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Presenta:
1.-Introducción
II.- Objetivos
III.1 .- Preparación
IV.- Resultados
V.- Discusión
VI.- Conclusiones
VII.- Bibliografía
INTRODUCCION
4
de Carlson y col (1990) se establece que el movimiento de aproximación se
depende del estado postural previo al inicio del rascado : gato parado, sentado
las secuencias de los patrones del rascado (postural y rítmico) se ejecutan con
movimientos que no dan como resultado la frotación de la piel irritada, sino que
duración de la fase rítmica del rascado al no haber contacto con la piel (Carlson
5
después de seccionar las raíces dorsales de los segmentos medulares
músculos flexores como los extensores. Los músculos flexores se activan por
un período que dura entre 150 a 250 mseg, en contraste, los músculos
mano del experimentador (Carlson y col. 1990). Cabe mencionar que algunos
6
Figura 1
receptivo está limitado sólo a la piel de la oreja y del cuello, que incluye la
la porción superior del crescent y el meato auditivo, el borde frontal del pabellón
extendiendose hacia la piel de la porción postero-proximal a este, justo donde el
pelo cambia de corto a largo; y hacia atrás, desde la raíz del pabellón hasta el
cuello; abarcando también la porción media del craneo (Sherrington 1917,
Los segmentos espinales que reciben las entradas cutáneas del campo
receptivo del rascado están localizados en regiones cervicales de la médula
interneuronas del generador del rascado y las neuronas motoras que inervan a
1983, Barajon y col 1992). Sherrington y Laslett (1903) reconocierón que los
axones de neuronas sensoriales primarias no recorrían tal distancia y
9
segmentos lumbares de la médula espinal (Deliagina,1977, Deliagina y col
1983). Estos autores usaron lesiones parciales de la médula espinal a niveles
cervical, torácica y lumbar mediante los cuales conseguían reducir la capacidad
del miembro posterior para responder al estímulo de rascado. En base a sus
observaciones, estos autores sugirieron que la vía propiospinal es una vía
cruzada, ya que, el reflejo de rascado puede producirse después de la
hemisección medular ipsilateral a nivel de los segmentos cervicales C5 o C7.
La vía al parecer se decusa en varios niveles de los segmentos torácicos, pués
el reflejo puede observarse después de la hemisección ipsilateral espinal, entre
los segmentos T3 y T5. La vía parece transcurrir ipsilateralmente a partir de
estos segmentos espinales ya que el reflejo no puede ser obtenido después de
la hemiseccón ipsilateral de los segmentos T7 y Ll.
interneuronas del grupo 1 que median la inhibición no-reciproca (Mc Crea y col
1992). Las interneuronas la y las que median la inhibición no recíproca reciben
Lundberg, 1979, Jami y col 1992, Lundberg y col. 1987) y de sistemas de fibras
descendentes supraespinales (ver Baldissera y col., 1981; Hultborn, 1972;
10
1992). También reciben contactos sinápticos de vías descendentes como las
procedentes del núcleo rojo, del núcleo vestibular y de la corteza sensorio-
motora (Hultborn y col.1981). Por otro lado, las interneuronas del grupo 1 que
median la inhibición no recíproca reciben entradas de los tractos corticoepinal,
ejemplo, aferentes del grupo I), sino que también por la sumación de entradas
motoras que inervan a los músculos puestos en juego durante el rascado. Los
principales factores que determinan que una neurona motora sea activada son
ll
presencia o ausencia de biestabilidad en el potencial de membrana en las
Las neuronas .motoras junto con las fibras musculares que inervan
constituyen las unidades motoras. Las unidades motoras participan en forma
segregada durante el rascado, esto es, no todas las unidades motoras de un
músculo se activan durante esta conducta motora, por ejemplo, los músculo
sartorio y el bíceps femoris se activan de forma compartamentalizada, esto es,
solo regiones de estos músculos son activadas durante el rascado (Chandau y
col 1991, Pratt y Loeb 1991). De lo expuesto en los párrafos anteriores se
puede considerar al rascado como una conducta motora, que a pesar de ser
considerada como estereotípica, requiere de un alto grado de coordinación
entre el sistema nervioso (SNC y receptores periféricos) y los efectores
(músculos) correspondientes, lo cual conlleva a movimientos precisos con el fin
de satisfacer las demandas mecánicas y (0) volitivas de los animales (Abraham
y Loeb, 1985).
generador del rascado es activado por la estimulacion del campo receptivo del
es suficiente para producir el reflejo, pero también puede ser producido, aunque
12
calórica del campo receptivo (Sherrington 1906a). La estimulación mecánica
efectivo para evocar el rascado ficticio. Los agentes farmacológicos como son:
Trevedi 1966), y la estricnina (Panchin y Skryma 1978) son los fármacos que
Berkenblit 1980, Baev y col 1981, Pratt y col 1987) como la acción sináptica
que ejercen las vías aferentes segmentarias (Shimaskii y col 1987,1988) o las
estructuras supraespinales (Arshavsky y col 1978) sobre las estructuras
13
FIGURA 2 Episodio de rascado ficticio registrado como electroneurograma
14
FS
TA
MG
150msec
Figura 2
1.3- El reflejo monosináptico
sináptica de las vía aferentes la y del grupo II sino que tambien depende del
información de los cambios de tensión que ejecutan los músculos (Jami 1992,
Proske 1981) y envian su información a las interneuronas espinales lb. Estas
longitud muscular a través de las fibras aferentes la y del grupo II, una vez
procesada esta información modulan la excitabilidad de las neuronas motoras
15
fuerza/longitud (“stiffnes”) muscular (Howk and Rymer 1981, Dyhre-Poulsen y
de la actividad rítmica
conectividad intraespinal entre fibras la, Ib y del grupo ll con las neuronas
Estos estudios (para revisión ver: Hultborn, 1981, Hunt 1990, Jami 1992;
sínáptica entre las fibras aferentes la con las neuronas motoras sin mostrar la
conectividad monosínáptica que existe entre las fibras aferentes del grupo II y
las neuronas motoras (Kírkof y Sears 1976, Sypert 1986, Lusher y Clamann,
1992). En este esquema solo se ilustra la inhibición producida por las acciones
La Port y Lloyd 1952), pero esta bién establecido que ínterneuronas activadas
16
FIGURA 3 Esquema que ilustra la conectividad de las fibras aferentes la, las
músculos sinergistas como las del soleo). Las fibras del grupo ll hacen
contactos monosinápticos y polisinápticos con las neuronas motoras, solo
como autogénica. El generador del rascado (SG) puede ser activado por
motoras.
17
FIGURA 3
En conclusión: la respuesta monosináptica “estereotípica” puede variar de
momento a momento de acuerdo con los cambios de excitabilidad de las fibras
ejercen su acción mecánica sobre una misma articulacion del gato (Dum y col.
1981). Por ejemplo, Eccles y col. (1957) describen que la estimulación del
nervio MG produce un potencial sináptico excitatorio (EPSP) de 6.2 mV en
18
flexor digitorum longus (FHL) y las neuronas motoras de su sinergista
anatómico, el flexor digitorum longus (FDL) y Nelson y Mendell (1978) entre las
fibras aferentes la del biceps posterior (PB) y las neuronas motoras del
sus contacto monosinápticos con las neuronas motoras del FHL. El músculo
durante la sinergia extensora del reflejo del rascado (O’Donovan y col. 1981).
Los contactos monosinápticos de fibras aferentes la con neuronas motoras que
(Eccles 1957).
(Merton 1953, citado por Houk 1981). En este caso, se considera al reflejo
19
FIGURA 4
20
FIGURA 4
Este circuito tiene un control por retroalimentación que permite mantener una
longitud muscular con muy pequeñas variaciones, no obstante los cambios en la
(Akasawa y Col 1982: Capaday and Stein 1987: Hultborn, 1986: Hultborn y col
Deseilligny 1989; Dueñas y col. 1990, Rudomin 1991; Lushery Claman, 1992).
El mecanismo de inhibicion presináptica fué inicialmente propuesto por
Frank and Fourtes en 1957. Estos autores observaron una depresión de los
21
potenciales monosinápticos excitatorios registrados en neuronas motoras del
gastrocnemio-soleo al estimular condicionantemente al nervio flexor biceps
presináptico.
EPSPs producidos por fibras la del GS. Este autor propuso que el incremento
22
botones terminales de las fibras aferentes. Estos autores concluyen que puede
5). Esta hipótesis fue planteada por Barron y Mathews en 1938 y se encuentra
sensibles a este ión ( Kris y col, 1975, Sykova,1981). Este mecanismo parece
23
durante la locomoción y el rascado (Cueva y col. 1987; Dueñas y Rudomin
1988). Sin embargo, cuando se activan viás de fibras aferentes del grupo 1, la
concentración de K+ no se incrementa significativamente pero si se produce
una clara PAD en las fibras aferentes (Jiménez y col 1984).
2) Hipótesis sináptica. En este caso la PAD seria mediada por
termínales aferentes produce PAD (Curtís y Mílk 1981, Curtís y Lodge, 1982,
Solodkín y col 1984). La bícuculína y la picrotoxina, drogas antagonistas del
DeFrance 1980).
La Figura 5 ilustra los posibles mecanismos presináptícos que participan
24
FIGURA 5
neurotransmisor.
25
B
FIGURA 5
Estos autores obsrvaron que en gatos espinalizados, tratados con
dihidroxifenil -amina (DOPA) se podía producir una hiperpolarización en las
sinergistas esta presente en el humano, por ejemplo, entre las fibras aferentes
del cuadriceps con las neuronas motoras del S0L.y viceversa (Fournier y col.
1984).. Si las fibras aferentes la del Sol y las la del cuadriceps se estimulan con
un intervalo de tiempo que permita suma entre sus respectivos EPSPs entonces
se produce una facilitación heterónima del reflejo H (Figura 6 B,C y G,H). Esta
26
Figura 6
27
C
F
2mVI
FIGURA 6
(TA) produce una inhibición prolongada (300-500 ms) de este reflejo
monosináptico homónimo (Figura 6 D,I) la cual, puede ser de origen
presináptico (Illes 1987). Esta inhibición se puede compensar a su nivel control
por un incremento en la intensidad de estimulación al nervio SOL (Fig 6 E,J). Si
a la respuesta refleja (reflejo H) compensada del nervio SOL se le suman los
efectos sinápticos producidos por la estimulación de su sinergista el cuadríceps,
entonces’ se produce un reflejo monosináptico heterónimo facilitado (Figura 6
F,K) el cual es de menor tamaño que el heterónimo facilitado que no estuvo bajo
el condicionamiento por el TA.(compare Fig 6C con 6F y 6H con 6K).
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Estos autores suguieren que la vía vestíbulo espinal no esta bajo control
presináptico y lo demuestran valorando la amplitud y forma de los EPSPs
vestibulares con y sin la estimulación condicionante que genera PAD en las
fibras aferentes la del gastrocnemio medial.
al inicio de una contracción del SOL (flexión plantar del pié). En este caso las
cuadríceps sufren una inhibición presináptica, pero las fibras homónimas del
que estan activos y una inhibición presináptica en las fibras aferentes de los
músculos sinergistas que se encuentran silentes (Fig.7) Las vías descendentes
que producirían PAD en las fibras aferentes de los músculos silentes (Zytnicki y
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FIGURA 7
Mecanismos presinápticos que regulan la eficiencia sináptica de vias
aferentes durante contraciones voluntarias en humanos. Las fibras
aferentes del cuadriceps y el Sol son sinápticamente sinergistas. Estas
vias se encuentran bajo control presináptico (interneuronas dibujadas en
negro). La activación voluntaria del cuadrkeps activa estructuras
supraespinales que inhibe las interneuronas que median la inhibición
presináptica y produce facilitación en las fibras aferentes la homónimas del
30
FIGURA 7
1.3 Planteamiento de la hipótesis
permanece silente (O’Donovan y col 1982) o, las neuronas motoras del FDL
músculo soleo que es sinergista del MG ( Eccles y col 1957, Scott y Mendell
1976, Harrison y Taylor 1981, Luscher y col 1989) se activa previamente al el
(Ecless y Col 1957, 1958, Nelson y Mendel 1978) se activa durante la fase de
el gato Íntegro sino que también ocurre durante el rascado ficticio del gato
31
Figura 8
Actividad electroneurográfica registrada en tres diferentes gatos talámicos
y un gato espinal durante el rascado fictio. A: Actividad
electroneurográfica de las neuronas motoras del flexor hallicus longus y
de sus sinergistas las del flexor dígítorum longus, trazos superior e
inferior respectivamente. B: Actividad electroneurográfica del bíceps
posterior y actividad ENG desfasada de las neuronas motoras de su
sínergísta el semitendínoso. Trazos como se indica. C: actividad
electroneurográfica de las motoneuronas del soleo y el gastrocnemío
medial. trazos 1 y 2 respectivamente. D: actividad electroneurográfíca de
las neuronas del soleo y gastrocnemío medial, trazos superior e inferior
respectivamente, Este registro se obtuvo de en un gato espinalizado.
32
A
FHL
PB
ST
100msec
FIGURA 8
Es pertinente mencionar que estos autores observaron que el desfasamiento del
FDL con el FHL varia entre 90 a 180 grados y no ocurre en todos los episodios
de rascado del gato tálamico. Castillo y col (en preparacion) tambien describen
que la actividad de las motoneuronas del SOL no siempre permanece silente en
En este estudio analizamos los efectos del generador del rascado sobre
33
neuronas motoras heterónimas que reciben contactos monosinápticos de fibras
aferentes la que se originan de músculos que ejercen acción mecánica en
articulaciones diferentes pero que, se coactivan durante el rascado. Por
ejemplo, el reflejo monosináptico producido en neuronas motoras del FHL por
estímulos al nervio SOL o estimulación de los nervios GM y LG..
34
II.- OBJETIVOS:
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III.-MATERIAL Y METODOS.
III.1 .- PREPARACION:
posibles
auditivo, con el cuello en extensión; el tronco del animal también se mantuvo fijo
mediante un par de tornillos colocados en las fosas iliacas y una pinza que
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tercio distal de la tibia.
Posteriormente se llevó a cabo una extensa craneotómía y la corteza
se realizaron dos lamínectomías: una a nivel de Cl-C2 sitio utilizado tanto para
del miembro posterior izquierdo, se hicieron pozas en las que se vertió aceite
mineral a 370C. Luego se ejecutó un neumotorax bilateral. con el fin de reducir
los movimientos transmitidos a la médula espinal por variaciones de la presión
37
sobredosis de nembutal I:V: y suspendiendo la respiración asistida.
rectificados y promediados.
de los ENG (donde existía rascado ficticio) es utilizado como canal de ciclos.
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Los músculos sinergistas anátomicos, utilizados para estudiar la
respuesta refleja, son los siguientes: el FDL, músculo fundamentalmente rápido,
y su sinergista el FHL (ambos actuando sobre la articulacion metatarso-
falángica); el SOL, un músculo predominantemente lento y su sinergista el
gastrocnemio medial (estos músculos actúan mecánicamente sobre la
articulacion del tobillo) y los músculos bíceps posterior y su sinergista, el
semitendinoso que ejercen su acción mecánica tanto sobre las articulación de la
rodilla como de la cadera. Son sinergistas funcionales, el PB, el tríceps surae
(medial gastrocnemio, lateral gastrocnemio y soleo) y el FHL.
diez intervalos y los valores de voltaje de las respuestas reflejas que ocurren
análisis fué diseñado en el laboratorio para tal fin. El programa también exhibe
ciclos motores con sus respectivas fases (actividad y silencio; ver la parte
forma de barra en la parte izquierda de la grafica (Fig 9E). La fase tónica del
39
El potencial antidrómico (AP) se valoró en forma similar a las respuestas
reflejas. Debido a que se seccionaron en forma secuencial las raíces ventrales,
los ciclos del rascado se registraron en un filamento de la raíz ventral con
respuesta monosináptica a la estimulación del nervio donde se va medir el AP o
bién, en el ENG de motoneuronas sinergistas. Las raices ventrales se cortaron
para no confundir el potencial antidrómico con una respuesta directa producida
por la estimulación de las neuronas motoras. Los cortes se hicieron
secuenciales de L4-S1 procurando dejar sin actividad el ENG eferente del
nervio donde se va a registrar el potencial antidrómico, pero asegurandose de
dejar la actividad eferente de algunas neuronas motoras sinergistas. Por
ejemplo, cuando se media potencial antidrómico en el nervio PB se procuraba
dejar actividad eferente en su sinergista, el FHL
2.5 veces umbral ), ST ( 1.5 2.3 veces umbral), o al tibial anterior (2-4 veces
condicionante.
Para los registros intracelulares de neuronas motoras se usaron
40
Las neuronas motoras que inervan a los nervios de nuestro interés se
identificaron tanto ortodrómicamente, mediante la generación de potenciales
sinápticos excitatorios, como antidrómicamente. Asi mismo, se registró la salva
aferente a la entrada de las raíces dorsales a la médula espinal, esto, para
registrar el potencial del dorso de la médula y determinar mediante la velocidad
de conducción el tipo de aferente que se estimula.
Las respuestas reflejas también fueron analizadas en forma cualitatíva
considerando un trazo que muestra la actividad electroneurográfica alrededor
(Fig. 9D). Para la obtención de este tipo de grárfica, los registros ENGs fueron
rectificados. Todos los reflejos que ocurren durante un episodio de rascado
fueron desplegados como una serie de barridos horizontales, con los trazos
sirve para ordenar los trazos. Se inicia con los reflejos a partir del comienzo de
la fase de actividad ENG del nervio donde se miden los ciclos motores. Además,
en todos los episodios se midio el período de latencia de la respuesta
nervio Sol en las neuronas motoras del gastrocnemio medial. Esta latencia varía
entre 3.5 a 4.0 mseg en los diferentes episodios de rascado. Luego se mide la
latencia del reflejo funcional en las motoneuronas del FHL producido por la
misma estimulación al nervio soleo. En este caso la latencia varió de 3.9 a 4.5
mseg. Luego se resta el tiempo de conducción que existe entre los electrodos
41
FIGURA 9 . A: esquema de la médula espinal y de los amplificadores que
que se indican, A8, filamento de la raíz ventral, A9; potencial de campo del
42
RP
10 msec
FHL
C S C
MG
SOL
E 1
MR
VRF
AU
VRF X SD
236±37
3 9 ±4
196 ±37msec
FIGURA 9
El tiempo de conducción varió entre 0.3 y 0.6 mseg. Este tiempo de conducción
se calcula midiendo la distancia que existe entre los electrodos que registran la
actividad refleja del nervio MG y la del nervio FHL y dividiendo esta distancia
el MG o el FHL). Puesto que los reflejos son producidos por la misma intensidad
de estimulación y las diferencias en el tiempo de aparición entre ambos reflejos
se pueden atribuir al tiempo de conducción entre los electrodos de registro
entonces se puede considerar que ambos reflejos son de origen monosináptico.
Para la valoración estadística de las respuestas reflejas y antidrómicas se
de cuando menos p< 0.05. Los cuadros se utilizan para indicar cuando hay
significación estadística entre los valores del potencial antidrómico o del reflejo
entre los intervalos en que se obtuvo el valor máximo del potencial antidrómico
43
IV.-RESULTADOS
cuando menos dos episodios de rascado en dos experime ntos diferentes. Para
mencionara en el texto.
gastrocnemio medial.
TABA 1 Recuadro superiror: Número de gatos (NC) y número de episodios
(NE) de rascado en los que se analizaron las variaciones en amplitud del
reflejo monosináptico heterónimo de neuronas motoras (MN) sinergistas
anatómicas del FHL y FDL, PB y ST y SOL. Recuadro inferior: Número de
gatos y número de episodios de rascado en los que se analizaron las
variaciones de la excitabilidad de las fibras aferentes la procedentes de
los músculos FHL, FDL, PB, ST, SOL y MG.
45
MR
TABLA 1
IV.l.l Variaciones de la amplitud del reflejo monosináptico en neuronas
motoras del FDL y FHL y cambios en la excitabilidad de las fibras
entre las neuronas motoras del FDL y las del FHL se observo una modulación
12).
En 16 episodios de rascado, el reflejo monosináptìco heterónimo en
neuronas motoras del FHL muestra dos incrementos de amplitud durante la fase
e observó 20-50 mseg antes de la actividad de las neuronas motoras del FHL.
atos tálamicos como en los episodios de los gatos espinalizados. Entre los dos
46
etapa rítmica del rascado, particularmente en la fase de actividad de las
motoneuronas del FHL. En este caso, la actividad electroneurográfica del FHL
se muestra como actividad rectificada y promediada sobrepuesta en la grafica
Un segundo incremento del reflejo monosináptico ocurre al final de la fase de
silencio de las motoneuronas extensoras del FHL. El segundo incremento
pudiera ocurrir porque un buen número de estas neuronas motoras se
encuentran en un estado subumbral y solo alcanzan su nivel de disparo por
acción sináptica refleja o bién el incremento se debe a una facilitación
presináptica.
amplitud mínima del potencial antidrómico ocurrió en el cuarto intervalo del ciclo
fase de silencio de las neuronas motoras del FHL, esto es, cuando las neuronas
motoras del FDL estan activas.
FIGURA 10 Variaciones de la amplitud del reflejo monosinpático
indicados.
48
1 . 1
MR MR
FHL FHL
AU AU
FHL SD PB SD
B 1
20±27
6
±1
4 83 D
AP 1
AP
FDL FDL
AU AU
0 SC 1
VRF
231
42 4 3
38msec 188 28msec
FIGURA 10
La relación entre los cambios del potencial antidrómico y el reflejo
los valores del potencial antidrómico y los del reflejo monosináptico de dos
reflejo monosináptico.
Estas observación nos permite apoyar la posibilidad de que la regulación del
reflejo monosináptico heterónimo del FHL se lleve a acábo fundamentalmente a
nivel postsináptico
de las neuronas motoras del FDL, producido por estimulación en las fibras
49
Figura 11
Gráfica tridimensional que relaciona la amplitud del reflejo monosináptico
del FHL con la amplitud del potencial antidrómico del FDL durante el
50
FIGURA 11
El reflejo se incrementó en relación con la actividad de las neuronas motoras
del FDL. El incremento máximo de amplitud, comparándolo con la amplitud
control varió del 56 al 212% entre los cuatro episodios de rascado. Un segundo
incremento ocurrió previamente a la actividad de las neuronas motoras del FDL
pero fue de menor amplitud y varió entre el 8 y el 66 %. La excitabilidad de las
fibras aferentes del FHL se midio en 8 episodios de rascado en gatos tálamicos
amplitud del potencial antidromico de las fibras la del FHL. Durante el episodio
de rascdo del cual se obtuvo la gráfica A, las neuronas motoras del FDL
51
Figura 12
52
FIGURA 12
A 1
MR .
FDL
AU -
FDL SD
242
8 4
158
1
FHL SD
64
IV.1.2 Variaciones de la amplitude del reflejo monosináptico en neuronas
nervio MG. El reflejo en las neuronas motoras del MG producido por el nervio
Entre ambos incrementos ocurrió una reducción relativa. La magnitud del primer
incremento varió con respecto al control entre el 220 a 710%. para el reflejo
monosináptico producido por el nervio SOL y del 312 al 621% para aquel
326% con respecto a su nivel control y del 210 a 514% para el producido por
estimulación al MG.
53
Figura 13
Reflejo monosináptico en las neuronas motoras del triceps surae.
10.
54
FIGURA 13
B
1
1
MR
S-MG S O L S-MG
AU
0 sc 1
SOL SD
51 msec
C 1
D 1.
MR MR
MG GL - S-MG
AU AU .
0 sc 1 0 SC 1
SD
M G
4
367 73msec 22 msec
En este caso el reflejo se produjo por estimulación en el nervio gastrocnemio
medial y se registró en un filamento de raiz ventral L7, este filamento mostró un
motoras del SOL. Por ejemplo, cuando estas neuronas estan activas, como
fluctua del 30 al 210% para el gato talámico y del del 163 al 320% para el gato
neuronas y fluctua entre el 37 y 128% en lel gato talámico y fluctuo entre el 120-
260% en el gato espinal. .En la Figura 13B se exhibe la modulación del reflejo
paralelo: tanto en las neuronas motoras como en las fibras aferentes la.
56
Figura 14
Variaciones del reflejo monosináptico heterónimo en las motoneuronas del
57
FIGURA 14
1
MR
A SOL
AU
FHL SD PB SD
233
38
156 37msec 195 35msec
1
B AP
MG
D A P
1
MG
AU AU
VRF SD VRF X SD
58
Figura 15
Reducion en la excitabilidad de las fibras aferentes del SOL y FDL durante
figura 10.
59
FIGURA 15
A 1
AP
SOL
AU
0 SC 1
SD
270
6 9
201 53msec
B 1
AP
FDL
AU
VRF X SD
34
232 42 msec
La redución paralela en la excitabilidad de las fibras aferentes la y de las
neuronas motoras del SOLy FDL pudiera indicar que el generador del rascado
la del PB y el ST
se activan fuera de fase con descargas de corta duración La actividad ENG del
60
En 8 episodios de rascado de gatos talámicos la amplitud del reflejo
monosináptico heterónimo del PB se incrementó del 183 al 251% durante la
neuronas motoras del PB; durante la sinergia extensora, mientras que, el reflejo
monosináptico del ST ocurre con amplitud máxima durante la fase de actividad
de las neuronas motoras del ST pero en forma desfazada de la sinergia
extensora, como cabía de esperar para este tipo de reflejo si fuese modulado
por el estado de excitabilidad de las neuronas motoras del ST (Fig 8).
Como puede observarse en la figura 16B-D, la excitabilidad de las fibras
aferentes la del ST y del PB no varian significativamente entre las etapas en
que se dividieron los episodios del rascado. La excitabilidad de las aferentes del
61
FIGURA 16. Variaciones del reflejo monosináptico heterónimo en las
neuronas motoras del BP y del ST y cambios en la excitabilidad de fas
motoras del ST producidos por estimulación en las fibras aferentes del BP.
figura 10.
62
FIGURA 16
A 1 C 1
MR MR
PB ST
AU AU
SC 1 0 SC 1
PB X SD
31 5 30
143 12 msec 193 24 msec
B 1 D 1
AP AP
ST PB
AU AU
0 SC 1
VRF X SD
81 35
103 I-23 msec 218 msec
IV:1.4 Registros intracelulares
La siguiente serie de experimentos fueron realizados para analizar los
monosináptico del SOL sería una hiperpolarizacíon de las neuronas motoras del
SOL, puesto que una reducción en el reflejo monosináptico del SOL solo ocurre
neurona motora del Sol durante el rascado. Tal como se puede observar, la
motoras del SOL e incidentalmente ocurre cuando la actividad ENG del soleo
63
soleo. Sin embargo, los resultados obtenidos no permiten descartar una posible
de la fase de silencio de las motoneuronas del FHL, FDL, tríceps surae, bíceps
posterior y semitendinoso pudiera deberse a lo siguiente: El generador del
las fibras aferentes la. Para esclarecer este punto, se estimuló el nervio ST con
una intensidad suficiente para activar las fibras aferentes la, y se registro
simultáneamente, en forma intracelular, los cambios de potencial producidos en
esta neurona motora presenta una despolarización máxima que coincide con la
actividad ENG registrada en el nervio PB. Cuando ocurre la despolarización de
nervio PB
Esta observación nos sugiere que el incremento de repuesta refleja antes
64
FIGURA 17 A: registro intracelular de una neurona motora de SOL durante
n e u r o n a m o t o r a del g a s t r o c n e m i o me di a l y en C: el r e g i s t r o
nervio ST.
65
FIGURA 17
MN
SOL 10mV
-7OmV
250msec
MN
MG 1OmV
-73mV
500msec
C
20mV
40 m se c
motoras se encuentran en un nivel de depolarización cercano al nivel de
disparo. El nivel de disparo se logra por la acción sináptica de las fibras la, que
en las neuronas del FHL producido por estimulación del nervio soleo se
del FHL varió entre el 73 y 121% (Fig.18C). Para producir el reflejo heteronimo
66
Figura 18
67
FIGURA 18
A 1
MR
S-FDL
0 SC 1 0 SC 1
X SD
M G 393 73
25 3
260 31 msec
367 73msec
C D
MR MR
S-MG S-PB
0 SC1
FHL X SD
219 31
26 7 35
187 48msec 183 msec
producidos por el Sol o el MG (Fig 180). Sin embargo, este reflejo puede no ser
monosináptico puesto que, la diferencia en latencia no se compensó
descontando el tiempo de conducción entre el electrodo que registro del reflejo
monosináptico sinergista anátomico y el electrodo que registró el reflejo
sinergista funcional. Las diferencias fluctuaron entre 03 y 0.8 mseg. Es posible
que este reflejo sea bisináptico producido por las fibras aferentes la o
monosináptico producido por aferentes del grupo II (ver DISCUSION).
sinergista funcionales.
neuronas motoras del LG o MG) varió entre el 212 al 324%, el incremento que
donde inciden las fibras la del PB. Es pertinente mencionar que la repuesta
refleja en las motoneuronas del LG o MG tiene una latencia superior entre 0.4 y
68
Figura 19
69
FIGURA 19
A 1 B 1
MR
S-PB PB S - ST
AU AU
SC 1 0
P B
SC1
MG SD
B - 1 7 5
31
213 45msec 143 12 msec
C 1 D 1
MR
S-PB S-PB
AU AU
0 1 0 1
236
2 6 3 9
182 fll msec 196
del MG o viceversa, esta diferencia en latencia puede sugerir la presencia de
motoras del FDL. Este incremento fluctuó entre el 53 y el 181% (Fig 20 B,C) Es
notorio que durante la actividad extensora, el reflejo del FDL es de menor
amplitud que durante la actividad flexora del FDL como se ilustra en la Figura
modulacion es similar, esto es, el reflejo producido por el SOL en neuronas del
FDL fluctua como el reflejo heterónimo sinergista producido por estimulación del
70
Figura 20
Reflejo monosináptico producido en las neuronas motoras del FDL por
71
FIGURA 20
1
MR
FDL . S-FHL
AU
0 SC 1
84
44 msec
1
B MR
FDL
AU
391 52msec
FHL en neuronas motoras del FDL. La actividad de las neuronas del FDL
pueden presentar una activación homogénea como se ilustra en la figura 20B o
pueden ser una actividad ENG segmentada con ráfagas de actividad que se
amortiguan (Figuras 20A y 12A) durante el transcurso de la sinergía flexora.
Durante estas rafagas de actividad se incrementa la respuesta monosináptica
(Figuras 12A y 20B). Estas observaciones apoyan fuertemente que la
modulación del reflejo monosináptico se regula importantemente a nivel
postsináptico durante el rascado ficticio, Al parecer la conexiones “aberrantes”
entre’ aferentes del SOL y las neuronas motoras del FDL pudieran tener
significado funcional durante conductas motoras como el rascado. La
modulación del ref le jo m o n o sin á p t i co h e t e ró n im o p a rece d e pe nd er
fundamentalmente del estado de excitabilidad de las motoneuronas donde se
produce el reflejo.
72
V.-DISCUSION
anatómico.
episodios de rascado. Es por tanto posible que centros neurales situados entre
73
El porque la inhibicion sostenida del reflejo monosínáptico ocurre solo en
Es claro que la actividad en las neuronas motoras del SOL varía en diferentes
actividad de las neuronas motoras del SOL está ausente durante algunos
episodios de rascado (Abraham y col. 1985, Velasco y col., 1990) lo que sugiere
que el generador del rascado solo activa a las neuronas motoras del SOL
cuando las demandas mecánicas asi lo requieran. En esta activación pudieran
mecánicas son nulas por lo que, la acción del generador del rascado estaría
74
segundo incrementos parecen estar en relacion con la despolarización cíclica
la estimulación del MG (Fig 13A). Baev (1980) reporta variaciones cíclicas del
Los efectos de las fibras aferentes la que llegan a la médula espinal por
col 1957) . En el gato, Eccles y col.1 957 mencionan que hay acción
neuronas del FHL ;LG y MG por estimulación del nervio PB puede no ser
75
entre 0.3 y 0.9 mseg, una vez que se hubo descontado el tiempo de conducción
(ver METODOS), por lo que podria suponerse la presencia de una interneurona
en la vía que produce la respuesta refleja, o bien, que las fibras aferentes
posean velocidades de conducción pequeñas. De hecho, el estímulo para
evocar este reflejo esta dentro de la intensidad (2 a 4 XT) necesaria para activar
fibras aferentes del grupo II (Lundberg 1987). Con los presentes resultados no
podemos discernir entre las dos posibilidades. Para tener más evidencias a este
respecto es necesario medir la latencia central de los EPSPs producidos por
aferentes la y del grupo II del nervio PB en neuronas motoras del FHL y del
triceps surae.. Para ello se requiere registrar intracelularmente las acciones
sinápticas producidas por la estimulación de fibras aferentes a las neuronas
motoras y calcular el retardo central que ocurre desde la llegada de la salva
aferente al dorso de la medula hasta la generacion de los EPSPs.
motoras producida por el generador del rascado. Pratt y Col (1987) encuentran
una inhibición postsináptica cíclica que ocurre durante la locomoción. Esta
pudiera ser de origen presináptico producida por una PAD en las fibras
76
Dueñas y col 1990, Gossard y col 1991). En los presentes experimentos no
encontramos indicios de tal fenómeno en los gatos talámicos ni en la mayoría
de los gatos espinalizados. Es cierto que solo se probó uno de los posibles
mecanismos que participan en la inhibición presináptica esto es, una PAD
producida por el generador del rascado. Sin embargo, la activación de
receptores GABAb también producen inhibición presináptica sin PAD ( Frank y
Peng 1989). La elucidación de este punto es difícil de realizar con la presente
preparación, quizas pudiera encontrarse evidencia estudiando las corrientes de
calcio en las terminales de las fibras aferentes la en rebanad8 de la médula
espinal de la rata. En este tipo de rebanadas, las neuronas motoras del
segmento lumbar L7 pueden ser activadas con fármacos y producir una
actividad rítmica con una frecuencia similar a la del rascado (Dueñas, S.H. y
Lomelí, J.; observaciones no publicadas) .
aferentes del FDL durante la fase rítmica del rascado pudiera ser indicativa de
motoneuronas del FHL pero su participación sería de mucho menor cuantía que
sobre las fibras aferentes la. Este incremento relativo se podría atribuir a una
del FDL Evidencias de efectos excitatorios sostenidos del tallo cerebral sobre
77
Figura 21
78
FIGURA 21
A
FDL
FHL
SOL
PB
50msec
B
FDL
MG
ST
(adaptada de Castillo y col., en preparación). Estos efectos excitatorios
desaparecieron en el gato espinal 21 B. Es claro que en el gato espinal, en el
cual no ocurren los efectos tónicos sobre las fibras aferentes, se incremen los
efectos del generador del rascado. El mecanismo por el cual esta actividad
sinápticas excitatorias sobre las neuronas motoras o las fibras aferentes la.
Estas entradas podrían provenir de la formación reticular o del núcleo vestibular
generador del rascado, las fibras aferentes la del FDL y las neuronas motoras
activaría otro grupo de neuronas motoras del FDL. En este caso la activación
que median la PAD de las fibras aferentes la (en particular en aquellas que
hacen contacto con las neuronas motoras que se activan fasicamente). Una
79
tbnlcamente. Sin embargo, esta PAD no se detectaría si se registra Ia
también participarían las fibras la del FDL que sufren simultáneamente una
reducción en su excitabiliad.
Cuando la acción sináptica sostenida está ausente, como ocurre en
algunos gatos talámicos, entonces solo se observaría la reducción en la
excitabiliadad de las fibras aferentes la del FDL que estan en contacto con las
FDL (Fig. 218) y también sobre las fibras aferentes la que convergen sobre
estas neuronas motoras (Figura 10).
El porque los cambios fásicos en la excitabilidad de fibras aferentes la
del FDL no ocurren en todos los episodios de rascado del gato espinal es dificil
de explicar. Es posible que influya la intensidad con que se activa a los
la duración y amplitud de las descargas ENG de cada fase del ciclo motor..
podemos arguir que el generador del rascado ejerce una mayor acción
presináptica sobre las fibras aferentes que proceden de musculos rapidos, como
es el caso del FDL. Las fibras aferentes la del MG, ST, PB, Y FHL proceden de
fibras musculares rápidas y lentas y las del soleo proceden de fibras lentas, por
lo que, en un registro de una población de fibras aferentes, la acción del
80
También podría pensarse que fibras articulares son estimuladas por la
hiperextensión de la rodilla y el tobillo (posición del gato durante el
experimento). La acción de estas fibras podría producir una reducción de la
acción presináptica del generador del rascado en las fibras aferentes la del
tríceps surae, PB yST.
La presencia ocasional de PAD cíclica en las fibras aferentes del
FDL,pudiera deberse a mecanismos específicos o inespecíficos. Entre los
mecanismos especificos estaria la liberación de GABA, por interneuronas que
producirían una depolarización de las fibras aferentes la por activación de
receptores GABAa. Uno de los mecanismos inespecíficos sería la acumulación
extracelular de K+ en la vecindad de las fibras terminales (Kriz y col, 1975). Los
resultados obtenidos en algunos episodios de rascado de disminución de la
excitabiliadad en fibras aferentes del FHL del FDL y del SOL no parecen apoyar
esta última hipótesis por lo que la posibilidad de participación de un mecanismo
inespecífico se ve reducida.
en paralelo con las neuronas motoras del FDL y SOL pudiera tener relevancia
presináptica.
81
talámico también observamos que la excitabilidad de las fibras la del SOL se
reduce en forma sostenida. Las diferencias entre las observaciones de este
estudio y las descritas por Baev (1981) pueden resultar de lo suigiente: el tipo
de preparación, los anestésicos usados para la cirugía inicial (Kullman, 1991) y
discernir cuál o cuáles son las causas de las diferenecias encontradas entre
ambos estudios, en general es difÍciI reconciliar los presentes resultados con las
las posibles acciones del generador del rascado sobre las fibras aferentes la y
las neuronas motoras del tríceps surae. Permítanme suponer que el generador
del rascado activa estructuras del tallo cerebral y éstas a su vez inhibieran
tónicamente interneuronas que producen PAD en las fibras aferentes la. Esta
suposición la muestro en el esquema de la Figura 22. La activación de una vía
de este tipo produciría una inhibición de las neuronas motoras del SOL (Fig
14A) y una reducción en la excitabilidad en las fibras aferentes la del SOL (Fig
cambios cíclicos de PAD a través de estructuras del tallo cerebral (Figura 14B),
Una vez que las fibras aferentes quedan sin la influencia descendente (gato
14D). El generador espinal del rascado solo actuaría sobre las motoneuronas
del MG pero no sobre las fibras aferentes la.
82
V.4 Hipótesis de Hultbor y generador espinal del rascado.
El planteamiento central de este trabajo se origina en la hipótesis de
las ramas puede estar bajo PAD mientras que en otra la PAD es mínima o
ausente. En base a estos resultados es posible que en el gato con cerebro
en gatos íntegros.
83
FIGURA 22. Representación diagramática de las posibles interacciones del
generador de rascado (SG) con estructuras del tallo cerebral, con las fibras
aferentes la del SOL, MG y del FDL y con las neuronas motoras del SOL y
84
S
SOL
SOL
FIGURA 22
En general nuestros resultados apoyarían la hipótesis de Hultborn si se
considera que las vías descendentes que ejercen el control presináptico sobre
articulacion del miembro con que se rasca el animal. Las conexiones entre
fibras aferentes que proceden de músculos proximales,con neuronas motoras
produce una sinergia que va más allá de una sinergia anatómica o funcional y
sería una sinergia a nivel sináptico, que coadyuvaría a la acción sincrónica de
movimiento.
Desde este punto de vista el rascado parece no ser una conducta
estereotípica sino que cambia bajo díferentes circunstancias y se regula
85
compensar la carga que podria añadirse a una region muscular en forma
imprevista
86
CONCLUSIONES
MUSCULARES VOLUNTARIAS
87
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