Professional Documents
Culture Documents
Fazer um pop
Meios de Cultura
Agar sangue
Aguar macConkey
Agar cled
Agar mueller hington
Agar chocolate
Agar BHI
Agar SS
Componentes
Preparo
Principais bacterias
Controle de qualidade
Mais de 27 espécies
Principais:
Staphylococcus aureus = infecções da comunidade e hospitalares, em qualquer lugar.
Staphylococcus saprophuticus = sempre relacionada a infecções urinarias
Staphylococcus epidermidis = infecções de pele, porem em outros lugares se não for o aureus
Fatores de virulência
Toxinas
Proteínas
Enzimas
Alem destas existem:
Capsula
Peptídeo
Acido teicoico e lipoteicoico (parede das bactérias gram positivas)
Componentes estruturais
Capsula
Inibição da fagocitose
Inibir a ingestão
Proteger da ingestão
Adesão (quando se junta e forma uma maior aderência)
Proteína A (SpA) tem uma afinidade da Fc da IgG (impedem a interação dos anticorpos com as
células fagociticas) ao invés do antígeno se ligar a bactéria se liga e impede que aconteça a
interação antígeno anticorpo.
Adesinas são proteínas do endotélio (abaixo da superficial), precisa aderir para controlar a
lesão.
Fator clumping -> fibrinogênio (fator de coagulação da protrombina, a bactéria está dentro do
grumo do fibrinogênio).
Enzimas
Coagulase deposito de fibrina (a bacteria se liga através da coagulase a
protrombina, cria um coagulo e fica dentro dele como protenção).
Catalase protege contra a ação de superóxido (separa o hidrogenio e oxigenio, por
isso gera bolha).
Hialuronidase ação no acido hialurônico (acido do peeling, micropigmentação)
Lipase ação nos lipídeos (na pele, gordura da pele, foliculite, grandes concentrações
de gordura)
DNAse destroe DNA
Fibrinolisina ação fibrinolítica (disseminação pelo tecido, para expalhar)
Toxina
Estão no interior da célula da bactéria.
Citotoxinas que destroem leucócitos e levam as síndromes, produz leucocitina que destroe
leucócitos causando necrose tecidual.
Fatores de virulência
Estruturas bacterianas
Flagelo permite que as bactérias tenham acesso à áreas anatômicas que as
bactérias imóveis não conseguem alcançar, podem permitir que as bactérias
“escapem” dos fagócitos.
Capsulas servem como função antifagocítica
Pili permite que as bactérias se fixem às superfícies
Enzimas
Coagulase permite que as bactérias formem coágulos dentro dos quais elas se
“escondem”
Quinases permitem quais bactérias dissolvam coágulos
Hialuronidases dissolve o ácido hialurônico, permitindo que as bactérias penetrem
mais profundamente nos tecidos
Leucitinases destrói membranas celulares
Enzimas necrosantes causam intensa destruição dos tecidos
Toxinas
Endoxina liberada das paredes celulares de bactérias gram negativas, causa febre e
sepse
Exotoxinas produzidas no interior da célula, mas liberada da célula
Neurotoxinas causam dano ao sistema nervoso central
Enterobacterias causam doenças gastrointestinais
Toxina B Clostridium citotoxina que causa colite pseudomembranosa.
TSST-1 de Staphylococcus aureus toxina que causa a maioria dos casos de síndrome
do choque tóxico.
Toxina esfoliativa produzida por algumas cepas de S. aureus, causa a síndrome da
pele escaldada
Toxina eritrogênica produzida por algumas cepas de S. pyogenes, causa escalatina
Toxina diftérica produzidas por cepas toxigênicas de Corynebacterium diptheriae,
causa difteria
Leococidinas causa a destruição dos leucócitos
COPROCULTURA
Gastroenterites
Diarreias bacterianas
Amostra clinica
Fezes (1 a 2 gramas)
In natura – fora da geladeira, por mais de 2 dias não pode usar.
Coleta e transporte:
Recipiente estéril ou sem conservante
Zaragatoa retal
Papel filtro (fezes muito liquidas)
** transporte imediato, se houver necessidade conservar em geladeira a 4 C.
Amostras aceitáveis
Sem conservante ate 1 h após coleta
Com conservante mantidas em temperatura ambiente ate 24h
Glicerina tamponada
Cary Blair
Cary Blair
Formulado a partir do meio Stuart, microorganismos patogênicos e outros coliformes fecais
sobrevivem.
Impede a multiplicação mas os que já tem continuam vivos.
*** específico para salmonela e shigela, quando tem é preciso que uma das duas se
sobreponha, elas competem entre si.
Swab retal
Umedecer o swab em salina estéril e inserir no esfíncter retal, fazendo movimentos rotatórios.
Retirar e certificar que existe coloração fecal no algodão.
*** s. agalactiae utulizar omesmo swab vaginal para coleta de swab anal e coloca-lo em caldo
Todd-hewitt. – deve-se pesquisar na gestante porque pode causar meningite ao RN e
septsemia.
Métodos analíticos
Pode ter exame a fresco – coloração de gramm, pode corar com leishman ou guinza para saber
se a amostra tem leucócitos e bactérias,
Pesquisa de BAAR
Meios utilizados
Meios diferenciais – diferencie uma coisa da outra, precisa da hemólise. Agar sangue so gram
positivo.
Meios seletivos – so cresça 1 tipo de bactéria, Agar mackonkey
Meios altamente seletivos – Salmonela shigela
Caldo de enriquecimento – glicerina tamponada, tetrationato, selenito, cary Blair, Stuart, bhi,
so crescer o que eu quero que cresça, não vai crescer fungo.
Interpretação
Geral positiva ou negativa
Imunocomprometido micobacteria ou pseudômonas spp (pode ter qualquer bactéria ou
qualquer parasito causando diarreia)
Paciente com uso de antibiótico terapia
Meios de cultura
Não seletivos - TSA, Agar sangue, caldos.
Seletivos e diferenciais: Agar MC/Agar SS/ Agar VB
Enriquecimento
Agar macconkey – tota enterobacteria fermenta lactose, se ficar ROSA lactose positiva,
AMARELA lactose negativa.
Agar SS – a colônia fica preta para salmonela, produz citrato férrico, detecta H2S.
Coprocultura - roteiro
Recebimento de amostra – in natura até 30 min
Prova microbiologia
Cocos gram positivos Patologia e Identificação (prova de virologia)
Enterobacterias morfologia, patologia e identificação
Coprocultura
Enterobactérias
Capsula (k)
Lisopolissacarídio (o)
Flagelo (h)
Envoltório celular (membrana plasmática, peptidioglicano e membrana externa)
Definição
Bacilo gram negativo
Fermentador de glicose
Oxidase negativo/catalase positiva
Moveis/imóveis
Crescimento em meios de cultura comum
Hospitalar?
Comunidade?
Onde??
Isolamento
Crescem bem em 18 – 24h em meios comuns
A – MC – SS – TSA
Diagnostico
PresuntivoS: IAL – Fermentação Glicose / Produção de gás / Fermentação sacarose / produção
indol / produção de H2S / hidrolise da ureia / descarboxilização da lisina / motilidade
Ex. Escherichia coli: lactose + / GLi + / Gas + / Sacarose + / uréase - / indol + / motilidade +
Fluxograma BGN
BGN/Oxidase Negativa
Agar MacConkey
Lactose Positiva (cor rosa)
IAL
E. coli
Enterobacter
Klebsiella
Citrobacter
Citrato de Simmons (confirmatório: VP)
o Positivo
Enterobacter
Klebsiella
Citrobacter
o Negativo
E. coli
o VP positivo: Enterobacter / Klebsiella
IMPORTANTE!!
Identificar corretamente as espécies, permitindo a detecção ou confirmação de surtos,
beneficiando as ações da vigilância;
Identificar erroneamente pode determinar falsos surtos;
Ignorar um possível surto por falta de identificação das cepas isoladas;
Descartar cepas atípicas de uma espécie considerando-as contaminantes;
Descartar espécies raras;
Realizar controle de QUALIDADE dos meios de cultura, reagentes e testes.