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PRACTICA N° 2
QUIMICA BIOLOGICA
I. OBJETIVO
El objetivo de la práctica es obtener experiencia con la identificación química de agua, carbohidratos, lípidos y
proteínas contenidos en un tejido biológico.
II. MATERIALES
III. PROCEDIMIENTO
A. DETERMINACIÓN DE LA CANTIDAD DE AGUA
1. Pese 10 g de papa en un papel de aluminio prepesado y anote el peso exacto.
2. Corte el trozo de papa en pedazos de 3 mm y distribúyalos uniformemente en el papel de aluminio.
Identifique su muestra.
3. Coloque su muestra en el horno de secado a 120° C por 24h.
4. Pese su muestra y anote el peso exacto.
5. Calcule el porcentaje de agua de la muestra original de papa:
% H2O = peso fresco – peso seco x100
peso fresco – peso de papel
B. IDENTIFICACIÓN DE LÍPIDOS
Saponificación (formación de jabón)
• Colocar en un tubo de ensayo 2ml de aceite vegetal y 2ml de una solución de hidróxido sódico al 20%.
• Transcurrido este tiempo, se puede observar en el tubo tres capas: la inferior clara, que contiene la solución
de soda sobrante junto con la glicerina formada; la superior amarilla de aceite no utilizado, y la intermedia,
de aspecto grumoso, que es el jabón formado.
Tinción
Las grasas se colorean en rojo anaranjado por el colorante denominado Sudan III.
• Disponer en una gradilla dos tubos de ensayo, colocando en ambos 2ml de aceite.
Añadir a uno, 4 o 5 gotas de solución alcohólica de Sudán III. Al otro tubo añadir 4-5 gotas de tinta roja. Agitar
ambos tubos y dejar reposar.
• Observe y anote los resultados.
Solubilidad
• Tomar dos tubos de ensayo y poner en cada uno de ellos 2-3 ml de agua y en el otro 2-3ml de éter de
petróleo.
• Añadir a cada tubo 1cc de aceite y agitar fuertemente. Observar la formación de gotitas o micelas y dejar en
reposo. Se verá como el aceite se ha disuelto en el éter y en cambio no lo hace en el agua, y el aceite
subirá debido a su menor densidad.
C. IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS
1. Realice una prueba cualitativa para carbohidratos utilizando el reactivo de Benedict siguiendo las
indicaciones del cuadro contiguo:
Muestra: 1
Tubo N° R. Benedict H2O dest. Resultado
Glucosa 1% ml
1 3 ml 1 ml 0 0
2 3 ml 0 1 ml 0
3 3 ml 0 0 lactosa
4 3 ml 0 0 maltosa
5 3 ml 0 0 sacarosa
6 3 ml 0 0 almidón
1. Después de agregar los reactivos coloque los tubos en baño de agua hirviente durante 15 minutos.
2. Anote los resultados utilizando positivo o negativo (+ o - respectivamente) en la tabla anterior, de acuerdo
a los cambios que observe en relación a lo ocurrido con la glucosa.
Hidrólisis de la sacarosa
Como se veía en la experiencia anterior la sacarosa daba la reacción de Benedict negativa por no presentar
grupos hemiacetálicos libres. Ahora bien, en presencia del ácido clorhídrico (HCl) y en caliente, la sacarosa se
hidroliza descomponiéndose en los dos monosacáridos que la forman (glucosa y fructosa):
• Tomar una muestra de sacarosa (2 ml) y añadir unas 10 gotas de ácido clorhídrico al 10%. Calentar en
baño maría hirviente durante 10 minutos.
• Dejar enfriar y realizar la Prueba de Benedict. Observar el resultado. La reacción positiva nos dice que
hemos conseguido romper el enlace O-glucosídico de la sacarosa.
El polisacárido almidón se colorea de azul-violeta en presencia de yodo, debido no a una reacción química,
sino a la fijación del yodo en la superficie de la molécula del almidón, fijación que sólo tiene lugar en frío.
• Colocar en una gradilla 4 tubos de ensayo con 3 ml de glucosa, maltosa, almidón y del extracto de papa.
• Observar los resultados positvos y negativos. Con este método puede identificarse el almidón.
D. IDENTIFICACION DE PROTEINAS
Coagulación
Reacción de Biuret
Tomar un tubo de ensayo y agregar 3 ml de la solución de clara de huevo.
•Añadir 2 ml de solución de hidróxido sódico al 20%.