Universidad Nacional Autónoma de

México.
Facultad de Estudios Superiores Zaragoza

Química Farmacéutico Biológica.

LABORATORIO DE BROMATOLOGIA.

ANTEPROYECTO 9

Espectrofotometría: Fierro

Equipo 2.

Alumnos:
 Miramontes Vázquez Gloria Esther
 Mora Velázquez Geyma Montserrat
 Morales Yeso Alejandro
 Pérez Juárez María Isabel
 Rojo López Jovanna

Grupo: 1751 Semestre: 2018-I

Fecha de entrega: 24/10/2017

Objetivo
El Alumno en formación a través del conocimiento adquirido en la teoría del curso, sea capaz de realizar la
determinación de Hierro en muestras de alimentos, Utilizando un método espectrofotométrico, analizando las bondades
del método y su aplicación en la práctica.

Justificación
El análisis que se realizara es para conocer el contenido de Hierro presente en los productos alimenticios analizados,
sustentados en la Norma Oficial Mexicana NOM-117-SSA1-1994, bienes y Servicios. “Método de Prueba para la
determinación de Cadmio, Arsénico, Plomo, Estaño, Cobre, Fierro, Zinc y Mercurio en Alimentos, Agua Potable y
Agua Purificada por espectrometría de Absorción Atómica”, con el fin de establecer el contenido real.

4. Metodología
1) Preparar una curva de calibrado tal como se describe en la práctica 11.2

2) Pesar una cantidad de muestra que contenga entre 0'1 y 0'5 miligramos de hierro en un crisol de cenizas
calcinado y tarado.
3) Hacer cenizas a 525ºC.

4) Disolver las cenizas con una pequeña cantidad de ácido sulfúrico diluido (aprox. 1:5) y filtrar sobre vaso de pp
de 100 ml; lavar rápidamente con pequeñas porciones de agua destilada hasta completar un volumen total no
superior a 50 ml.

5) Transferir a un matraz aforado de 1 litro, enrasar y homogeneizar; un ml de esta disolución madre contiene 0.1
miligramos de hierro (si no se ha pesado exactamente la cantidad indicada, efectuar la corrección oportuna).

6) Preparar disoluciones de trabajo, transfiriendo a vasos de precipitados de 100 ml con 50 ml de agua destilada
exenta de hierro, porciones de 0 ml (blanco), 1 ml, 2 ml, 3 ml, 4 ml y 5 ml de disolución madre, junto con 5 ml
de solución de clorhidrato de hidroxilamina y 2 ml de solución del reactivo de ortofenantrolina.

7) Comprobar y corregir el pH (entre 6 y 9), ayudándose, si ello fuera necesario, de amoníaco o de ácido
sulfúrico.
8) Transferir las disoluciones de trabajo a matraces aforados de 100 ml, enrasar y homogeneizar.
9) Esperar un tiempo mínimo de 1 hora y leer las absorbancias a 505 nm frente al blanco.

10) Construir una gráfica representando en abscisas las concentraciones en miligramos/litro y en ordenadas la
absorbancia (las disoluciones de trabajo de 1, 2, 3, 4 y 5 ml de solución madre corresponden respectivamente a
concentraciones de 1, 2, 3, 4 y 5 miligramos/litro).

Obtención de la curva de calibrado:

1.- Disolver 0.7022 gramos de sulfato ferroso amónico, con ayuda de unas gotas de ácido sulfúrico concentrado, en un
erlenmeyer de 250 ml.
2.- Añadir, con bureta, disolución de permanganato de potasio hasta coloración rosa persistente.

3.- Transferir a un matraz aforado de 1 litro, enrasar y homogeneizar; un ml de esta disolución madre contiene 0.1
miligramos de hierro (si no se ha pesado exactamente la cantidad indicada, efectuar la corrección oportuna).

4.- Preparar disoluciones de trabajo, transfiriendo a vasos de precipitados de 100 ml con 50 ml de agua destilada exenta
de hierro, porciones de 0 ml (blanco), 1 ml, 2 ml, 3 ml, 4 ml y 5 ml de disolución madre, junto con 5 ml de solución de
clorhidrato de hidroxilamina y 2 ml de solución del reactivo de ortofenantrolina.
5.- Comprobar y corregir el pH (entre 6 y 9), ayudándose, si ello fuera necesario, de amoníaco o de ácido sulfúrico.
6.- Transferir las disoluciones de trabajo a matraces aforados de 100 ml, enrasar y homogeneizar.
7.- Esperar un tiempo mínimo de 1 hora y leer las absorbancias a 505 nm frente al blanco.
8.- Construir una gráfica representando en abscisas las concentraciones en miligramos/litro y en ordenadas la
absorbancia (las disoluciones de trabajo de 1, 2, 3, 4 y 5 ml de solución madre corresponden respectivamente a
concentraciones de 1, 2, 3, 4 y 5 miligramos/litro).

4.1 Propiedades Físicas y Químicas de los Reactivos a utilizar

 1,10-fenantrolina
Aspecto físico: polvo blanco
Punto de fusión: 90-93°C
 Clorhidrato de hidroxilamina
Temperatura de ebullición: S/D
Temperatura de fusión: 155‐ 157 °C (311‐315 ° F)
Temperatura de inflamación: S/D
Temperatura de ignición: S/D
Densidad: 1.67 g/cm3 a 25 °C (77° F)
Ph: 2.5 a 3.5 a 50 g/L a 20 °C (68° F)
Estado físico: Cristalino
 Ácido sulfúrico
Apariencia Líquido aceitoso incoloro
Densidad 1840 kg/m3; 1.84 g/cm3
Masa molar 98,08 g/mol
Punto de fusión 283 K (10 °C)
Punto de ebullición 610 K (337 °C)
Índice de refracción (nD) 1,397
 Amoníaco concentrado y amoníaco diluido.
Apariencia: Incoloro olor penetrante y desagradable
Densidad 0.73 kg/m3; 0,00073 g/cm3
Masa molar 17,03 g/mol
Punto de fusión 195,42 K (-78 °C)
Punto de ebullición 239,81 K (-33 °C)
Punto de descomposición 773 K (500 °C)
Temperatura crítica 405,5 K (132 °C)
Presión crítica 111,52 atm
Índice de refracción (nD) 1,355
 Agua destilada.
Aspecto: Líquido transparente e incoloro.
Olor: Inodoro.
Punto de ebullición: 100°C
Punto de fusión: 0°C
Presión de vapor: (20°C) 23 hPa
Densidad (20/4): 1,00
Solubilidad: Soluble en etanol.
pH 5,0 – 6,5
Conductividad: 1,5-4,0 µmhos/cm
 Sulfato de amonio ferroso.
Temperatura de ebullición (ºC): No aplica
Temperatura de fusión (°C): 110
Apariencia: Cristales
Densidad relativa (AGUA=1):1.86
 Peso molecular 392.13
Estado físico: Sólido
Color: Verde a azul pálido. Olor: Sin olor
PH solución acuosa a 25 °C No se encontró información
Solubilidad en el agua: No se encontró información
 Permanganato de Potasio 0.1 N
Propiedades físicas: Densidad 0,00270305212 kg/m3; 2,70305212 g/cm3; Masa molar 158.0336 g/mol; Punto
de fusión 323 K (50 °C); Punto de ebullición 513 K (240 °C).
Propiedades químicas
Solubilidad en agua 6.38 g/100 ml at 20 °C

4.2 Cálculo y preparación de reactivos

 1, 10-fenantrolina
Pesar 0.5 g del reactivo de ortofenantrolina monohidratado en agua destilada, calentando y agitando. Dejar enfriar y
llevar a volumen hasta 100 mL en matraz aforado.

 Clorhidrato de hidroxilamina
Pesar 10g de clorhidrato de hidroxilamina y colocarlos en un matraz aforado de 100 mL disolver y aforar.

 Ácido sulfúrico diluido

Diluir 4 mililitros de ácido sulfúrico en 20 mL de agua destilada
 Permanganato de potasio
3.3g ------------1000mL
X=0.66g-----------200mL Pesar 0.66 g de permanganato de potasio y disolver en 200 mL de agua y
calentarlo a ebullición durante 15 min, tapar el matraz y dejar reposar por dos días filtrar con lana de vidrio.

4.3Cálculo y preparación de la muestra

Pesar un aproximado de la muestra que contenga 0.1-0.5 mg de hierro

4.4 Diagrama de flujo de la metodología

Curva de calibrado
Preparación de la muestra

5. Precauciones en el manejo de reactivos

 1, 10-fenantrolina
Ventilación adecuada, no comer ni beber durante su utilización. Después de trabajar con el producto lavar bien las
manos. Condiciones de almacenamiento: almacenar en un lugar seco.
 Clorhidrato de hidroxilamina
Manipulación y almacenamiento Manipulación: Sin más exigencias. Almacenamiento: Almacenar bien cerrado, seco.
Mantener alejado de fuentes de ignición y calor. Temperatura de almacenamiento: sin limitaciones.

 Ácido sulfúrico
Precauciones para el manejo seguro: Proporcionar una ventilación adecuada. Utilizar protección de ojos y manos
cuando se manejen pequeñas cantidades. Usar equipo de protección total cuando exista riesgo de salpicaduras o
derrames. Cuando se diluye, adicionar siempre el ácido sobre el agua y nunca el agua sobre el ácido. Evitar la
inhalación de altas concentraciones de nieblas, en estos casos usar máscara completa con filtros para gases ácidos.

 Sulfato de amonio ferroso

MANEJO Y ALMACENAMIENTO: Almacénese en área color naranja/verde (almacén general). En un lugar seco y
fresco, ventilado. Separado de productos o materiales incompatibles.

 Permanganato de potasio
ALMACENAMIENTO: Debe almacenarse en recipientes bien tapados alejados de ácido sulfúrico, peróxido de
hidrógeno, combustibles, compuestos orgánicos en general, materiales oxidables y protegidos de daños físicos, en
lugares frescos y bien ventilados.
5.1 Primeros Auxilios
 1, 10-fenantrolina
Indicaciones generales: En caso de pérdida del conocimiento nunca dar a beber ni provocar el vómito.
Inhalación: Trasladar a la persona al aire libre. En caso de que persista el malestar, pedir atención médica.
Contacto con la piel: Medidas de primeros auxilios Lavar abundantemente con agua. Quitarse las ropas contaminadas.
Contacto con los ojos: Lavar con agua abundante manteniendo los párpados abiertos. En caso de irritación, pedir
atención_médica.
Ingestión: Beber agua abundante. Provocar el vómito. Pedir inmediatamente atención médica.
 Clorhidrato de hidroxilamina
‐Ingestión: Nocivo si se ingiere. Nunca debe administrarse nada por la boca a una persona inconsciente. Enjuague la
boca con agua y consulte a su médico.
‐Inhalación: Nocivo si se inhala. Puede provocar una irritación en el tracto respiratorio. Si se aspiró, mueva a la
persona al aire fresco, si ha parado de respirar aplicar respiración artificial.
‐Contacto con la piel: Provoca irritación si es absorbido por la piel. Eliminar lavando con mucho jabón y abundante
agua.
‐Contacto con ojos: Provoca irritación ocular. Lavarse abundantemente los ojos con agua.
 Ácido sulfúrico
Oral: NO INDUCIR EL VÓMITO ya que existe riesgo de perforación de esófago y quemadura química en cavidad
bucal. Nunca dé nada por la boca a una víctima que esté perdiendo la consciencia, inconsciente o con convulsiones.
Haga que la víctima se enjuague la boca con abundante agua. Si está consciente darle a tomar de 60 a 240 ml de agua.
Si no se puede evitar el vómito, haga que la víctima se incline hacia adelante para reducir el riesgo de aspiración.
Cutánea: Retirar la ropa y calzado contaminados tan pronto como sea posible. Lavar la zona afectada con abundante
agua y jabón al menos durante 20 minutos. Buscar atención médica inmediata.
Ocular: Lavar los ojos con abundante agua corriente al menos durante 20 minutos. Levantar y separar los párpados
para asegurar la eliminación completa de la sustancia química. Buscar atención médica inmediata (oftalmólogo).
Respiratoria: Retire a la víctima lejos de la fuente de exposición hacia un área ventilada. Si no respira administrar
respiración artificial. Si respira con dificultad administrar oxígeno. Buscar atención médica inmediata

 Sulfato de amonio ferroso

Indicaciones generales: En caso de pérdida del conocimiento nunca dar a beber ni provocar el vómito.
Inhalación: Ir al aire fresco.
Contacto con la piel: Lavar abundantemente con agua. Quitarse las ropas contaminadas.
Ojos: Lavar con agua abundante manteniendo los párpados abiertos.
Ingestión: Beber agua abundante. Provocar el vómito. En caso de malestar, pedir atención médica.

 Permanganato de potasio
Inhalación: Causa irritación de nariz y tracto respiratorio superior, tos, laringitis, dolor de cabeza, náusea y vómito. La
muerte puede presentarse por inflamación, edema o espasmo de la laringe y bronquios, edema pulmonar o
neumonitis_química.
Contacto con ojos: Tanto en formas de cristales como en disolución, este compuesto es muy corrosivo.
Contacto con la piel: La irrita y en casos severos causa quemaduras químicas.
Ingestión: Se ha observado en humanos que una ingestión de 2400 µg/Kg/día (dosis bajas o moderadas) genera
quemaduras en tráquea y efectos gastrointestinales como náusea, vómito, ulceración, diarrea o constipación y pérdida
de conciencia. Con dosis mayores se ha presentado anemia, dificultad para tragar, hablar y salivar, En casos severos se
han presentado, además de los anteriores, taquicardia, hipertermia (aumento de la temperatura corporal), cansancio,
daños a riñones y la muerte debida a complicaciones pulmonares o fallas circulatorias.

5.2 Fundamento y Manejo del Equipo

Espectrofotómetro de absorción
La espectrometría de absorción atómica es una técnica para determinar la concentración de un elemento metálico
determinado en una muestra. Puede utilizarse para analizar la concentración de más de 62 metales diferentes en una
solución.

La técnica hace uso de la espectrometría de absorción para evaluar la concentración de un analito en una
muestra. Se basa en gran medida en la ley de Beer-Lambert. En resumen, los electrones de los átomos en el atomizador
pueden ser promovidos a orbitales más altos por un instante mediante la absorción de una cantidad de energía (es decir,
luz de una determinada longitud de onda). Esta cantidad de energía (o longitud de onda) se refiere específicamente a
una transición de electrones en un elemento particular, y en general, cada longitud de onda corresponde a un solo
elemento.
Como la cantidad de energía que se pone en la llama es conocida, y la cantidad restante en el otro lado (el
detector) se puede medir, es posible, a partir de la ley de Beer-Lambert, calcular cuántas de estas transiciones tiene
lugar, y así obtener una señal que es proporcional a la concentración del elemento que se mide.

Para analizar los constituyentes atómicos de una muestra es necesario atomizarla. La muestra debe ser
iluminada por la luz. Finalmente, la luz es transmitida y medida por un detector. Con el fin de reducir el efecto de
emisión del atomizador (por ejemplo, la radiación de cuerpo negro) o del ambiente, normalmente se usa un
espectrómetro entre el atomizador y el detector.

6. Bibliografía
 Flores-G, Alejandro, "Manual de Bromatología", UNAM: FES Zaragoza, México: 2017.
 Norma Oficial Mexicana NOM-117-SSA1-1994, bienes y Servicios. “Método de Prueba para la determinación
de Cadmio, Arsénico, Plomo, Estaño, Cobre, Fierro, Zinc y Mercurio en Alimentos, Agua Potable y Agua
Purificada por espectrometría de Absorción Atómica”,
 https://quimica.unam.mx/wp-content/uploads/2016/12/15permanganatok.pdf
 https://www.ctr.com.mx/pdfcert/Sulfato%20Ferroso%20Amoniacal.pdf
 http://www.inr.gob.mx/Descargas/bioSeguridad/ClorhidratoHidroxilamina.pdf
 https://quimica.unam.mx/wp-content/uploads/2017/05/HDS-Acido-sulfurico-NOM-018-2015-MARY-MEAG-
Hoja-de-datos.pdf
 http://www.insumos-labcentral.unlu.edu.ar/sites/www.insumos-labcentral.unlu.edu.ar/files/site/O-
Fenantrolina%201%20H2O%20%281%2C10-Fenantrolina%201%20H2O%29.pdf