MATERIALES Y MÉTODOS

Cepas bacterianas

Preparación del DNA

Disolución de Centrifugación
colonia en 100 12.000 r / min (5
μL agua destilada min )a 4◦C

Baño de agua a Baño de hielo (5

100 ͦC (15 min) min)
Diseño y síntesis de primers
Cuatro primers: 2 internos y 2 externos

Reacción LAMP y condiciones de optimización

 Mezcla de 25 μl (conjuntos de primers internos y externos, dNTPs, 1DNA × ThermoPol y el molde de
ADN).
 Baño Maria a 95oC (5 min) y enfriamiento
 Adición Bst DNA Polimerasa
 Incubación (ciclador térmico)
 Calentamiento 80oC (10 min)
 Electroforesis

Sensibilidad de la detección LAMP

Ensayo LAMP de Salmonella en muestras simuladas de Cerdo