https://www.northshore.org/healthresources/encyclopedia/encyclopedia.aspx?Docu
mentHwid=aa80714&Lang=es-us
Qiagen. (2005). DNA Plant Handbook. Bosnia: BioSprint.