UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE MEDICINA
GUÍA DE PRÁCTICA DE LABORATORIO

UNIDAD N°: 4

NOMBRE DE LA UNIDAD: LAS ENZIMAS

NÚMERO DE HORAS POR UNIDAD: 24 Horas

RESULTADOS DE APRENDIZAJE DE LA UNIDAD:
Relaciona la función específica de proteínas y su participación en los varios procesos metabólicos

PERIODO ACADÉMICO abril – agosto 2018

ASIGNATURA: BIOQUÍMICA I
CURSO Y PARALELOS PRIMERO A
GRUPOS DE
APELLIDOS Y NOMBRES COMPLETOS
PRÁCTICA
ADRIANO CUVI ANDERSON FERNANDO 1
AYNAGUANO AYNAGUANO SANTIAGO ALEXIS 6
BADILLO PAZMIÑO ANDRES SANTIAGO 5
ESTEVEZ RECALDE VIVIAN MARCELA 3
BONILLA MUÑOZ KATHERINE ALEJANDRA 4
CHICAIZA ALLAUCA KATHERINE MIREYA 6
CHIMBOLEMA POMAQUERO SANDY MARIBEL 6
CHINCHI CARVAJAL MISHEL ESTEFANY 6
DAMIAN LEMACHE SILVIA VANESSA 4
DAVALOS CASTELO JOSE DAVID 4
JINDE CHAMBA CARLOS MIGUEL 3
GOMEZ CAICEDO ESTEFANIA RAQUEL 4
PINEDA IBADANGO JHON MARLON 3
RAMON ARMIJOS DIEGO ANDRES 3
MARTINEZ PALACIOS MARCO ALEXANDER 5
MEDINA CARRILLO GISSELA MONSERRATH 6
VILLA ALARCON ALEX FABRICIO 3
OLEAS BERMEO JHOSELYN XIMENA 5
ORTIZ QUINTANA MARITZA MISHELL 5
PACA AUCANCELA JHON BRYAN 5
BALLADARES RODRIGUEZ JOHNNY ALEXANDER 2
PANCHI TACURI ODALIS CAROLINA 1
HUILCA MODUMBA JONATHAN ORACIO 2
MINGA JIMENEZ NADIA MELISSA 2
SILVA SAMANIEGO ANAHI MELANY 1
TORRES GARRIDO DIEGO ARATH 1
VELASTEGUI GUERRERO ANDREA MISHELL 4
PAGUAY DAQUILEMA ALEXIS NICOLAS 2

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VILLAVICENCIO AVILA LIZBETH DEL CARMEN 2

PRIMERO B
GRUPOS DE
APELLIDOS Y NOMBRES COMPLETOS
PRÁCTICA
ALCIVAR ALVAREZ BETZABETH AZUCENA 3
AMAGUA TUCTA NATALIA CAROLINA 1
ARGUELLO ARGUELLO JACQUELINE ELIZABETH 5
ASQUI QUEZADA TERESA ELIZABETH 6
CASTRO CAICEDO ALISSON GEOMARA 2
CEPEDA QUISHPI MARIA JOSE 6
CORONEL VALLEJO JENNY VICTORIA 2
CORREA CRUZ KAREN CECIBEL 5
GALEAS ARBOLEDA RASHELL SAMANTHA 6
GUEVARA JIMENEZ SARA BETZABETH 5
LEMA LEON JUAN DIEGO 4
LOPEZ ARIAS JAMMY SABRINA 2
MORALES PUMISACHO MARJURY GABRIELA 6
OLEAS BUENAÑO CARLOS PATRICIO 3
OVIEDO REINO ANDREA MONSERRATH 3
PILCO YANZA NELLY JESSICA 5
PORTILLA CARGUA ISAAC JARDIEL 2
REA MANOBANDA JOHANNA KAROLINA 4
ROJAS SANCHEZ ALEXANDRA STHEFANIA 6
ROSERO BERMEO RAMIRO SEBASTIAN 3
SAMANIEGO TOLEDO VANESSA MARISOL 4
SANCHEZ ARIAS RONNY ALEXANDRA 1
SAYAY TENESACA EDISON NESTOR 1
SIGCHA ARIAS ALISSON JORLENI 1
TIUQUINGA PEREZ CARLOS RODRIGO 4
TOAPANTA TOAPANTA JOHANA JAZMIN 4
VILLA MORENO SOFIA VANESSA 1
YAMAZCA MUÑOZ CINDY CAROLINA 5
PRIMERO C
GRUPOS DE
APELLIDOS Y NOMBRES COMPLETOS
PRÁCTICA
ALMACHE ALULEMA ERIKA STHEFANIA 3
AMBULUDI MEDINA TANIA MARITZA 2
ARELLANO ZABALA JORGE ALBERTO 4
CAGUANO CUDCO EDILVANNY MARISOL 3
CANDO TUTALCHA KEVIN ANDRES 3
CAZORLA VINUEZA JORMAN FERNANDO 5
CHALCO SUCUZHAÑAY JENERSA MICHELLE 5
CONDO ULLOA GABRIELA ALEXANDRA 6
CUENCA GUERRERO PAUL MARCELO 5
GREFA ALVARADO LUIS FERNANDO 4
GUERRERO MUÑOZ LESLIE CRISTINA 1
GUEVARA TOAPANTA JOSELYNE ESTHEFANNY 2
HEREDIA YASELGA MELANY BERENISSE 1
JAMA GUAÑUNA IVANA ANDREA 6

-2-
 LARA DUTAN ANGEL CRISTOBAL 2
LLAMUCA LLANGA ALEX GUALBERTO 4
MALDONADO MOLINA ANGIE STHEFANY 6
MANZANO MENDEZ LUIS MATEO 1
MOSCOSO GAIBOR OSCAR GONZALO 1
MUÑOZ SALINAS DOMENICA MERCEDES 1
PAGUAY ZULA INGRITH MABELL 5
PILAMUNGA CALUÑA MARIA MERCEDES 2
RIVADENEIRA PIRUCH DORIS ANDREA 6
RUMIPAMBA PULLUGANDO YESENIA LIZBETH 4
SOLIS BENAVIDES KERLY IVONNE 5
SUNTAXI PAUCAR KATHERINE SAMANTA 6
TIXI VILLACIS JOCELINE ADRIANA 4
VALDIVIEZO BARBA JORGE ANDRES 3
PRÁCTICA DE LABORATORIO 5
No:
TEMA: Identificación cualitativa y cuantitativa de Enzimas
HORARIO: PRIMERO A LUNES 07H00 a 10H00
PRIMERO B MARTES 07H00 a 10H00
PRIMERO C MARTES 10H00 a 13H00
FECHA REALIZACIÓN DE LA PRIMERO A
PRÁCTICA: 25 de junio del 2018: GRUPOS 1, 2, 3
02 de julio del 2018: GRUPOS 4, 5, 6
PRIMERO B
26 de junio del 2018: GRUPOS 1, 2, 3
03 de julio del 2018: GRUPOS 4, 5, 6
PRIMERO C
26 de junio del 2018: GRUPOS 1, 2, 3
03 de julio del 2018: GRUPOS 4, 5, 6
FECHA DE ENTREGA DEL PRIMERO A
INFORME DE LA PRÁCTICA: 02 de julio del 2018: GRUPOS 1, 2, 3
09 de julio del 2018: GRUPOS 4, 5, 6
PRIMERO B
03 de julio del 2018: GRUPOS 1, 2, 3
10 de julio del 2018: GRUPOS 4, 5, 6
PRIMERO C
03 de julio del 2018: GRUPOS 1, 2, 3
10 de julio del 2018: GRUPOS 4, 5, 6
DOCENTE: Dra. María Angélica Barba Maggi, Mgs
1. TEMA: Identificación cualitativa y cuantitativa de Enzimas
2. OBJETIVOS
2.1 OBJETIVO GENERAL:
Identificar cualitativa y cuantitativamente las enzimas e interpretar resultados
2.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
2.2.1 Describir y aplicar métodos cualitativos que permitan establecer las funciones y propiedades de las enzimas digestivas, amilasa
salival, catalasa y establecer su importancia en los procesos metabólicos.
2.2.2 Describir y aplicar métodos cuantitativos espectrofotométricos para determinar la concentración de enzimas para diagnóstico
clínico: GOT –AST (Transaminasa Glutámica Oxal Acética – Aspartato Alanino Transferasa), CK (Creatina quinasa), Amilasa
y Lipasa en muestra sanguínea y establecer su importancia en los procesos metabólicos.
3. MATERIALES / REACTIVOS /SOLUCIONES/ EQUIPO
A RETIRAR EN LABORATORIO
 4 gradillas
 20 tubos de ensayo grandes
 20 tubos de ensayo pequeños
 1 pipeta semiautomática de 100 -1000 ul
 1 pipeta semiautomática de 10 -100 ul
 4 pipetas de vidrio de 10 ó 5 ml
 1 pipeta Pasteur
 1 varilla de agitación

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  1 vaso de precipitación de 250 ml
 4 vasos de precipitación de 150 ml
 1 pera de succión
 1 embudo simple
 1 pizeta
 1 mortero con pistilo
 1 pinza metálica para tubo de ensayo
 1 espátula
 1 cronómetro
 1 termómetro
 1 mechero de bunsen con suministro de gas
 Parafilm para tapar 4 vasos de precipitación de 50 o 100 ml
 Papel filtro
 1 malla metálica
Kit de reactivos para cuantificar:
 GOT –ALT (TRANSAMINASA GLUTÁMICA OXAL ACÉTICA – ASPARTATO ALANINO TRANSFERASA)
 (TRANSAMINASA GLUTÁMICA PIRÚVICA- ASPARTATO AMINO TRANSFERASA)
 CK (CREATINA QUINASA)
 LIPASA
 AMILASA
 Reactivo de lugol
 Reactivo de Benedict (10 ml en un tubo de ensayo grande)
 Centrífuga
 Vórtex
 Espectrofotómetro
 Baño termostático
 Reverbero

MATERIAL A TRAER EN EL GRUPO QUE NO SE RETIRA EN LABORATORIO

GRUPALES:
 2 Franelas de 40 cm cada una
 1 frasco de cloro
 1 frasco de agua destilada de 500 ml
 1 frasco estéril (para torundas de algodón, pueden ser recipientes plásticos de boca ancha)
 Torundas de algodón
 1 frasco de alcohol
 10 gasas estériles
 1 frasco de jabón líquido
 1 dermográfico (o marcador de material de vidrio)
 2 cepillos para lavar tubos de ensayo (pequeños de 5 ml y grandes de 10 ml)
 1 par de guantes de uso doméstico
 1 frasco con detergente (para lavado de materiales)
 1 recipiente de plástico para cortopunzantes con etiqueta de desechos cortopunzantes y que indique el curso,
paralelo y grupo (recipiente vacío de los desinfectantes que utilice en casa con tapa, grande de plástico grueso).
Este recipiente lo entregan en el laboratorio si aún no lo hizo el grupo.
 4 recipientes de plástico de 100 ml de capacidad con tapas
 50 puntas azules
 50 puntas amarillas
 Tiras multipeg
 1 lavacara pequeña
 1 paquetes de toallas desechables
 Solución de almidón que se preparó en prácticas anteriores
 1 cápsula o comprimido de pancreatina (digenil o pankreoflat)
 2 inciensos
 1 porción pequeña de riñón de cerdo
 1 porción pequeña de hígado de res
 1 patata con cáscara
 20 tubos de ensayo pequeños de 5 ml de capacidad (no son para toma de muestra)
 1 frasco pequeño de agua oxigenada
 1 tubo de tapa roja para toma de muestra sanguínea
 1 aguja vacuntainer
 1 cápsula
 1 torniquete
 1 curita
 1 goma de mascar sin azúcar
 2 vasos desechables pequeños transparentes
 6 jeringuillas de 5 ml

INDIVIDUALES:

-4-
  1 mascarilla
 1 par de guantes de manejo de látex
 1 cobertor de cabello (gorra para laboratorio)
 1 mascarilla
 1 par de gafas para laboratorio
 1 Mandil con el nombre del estudiante y sello de la universidad - Carrera de Medicina
 1 toalla de mano para uso personal
Los materiales individuales y grupales no se quedan en el laboratorio, son de uso permanente en cada jornada de
práctica que los estudiantes deberán traer.
4. GRÁFICO
5. FUNDAMENTO TEÓRICO
Revisar la Bioquímica de Harper en el Capítulo correspondiente y el material del aula virtual.
5.1. FACILITAR LA ACCIÓN ENZIMÁTICA DE LA AMILASA SOBRE SUSTRATOS DE ALMIDÓN Y
RELACIONAR CON LA DIGESTIÓN DE LOS CARBOHIDRATOS (ALMIDÓN).
Las enzimas son biomoléculas de naturaleza proteica, participan en las reacciones, acelerando los procesos metabólicos
(catálisis), que ocurren en niveles intra ó extra celulares.
No sufren cambios en su estructura al actuar como catalizadoras.
En el proceso de digestión, los alimentos contienen biomoléculas, las cuales deben ser catabolizadas en compuestos y/ó
estructuras moleculares más sencillas, para que sean absorbidas a nivel del tubo digestivo y ser transportadas a los diferentes
espacios celulares, sitios en los que participarán en otros procesos metabólicos, lo que contribuyen al mantenimiento de la
homeostasis.
Los carbohidratos inician su proceso de digestión en la boca, lugar en el que gracias a la presencia de la enzima amilasa salival,
la cual cataboliza la degradación de enlaces glucosídicos del almidón, generando: maltosa, glucosa y dextrinas de almidón que
poseen todos los enlaces.

La actividad enzimática se afecta por las siguientes condiciones:

1. Temperatura:
Las enzimas son termolábiles, al incrementar la temperatura en ciertos límites se acelera la velocidad de la reacción, sin
embargo, esta condición tiende a desnaturalizar la enzima pro ser de naturaleza proteica, perdiendo así su actividad
biológica.
La temperatura, a la cual se observa la máxima actividad enzimática se denomina Temperatura óptima.
2. pH:
Las enzimas de un estado ionizado (con carga) pueden cambiar a un estado neutro (sin carga), lo cual influyen en la
pérdida de su actividad biológica.
El pH al cual se observa, la máxima actividad enzimática se denomina pH óptimo.
3. Inductores e inhibidores:
Se produce una interacción del sustrato con la enzima. Los inhibidores tienen gran utilidad en bioquímica, ya que ayudan
a determinar la especificidad de la enzima por el sustrato y el mantenimiento de la estructura activa de la enzima.
Estos compuestos no son alterados químicamente por la enzima.
De acuerdo al tipo de inhibición que ejerzan éstas sustancias, son: reversibles e irreversibles
5.2. LA ENZIMA CATALASA

La catalasa es una enzima que se la obtiene a partir de microorganismos. La función principal es facilitar la reacción del
peróxido de hidrógeno.
H2O2 → 2 H2O + O2

En la industria alimenticia su importancia radica en utilizarla para alargar la vida útil de los zumos de cítricos, cerveza, vino,
inhibiendo las reacciones oxidativas.

5.3. ENZIMAS DE IMPORTANCIA CLÍNICA PARA DIAGNÓSTICO MÉDICO

Se emplean las enzimas en altas investigaciones de laboratorio y en análisis clínicos, actúan como reactivos biológicos y
permiten la cuantificación de analitos de interés en sangre o en cualquier muestra biológica, las cuales ayudan en el
diagnóstico, pronóstico y tratamiento.
NOMBRES DE ENZIMAS DE ACUERDO A LA COMISIÓN DE ENZIMOLOGÍA CLÍNICA, EJEMPLOS

 FOSFATASAS CLASE HIDROLASA SUBCLASE ESTERASAS

 FOSFATASA ALCALINA: EC 3.1.3.1
 FOSFATASA ACIDA: EC 3.1.3.2
 CREATINA QUINASA: EC 2.7.3.2
 AMINOTRANSFERASA O TRANSAMINASAS:
 ASPARTATO AMINOTRANSFERASA (AST ó GOT) EC 2.6.1.1
 ALANINA AMINO TRANSFERASA (ALT Ó GPT) EC 2.6.1.2
 GAMMA GLUTAMIL TRANSFERASA: EC 2.3.2.2
 LACTATO DESHIDROGENASA: EC 1.1.1.27
 AMILASA: EC 3.2.1.1

-5-
6. DISEÑO EXPERIMENTAL
Rotular 2 vasos desechables pequeños transparentes como A y B respectivamente
Rotular 10 tubos de ensayo grandes como: C, D, E, F, G, H, I, J, K y L respectivamente

6.1. PODER DE LAS ENZIMAS DIGESTIVAS

1. Los vasos desechables pequeños transparentes que ya fueron rotulados: A y B - Vaso A (será el vaso, para control) y el
Vaso B (será el vaso para la prueba desconocida)
2. En los vasos A y B pesar 1.0 g de avena respectivamente.
3. Triturar completamente una cápsula de pancreatina (digenil o pankreoflat) en el mortero.
4. Añadir 20 ml de agua destilada en los vasos rotulados como A y B, mezclar. Establecer características organolépticas:
color, olor, consistencia
5. Inmediatamente añadir solo al vaso B el contenido de la cápsula de pancreatina (digenil o pankreoflat), que fue
previamente triturada, mezclar con una varilla a de agitación.
6. Dejar en reposo 30 minutos
7. Trascurrido el tiempo de reposo, establecer características organolépticas: color, aspecto- consistencia y registrar datos,
observaciones y llegar a conclusiones.

6.2 PRUEBAS CUALITATIVAS DE LA COMPOSICIÓN Y PROPIEDADES DE LAS ENZIMAS

A. PREPARACIÓN DE LA ENZIMA AMILASA SALIVAL Y DETERMINACIÓN DE SUS PROPIEDADES

Tubos de ensayo: A, B, C, D, E, F, G, H, I

1. Seleccione un estudiante del grupo, el cual deberá enjuagar su boca con tres buchadas de agua destilada. Masticará
un trozo de papel filtro, o una goma de mascar sin azúcar estimulando la salivación.
2. En el TUBO A: Colocar un embudo simple con papel filtro y el estudiante irá depositando la saliva que se segrega,
hasta obtener 2 ml de saliva aproximadamente
3. Una vez obtenida la saliva adicionar 6 ml de agua destilada (Esta solución se denominará “solución de enzima
base”), que se conservará para las siguientes experiencias de esta práctica.
4. En el TUBO B: Adicionar 1 ml de agua destilada y 4 ml de solución de almidón al 5%, mezclar en vórtex 5 segundos
5. En el TUBO C: Colocar 1 ml de agua destilada, añadir 4 ml de solución de almidón al 5% y 4 ml de la “solución de
enzima base” que estaba contenida en el tubo A, mezclar en vórtex 5 segundos y someter a ebullición durante 5
minutos.
6. Retirar los tubos de ensayo del baño de agua y realizar las siguientes pruebas indicadas en la tabla:

PRUEBA DE LUGOL: El lugol es una solución de PRUEBA DE BENEDICT: permite identificar a los
Iodo – (Di Iodo disuelto en Ioduro de potasio), permite azucares reductores (contienen un OH libre del Carbono
identificar almidones dando un color azul violeta o anomérico, en medio alcalino reduce el Cobre (Cu 2+) a
púrpura profundo. Determina la presencia o alteración Cu+, produciendo un precipitado rojo ladrillo de óxido
del almidón u otros polisacáridos. cúprico (Cu2O). En este experimento se indica la
presencia de glucosa y maltosa, producto de la hidrólisis
del almidón. El reactivo de Benedict consta de: Sulfato
cúprico, Hidróxido de sodio, Sulfato de Sodio y
Carbonato anhidro de sodio.
TUBO D TUBO E TUBO F TUBO G
1. Medir 2 ml de la solución 1.Medir 2 ml de la 1. Medir 2 ml de la 1. Medir 2 ml de la
del tubo B solución del tubo C. solución del tubo B. solución del tubo C.
2. Añadir 5 gotas de lugol. 2.Añadir 5 gotas de 2. Añadir 1 ml de reactivo 2. Añadir 1 ml de reactivo
Registrar observaciones y lugol. Registrar de Benedict, mezclar en de Benedict, mezclar en
llegar a conclusiones observaciones y vórtex 5 segundos vórtex 5 segundos llevar
llegar a conclusiones llevar a ebullición en a ebullición en Baño
Baño María 5 minutos. María 5 minutos.
Registrar observaciones Registrar observaciones
y llegar a conclusiones y llegar a conclusiones.

B. ENZIMA CATALASA

Trocear una pequeña cantidad (10 g aproximados de hígado de res) en un mortero y proceder como sigue en la tabla:

A. DETERMINACIÓN DE LA PRESENCIA DE B. DESNATURALIZACIÓN DE LA ENZIMA

ENZIMA CATALASA EN TEJIDO ANIMAL
TUBO H
1. Colocar aproximadamente 1 g de hígado de res
troceado
2. Añadir 2 ml de agua oxigenada
3. Enseguida, encender un incienso y acercar a la boca
del tubo, mientras se produce el burbujeo. Registrar
datos, observaciones y llegar a conclusiones (evitar
que se humedezca el incienso)
CATALASA EN TEJIDO ANIMAL
TUBO I
1. Colocar aproximadamente 1 g de hígado de res
troceado.
2. Someter a cocción frente a la llama de un mechero,
durante este procedimiento cuidar que los valores que
se desprenden, se dirijan en posición contraria a los
estudiantes.
3. Una vez que el tubo se enfríe, añadir 3 ml de agua
oxigenada

-6-
 4. Enseguida, encender un incienso y acercar a la boca
del tubo, mientras se produce el burbujeo. Registrar
datos, observaciones y llegar a conclusiones (evitar
que se humedezca el incienso)

C. ESTUDIO DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE LA CATALASA

1. Rotular 3 vasos pequeños de precipitación A, B, C y D
2. Pesar en cada vaso indistintamente 5 g de los tejidos a utilizar: hígado de res, riñón de cerdo, patata (troceada)
3. Cubrir con parafilm y colocar 1 termómetro
4. Añadir a cada matraz 10 ml de agua oxigenada
5. Simultáneamente encender el cronómetro medir las variaciones de temperatura en intervalos de 0.5 minutos (durante
3 minutos), partiendo desde la lectura antes de colocar el agua oxigenada (tiempo 0 minutos)
6. Registrar datos, observaciones, realizar gráficas y llegar a conclusiones.

6.3 CUANTIFICACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE ENZIMAS DE INTERÉS CLÍNICO

Revisar y aplicar los métodos dispuestos en el Aula virtual. Se trabajará en suero de 1 estudiante (tubo de tapa roja)
1. ALANINA AMINO TRANSFERASA (ALT)
2. CK–MB (CREATINA QUINASA)
3. Amilasa
4. Lipasa
Registrar datos, observaciones, realizar los cálculos y llegar a conclusiones
7. DATOS OBTENIDOS EN LA PRÁCTICA/REPORTE (ANEXO):
8. OBSERVACIONES / CÁLCULOS E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:
8.1 PODER DE LAS ENZIMAS DIGESTIVAS

A B A B

0 minutos (inicio) 30 minutos de reacción

Color: Color: Color: Color:

Aspecto - Consistencia: Aspecto - Consistencia: Aspecto - Consistencia: Aspecto - Consistencia:

SUSTRATO:
ENZIMAS:
OBSERVACIONES:
INTERPRETACION DE RESULTADOS:

8.2 PRUEBAS CUALITATIVAS DE LA COMPOSICIÓN Y PROPIEDADES DE LAS ENZIMAS

A. PREPARACIÓN DE LA ENZIMA AMILASA SALIVAL Y DETERMINACIÓN DE SUS PROPIEDADES

TUBO D TUBO E TUBO F TUBO G

Color: Color: Color: Color:

Aspecto - Consistencia: Aspecto - Consistencia: Aspecto - Consistencia: Aspecto - Consistencia:

-7-
SUSTRATO:
ENZIMAS:
OBSERVACIONES:
INTERPRETACION DE RESULTADOS:

B. ENZIMA CATALASA

DETERMINACIÓN DE LA PRESENCIA DE DESNATURALIZACIÓN DE LA ENZIMA

ENZIMA CATALASA EN TEJIDO ANIMAL CATALASA EN TEJIDO ANIMAL
TUBO H TUBO I

SUSTRATO:
ENZIMAS:
OBSERVACIONES:
INTERPRETACION DE RESULTADOS:
C. ESTUDIO DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE LA CATALASA

TIEMPO TEMPERATURA

min °C

A B C

(hígado) (riñón) (patata)

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

3.0

GRÁFICAS

SUSTRATO:
ENZIMAS:
OBSERVACIONES:
INTERPRETACION DE RESULTADOS:

-8-
 Análisis e Interpretación de gráficas:

8.3 CUANTIFICACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE ENZIMAS DE INTERÉS CLÍNICO

1. ALT

Datos:
TUBO GPT –ALT
Medida 37 °C
BLANCO
MUESTRA A (inicial):

A (1 minuto):

A (2 minuto):

A (3 minuto):

Cálculo de la Concentración GPT (ALT):

Muestra 1:

Valor referencial:

Interpretación del Resultado:

2. CK-MB (CREATINA QUINASA)

Datos:
TUBO CK-MB
Medida 37 °C
BLANCO
MUESTRA A (inicial):

A (1 minuto):

A (2 minuto):

A (3 minuto):

Muestra 1:

Valor referencial:

Interpretación del Resultado:

3. AMILASA

Datos:
TUBO AMILASA
Medida 37 °C
BLANCO
MUESTRA A (inicial):

A (1 minuto):

A (2 minuto):

A (3 minuto):

-9-
 Muestra 1:

Valor referencial:

Interpretación del Resultado:

4. LIPASA
Datos:
TUBO LIPASA
Medida 37 °C
BLANCO
MUESTRA A (inicial):

A (1 minuto):

A (2 minuto):

A (3 minuto):

Muestra 1:
Valor referencial:
Interpretación del Resultado:
9. CONCLUSIONES
10. RECOMENDACIONES
11. CUESTIONARIO
Para contestar el cuestionario, se tomará como base en la Bioquímica Ilustrada de Harper constante en el repositorio de libros
digitales de la Biblioteca de la UNACH, edición 30, se revisarán los capítulos:
 Capítulo 7 Enzimas: mecanismo de acción
 Capítulo 8 Enzimas: cinética
 Capítulo 9 Enzimas: regulación de actividades

1. Realice un mapa conceptual que resuma la clasificación de enzimas y ejemplos específicos.

2. Indique qué condiciones influyen en la actividad enzimática
3. Qué mecanismos emplean las enzimas para la catálisis
4. Qué factores influyen en la acción de las enzimas en las reacciones
5. ¿Qué funciones cumplen las enzimas?
6. En la práctica realizada, experimento parte A, se utiliza la pancreatina en presentación farmacéutica, explique su
composición y en que se fundamenta la prueba.
7. ¿Qué es el almidón y cómo está formado?
8. ¿Cómo actúa la amilasa salival sobre el almidón? y porqué es importante su presencia en los animales racionales e
irracionales?
9. Explique el fundamento de la prueba de Lugol sobre los almidones?
10. Explique el fundamento de la prueba de Benedict sobre los almidones?
11. ¿Cuál es la fuente de la que se extrae la enzima catalasa?
12. ¿Cuál es la función de la enzima catalasa en el organismo?
13. ¿Cuál es el sustrato sobre el que actúa la enzima catalasa?
14. ¿Cuál es el producto que se obtiene de la actividad de la enzima catalasa?
15. Describa y explique la importancia Biomédica de las Enzimas de aporte al Diagnóstico Clínico, fundamente sus
respuestas. (Enzimología Clínica), con valores referenciales.
16. Cada estudiante leerá un artículo científico que se puede ubicar en la Biblioteca virtual de la UNACH, puede acceder a
Scopus, Pro Quest entre otros; para seleccionar un artículo relacionado con la presente práctica. Realice el resumen,
establezca máximo 2 conclusiones, realice una propuesta de aplicación de este análisis en su localidad. Este análisis será
individual, el resumen deberá constar en el informe de práctica escrito a mano, de cada estudiante del grupo, con una
extensión de 1 página a doble cara, se debe indicar la dirección de la página web en la que se encuentra publicado el
artículo.

12. BIBLIOGRAFIA
 Robert, M, 2012 Bioquímica Ilustrada de Harper’s, . Murray Robert K., McGraw-Hill Companies,
 https://bioquimicaenfermeria.files.wordpress.com/2012/05/tema-7-enzimas-enzimologc3ada-clc3adnica.pdf
 www.linear.es/ficheros/archivos/14_1109000C.pdf
 www.linear.es/ficheros/archivos/10_1105000C.pdf
 www.linear.es/ficheros/archivos/1107005C.pdf

- 10 -
  www.ral-sa.com/files/hu12118.pdf
 www.bganalizadores.com.ar/img/inserto5.pdf
 https://hkost.home.xs4all.nl/english/.../Lipase_(12006+12026).pdf
 https://www.youtube.com/watch?v=jL5vUkTPDJQ

ANEXO/ DATOS OBTENIDOS EN LA APLICACIÓN EXPERIMENTAL:

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
REPORTE DE DATOS OBTENIDOS EN LA PRÁCTICA

CARRERA:
ASIGNATURA:
CURSO:
PARALELO:
GRUPO No.
PRÁCTICA DE LABORATORIO No:
TEMA:

FECHA REALIZACIÓN DE LA
PRÁCTICA:
DOCENTE: DRA. MARÍA ANGÉLICA BARBA MAGGI. M Sc.
APELLIDOS Y NOMBRES COMPLETOS CÉDULA FIRMA
ESTUDIANTE

7.1 PODER DE LAS ENZIMAS DIGESTIVAS

A B A B

0 minutos (inicio) 30 minutos de reacción

Color: Color: Color: Color:

Aspecto - Consistencia: Aspecto - Consistencia: Aspecto - Consistencia: Aspecto - Consistencia:

7.2 PRUEBAS CUALITATIVAS DE LA COMPOSICIÓN Y PROPIEDADES DE LAS ENZIMAS

A. PREPARACIÓN DE LA ENZIMA AMILASA SALIVAL Y DETERMINACIÓN DE SUS PROPIEDADES

TUBO D TUBO E TUBO F TUBO G

Color: Color: Color: Color:

Aspecto - Consistencia: Aspecto - Consistencia: Aspecto - Consistencia: Aspecto - Consistencia:

- 11 -
B. ENZIMA CATALASA

DETERMINACIÓN DE LA PRESENCIA DE DESNATURALIZACIÓN DE LA ENZIMA

ENZIMA CATALASA EN TEJIDO ANIMAL CATALASA EN TEJIDO ANIMAL
TUBO H TUBO I

C. ESTUDIO DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE LA CATALASA

TIEMPO TEMPERATURA ° C

min A (hígado) B (riñón) C (patata)

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

3.0

7.3 CUANTIFICACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE ENZIMAS DE INTERÉS CLÍNICO

1. ALT
TUBO GPT –ALT Medida 37 °C
BLANCO
MUESTRA A (inicial):

A (1 minuto):

A (2 minuto):

A (3 minuto):

2. CK-MB (CREATINA QUINASA)

TUBO CK-MB Medida 37 °C
BLANCO
MUESTRA A (inicial):

A (1 minuto):

A (2 minuto):

A (3 minuto):

3. AMILASA
TUBO AMILASA Medida 37 °C
BLANCO
MUESTRA A (inicial):

A (1 minuto):

A (2 minuto):

- 12 -
 A (3 minuto):

4. LIPASA
TUBO LIPASA
Medida 37 °C
BLANCO
MUESTRA A (inicial):

A (1 minuto):

A (2 minuto):

A (3 minuto):

FIRMA DE LA DOCENTE:

……………………………………………………………………………………
Dra. María Angélica Barba Maggi, Mgs

- 13 -