Aanales de la Facts de Medici ISSN 1025-554, ‘Universidad Nacional Mayor de San Marcas Vol. 57.N°4- 1996 Copyright @1996 Pigs, 278-281 Los Radicales Libres y las Defensas Antioxidantes. Revisién. MARIA MONTERO. Depurtamemo de Bioquinica y Biologta Molecular. Universidad de Saniiago de Compasteln. Bspane. RFSUMEN: la vida de los oryanismos acrobios, es decir, aquetios que usan el oxfgeno como medio para conseguir eneryta, existe el peligro de que sus defensas antioxidantes se vean sobrepasadas por las fuerzas oxidantes. Esta situa ‘denomfnada estrés oxidativo, es ln base de uma serie de aberraciones fislolégicas en los mamiferos, que inclaye ‘carcinogénesis, enfermedades cardiovascnlares, enfermedades del sistema inmute, cataratas, enfermedades cere bralese, incluso, el mismo proceso de envejecimiento. La causa de estas situaciones es el daiio oxidative originado ene DNA, lipides y proteinas por los denominades oxiradicales, Frente a estas especies oxidantes, tos organismos vivos han desarrollado una serie de mecanismies de defensa anthoxidantes, tanto de naturaleza enzimatica como no enzimitica, y que se hallan presentes tanto en el prepio organismo como en la dieta ingerida. En recientes investi- ‘gaclones se establece una relacion entre la produccién de oxiradlcalesy la aparicion de enfermedades degenerstivas, ‘as{ como la posibilidad de usar la dieta como una terapla antioxidant, Palabras clave: Radicales libres, Estrésoxidativo, Antioxidartes. FREE RADICALS AND ANTIOXIDANT DEFENCES SUMMARY = Inaerobic life, that is to say, in organisms that use oxygen to obtain energy, there Is danger that their antioxidant defences are overcome by prooxidant forces. This situstion, called oxidative stress, is the basis of a wide array of physiological aherrationsin mammals, including carcinogenesis, cardiovascular diseases, insmvune system diseases, ‘cataracts, brain dystuntions and, even, the aging process. The source ofthese situations isthe oxidative damage DNA, lipids and proteins by oxyradicals. Against these oxidant spectes, living beings have developed a series of ‘mechanisms of antioxidant defence, enzimatic and non enzimatic, that are present in both their organisms and ingested diet. In recent investigations the relation between oxyradicals production and the appearence of degenerative diseases is established, as well us the possibility to use the diet as an antioxidant therapy. A review of these studies is made. Key words: Free radicals, Oxidative-sress, Antioxidants. LOS OXI-RADICALES oxigeno ('). Se originan como consecuencia de la re- El oxigeno molecular apareci6 en la atmésfere como contami- dcci6n parcial del oxigeno a través de una serie de pnante en un ambiente reductor, siendo un subproducto de la des. transferencius monoelectsénicas. composicién del agua en hidrogeno. Entonces, ciertos organis ‘mos empezaron a usarlo como medio de obtencién de ene ‘apareciendo asi los serex aerobios. Por otro lado, estos mistnos crearon mecanismos de defensa antioxidantes, para protegerse de oO +e = 0, tle +2 > Ho, tle +IK > OH + HO ls toxividad de las especies de oxigeno parcalmente reducidas OH tie +1H > HO Estas especies se denominan especies reactivas del oxigeno 0, +4 44 > 20 (RSOs) (), oxisadicales @) 0 intermediarios de la reduccién del : ‘Como podemos ver, la reduccién monoelectednica Correspondencia. del oxfgeno da lugar ul radical anin superdxido, Ta Marlo Pe Montero Torrero ielecténica al perbxido de hideSgeno ya triclectnica ‘Dpto. de Biogutnicay Biol. Molecular. Faceted de Farmacia. al radical hidroxilo, La razéa de estas vedueciones Unio. de Santiago de Compostela. Expos ;, pete: Eps monoelectrinicas es que la molsculas de oxigeno po: 278‘ales de la Facultad de Medicina see 2 eleewones desaparcaos en orbitals X antienavantes, fo que disminvye su capacidad de revceiGn y hace que se vea obligada a saceptar Jos electrones de uno en uno (9), Hemos de sear que el penxido de hicidgen no es propiamente un ratical ibe, ya que no tiene ningin eleetén desspareado. Otra especie reactiva del oxigeno es el oxi 1 OF que posee el mismo nimero ele- twonieo que el oxigeno molecular, pero presenta las dos electones desapareados (*). Asimismo, existen productos de peroxidaci¢ lipiica, como los radiales hidsoperoxito y peroxily, que pued acivar como oxidantes. Las especies reactivas radical unién superbxido y perdxido de hidrdgeno pueden combinarse mediante la rcein de Huber-Weiss Y ovignar el radical hidroxilo ). Pero esta reucciGn, aunque ter- ‘modinsmicamente favorable, einéticamente es piuy lent, por Io que necesita de catalzadores metlicos. como el bier 0 el cobre siendo éste el mecanismo propuesto Fe) 402 Fee + Fe? HO, > Fev + oO > Oo + De todas las especies reducidas del oxigeno, sin duda, la mis daitna es el radical hidronilo, Su alta toxicidad se debe a que po- see una vida muy corta (10* segundos) y una alta reactividad, que Je permite interactuar con todo tipo de sustrates. En camio, otras especies, como el persxido de hidn'geno, son més estables, por Io que pueden difundir grandes distancias y elegir ls motécula sobre la que aettan (%. El radical hidréxilo, por tanto, actéa sobre todo tipo de biomoléeulas. Asi, en los lipides. provoca pevoxidacién lipidica de las membranas, en fas proteinas, da lugar a inactivacién cnizimética, en el DNA, ocasiona mutaciones y, en tos ghicidos, puede provocar alteraciones en los receplores cclulares () Dentro de las fuentes de sustancias oxidanles, enemas dos ‘grupos 1) Lax endégenas: Cadenas de transporte electrénico mitocondrial, peroxisomal y microsomal (citocromo P-450 Y citocromo b5), enzimas citoplasméticas (como la XOD, catecolamina y riboftavina) y enzimas fagociticas (como Ja micloperoxidasa y 1s NADPH-oxidasa), Las exdgenas: Xenobidticos (benzopireno, quinonas, bipiridilos), e! humo el cigaro, cierios componentes ée la dicta (salex de hicrro y cobre y compuestos fendlicos), las radjaciones y la hiperoxis, Un primer grupo de fuentes endégenas de RSOs lo constitu. yen las caderas de transporte electrénico. En condiciones rormales, estas cadenas de. transporte son tan eficaces que ningtin elecudn se escapa a elas. Sin embargo, pueden exis- tir fugas en éstas por ruptura de la cadens o interaccién con xewobiticos (), Asf, en el caso de le cadena de transporte milveondrial, se ha comprobado que, tanto le ubiq come eierox eomplejos fero-xblivrados, un preven 2) ny Val. 57. N64 1996 anfimicins A, se sitooxidan, dando lugar a ke pérdida de eleetrones y- fa formacid de swperixid, Asinnsino, et bs wadens de teansporte peroxisomal. intervienes las Tavinonidhsas, que proneen persxide de hidhigeno, que puetle excapar el calens y originar radial hidosilo. Por ‘timo, en la yicrosomal, tambidn puede produvine certs {ngs electeinics, cuando la oxidacisn el susirate no est ign acoplada al flujo eleetednico, tanto en el ease de compuestous endégenos (prostaglandinas, deides grasos) cus del tipo del benzopireno) Ora fuente endégena de RSOs es Ia fagocitosis activa por feucocios, en la cual estas esl 3 tancias oxiduntes como el super6xit, el perixidl de hides- geno, los dxidos de nittdgeno y el hipoctoivo para atacar a virus y bacteria Por sino, En primer lugar. estn los xenohisticos. como las quinonas Fipitidilos e hidrocarhueos sromtions. que intervienen en |i formacin de RSOs. via citocromo P-450 y cielo redox Exte ciclo redox puede definine vor un proceso en el cl un mediador de bajo PM (lel ipo del FADD) scxpta-un elee- 1r6n de un compuesto reducido y transfiere el electtén a ofgeno para produir superéxido (). Este compnesto re ducid puede ser tanto enckigeno (uhiquinona) como exégeno (enobidvicos de tipo quinonss y hpiriles) y la reaeein es eatalizada por seductasax NAD(P)-H depeniente. de natralena lavoproteiea y de baja selectividad por el strato. Cube setalar que 1a canidad de superéxido praucida por esta vias superior a la esteyuiomérica, Adeamis. tenemos los Oxidos de nittigeno del nme del ek: unillo, que se ba eomnprobado que aumentan fy oxidacign dle mokéculas y disminuyen fos antioxidants. Tam 1m las sales de hierro y eohre, que aumentan a producci¢n dle oxiradicules via resceidn le Fenton. y los eoimpuestos fenélicos de plantas, que provocan un sttnento de las oxids- ciones via cielo redox (), Por domo, exten otras tuentes, como las raliaciones y la biperoxa meric as ftentes endl LAS DEFENSAS ANTIOXIDANT! Los organismas aerobies disponen de una haterfa de detensas antioxidantes, para protegerse frente a la produccidn de oxi cales. Un antionidante puede delinisse como cualquier sustancia que, presente a bajas concentraciones comparadas cam las del sustato, retrasa signficativamente 0 previene la oxidacign de di- cho sustrato, El téimino “sustralo oxidable” incluye todo tipo de biomoléculas: ghicidos, Npidos, proteinas y DNA (*). Esencialmente, las defensas antioxidantes se dividen en dos grandes grupos: los enziméticos y los no enzimaticos: 1) Les envimticos etin presentes en el onganisno de los seres Vives y proegen free a los RSOx producios durate et te- tabolisino, Dentro de éstos, tenemos 3 principales: la superSxide dismatasa (SOD), la ealasa (CAT) y la gloatin petoridasa (GPX), ali[Anales dela Pacltad de Medicina = La SOD (EC. 1.45.11) cataliza Ia dismutacion del anién superixido, ovginando perdxido de hidrégeno. Existen dis- tint formas, dependiendo del metal del certo eataitio: Zn, Cu-SOD eitoslic, la Mo-SOD mitocondtal y la EC* SOC extrvellar ("). La CAT (EC. 1.1116) es un enzims teranrica que eatalza la descomposicisn del perdxida de hidrSgeno en agua, Els presen en mayoria de las éhias eucariots,lcalinindose “nivel de los peroxisomas ("). Por lkimo, esté la GPX (EC. 1.11.19), que también cont- buye a la eliminacisn del perdxido de hidrigeno pero, 2 dif rencia de la CAT, que usa el perSxido de hidrégeno como dador de cleewonss, uiliza el glsttin reduc. Existen dos formas: la selenio dependiente y a seleio independiente y, en vertebraos, se encuentzan en el itosoly en ls mitocondsias (), Ademis sé la gluatién reductasa (GR, EC. 1.642), que se encatga de mantener la proporcidn GSHIGSSS. Los antoxidanes no enzimalicos estin presentes en la dita ingerida por los sees vivos, sobre todo en as frtas verdu- ras, Ses pinipaes caractefsticas son que son sustancias ca paces de newualzar un ica suc libre por mokul (cae dores estequomséticos), slo atian a eonecnrecones eleva das y tienen un papel desprcisble fente alos anteriores Un primer grupo de antioxidants no enzimiticos lo eonstit- yen moléculas reductoras de pequetio tamato e hidrosolubls. Deno de ella tenemos al glatin reducido y el ascorbato 0 vitamina C. Pueden actuar tanto como pro o antioxidanes. ‘Asi, pueden autooxidarse,specialmente en presencia de me tales, para produir RSOs. Al ser hiroins, no son efeti- ‘vos frente a Ia peroxidacién lipiica ("). Un segundo grupo de antioxidantes no enzimsticos son las vitaminas liposlubles. Aqui estén el atocoterl 9 vitamina E, que ex capa de imped les reacionesen cadena produc «das por los tadcales hidroperoxilo dorane la peroxidacién lipidica (") y el a-curoteno, que offece una protecién eficaz Irente al oxigeno singlet (* 2 ENFERMEDADES DEGENERATIVAS OCASIONADAS POR LOS RSOs Existen nomerosas enfermedades que se han vinculado 3 Ia formacién de RSOs e, incluso, el mismo proceso de envejecimien to. Tenemos aquf algunos ejemplos Carcinogénesis Se ha comprobudo la participacin de lox RSOs en ki ién y promocién de la carcinogénesis. Pueden actuar como ini- ciadores y/o promotores, causan dae en el DNA, activan procarcinégenos y alteran el sistema de defensa antioxidants (") Infeccién crénica, inflamacién y céncer: Los fagocitos usan para combatir contra los organismos pal6genos une batorfe de oxidantes (NO, superSxido, peréxido de hidrégeno, hipoclorito), Estws especies pusden euusar dao 280. Vol. 57. N84 1996 cen el DNA, mutuciones y, pot lo tanto, eéneur. Alguoos ejem plos: los virus de la heptitis A y C son la mayor causa de hapatecareinoma. La esquistomatosis puede provocar cincer de colon. Parisitos hepsticos, como el Opistorchis viverrini y el Chlonorchis sinensis, aumentan el riesgo de colangiocarcinome, La exposicién « asbestos causa inflamacidn erénica y cincer de pulmén (*), Tabaco y cancer: El tabuco posee una gran cantidad de sustancias carcindgenas, (como los dxidos de nitrégeno) y es la causa de la tercera parte de los ednceres en EE-UU. Asi, el radical NO puede reaccionar con el radical superéxido para dar lugar al peroxinitrilo y con el radical peroxilo para originar el alquil peroxinitilo, ambus expe- cies fuertemente oxidantes (*) Enfermedades Cardiovaseulares: Las rezcciones de oxidacidn juegan un importante papel en la aterogénesis 9 la enfermedad vascular esté relucionada con bajas concentraciones en plasma de ascorbato, c-tocoterol y B= caroteno. Una mayor evidencia es que la oxidacién de la apolipoproteina B100 por productos de ls peroxiducidn lipidice hace que éta sez reconocida por lx LDL y xea exptada por lor macr6tagos, lo que conéice 4 Ia formacién de placas, aeroescleréticas (") Enfermedades det sistema inmunitario Por estudios in vitro, se ba eomprobado que los leveocitos polimorfonucleares y los macr6fagos pueden inbibir lx prolife: racidn de linfocitos a través de la produceién de RSOs, PG E, y NO y, por tant, disminuye las delensas del individuo (") Cataratas Se ha demostrado que, tanto el tabaco como las radiaciones, son las principates causas de apuricién de cataratas. En esta patologia, fas protefnas de los ojos presentan mis de un 60% de vs residuos de metionina oxidados ("). Asimismo se bu visto aque los antioxidantes de ls dieta retardan los procesos destructives cn la retina y en et epitelio retinal que conducen # la degenera ign de la mécula (*). Disfunciones generales Los RSOs son causa de algunss patologias eerebrales. come 1a isquemnia cerebral, la enfermedad de puskinson y la exclerosis Jateral amiotrtica. Asi, por ejemplo, tenemos que en los pacien- tes packjasonianos se ba encontiado uns alta euntidad de DNA en nevronas dopaminérgicas. En la isquemia cerebral, liberan grandes eantidudes de hier, que es ua importante catalizador en la formacion de RSOs. La mayor evidencia de lu rlucin en- tre desérdenes neurol6gicas y formacién de RSOs ex la fuerte relucién entre la esclerosis lateral amiotsfiew y lay mutaciones en la Cu, Zn-SOD, indicando que los RSOs xen fos responsubles de tu degeneracién selestivu de lu neurons motores 2),