ENSAYOS CON PROTEÍNAS 6

Díaz Tatiana; campillo Elder ; Suarez maría ; cárdenas rugero

;pastrana sorelli ;Celis georgette

Resumen

en el desarrollo de esta práctica se realizaron diferentes ensayos cualitativos(desnaturalización;

solubilidad en etanol; reacción de biuret y reacción de precipitación de cationes ) con el objetivo de
identificar proteínas presentes en muestras conocidas como huevo , la cual finalizó en el reconocimiento
de albúminas; debido a la especificidad de cada una de estas pruebas y a las características estructurales
de la proteína que se utilizó se consiguió reconocer la presencia o ausencia de ellos en las muestra
analizada con las diferentes pruebas . Las proteínas son biomoléculas formadas básicamente por
carbono, hidrógeno, oxígeno y nitrógeno. Pueden además contener azufre y en algunos tipos de
proteínas, fósforo, hierro, magnesio y cobre entre otros elementos. Pueden considerarse polímeros de
unas pequeñas moléculas que reciben el nombre de aminoácidos y serían, por tanto, los monómeros o
unidad de proteínas. Los aminoácidos están unidos mediante enlaces peptídicos. La unión de un bajo
número de aminoácidos da lugar a un péptido; si el número de aminoácidos que forma la molécula no es
mayor de 10, se denomina oligopéptido, si es superior a 10 se llama polipéptido y si el número es superior
a 50 aminoácidos se habla ya de proteína. Por tanto, las proteínas son cadenas de aminoácidos que se
pliegan adquiriendo una estructura tridimensional que les permite llevar a cabo miles de funciones.

PALABRAS CLAVES

Proteínas- biuret -reacciones -desnaturalización –solubilidad -cationes

Introducción

Las proteínas son un grupo de biomoléculas caracterizados por su gran variedad estructural y enorme
diversidad de funciones biológicas. Las proteínas de cada ser vivo, animal o vegetal son específicas ya que
están codificadas por su genoma. A pesar de que desempeñan la misma función, las proteínas presentan
ligeras variaciones estructurales en las diferentes especies. Químicamente pueden diferenciarse en
proteínas simples, constituidas únicamente por aminoácidos y proteínas complejas que contienen
material adicional como carbohidratos, lípidos o ácidos nucleicos. Las proteínas pueden variar sus
características de solubilidad mediante alteraciones en el medio acuoso en el que se hallen disueltas.
Cuando una proteína se disuelve en agua, las fuerzas hidrofílicas, electrostáticas y los puentes de
hidrógeno, participan positivamente, aportando un mayor grado de solubilidad entre más efectivas sean
estas interacciones. Sin embargo factores físicos como el calor, radiaciones, variaciones en los valores de
pH y la presencia de solventes que afecten estas interacciones, pueden producir serias alteraciones en la
solubilidad. Algunas veces pueden ocurrir cambios en la estructura nativa de la proteína y se considera
que en estas condiciones la proteína se ha desnaturalizado. El fenómeno físico observado en este caso, es
la formación de un coágulo o proceso de coagulación

MATERIALES

 6 tubos de ensayo
 Gradilla
 Pipetas
 Beaker
 Pinzas
 Baño maria
 Pipetiador
 Huevo
REACTIVOS
 Etanol
 Naoh al 10%
 Hcl
 Cuso4 al 1%
 Cuso4 al 10%
 Naoh

Métodos

 Desnaturalización
1. Tomar 3 tubos de ensayo márcalos A-B-C y adicionar a cada uno 3 ml de la solución de
albumina
2. Al tubo de ensayo A calentar hasta coagulación
3. Al tubo de ensayo B adicionar una gota de HCL concentrado
4. Al tubo de ensayo C adicionar una gota de NAOH
5. Anotar observaciones
 Solubilidad en etanol
1. A un tubo de ensayo adicionar 3 ml de la solución de albumina y 5 ml de etanol
2. Observar
 Reacción de biuret
 1. En un tubo de ensayo adicionar 3 ml de la solución de albumina ; 1ml de NAOH al
10% y una gota de CUSO4 al 10 %
2. Anotar observaciones
 Reacción de precipitación de cationes
1. En un tubo de ensayo adicionar 3 ml de la solución de albumina y 3 ml de cuso4 al
10%
2. Anotar observaciones

RESULTADOS Y DISCUSIONES

 DESNATURALIZACIÓN
1. Tubo A

En la solución de albumina se confirmó la presencia de proteínas debido a la coagulación total en el

tubo (color blanco) debido principalmente a la aplicación de calor ya que por encima de 60º C estas
son inestables haciendo disminuir su solubilidad y generando la precipitación.

2. Tubo B

Se obtuvo un precipitado color blanco debido a que el ácido clorhídrico aumenta la concentración de
protones del medio, (disminuye el pH). El exceso de protones cambia las cargas de los grupos
ionizables que permiten mantener la estructura terciaria de la proteína (albùmina), así como t ambién
afecta las uniones puente de hidrógeno de la estructura secundaria. La pérdida de todas las
estructuras proteicas, (excepto la primaria), se conoce como desnaturalización, y tiene como
consecuencia la pérdida de las funciones biológicas.

3. Tubo C

No se observaron cambios a simple vista aunque la desnaturalización de las proteínas están

provocadas por cambios en el pH (ya sea aumentarlo o disminuirlo) o en la temperatura, o bien por el
tratamiento con sustancias desnaturalizantes. El NaOH al ser una base, aumenta el pH con lo cual se
produce esta desnaturalización de las proteínas de la clara de huevo.

 SOLUBILIDAD EN ETANOL
Observamos una coagulación suspendida luego de un tiempo de haber agregado el etanol esto
se debe a que Las cadenas de proteínas que hay en la clara de huevo, denominadas proteínas
globulares, se encuentran enrolladas adoptando una forma esférica. Al añadir etanol ocurre lo
mismo que cuando se fríe un huevo, las cadenas de proteína se desenrollan y se forman
enlaces que unen unas cadenas con otras. Este cambio de estructura da a laclara de huevo la
consistencia y color que se observa en un huevo cocinado.
 REACCIÓN DE BIURET

Se observó un cambio de color transparente a violeta esto se debe a que La prueba de Biuret (sulfato
cúprico en medio alcalino) es positiva para todos los compuestos que tengan dos o más uniones
peptídicas. La coloración púrpura de una reacción positiva se debe a un complejo de coordinación
entre el Cu+2 y cuatro átomos de nitrógeno proveniente de enlaces peptídicos y los pares de
electrones no compartidos del nitrógeno que forma parte de los enlaces peptídicos.

 REACCIÓN DE PRECIPITACIÓN DE CATIONES

Se observó un cambio de color transparente a azul. Al agregar el reactivo de sulfato de cobre a la

solución de albumina se debió dar una coloración violeta pero en este caso la coloración fue azul
claro lo que nos quiere decir que la prueba dio negativa ya que hubo presencia de aminoácidos.

CONCLUSIONES
 La mayoría de las proteínas pierden su función biológica cuando están desnaturalizadas,
por ejemplo, las enzimas pierden su actividad catalítica, porque los sustratos no pueden
unirse más al centro activo, y porque los residuos del aminoácido implicados en la
estabilización de los sustratos no están posicionados para hacerlo.Es decir la
desnaturalización es irreversible
 Las proteínas son los constituyentes químicos fundamentales de la materia viva.
Constituyen alrededor del 50% en peso seco del cuerpo. Los glúcidos y lípidos se
encuentran en las células como simples sustancias inertes (excepto algunos lípidos que
actúan como hormonas y vitaminas), sin embargo, las proteínas presentan actividad vital
desempeñando múltiples funciones
 Químicamente las proteínas tienen una característica esencial, además de contener en sus
moléculas C.H y O presenta N y en muchos de ellos S y P. Las proteínas están
constituidas por la unión de numerosas moléculas sencillas (monómeros) denominados
aminoácidos.

Bibliografía
 https://es.slideshare.net/yoselinnlilian/monografia-proteinas
 https://www.coursehero.com/file/p34oupkc/agregar-el-reactivo-de-sulfato-de-cobre-
mas-la-solucion-de-la-alb%C3%BAmina-de-huevo/
 http://www.monografias.com/trabajos93/desnaturalizacion-proteina-temperaturas-y-ph-
extremos/desnaturalizacion-proteina-temperaturas-y-ph-extremos.shtml