PRÁCTICA 9

CORPUSCULO DE BARR

JORGE BLANQUICETH ARRIETA

DANA PALENCIA MARTÍNEZ

CARMELO ROYO GUZMÁN

PRESENTADO A:

LIC. TEODORA CAVADIA MARTÍNEZ

UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

PROGRAMA DE BACTERIOLOGÍA

LABORATORIO DE GENÉTICA

2018
INTRODUCCIÓN

Murray Barr y su colaborador, Ewart Bertram, en la década de los 40´s, describieron la presencia
de una masa de cromatina condensada en los núcleos de las células de las gatas, así como su
ausencia en los machos, por lo que plantearon la hipótesis de que el corpúsculo de Barr
representaba un cromosoma X condensado. A estas masas de cromatina se les denominó
corpúsculo de Barr.

Los corpúsculos o cuerpos de Barr son masas de cromatina sexual altamente condensadas que
encontramos en los núcleos de las células somáticas de las hembras. Según la hipótesis de Mary
Frances Lyon de 1966 o también llamada “Hipótesis de Lyon”, dicha estructura aparece como
consecuencia de la inactivación azarosa de uno de los cromosomas X pasará a ser genéticamente
inactivo. Más concretamente se producirá la inactivación de todos los cromosomas X presentes
excepto uno.

Mary F. Lyon determinó 4 principios básicos sobre esta cromatina sexual:

1. La cromatina sexual es genéticamente inactiva.

2. La inactivación ocurre de forma aleatoria o azarosa.

3. La inactivación puede ocurrir tanto en el cromosoma paterno como materno.

4. La inactivación ocurre en el día 16 del desarrollo embrionario.

Dicha inactivación se encuentra directamente relacionada con la compensación de la dotación

genética entre sexos.

OBJETIVOS

- Observar y conocer la evidencia citológica de la presencia del cromosoma X inactivo en

preparaciones de células de descamación de la mucosa oral.
- Conocer el proceso de inactivación del cromosoma X.
- Entender las manifestaciones fenotípicas de la inactivación del cromosoma X.
- Describir la relación entre el número de cromosomas X presentes en el genoma y la
heterocromatina del cromosoma Y.
MARCO TEÓRICO

Los Corpúsculos o cuerpos de Barr, también llamados cromatina sexual X, son masas condensadas
de cromatina sexual, se encuentran en el núcleo de las células somáticas de las hembras debido a
un cromosoma X inactivo. Son una masa heterocromática, plana y convexa, con un tamaño de 0,7
x 1,2 micras. Barr y Ewart George Bertram (que lo descubrieron en 1923) demostraron que es
posible determinar genéticamente el sexo de un individuo dependiendo de que exista o no una
masa de cromatina en la superficie interna de la membrana nuclear (cromatina sexual). De acuerdo
con la hipótesis de Lyon (propuesta por Mary Lyon en 1966), uno de los dos cromosomas X en
cada célula somática femenina es genéticamente inactivo.

El corpúsculo de Barr representa el cromosoma X inactivo. El número de masas de Barr se

determina por la fórmula B=X-(P/2) donde P equivale a la ploidía de la célula. El número de
cuerpos de Barr que se observan corresponde al número de cromosomas B= X - (1) en una célula
normal femenina humana diploide, entonces, se observa sólo un cuerpo de Barr.

El estudio de la cromatina sexual nos permite identificar la presencia del cromosoma X en recién
nacidos con genitales externos no definidos para obtener el diagnóstico de sexo en un individuo.

Relacionado a esto, encontramos una afectación llamada el síndrome de Turner, que se debe a una
constitución X0. ¿Por qué no son mujeres normales si tienen, como todas las mujeres, un único
cromosoma X activado? El síndrome de Turner es una afección genética rara provocada por la
ausencia parcial o total de un cromosoma X (constitución XO), que afecta únicamente a las mujeres.
Aparece prácticamente en el momento de la concepción y no puede prevenirse. Su afectación no
es muy abundante, incide aproximadamente, en 1 de cada 2.500 niñas. En las mujeres con este
síndrome, lo más habitual es que tenga sólo un cromosoma X, pero también pueden encontrarse
casos donde presenten dos cromosomas X, pero uno de ellos está incompleto. A veces, ciertas
células presentan los dos cromosomas X, pero otras células tienen sólo uno.

Este síndrome se produce porque durante el proceso de formación de los ovocitos, uno de los
cromosomas sexuales se pierde o se modifica estructuralmente. En ambos casos, tanto
genotípicamente como fenotípicamente son mujeres, ya que no presentan el cromosoma Y.

El cariotipo de las mujeres que presentan síndrome de Turner se denomina 45X, donde hay una
monosomia del cromosoma X, 44 autosomas y un único cromosoma X. La falta de un cromosoma
X determina la falta de desarrollo de caracteres sexuales, tanto primarios como secundarios. Esto
les confiere a las mujeres que padecen dicho síndrome aspecto infantil y esterilidad de por vida.
Las mujeres afectadas por este síndrome presentan una estructura baja, que suele hacerse evidente
a partir de los 5 años. En cuanto a la esterilidad, aunque sus ovarios suelen tener un desarrollo
normal al principio, estos mueren rápidamente, de manera que la mayoría de ovocitos han
degenerado antes de que la mujer nazca.

También pueden presentar otras anomalías como inflamación en las manos o pies, pliegues de piel
adicionales, problemas renales o deformaciones esqueléticas, entre otros. Un alto porcentaje,
además, nace con graves defectos cardíacos, que pueden llegar a ser mortales. Otras características
físicas típicas del síndrome de Turner son:

Baja estatura, "pliegues" en el cuello que van desde la parte superior de los hombros hasta los lados
del cuello, línea del cabello bajo en la espalda, baja ubicación de las orejas, manos y pies
inflamados. La mayoría de las mujeres con síndrome de Turner son infértiles. Corren el riesgo de
tener problemas de salud como hipertensión arterial, problemas renales, diabetes, cataratas,
osteoporosis y problemas tiroideos.

Los médicos diagnostican el síndrome de Turner sobre la base de los síntomas y una prueba
genética. A veces se encuentra en pruebas prenatales. No existe una cura para el síndrome de
Turner, pero hay algunos tratamientos para los síntomas. La hormona del crecimiento suele ayudar
a que las niñas alcancen estaturas cercanas al promedio. La terapia de sustitución hormonal puede
estimular el desarrollo sexual. Las técnicas de reproducción asistida pueden ayudar a algunas
mujeres con el síndrome de Turner a lograr embarazarse.

MATERIALES

- Bajalenguas.
- Agua potable.
- Portaobjetos.
- Microscopio óptico.
- Mechero de alcohol.
- Solución de aceto – orceína 2%
 - Material biológico: células del epitelio de descamación de la mucosa oral.
- Aceite de inmersión.

PROCEDIMIENTO

1. Se enjuagó la boca de dos a tres veces con agua potable y con un bajalenguas se hizo una
raspado en la parte interna de la mejilla.
2. Se realizó un frotis del raspado sobre un portaobjetos.
3. Se fijó la preparación al calor utilizando un mechero de alcohol.
4. Se procedió a teñir la preparación con solución de aceto – orceína al 2% durante 10 minutos.
5. Se retiró el exceso de colorante con agua destilada y se dejó secar al aire.
6. Se observó al microscopio óptico con objetivo de inmersión (100X) para identificar el
corpúsculo de Barr, el cual se aprecia como una mancha obscura adherida a la membrana
nuclear que se tiñe más intensamente.

RESULTADOS
CONCLUSIONES

- En todas las mujeres uno de los dos cromosomas X se inactiva en cada célula, entre los 12
a 16 días de vida intraembrionaria.
- El corpúsculo de Barr representa el cromosoma X inactivo.
- El centro de inactivación del cromosoma X se encuentra en el cromosoma inactivado. El
gen XIST (Inactive X – Specific Transcripts) que es clave para la inactivación, produce un
RNA no codificante.
- El cromosoma presenta una herencia de carácter sexual, por lo cual sus mutaciones son
fácilmente identificables.

CUESTIONARIO

1. ¿En qué células se deben buscar los corpúsculos de Barr?

Se deben observar en células somáticas femeninas, principalmente en las células de la mucosa
oral.

2. ¿Qué diferencias se observan entre células de la mucosa oral y sangre periférica?

Las diferencias que se observan principalmente es que varían en su morfología, más
específicamente en su membrana celular. En el caso de las células epiteliales y los neutrófilos
se pueden observar que los corpúsculos se ven de diferentes maneras, en el primero se observa
como especie de una mancha oscura y los neutrófilos como un apéndice semejante a un palillo
de tambor.

3. ¿En qué fase del ciclo celular son visibles los corpúsculos de Barr?
Aparecen en la periferia de los núcleos de las células somáticas femeninas durante la interfase.

4. ¿Qué tipo de moléculas tiñe la aceto-orceina, acetocarmin y Giemsa?

La aceto- orceína es un colorante generalmente utilizado para teñir cromátidas, por lo que es
útil para obtener el índice mitótico de las células meristemáticas, localizar los corpúsculos de
 Barr (cromosomas X inactivos visibles junto a la membrana nuclear de células somáticas de
hembras), etc. En general el colorante es una sustancia básica, es decir, tiene afinidad por las
sustancias ácidas (como los ácidos nucleicos), por lo que, si agregas dicho colorante a una
preparación que contenga ácidos, estos se teñirán debido a la "unión" de las moléculas básicas
del colorante con las moléculas ácidas de los componentes de la preparación.
El ácido carminico es una sustancia química compleja, se encuentra presente en las hembras
con crías de ciertos insectos de la familia Coccidae, parásitos de algunas especies de cactus. El
acetocarmin es un colorante de origen animal que se utiliza para colorear células mitóticas y
así poder observar a través del microscopio los cromosomas de dichas células.
El método de tinción de Giemsa permite la tinción diferencial de zonas con un alto contenido
de ADN, y concretamente de uniones A-T. Esto permite distinguir perfectamente en
microscopio óptico el núcleo celular, los cromosomas durante la mitosis, y en algunos casos,
incluso el ADN mitocondrial. Los cromosomas pueden ser tratados con varios compuestos
químicos que producen la alternancia de bandas claras y oscuras a lo largo de los cromosomas.
Cada cromosoma tiene un patrón de bandas característico, permitiendo que aberraciones
estructurales como borrados, duplicaciones o sutiles translocaciones sean detectadas, al igual
que permite la identificación de cromosomas marcadores.

5. ¿Por qué es importante enjuagarse la boca antes de tomar la muestra?

Para así desprender células del epitelio bucal y poder observarlas con mayor facilidad, además
de que ayuda a limpiarla de otros agentes que pueden dificultar la visión.

6. Explicar el mecanismo de inactivación de un cromosoma X.

La mayor parte del proceso es poco conocido, aunque sí se conoce la existencia de un ARN no
traducible, XIST, generado por el cromosoma que se inactiva, y que forma un complejo con el
propio cromosoma, siendo imprescindible en el proceso inicial de la desactivación pero no en
el mantenimiento de la misma. Este mantenimiento tiene lugar debido a la metilación en el
cromosoma inactivado tanto del gen XIST como de promotores de múltiples genes. Así mismo,
también interviene la presencia de una histona 2A especial, H2A1, que otorga la condensación
característica del corpúsculo de Barr. El corpúsculo también se caracteriza por una escasa
acetilación de sus histonas y una infrecuente metilación de la lisina 4 y frecuente de la 9 en
 H3. Se conocen centros de inactivación X (XIC) cuya simple presencia es suficiente para el
silenciamiento incluso de autosomas, como se ha visto en translocaciones, y que incluye
secuencias de unión de proteínas reguladoras y secuencias codificantes de RNAs no
traducibles: XIST y TSIX (que se trata de un RNA antisentido de XIST, que lo regula
negativamente).

7. Menciona las características del cromosoma X inactivo.

En los cromosomas X aparecen los llamados Corpúsculos de Barr por la inactivación de todos
menos uno de ellos. Estos cuerpos que se observan en células sin división de mamíferos
corresponden a la cromatina del cromosoma X de hembras (Mary F. Lyon, 2003) condensada
en heterocromatina, y dicha inactivación tiene lugar debido a la metilación de su ADN (lo que
silencia sus genes). Forma parte de los mecanismos de compensación de dosis génica,
evitándose que las hembras expresen el doble de producto génico por disponer de 2
cromosomas X (frente a un X y otro Y en los machos).

8. Explicar por qué algunos genes del cromosoma X escapan a la inactivación.

Pese a que algunos genes humanos ligados a X tienen homólogos funcionales en el cromosoma
Y, y por tanto escapan a la inactivación del cromosoma X, existen otros genes (como SYBL1
y HSPRY3) que, a pesar de tener homólogos en el cromosoma Y, sufren la inactivación del X.
En este caso, la discrepancia aparente parece compensarse mediante la inactivación de Y para
estos genes: cuando se presentan en el cromosoma Y, SYBL1 y HSPRY3 se metilan y no se
expresan. En general, los genes que eluden la inactivación tienden a concentrarse en grupos,
sobretodo en Xp, y muchos de ellos al parecer derivan de adiciones autosómicas recientes a
los cromosomas sexuales.

BIBLIOGRAFÍA

https://es.scribd.com/doc/143144955/Corpusculo-de-Barr.

https://es.slideshare.net/OswaldoAngeles/enfermedades-ligadas-a-cromosoma-x.

http://bioinformatica.uab.cat/base/documents/genetica_gen/portfolio/Glosario2017_6_18P18_29
_15.pdf.
https://salud.ccm.net/faq/21434-corpusculo-de-barr-definicion.