INTRODUCCION

Las células de la sangre se han estudiado clásicamente mediante observación directa con el
microscopio de luz sobre frotis de sangre coloreados con tinciones diversas. El desarrollo de la
tecnología, requerido para cubrir las necesidades crecientes de la demanda en estudios de la salud,
permite disponer en la actualidad de equipos automáticos muy sofisticados que realizan un gran
número de estudios en un período de tiempo infinitamente menor. (1)

El uso de estos equipos modernos especializados, con formatos informáticos complejos de alta
precisión, se encuentra en todo su auge y facilita la realización de estudios hematológicos. Sin
embargo, a pesar de los progresos tecnológicos, los equipos modernos no logran suplir todas las
garantías de calidad, en particular en el área de la citología, que requiere verificación conocida como
“revisión manual” detallada de los estudios que marcan alarmas o cuyos resultados muestran
anomalías, que deben ser realizados por personal entrenado en citología hematológica. Aún no ha
sido posible reemplazar el ojo humano que detecta cambios sutiles, particularmente en lo que se
refiere a la calidad de las células y sus características morfológicas. Por esta razón, el uso de estos
modernos equipos complementa pero no reemplaza la labor humana en la revisión detallada de los
exámenes de laboratorio.

Para determinar la cantidad de eritrocitos contenidos en un volumen conocido, basta colocar una
pequeña muestra de sangre en una superficie con espesor y graduación definidos y por medio del
microscopio hacer el recuento, o bien utilizar un contador electrónico.

Para regular la homeostasis del medio interno del organismo y una correcta oxigenación de los
diversos tejidos , las células hemáticas han de mantenerse constantes, esto regulado por la
secreción de eritropoyetina que aumenta su formación en la medula ósea .Las células viejas o
ineficaces para mantener el correcto transporte de oxigeno por disminución de la hemoglobina son
destruidas en bazo . La cantidad de cada linaje celular sanguíneo tiene repercusiones en el estado
de salud de los organismos, con las variaciones normales debidas a la edad y al sexo como por
ejemplo en las mujeres una disminución de esta última. Estos parámetros de disminución o
aumento de células sanguíneas se deben a patologías asociadas .El recuento de células hemáticas,
tanto de eritrocitos como de leucocitos, es una de las pruebas clásicas en la práctica clínica .Estas
pruebas tienen por objeto determinar la concentración de los distintos tipos celulares presentes en
la sangre como los glóbulos rojos, blancos y las plaquetas para determinar reacciones inflamatorias,
repuestas infecciosas, anemias y neoplasias sanguíneas.
OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL:

 Estudiar la realización y la relevancia que tiene el estudio del recuento de células

sanguíneas tanto blancas como rojas en la práctica clínica haciendo énfasis en los niveles
normales y anormales de estas células en el cuadro hemático, el examen de rutina más
común en la clínica.

OBJETIVOS ESPECIFICOS:

 Utilizar de manera correcta el mecanismo de tinción necesaria para observar las células de
linaje blanco como los neutrófilos o linfocitos además de saber diferenciar cada tipo de
célula.
  Identificar los niveles normales de cada una de las células sanguíneas tomando en cuenta
las anormalidades que dan origen a cada una de estas alteraciones
 Conocer las funciones de cada uno de los linajes celulares y las diferencias de cada uno de
estos y la manera correcta de hacer el conteo de estas células.

MARCO TEÓRICO.

Hematopoyesis

La sangre se fabrica en la médula ósea mediante el proceso de la hematopoyesis, que consiste en la

renovación, la división y la proliferación de células hematopoyéticas progenitoras, que constituyen
las células progenitoras para todas las diferentes líneas celulares: eritrocitaria, mieloide, linfoide y
megacariocítica, que van a formar todos los componentes celulares de la sangre. El proceso de
hematopoyesis, de migración y establecimiento de las células en las áreas anatómicas adecuadas
para su desarrollo y posterior proliferación, se conoce con el nombre de haming . Dicho proceso
depende de múltiples factores que afectan el entorno celular, como son: el endotelio medular, las
moléculas de adhesión y las citoquinas, que cumplen con la función de la regulación humoral. Las
células hematopoyéticas progenitoras se caracterizan por su gran capacidad de autorrenovación, la
posibilidad de dar origen a cualquier tipo de célula hematopoyética y de reconstituir totalmente el
sistema hematopoyético de un receptor sometido a un tratamiento mieloablativo.

La sangre se fabrica en la médula ósea mediante el proceso de la hematopoyesis, que consiste en la

renovación, la división y la proliferación de células hematopoyéticas progenitoras, que constituyen
las células progenitoras para todas las diferentes líneas celulares: eritrocitaria, mieloide, linfoide y
megacariocítica, que van a formar todos los componentes celulares de la sangre. El proceso de
hematopoyesis, de migración y establecimiento de las células en las áreas anatómicas adecuadas
para su desarrollo y posterior proliferación, se conoce con el nombre de homing . Dicho proceso
depende de múltiples factores que afectan el entorno celular, como son: el endotelio medular, las
moléculas de adhesión y las citoquinas, que cumplen con la función de la regulación humoral. Las
células hematopoyéticas progenitoras se caracterizan por su gran capacidad de autorrenovación, la
posibilidad de dar origen a cualquier tipo de célula hematopoyética y de reconstituir totalmente el
sistema hematopoyético de un receptor sometido a un tratamiento mieloablativo.

La célula progenitora mieloide (CMP) diferenciada hacia la línea eritrocítica va a permitir la

formación de diferentes células eritroides que, finalmente, formarán el eritrocito a partir de los
progenitores eritroides más primitivos conocidos como BFU-E (Burst-forming unit-erythroid), por su
capacidad de formar colonias multiclúster (erythroid bursts). Estos progenitores pueden formar
colonias de 30.000 a 40.000 células que se “hemoglobinizan” entre dos a cuatro semanas.
Posteriormente, se observan progenitores un poco más diferenciados que son los CFU-E (Colony
forming uniterythroid), los cuales forman colonias eritroides en siete días, no cuentan con la
posibilidad de autorrenovación, proliferan en forma limitada y son muy sensibles a la eritropoyetina.
El compartimiento celular precursor eritroide derivado de los BFU-E y los CFU-E se conoce como
eritrón, y está compuesto por células que se pueden reconocer por sus características morfológicas.
Se reconoce una primera célula que es el proeritroblasto, y posterior y secuencialmente se
distinguen: los eritroblastos basófilos, los eritroblastos policromatófilos, los eritroblastos
ortocromáticos, los reticulocitos y finalmente los eritrocitos.

LEUCOPOYESIS O GRANULOCITOPOYESIS

La célula progenitora mieloide común (CMP) que va a dar origen al linaje leucocitario se puede
orientar a la generación de dos tipos de células: la célula progenitora de megacariocitos y eritrocitos
(MEP) que llevará a la formación de plaquetas y eritrocitos y, por otra parte, a la célula progenitora
de granulocitos y macrófagos, que llevará a la formación de macrófagos, neutrófilos, eosinófilos,
basófilos y mastocitos.

ERITROCITOS

El eritrocito, también conocido como glóbulo rojo, es un disco bicóncavo de 7,8 μ de diámetro y 2,5
μ de espesor. Está compuesto en su mayor parte (33%) por la hemoglobina, que es la única molécula
capaz de transportar oxígeno y ácido carbónico.

La hemoglobina está compuesta por cuatro moléculas de grupo hem y globina; cada molécula de
grupo hem contiene un átomo de hierro bivalente. La globina está compuesta por dos cadenas alfa
y dos cadenas beta; cada cadena alfa está compuesta por 141 aminoácidos y cada cadena beta por
147 aminoácidos. Las hemoglobinopatías son alteraciones en estas cadenas de globinas, como por
ejemplo las talasemias, la drepanocitosis o la anemia de células falciformes, entre muchas otras. El
eritrocito también contiene agua, proteínas no hemínicas, proteínas insolubles, proteínas
enzimáticas, lípidos, fosfolípidos, sodio, potasio, magnesio, fosfatos inorgánicos, nucleótidos,
adenosina trifosfato (ATP), 2,3-bifosfoglicerato (2,3 BPG), glutatión reducido y ácido úrico.

La vida media de los glóbulos rojos es de 120 días. Su energía proviene de la glucosa y para un adulto
el consumo de glucosa será de 15 a 20 g por día. La degradación intraeritrocitaria de glucosa se
efectuará como anaerobiosis en el 90% y como aerobiosis en el 10%.

Función. El eritrocito es la célula encargada del transporte de la hemoglobina que brinda oxígeno a
todos los tejidos.

LEUCOCITOS
 Los leucocitos o glóbulos blancos son células que están principalmente en la sangre y circulan por
ella con la función de combatir las infecciones o cuerpos extraños; pero en ocasiones pueden atacar
los tejidos normales del propio cuerpo. Es una parte de las defensas inmunitarias del cuerpo
humano. Se llaman glóbulos blancos, ya que éste color es el de su aspecto al microscopio. Hay
diferentes grupos de glóbulos blancos, los llamados Polimorfonucleares (neutrófilos, eosinófilos y
basófilos) y los mononucleares (linfocitos y monocitos).

Los leucocitos varían entre 4000 y 11.000 células por mm 3. Están compuestos por cinco tipos
diferentes de células, que son los neutrófilos o Polimorfonucleares neutrófilos, los linfocitos, los
eosinófilos, los monocitos y los basófilos.

POLIMORFONUCLEARES

 Los leucocitos neutrófilos son los más numerosos y porcentualmente los más significativos
que se encuentran. Su función es la fagocitosis que se entiende como si fuera una absorción
y digestión de sustancias extrañas (bacterias, cuerpos extraños, tejidos, etc.). Las formas
inmaduras que aparecen cuando hay un estímulo intenso medular para su producción se
llaman cayados (por la forma del núcleo); suele indicar la existencia de actividad intensa de
las defensas contra infecciones por bacterias.
 Los neutrófilos son leucocitos de tipo granulocítico que se caracterizan por ser células
grandes de 12 a 18 P de diámetro, poseen un núcleo con cromatina compacta segmentada
en dos a cinco lóbulos conectados por finos puentes de cromatina y el citoplasma claro
contiene numerosos gránulos muy finos de tono púrpura. Son el tipo de leucocito más
numeroso en la fórmula leucocitaria. La vida media del neutrófilo en la circulación es de
dos a tres días antes de pasar a los tejidos y, una vez que pasa a ellos, no regresa a la
circulación sanguínea. Función. Participan en la respuesta celular a procesos inflamatorios
o infecciosos de tipo bacteriano.

 Los leucocitos eosinófilos se llaman así por el color rojo en el que aparecen al microscopio
por una tinción con eosina. Suelen estar elevados en ciertas enfermedades causadas por
alergia o por infecciones parasitarias.
  Los eosinófilos son una variedad de leucocito de tipo granulocítico que miden de 12 a 14 μ
de diámetro. Presentan un núcleo bilobulado con cromatina densa en forma de lente y se
caracterizan por su citoplasma lleno de gránulos acidófilos de color naranja que contienen
proteínas. La vida media en la circulación es de doce a veinticuatro horas antes de pasar a
los tejidos. Función. Fagocitosis de complejos antígeno-anticuerpo, destrucción de
parásitos. Participan en reacciones de tipo alérgico.

 Los basófilos suelen tener un comportamiento similar.

 Basófilos Los basófilos son una variedad de leucocitos de tipo granulocítico de 10 P de
diámetro. Contienen un núcleo de cromatina densa en forma de S. En el citoplasma se
encuentran los gránulos basófilos que lo caracterizan y que son gruesos, escasos de tono
púrpura intenso. Son de dos tipos: gránulos azurófilos (lisosomas) y gránulos específicos o
secundarios (histamina, heparan-sulfato, heparina y leucotrienos). La vida media en la
circulación es de doce a veinticuatro horas. Función. Participan en las reacciones
inflamatorias y en las reacciones de sensibilización.

MONONUCLEARES

Los leucocitos mononucleados son los linfocitos y los monocitos. Tienen un núcleo celular único y
pequeño. Sus funciones son las combatir infecciones virales y bacterianas crónicas.
  Los linfocitos son una variedad de leucocitos, de tamaño casi equivalente al de los
eritrocitos, entre 7 y 15 P, que presentan un gran núcleo denso con abundante cromatina,
excéntrico y con escaso citoplasma azul que contiene ribosomas, mitocondrias y aparato
de Golgi. Es el leucocito más pequeño. Función. Participan en la respuesta inmunológica:
los linfocitos B producen anticuerpos contra bacterias y virus, mientras que los linfocitos T
participan en la respuesta inmunológica de tipo celular.

 Los monocitos Son una variedad de leucocitos y son los más grandes de los leucocitos, con
un tamaño aproximado de dos a tres veces el tamaño de un eritrocito. Tienen un núcleo
arriñonado, en ocasiones de aspecto cerebriforme, con abundante cromatina laxa. El
citoplasma presenta finas granulaciones azurófilas que corresponden a lisosomas y puede
presentar vacuolas. La vida media en la circulación es de dos días antes de pasar a los
tejidos. Función. Se encargan de fagocitar restos celulares de microorganismos. Participan
en las respuestas inmunológicas en la presentación de antígenos y originan macrófagos
tisulares.

PLAQUETAS

Las plaquetas son fragmentos de citoplasma de megacariocitos enucleados, redondeados u

ovalados, que miden alrededor de 3 μ × 0,5 μ, con un volumen citoplasmático de 7 fl. Las
plaquetas circulan en forma de discos aplanados. Con la coloración de May-Grunwald-Giemsa se
distinguen dos zonas: una central, que corresponde al cromómero y en la que se encuentran los
gránulos rojo-violeta, y otra zona periférica ligeramente basófila que corresponde al hialómero.

Función. Mantienen la integridad del sistema circulatorio y participan en la coagulación y en

procesos inflamatorios. Cuentan con una vida media entre siete y diez días. La energía de la
plaqueta está asegurada por el catabolismo glucídico: glicogenólisis, glicólisis, ciclo de Krebs, bajo
la forma de ATP. Los lípidos intraplaquetarios representan el 17% del peso seco y están
constituidos por fosfolípidos (77%), lípidos neutros (20,8%), glicoproteínas (1,8%) y gangliósidos
(0,5%). El metabolismo lipídico es muy activo y dentro de la plaqueta se sintetizan fosfolípidos, en
particular ácido fosfatídico, fosfatidilcolina, fosfatidilinositol y, en menor proporción,
fosfatidiletanolamina y fosfatidilserina. El metabolismo de las prostaglandinas también es muy
activo y se lleva a cabo a partir de ácidos grasos poliinsaturados, en particular el ácido
araquidónico.

FORMULA LEUCOCITARIA

La fórmula de leucocitos o leucocitaria mide el porcentaje presente de cada tipo de leucocitos en el

total de glóbulos blancos. Al ser un porcentaje al aumentar un grupo de leucocitos disminuye otro,
aunque en ocasiones solo existe un aumento o disminución de un tipo concreto y por ello solo el
porcentaje ofrece una valoración orientativa pero se debe contar el número total de cada grupo
para saber cuál es la variable a tomar en cuenta.

Para efectuarlo se procede a hacer una tinción como Wright o Giemsa.

Se contabilizan los distintos tipos de leucocitos, usando un “contador de saco” u otro cualquier
artilugio que posibilite el contaje. Pueden cogerse varios campos del microscopio (los mejores, sin
repetirlos) usando el sistema de conteo de dividir mentalmente el campo del microscopio en una
esfera de reloj y ejecutar el contaje sistemáticamente. Lo normal es hacer un recuento de 200 a 300
leucocitos; lo mínimo es 100.

Se realizan los cálculos pertinentes y se pasan a tanto por ciento. Se compara lo obtenido con los
valores normales.
DESVIACIÓN A LA IZQUIERDA

La modificación del porcentaje de leucocitos puede orientar al diagnóstico de enfermedades

infecciosas, inflamatorias, y otros procesos.

Cuando en la medición de leucocitos se ven células jóvenes aparecen los neutrófilos en forma de
núcleo en forma de bastón (cayados), y un aumento del porcentaje de los glóbulos blancos
polimorfonucleares. Este término sugiere infecciones bacterianas agudas.

DESVIACIÓN A LA DERECHA

Se dice cuando el porcentaje de linfocitos y monocitos se encuentra aumentado con respecto al de

los polimorfonucleares (neutrófilos, eosinófilos y basófilos), se asocia en general a enfermedades
víricas.

Otras interpretaciones

La eosinofília, que es el aumento del porcentaje o del número total de eosinófilos, sugiere un cuadro
alérgico o una infección parasitaria. El recuento de leucocitos se realiza habitualmente en un estudio
de hematimetría y recuento leucocitario completo.

VALORES NORMALES

MATERIALES Y REACTIVOS.

 Pipeta diluidora de Thomas

 Cubreobjetos
 Lamina
 Microscopio
 Tincion de Giemsa
 Mechero
 Cámara de recuento de Neubauer
 Pipetas
 Sangre capilar o venosa con anticoagulante
 Alcohol
 Gasa
 Torniquete
 Tubos vacutainer
 Agujas vacutainer
 Capsula vacutainer
 Alcohol antiséptico
 Coloración Wright
 Agua corriente
 Aceite de inmersión.
 Centrifuga
PROCEDIMIENTO

EXTRACCIÓN DE SANGRE VENOSA

 Preparar el material, destapando la aguja descartable y enroscar la parte que posee el

capuchón en la capsula.
 Identificar al tubo
 Explicar al paciente el procedimiento que vamos a realizar.
 Colocarse los guantes desechables
 Colocar cómodamente el brazo del paciente
 Seleccionar el vaso mediante el tacto, así determinaremos la profundidad, calibre,
elasticidad, etc.
 Poner el torniquete.
 Pedir cerrar el puño al paciente.
 Desinfectar el punto de punción con torundas impregnadas de alcohol de 70º.
 Pinchar la piel y posteriormente la vena en dirección contraria al flujo sanguíneo,
con un ángulo entre 15º y 30º respecto a la piel, con el bisel de la aguja hacia
arriba
 Soltar el compresor cuando refluya la sangre e introducir el tubo en la capsula.

ELABORACIÓN DE LA FORMULA LEUCOCITARIA

 Una vez obtenida la sangre se realiza un frotis sobre las placas portaobjetos, dejar secar.
 Colocar la placa sin la tinción para observar los glóbulos rojos
 Realizar la coloración de Wright que se puede dejar de 3 a 5 minutos con el colorante y
luego adicionar agua corriente para que funcione como buffer dejar así durante 6 a 10
minutos, enjuagar y dejar secar.
  Colocar la placa y observar las células con la tinción realizar conteo de células al
microscopio
 Colocar la placa en el microscopio, poner una gota de aceite de inmersión y realizar la
lectura con el lente de mil aumentos, se efectuara un contaje de 100 células en las zonas
representativas del frotis.

Resultados

PLACA SIN TINCION

Los glóbulos rojos sin teñir tienen color grisaceo y no se mueven. Se ven amontonados en forma de
“pilas de moneda”. No se observan glóbulos blancos debido a la falta de tinción y las plaquetas son
diminutas pero observables Los eritrocitos se ven más claros en el centro, por la zona bicóncaba y
se observan algunos de ellos con formas diferentes, debido a su rotura al preparar la muestra, se
una aglutinación de los eritrocitos.
PLACA CON TINCION

En la placa con tinción pudimos observas algunas células de tamaño más amplio que los eritrocitos
con núcleo de color oscuro y de predominio sobre el citoplasma estas células mononucleares
pueden ser linfocitos o monocitos, además también pudimos observas células con múltiples núcleos
posiblemente neutrófilos, pero el predominio es de glóbulos rojos y en cuanto a leucocitos el
predominio fue de neutrófilos, también pudimos observar fragmentos celulares o plaquetas.
  Linfocitos: de tamaño aproximado al de los glóbulos rojos, tienen un sólo núcleo que
ocupa casi todo el glóbulo.
 Monocitos: son los leucocitos mayores, poco frecuentes normalmente, núcleo grande,
redondo, son los más móviles y su función principal es la fagocitosis.
 Polimorfonucleares: núcleo fragmentado o arrostrado. Pueden ser eosinófilos, con
abundantes granulaciones teñidas por la eosina neutrófilos y basófilos.
 Plaquetas: fragmentos de células

CONCLUSIONES

 Obtuve una muestra de sangre para efectuar una formula leucocitaria manual y aprendi
como realizar el extendido de la muestra y la tinción para identificar celulas leucocitarias
en la practica aprendi que los globulos rojos son las celulas mas abundantes y de los
leucocitos las mas abundantes son los neutrófilos además también aprendi la funcion de
cada celula y la importancia de la identificación de las anormalidades del cuadro hemático
en la practica clinica
 Aplique los métodos adecuados para realizar una extracción de sangre venosa correcta.
 Aprendí las características morfológicas de cada leucocito para identificarlos.
 Conocí los valores normales de cada tipo de leucocito.

BIBLIOGRAFÍA
1. Duarte, Romero, Mónica. Manual del hemograma y el frotis de sangre periférica,
Universidad de los Andes, 2013. ProQuest Ebook Central,
https://ebookcentral.proquest.com/lib/ucooperativasp/detail.action?docID=3213353.