1.

COBRE
1.1. OBJETIVO
 Determinación por espectrofotometría de absorción atómica de
llama a una longitud de onda de 324,7 nm.

1.2. FUNDAMENTO
El cobre es un elemento simple perteneciente al grupo IB de la
tabla periódica, de símbolo Cu, número atómico 29 y masa atómica
63,54. Su punto de ebullición es de 2,310ºC y su punto de fusión
1,083ºC. Cabe destacar que cristaliza en el sistema cúbico.
1.3. MATERIAL Y APARATOS.
 Espectrofotómetro de absorción atómica.
 Material de laboratorio exento de cobre.

1.4. REACTIVOS.
 Solución patrón de cobre, conteniendo 1,000 g de cobre
por litro. Disolver, calentando con cuidado, en vitrina de
gases, 1,000 g de cobre con, aproximadamente, 15 ml de
ácido clorhídrico 5 N, y 4 ml de agua oxigenada al 30 por
100 hasta disolución total. Enfriar, trasvasar a un matraz
aforado y completar hasta un litro con agua destilada.

1.5. PROCEDIMIENTO
 Obtención de la curva de calibrado.
 Preparar, a partir de la solución patrón, por diluciones
sucesivas, una serie conteniendo desde 0,1 hasta 5,0 mg
de cobre por litro.
 Medir las aborbancias a 324,7 nm. utilizando llama
oxidante de aire-acetileno, representándolas frente a las
respectivas concentraciones.

 Determinación.
 Medir la absorbancia de la muestra en las mismas condiciones
que las empleadas para obtener la curva de calibrado.

1.6. CÁLCULO.
El contenido en cobre se obtiene a partir de la curva de calibrado
obtenida de la representación gráfica de las absorbancias frente a
las concentraciones respectivas. Expresar el contenido en
microgramos de cobre por litro.

2. FOSFORO
2.1. OBJETIVO
 Determinar la concentración de fosforo en el agua
2.2. FUNDAMENTO TEORICO
El fósforo es un elemento esencial en el crecimiento de plantas y
animales. Actualmente se considera como uno de los nutrientes
que controlan el crecimiento de algas, el fósforo se encuentra en
aguas naturales y residuales casi exclusivamente como fosfatos,
los cuales se clasifican en ortofosfatos, fosfatos condensados
(piro-, meta-, y otros poli fosfatos) y fosfatos orgánicos.

Se estima que por lo menos el 85 % del fósforo vertido y aportado

al medio ambiente procede de la red de colectores. Esta fracción
proviene de los desechos humanos y de los detergentes. La
agricultura es la causante del 15% restante, siendo su influencia
relativamente pequeña, debido a que, el fósforo se absorbe y se
almacena bien en el suelo.

El fósforo aparece como fosfato en las formas siguientes:

 Fosforo Orgánico: insoluble, transformable a fosfato

soluble por fermentación o hidrólisis.
 Ortofosfatos Solubles: Fácilmente precipitables, pueden
proceder directamente de los vertidos o del resultado de
una degradación en el proceso del tratamiento de los
polifosfatos orgánicos o inorgánicos. Forma estable en
soluciones acuosas diluidas.
 Polifosfatos: Orgánicos o inorgánicos, que pueden bien
degradarse en ortofosfatos, o bien permanecer inertes. A
su vez pueden estar en solución o en suspensión más o
menos sedimentable. Los compuestos orgánicos
comprenden ésteres, fosfonatos, ácidos nucleicos,
fosfolípidos, azúcares, proteínas, ácido aminofosfórico,
fosfoamidas y otros.

El fosforo es considerado como un parámetro crítico en la calidad

de aguas debido a su influencia en el proceso de
eutropuriificación, de ahí la importancia de disponer de las
técnicas analíticas y de muestreo adecuadas para la
determinación de la concentración de las diferentes especies que
pueden estar disueltas en el agua, adsorbidas sobre partículas o
asociadas con organismos acuáticos. El incremento de la
concentración de fósforo en las aguas superficiales aumenta el
crecimiento de organismos dependientes del fósforo, como son
las algas. Estos organismos usan grandes cantidades de oxígeno
y previenen que los rayos de sol entren en el agua. Esto hace que
 el agua sea poco adecuada para la vida de otros organismos. El
fenómeno es comúnmente conocido como eutrofización. El
Decreto N°883 “Normas para la clasificación y el control de la
calidad de los cuerpos de agua y vertidos o efluentes líquidos
“establece 10 mg/L de fosforo.

2.3. MÉTODOS DE ANÁLISIS

Existen diferentes métodos para medir fósforo reactivo disuelto
(PRD o Ortofosfato), el cual se asume como una medida de la
concentración del fósforo biológicamente disponible y por ende de
la calidad del cuerpo de agua. No todo el fósforo disuelto está
realmente disponible para los organismos; la disponibilidad
biológica del elemento depende de muchos factores, incluyendo
las especies presentes y sus concentraciones.

El método colorimétrico estándar directo mide únicamente

ortofosfato cuando se usa directamente sin que las muestra hayan
sido sometidas a pretratamiento alguno. Por otra parte, la hidrólisis
térmica combinada con colorimetría es adecuada para la
determinación de ortofosfatos y polifosfatos; una fracción (aprox. 35
%) de fósforo orgánico puede descomponerse mediante
calentamiento en presencia de un ácido fuerte.

El método estándar Colorimétrico Directo con Ácido Ascórbico para

la determinación de PRD (ortofosfato) se basa en la reacción del
fósforo con iones molibdeno y antimonio para formar un complejo el
cual puede ser reducido utilizando ácido ascórbico resultando una
coloración azul característica que puede ser detectada mediante
colorimetría. La absorbancia a 880 nm se relaciona directamente
con la concentración de ortofosfato.

El ácido 12-molibdofosfórico es reducido por el ácido ascórbico a

azul de molibdeno, compuesto de composición desconocida que
contiene una mezcla de Mo (VI) y Mo (V), que absorbe a 880 nm.
 El método es aplicable cuando el contenido de fósforo en las
muestras se encuentra entre las concentraciones de 0,01 mg P/L a
6,0 mg P/L.

Todo el fósforo contenido en la muestra debe estar como ion

ortofosfato (PO4)3-, ya que el método espectrofotométrico es
esencialmente específico para este ión ortofosfato (PO4)3-. La
materia orgánica de la muestra es destruida por medio de una
digestión con ácido nítrico y ácido sulfúrico, rompiendo las
ligaduras orgánicas del fósforo (C-P y/o C-O-P), e hidrolizando los
polifosfatos a ortofosfatos.

2.4. INTERFERENCIAS:

 Los arsenatos reaccionan con el molibdato para producir un color

similar al formado por los fosfatos.
 El hierro ferroso produce un color azul, afecta su concentración.
 La presencia de turbidez y color en la muestra debe corregirse
elaborando un blanco. Si la turbidez es muy alta y es necesario
filtrar la muestra, ésta debe hacerse sólo después de la digestión.
 Las muestras con bajas concentraciones de fósforo no se deben
almacenar en botellas plásticas a menos que se congelen, debido a
que los fosfatos se pueden adsorber en las paredes plásticas.
 Los recipientes para el almacenamiento de la muestra deben
lavarse con una solución diluida de HCl y enjuagarse varias veces
con agua destilada. No lavarse con detergentes comerciales.

2.5. MATERIALES
 Espectrofotómetro (880 nm)
 Plancha de calentamiento
 1 Pipeta volumétrica de 50 ml
 1 Pipeta volumétrica de 5 ml
 Matraces aforados de 100 ml
 1 Matraz aforado de 50 ml
 2 Matraces enlermeyer de 250 ml
 Soporte Universal con pinza.
 1 Bureta de 25ml. TENEMOS QUE DEFINIR
 1 embudo.
 Toallin y pizeta.

2.6. REACTIVOS
 Ácido sulfúrico concentrado
  Ácido nítrico concentrado
 Hidróxido de sodio 1N
 Ácido sulfúrico 5 N
 Solución de tartrato de antimonio y potasio
 Solución de molibdato de amonio
 Ácido ascórbico 0,1 M
 Fenolftaleína
 Solución madre de fósforo (100 mg/l)
 Solución patrón de fósforo (2,5 mg/l)

 REACTIVO COMBINADO
 Ácido ascórbico 0,1 M.
 Solución de tartrato de antimonio y potasio.
 Solución de molibdato de amonio

1.5. PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL

 DIGESTION DE LA MUESTRA FOSFORO TOTAL

 Transferir 50 ml de la muestra a un matraz de 250 ml
 Adicionar 1 ml de ácido sulfúrico concentrado y 5 ml ácido nítrico
concentrado
 Calentar en una plancha de calentamiento hasta que empiece la
generación de vapores blancos y se reduzca el volumen a
aproximadamente 1 ml. Continuar hasta que se decolore la
muestra para eliminar el ácido nítrico
 Cuando finalice la digestión, deje enfriar las muestras, agregar
agua destilada hasta un volumen que no sobrepase los 30 mL
(con 20 ml de será suficiente)
 Adicionar 1 gota de fenoftaleína y neutralice hasta un color
rojo/rosa con hidróxido de sodio 1N, posteriormente neutralice con
ácido sulfúrico 5N, hasta desaparición del color.
 Transferir el digerido a un balón aforado de 50 mL y lleve a
volumen con agua destilada y agite varias veces para una
perfecta homogenización.

 METODO DEL ACIDO ASCORBICO

  Preparar una curva de calibración de 0; 0,15; 0,30; 0,60; 1 y 1,5
mg/l de fósforo
 Tomar 50 ml de la muestra y disponer en un matraz
 Agregar 1 gota de fenolftaleína. Si se forma un color
rosado/fucsia agregar gota a gota ácido sulfúrico 5N hasta que
desaparezca dicha tonalidad
 Adicionar 8 ml de reactivo combinado y mezclar completamente.
Esperar 20 min
 Leer la absorbancia en un espectrofotómetro a 880 nm

1.6. CÁLCULOS

NOTA:
La ecuación anterior es la indicada por el Método Estándar, sin embargo; con la
ecuación obtenida de la Curva de Calibración se obtiene la concentración
directa en mg P/L

3. FOSFATO
3.1. OBJETIVO
 Determinar la concentración de fosfatos de una muestra de agua.
3.2. FUNDAMENTO
En las aguas naturales y residuales, el fósforo se presenta
mayoritariamente en forma de fosfatos. Estos son clasificados en
ortofosfatos, fosfatos condensados (piro, meta y otros
polifosfatos) y fosfatos enlazados orgánicamente. Se encuentran
en solución, en partículas o detritus o en cuerpos de organismos
acuáticos y pueden provenir de diversas fuentes.

 El análisis de fósforo implica dos etapas básicas:

 La conversión de la forma de fósforo que interesa determinar, a
ortofosfato disuelto. Esto se logra mediante una hidrólisis o
digestión oxidante (IE 24). Cuando se quiere distinguir entre la
forma disuelta y la suspendida, se realiza una filtración por
membrana.
 La determinación colorimétrica de ortofosfatos. De los tres
métodos existentes: ácido vanadomolibdofosfórico, cloruro de
estaño II y ácido ascórbico, se ha seleccionado este último por su
sensibilidad y simplicidad. En este método, en medio ácido el
molibdato de amonio y el tartrato doble de antimonio y potasio
reaccionan con ortofosfato con formación de un heteropoliácido
fosfomolíbdico, el cual es reducido por el ácido ascórbico a azul
de molibdeno, complejo azul intensamente coloreado. La
absorbancia del complejo medida a una longitud de onda de 880
nm, resulta proporcional a la concentración de ortofosfatos en la
muestra.
 Los fosfatos que responden a la determinación colorimétrica sin
recurrir a la etapa 1, se consideran “fósforo reactivo”, el cual da
una medida fundamentalmente del ortofosfato, sin excluir una
pequeña fracción de fosfato condensado que puede hidrolizarse
durante el análisis.

3.3. ÁMBITO DE APLICACIÓN

El método es aplicable a todo tipo de aguas, incluyendo las
marinas, ya que la influencia de la salinidad es despreciable en la
intensidad del color. Está dirigido fundamentalmente a verificar el
cumplimiento de la legislación para aguas potables (0.5 mg/L).
Ver el que esté vigente

3.4. INTERFERENCIAS
 El color natural del agua no suele interferir a la elevada longitud
de onda empleada. Con aguas turbias o muy coloreadas,
preparar un blanco sin adición de reactivo combinado y restar su
absorbancia a la de la muestra. Diversas sustancias como
arsenatos, cromo VI y nitritos, pueden causar interferencias,
aunque las concentraciones necesarias para que esto ocurra,
habitualmente no son encontradas.

3.5. DESCRIPCIÓN DE LA METODOLOGÍA ANALÍTICA

3.5.1. Colección, preservación y almacenaje de muestras:
 Colectar sólo muestras puntuales y en frascos de vidrio
previamente lavados según Deben analizarse sin dilación y en
caso de requerirse almacenamiento por corto plazo, realizarlo por
refrigeración a 4 o congelación a - 20°C por un tiempo no mayor
de 24-48 horas.
 Si la solución no se va a analizar dentro de los dos días
siguientes a la preparación, se puede preservar una alícuota con
0,2 mL de ácido sulfúrico concentrado por cada 100 mL de
muestra para llevar a pH<2 y se debe almacenar a 4°C. La
muestra preservada se puede analizar tan pronto como sea
posible pero dentro de un periodo máximo de 28 días.
 Para determinar fosfato disuelto (fósforo reactivo disuelto), filtrar
inmediatamente a través de membrana de 0.45 m.

3.5.2. Equipos y materiales:

Espectrofotómetro para trabajar a 880 nm con celdas de 1 y 5 cm
de paso óptico.
 Vidriería de borosilicato lavada con HCl diluido caliente
(40-50°C) y enjuagada con abundante agua destilada. De
emplear detergentes, estos no pueden contener fosfatos.
Esta cristalería debe destinarse solamente para la
determinación de fosfatos y guardarse tapada hasta su
posterior uso. La cristalería donde se desarrolla el color
debe lavarse periódicamente con NaOH 2M para eliminar
la película del complejo coloreado que se adhiere a las
paredes del vidrio.
3.5.3. Reactivos:
Para la preparación de reactivos, patrones y muestras, se
empleará agua desionizada. Todos los reactivos son de grado
analítico, excepto se indique alguna especificación. En función del
consumo previsto y la caducidad de los reactivos, pueden
prepararse volúmenes menores reduciendo proporcionalmente
las cantidades empleadas.
 Solución Madre de Fosfatos (100 mg PO4 3- /L): utilizar
solución trazable. De forma alternativa, pesar (después de
secado a 105°C por 24 horas), 143.2910 mg de KH2PO4,
disolverlos y enrasar con agua en un matraz aforado de
1000 mL. Almacenar a 6°C en frasco de vidrio ámbar
hasta por tres meses.
 Solución Patrón de Fosfatos (1 mg PO4 3- /L): pipetear 1
mL de la Solución Madre de Fosfatos a un matraz aforado
de 100 mL y enrasar con agua. Un mL de esta solución
contiene 1 g de PO4 3- . Se debe preparar al momento de
usar.
 Solución de ácido sulfúrico 5N: verter 70 mL de H2SO4
concentrado en un matraz aforado de 500 mL que
contenga aproximadamente 400 mL de agua, agitar, enfriar
y enrasar. Almacenar en frasco de vidrio ámbar hasta por 6
meses.
 Solución de ácido ascórbico 0.1M: pesar 1.76 g de ácido
ascórbico, disolverlo y enrasar con agua en un matraz
aforado de 100 mL. Es recomendable prepararla al
momento de su uso aunque puede conservarse una
semana en refrigeración, sacando de la nevera sólo la
porción a utilizar.
 Solución de molibdato de amonio al 4%: pesar 20 g de
(NH4)6 Mo7O24 .4H2O, disolverlo y enrasar con agua en
un matraz aforado de 500 mL. Almacenar en frasco ámbar
durante 6 meses pero desechar antes si ocurre
precipitación.
 Solución de tartrato doble de antimonio y potasio: pesar
1.3715 g de (K(SbO)C4H4O6.½ H2O, disolverlo con 400
mL de agua en balón volumétrico de 500 mL y finalmente
enrasar. Almacenar en frasco ámbar durante 6 meses pero
desechar antes si ocurre precipitación.
 Reactivo Combinado para Fosfato: se debe preparar al
momento de su uso y usarse en las 4 horas subsiguientes.
Por cada 100 mL, mezclar en el siguiente orden y agitando
después de cada adición:

1- 50 mL de ácido sulfúrico 5 N
2- 5 mL de solución de tartrato de antimonio y potasio
3- 15 mL de solución de molibdato de amonio
4- 30 mL de solución de ácido ascórbico
  Si aparece turbiedad, agitar y dejar reposar unos minutos hasta
que ésta desaparezca.
3.5.4. Procedimiento:
Las condiciones ambientales no son críticas para la realización de
este ensayo.
 Preparación de las curvas de calibración:
Se emplean 2 curvas, una en intervalo bajo (0-0.40 mg/L) y otra en
intervalo alto (0.1-3.0 mg/L).
 Pipetear volúmenes crecientes de la solución patrón de fosfatos y
completar a volumen con agua para obtener al menos seis
concentraciones comprendidas en el intervalo deseado.
 Transferir los estándares a vasos de precipitado de 100 mL.
 Añadir 1 gota de indicador de fenolftaleína; si desarrolla color
rosado-rojo, añadir gotas de H2SO4 5N hasta desaparición del
color.
 Adicionar 8.0 mL de reactivo combinado y agitar.
 Dejar en reposo por al menos 10 minutos para completar el
desarrollo de color.
 Antes de 30 minutos, leer en espectrofotómetro a 880 nm con
cubetas de paso óptico de 5 cm ó 1 cm.
 En función del espectrofotómetro utilizado, crear la curva de
calibración
 Verificación de las curvas de calibración:
 Cada vez que se analicen muestras, no es necesario construir
una nueva curva de calibración, sino verificar la validez de la
existente. En este caso, se prepara un estándar de 0.20 ó 1.0
mg/L para el intervalo bajo o alto, respectivamente, y se lee como
si fuera una muestra. Si el resultado es coincidente 10 %, se
considera que la curva es válida y se procede a preparar y leer
las muestras. En caso negativo, repetir el estándar. Si el problema
persiste, verificar los reactivos, en particular, la solución madre de
fosfatos y si es necesario, prepararlos y construir una nueva curva
de calibración.

 Determinación de fosfatos en muestras:

 Transferir 50 mL de muestra (previamente filtrada por membrana
de 0.45 m, en caso de ser necesario por presentar alta turbiedad),
a un vaso de precipitados de 100 mL. Adicionar 8.0 mL del
reactivo combinado. Agitar para mezclar bien.
 Esperar 10 minutos para el desarrollo del color. Preparar y
analizar un blanco de reactivos con agua desionizada; para
muestras de aguas marinas, Dejar reposar por 30 minutos a 2
horas
  Leer en espectrofotómetro a 880 nm con cubetas de paso óptico
de 1 ó 5 cm respecto a la curva de calibración correspondiente.
 Si la muestra se analiza inicialmente con la curva baja y resulta
mayor al patrón superior, debe releerse con la curva alta. Si
también resulta superior al mayor patrón de ésta, es necesario
repetir el proceso mediante la lectura de diluciones de la muestra.
Para esto, debe realizarse como mínimo dos diluciones, se
calculará el coeficiente de variación y si éste no supera 10%, se
informará el valor promedio; en estos casos, es necesario
multiplicar previamente por el factor de dilución.

3.6. PRESENTACIÓN DE RESULTADOS

En función del espectrofotómetro utilizado, el resultado se
obtendrá directamente en la curva de calibración del equipo. Se
expresará con tres cifras decimales. Se debe consultar los datos
de la curva vigente para informar aquellos resultados que resulten
menores al límite de detección.
 I. CONCLUSIONES
 En conclusión se logró obtener toda la información necesaria destinada
por el docente del curso acerca del informe encargado de análisis de
agua y también sobre la determinación de todos los parámetros de
dureza, alcalinidad, hierro, nitratos, nitritos, sulfatos, cobre, fosforo y
fosfatos.

 A través de este trabajo, aprendimos que el agua es el compuesto más

abundante en la naturaleza. Cada molécula está formada por
un átomo de oxígeno y dos de hidrógeno, unidos por enlaces covalentes
polares que forman entre sí un ángulo de 105º.

 La contaminación puntualmente es la que procede de fuentes

localizadas y es controlada mediante plantas depuradoras. Pero ninguna
medida de control será efectiva, sino va acompañada de disposiciones
destinadas a reducir la cantidad de residuos y a reciclar todo lo que se
pueda. Por esto es importante concientizar a la población para que cuide
nuestro recurso, ya que existe desde tiempos prehistóricos y el
hombre siempre se ha establecido cerca de lugares de fácil
abastecimiento de agua, porque esta es una necesidad básica para el
desarrollo de la vida y hay que mantenerla incolora, insípida e inodora
De lo contrario (si el agua estuviera contaminada y no presentara las
características anteriormente mencionadas)
provocaría enfermedades como diarrea aguda, lesiones en el hígado y
en los riñones, etc. Y no solamente a los humanos, sino que también a
los animales al ingerirla y a las planta al absorberla.
II. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

 APHA-AWWA- AWWA CF (1992). Métodos normalizados para el análisis

de aguas potables y residuales. Díaz de Santos, Madrid.
 Johnson, W. W. (1980). Handbook of acute toxicity of chemicals to fish
and aquatic invertebrales. Fish and Wildlife, Service. Resource
Publication 137. United States Departernent of the Interior, Washington
D.C.
 Rodier, J. (1989) Análisis de las aguas: aguas naturales, aguas
residuales, agua de mar.Omega, Barcelona.
 Técnicas de Muestreo y Análisis de Agua, Asociación Nacional GN
Medio Ambiente.
 Informe de Análisis de Agua (Julio 2015),Solutions for Emvironment and
develepoment.