UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN

MARCOS
Universidad del Perú, DECANA DE AMÉRICA
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMIC

QUIMICA ANALITICA
INSTRUMENTAL
CUANTIFICACION DE CAROTENOIDES EN EL
EXTRACTO ETANÓLICO DEL FRUTO DE Physalis
peruviana (“AGUAYMANTO”)
DOCENTE:
QUISPE JACOBO, Fredy E.
GRUPO N° 2:

 Bravo Ortiz, Cristina

 Moloche Diaz, Marianela
 Quinto Berrocal, Sharmely
 Quispe Palacios, Iris

DIA DE PRÁCTICA:
Viernes 2-6pm

2015
 I. INSTRODUCCION

Según el Dr. Antonio Brack (2010), el Perú consta de un alto sitial en diversidad de
frutas con unas 623 especies, algunas de ellas desconocidas para el mundo e
incluso para el hombre de la ciudad del país. Entre las especies más conocidas, en
la zona andina dice Brack que destacan: el aguaymanto (Physalis peruviana L); el
capulí (Prunus capulli, Rosácea); la chirimoya (Ancona cherimola, Annonaceae); la
lúcuma (Pouteria lúcuma, Sapotaceae); el Pacae (Inga feuillei, Leguminosae);
Pepino (Solanum muricatum, Solanácea); tomate (Lycorpesicon esculentum
Solanácea); el tumbo serrano (Passiflora pinnastititpula); la tuna o nopal (Opuntia
sicus-indica, Cactaceae). 1

La fruta que se va a estudiar es el aguaymanto (Physalis peruviana L), este fruto a

pesar de ser originario del Perú, Colombia es el país que lo aprovecha más con las
investigaciones que van haciendo en biotecnología, conservación, transformación,
etc. Hoy en día se están desarrollando investigaciones en manejo agronómico, pos
cosecha, transformación y aprovechamiento de sus bondades nutricionales y
farmacológicas. 2

Así que dentro de sus propiedades tenemos que es un alimento energético natural,
ideal para niños, deportistas y estudiantes, por su alto contenido de vitaminas A, C
y algunas vitaminas del complejo B.2 El contenido de proteína y fósforo,
excepcionalmente altos, son indispensables para el crecimiento, desarrollo y
correcto funcionamiento de los diferentes órganos humanos. Es recomendado
durante el tratamiento de las personas con problemas de la próstata gracias a sus
propiedades diuréticas y además es utilizada como tranquilizante natural contra el
estrés por su contenido de flavonoides.

“El aguaymanto es una maravilla que nos ofrece la naturaleza por ser una fruta que
brinda numerosos beneficios a la salud, por lo que se aconseja consumirla con
regularidad”, destacó la directora de Medicina Complementaria de EsSalud, doctora
Martha Villar López. La especialista señaló que el aguaymanto por su gran cantidad
de antioxidantes, también combate la hipertensión arterial, la ansiedad y estabiliza
el nivel de glucosa en la sangre, por lo que se recomienda su consumo en personas
con diabetes.3

Lo que se va a desarrollar es el estudio y cuantificación de carotenos en el

aguaymanto. Con la ayuda de espectros del extracto etanólico del fruto mencionado.

CUANTIFICACION DE CAROTENOIDES EN EL EXTRACTO ETANÓLICO DEL FRUTO DE Physalis peruviana 2

(“AGUAYMANTO”)
II. MATERIALES

III. EQUIPOS Y REACTIVOS

IV. PROCEDIMIENTO
4.1 Determinación de Solvente
4.2 Obtención del Espectro de Carotenoides

- Se realizo el barrido desde 360nm hasta 600nm, hasta 0.05 de

absorbancia a extracto ETANÓLICO DEL FRUTO DE Physalis peruviana
(“AGUAYMANTO”)

V. RESULTADOS
5.1 Evaluacion para la selección de solvente
5.2 Determinacion de la acidez del extracto ETANÓLICO DEL FRUTO DE
Physalis peruviana (“AGUAYMANTO”)
5.3 Evaluacion del Espectro del extracto ETANÓLICO DEL FRUTO DE
Physalis peruviana (“AGUAYMANTO”)

Longitud Absorbancia (A) Promedio

de
onda(nm)
420 0.048 0.052 0.051 0.052 0.05075

449 0.037 0.041 0.040 0.041 0.03975

480 0.017 0.022 0.022 0.022 0.02075

CUANTIFICACION DE CAROTENOIDES EN EL EXTRACTO ETANÓLICO DEL FRUTO DE Physalis peruviana 3

(“AGUAYMANTO”)
 750 0.001 0.001 0.002 0.002 0.0015

440 0.034 0.042 0.041 0.049 0.0415

470 0.021 0.028 0.028 0.035 0.028

449 0.033 0.040 0.040 0.047 0.04

Figura 1 : Datos de las longitudes de onda con sus respectivas absorbancias:

Se realizo el barrido desde 360nm hasta 600nm, hasta 0.05 de absorbancia figura
1

Figura 1 : Espectro
UV-visible del
extracto etanolico
del fruto de physalis
peruviana (Allende
2015)

5.4. Cuantificación de carotenoides: Determinación cuantitativa

dcarotenoides por espectrofotometría ultravioleta/visible.

CUANTIFICACION DE CAROTENOIDES EN EL EXTRACTO ETANÓLICO DEL FRUTO DE Physalis peruviana 4

(“AGUAYMANTO”)
La propiedad de los carotenoides para absorber luz en el rango UV cercano y en el
visible, es utilizada para la cuantificación de los mismos en solución, por medio de
la Ley de Lambert- Beer . El problema principal cuando se aplica esta ley es conocer
el valor del coeficiente de absorción específica (ver figura Nº 5) o coeficiente de
extinción molar (εmol) para un carotenoide dado. El coeficiente de absorción
específica, representa la absorbancia teórica de la solución de 1.0 g de pigmento
en 100 mL de solvente (C) medido en una celda de 1 cm de espesor 1

La cantidad X (mg) de un carotenoide presente en un volumen V (mL) de solución

puede calcularse con la siguiente ecuación:

CUANTIFICACION DE CAROTENOIDES EN EL EXTRACTO ETANÓLICO DEL FRUTO DE Physalis peruviana 5

(“AGUAYMANTO”)
Figura 2: Coeficiente de absorción específica usados para la cuantificación de
carotenoides (Burgos.2009)

La cuantificación de carotenoides en general se basara con los β-carotenoides , el

más abundante teniendo un longitud de onda de 449nm (figura.2) , el coeficiente
de absorción específica de 2592 ;con una absorbancia experimental de 0.03975
(figura .1) , volumen de 20ml de extracto etanólico en 5g de muestra .

Reemplazando:

1000
𝑥 = 0.03975 ∗ 20 ∗
2592 ∗ 100

10−3 𝑚𝑔
X = 3.067 ∗ 20𝑚𝑙
𝑚𝑙

CUANTIFICACION DE CAROTENOIDES EN EL EXTRACTO ETANÓLICO DEL FRUTO DE Physalis peruviana 6

(“AGUAYMANTO”)
X=0.06113 mg de β-caroteno en 20ml de extracto etanólico y en 5g de muestra

La concentración de carotenoides totales cuantificados es expresada como el

promedio de las concentraciones en mg de β-caroteno /100g de muestra

Entonces se obtiene que 1.2226 mg de carotenoides /100g de muestra

VI. DISCUSIÓN

En la figura 1 se obtuvo un pico alto a 420nm con una absorbancia Max de 0.5075
A , a comparación a lo descrito en la figura 2 se observa que a longitud de onda
449nm se encuentra β- caroteno , carotenoide más abundante. En la figura 1 su
posición de máxima absorción puede variar dependiendo de la interacción de estas
moléculas con el solvente o el medio lipídico en el cual ha sido disuelto. En general,
los solventes de baja polaridad poseen poco efecto sobre la posición de máxima
absorción, por ello para un determinado carotenoide, los valores de longitud máxima
son casi idénticos en el hexano, petrolato líquido, dietil éter, metanol y etanol. La
acetona, usada comúnmente en extractos de carotenoides, causa un
desplazamiento batocrómico alrededor de 2 a 6 nm en la máxima absorción
comparado con los anteriormente mencionados. En cambio, los solventes altamente
polares tales como cloroformo y benceno causan un pronunciado desplazamiento
batocrómico (10 a 25 nm), el desplazamiento es extremo para el caso de disulfuro
de carbono (30 a 40 nm), esto pudo ser una de las causas del desplazamiento
batocrómico de 449 a 420nm1

CUANTIFICACION DE CAROTENOIDES EN EL EXTRACTO ETANÓLICO DEL FRUTO DE Physalis peruviana 7

(“AGUAYMANTO”)
Por poseer un extenso sistema de dobles enlaces conjugados, los
carotenoides suelen ser sustancias coloreadas. Un cromóforo con siete o más
dobles enlaces posee la capacidad de absorber radiación en la región
ultravioleta visible y por consecuencia la absorción de colores que van desde
el amarillo al rojo, y gran variedad de tonos naranja. Como en el ζ-caroteno, el
cual es amarillo suave. La ciclación causa algún impedimento, por tanto el β-
caroteno y el γ-caroteno son de color naranja y rojo-naranja respectivamente,
aunque tienen el mismo número de enlaces dobles conjugados que el
licopeno . La intensidad y matiz de los colores en los alimentos dependen de
cuales carotenoides están presentes, sus concentraciones y estado físico , es
por eso que en el grafico el espectro visible de los carotenoides es bastante
característico en el rango de 400 a 500 nm.

Como ocurre con cualquier compuesto químico, las funciones de los carotenoides
son debidas en última instancia a su estructura química. En el caso particular de
estos isoprenoides, la característica estructural más llamativa es el sistema de d.e.c.
(d.e.c.) característico de sus moléculas, que es el principal responsable de su
espectro de absorción, reactividad, forma, localización en estructuras subcelulares
y de su papel en procesos de transferencia de energía . Así, el número de d.e.c. no
sólo afecta a sus propiedades de absorción de luz y por tanto a su color , sino
también a su reactividad frente a radicales , a la forma de la molécula 3 ,esto pude
relacionarse como otra causa del desplazamiento batocrómico en la figura 1 .

Giraldo Bardalama en la investigación del “EFECTO DEL EXTRACTO

ETANOLICO DEL FRUTO DE Physalis peruviana (“AGUAYMANTO”) SOBRE LA
GLUCEMIA EN ANIMALES DE EXPERIMENTACIÓN” cuenta con resultados
similares con el presentado 4 , variación de los picos se explica por el mecanismo
de cuidado al preparar la muestra debido a la alta conjugación de enlaces dobles
presentes en sus moléculas de los carotenoides se descomponen por efecto de la
luz, la temperatura y el aire. La luz favorece reacciones fotoquímicas que cambian
la estructura original del carotenoide. Fue el oxígeno favoreció la oxigenación de
los enlaces dobles a funciones epóxido, hidroxilos y peróxidos, entre otros. Por
estas razones la extracción de carotenoides se debe preferiblemente realizar en
condiciones de ausencia de luz, a temperatura ambiente o menor, y en ausencia de
oxígeno 5. Además se debe realizar lo más rápido posible, y a partir de tejidos

CUANTIFICACION DE CAROTENOIDES EN EL EXTRACTO ETANÓLICO DEL FRUTO DE Physalis peruviana 8

(“AGUAYMANTO”)
frescos, para evitar la degradación por la acción conjunta de estos factores
adversos. Como estas variaciones que se observan en el figura 1 y 4

Figura 4 : Espectro UV-visible del extracto etanólico del fruto de physalis peruviana
(Bardalama 2014)

La concentración final 1.2226 mg de carotenoides /100g de muestra Physalis

peruviana .Este resultado posee similitud con Encina Zelada. Milber O. Ureña ,
Peralta Ritva Repo Carrasco. Determinación de compuestos bioactivos del
aguaymanto, obteniéndose 1.77mg/100g.6

CUANTIFICACION DE CAROTENOIDES EN EL EXTRACTO ETANÓLICO DEL FRUTO DE Physalis peruviana 9

(“AGUAYMANTO”)
 Obteniéndose como eficiencia del trabajo de 69.2 %

Figura 5 : Cantidad de antioxidantes del Physalis peruviana (Encina 2012)

VII. CONCLUSIONES

 Se evaluó el espectro del extracto etanolito del fruto Physalis peruviana

(aguaymanto). Y en el barrido de longitudes de onda se obtuvo un espectro
con un pico a 420nm con absorbancia máxima de 0.5075 A.
 Se evaluó que según la bibliografía a 449 nm se obtendría un pico de
absorbancia máxima, pero en esta longitud de onda se obtuvo una
absorbancia de 0.3975.
 Luego de realizar la cuantificación de carotenoides mediante
espectrofotometría, según lo descrito anteriormente en el procedimiento se
obtiene un total de 1.2226 mg de carotenoides cada 100 g de muestra.

VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

1. Ministerio de cultura y riego. Fichas técnicas (Actualizada el 8 de noviembre

del 2015; recuperada el 10 de noviembre del 2015) disponible en:
http://minagri.gob.pe/portal/objetivos/32-sector-agrario/frutas

CUANTIFICACION DE CAROTENOIDES EN EL EXTRACTO ETANÓLICO DEL FRUTO DE Physalis peruviana 10

(“AGUAYMANTO”)
 2. Javier A. Aguaymanto – Physalis peruviana. ( actualizada el 12 de septiembre
del 2015; recuperada el 10 de noviembre del 2015) disponible en:
http://chaka-runa.org/blog?lang=es
3. Essalud. El aguaymanto es la fuente de la eterna juventud. (Actualizado el
18 de Julio del 2014; recuperado el 10 de noviembre del 2015) disponible en:
http://www.essalud.gob.pe/el-aguaymanto-es-la-fuente-de-la-eterna-
juventud/

1. Burgos Sierra .J .Román calderón Rivera. DETERMINACION DEL

CONTENIDO DE CAROTENOIDES TOTALES EN OCHO ESPECIES DE
FRUTAS Y VERDURAS COMERCIALIZADAS EN LA ZONA
METROPOLITANA DE SAN SALVADOR. UNIVERSIDAD DE EL
SALVADOR. FACULTAD DE QUIMICA Y FARMACIA .2009
2. Martínez Martínez . A. Carotenoides. Universidad de Antioquia .
2003.Medellin
3. Antonio J. Meléndez-Martínez, Isabel M. Vicario, Francisco J. Heredia .
Pigmentos carotenoides: consideraciones estructurales y fisicoquímicas.
Archivos Latinoamericanos de nutrición. Vol. 57 Nº 2, 2 Facultad de
Farmacia. Universidad de Sevilla. 2007. Sevilla, España
4. Bardalama . Giraldo. “EFECTO DEL EXTRACTO ETANOLICO DEL FRUTO
DE Physalis peruviana (“AGUAYMANTO”) SOBRE LA GLUCEMIA EN
ANIMALES DE EXPERIMENTACIÓN” UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR
DE SAN MARCOS . FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. UNIDAD
DE POSGRADO .2014.Peru
5. Briones-Labarca Vilbett. . Extraction of -Carotene, Vitamin C and
Antioxidant Compounds from Physalis peruviana (Cape Gooseberry)
Assisted by High Hydrostatic Pressure. Food and Nutrition Sciences, 2013,
4, 109-118. Published Online August 2013 (http://www.scirp.org/journal/fns)
6. Encina Zelada. Milber O. Ureña , Peralta Ritva Repo Carrasco.
Determinación de compuestos bioactivos del aguaymanto (physalis
peruviana, linnaeus, 1753) y de su conserva en almíbar maximizando la
retención de ácido ascórbico. ECIPERU: Encuentro Cientifico Internacional
.2012.Peru

CUANTIFICACION DE CAROTENOIDES EN EL EXTRACTO ETANÓLICO DEL FRUTO DE Physalis peruviana 11

(“AGUAYMANTO”)