UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

Facultad de Farmacia y Bioquímica

Informe de Prácticas de Laboratorio

Tema: Espectrofotometría de Absorción Molecular UV - Visible

Curso: Química Analítica Instrumental

Profesor:

Integrantes:
*Dávila Centeno Jimena Tatiana
* Huamán Huamán Anthony Nahúm
*Hurtado Peña Cristian David
*Manrrique Sánchez Guisell Yojany
*Ríos Gonzales Manuel

Grupo: Viernes 3pm – 6pm

Año: 2018 – II
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Practica N°1

USO Y CUIDADO DEL ESPECTROFOTÓMETRO DE ABSORCIÓN UV-

VISIBLE Y OBTENCIÓN DE ESPECTROS

1.- OBJETIVOS
 Realizar un correcto uso y manejo del espectofotómetro de absorción UV-visible modelo
GENESYS 10S UV-VIS MARCA PHARO 300 -MERCK
 Obtener gráficas transmitancia/ longitud de onda y absorbancia/ longitud de onda a partir
del análisis de una solución diluida de azosulfamida.

2.- INTRODUCCIÓN
Espectroscopia
Rama de la Ciencia en la que la Radiación Electromagnética se descompone en todas las longitudes
de onda que la componen con la finalidad de generar espectros, los cuales se utilizan para los
estudios teóricos de la estructura de la materia o para el análisis Cualitativo y Cuantitativo. [1]

Aspectos cuantitativos de la medición

A. Transmitancia (T): Fracción de radiación incidente transmitida por la sustancia bajo análisis.
B. Absorbancia (A): Es la relación matemática definida por la ecuación: [2]
A = -Log10 T

A = Log Po /P

Aspectos cuantitativos de la medición

A. La Ley de Lambert - Beer:
“Cuando un Haz de radiación pasa a través de una sustancia, la intensidad de luz transmitida decrece
en forma exponencial, mientras que la concentración de la sustancia aumenta en forma aritmética”.

B. Absortividad y Absortividad Molar

Como la Absorbancia es directamente proporcional a la longitud de trayectoria a través de la
solución (b), y a la concentración de la sustancia (C), la Absorbancia se expresa como:

A = a.b.C

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en donde “a” es una constante de proporcionalidad, denominado como Coeficiente de Absortividad.

Cuando la unidad de “b” se da en cm y la concentración “C” se da en moles/L, el coeficiente se

denomina:

“Coeficiente de Absortividad Molar” y se simboliza por “” : [2]

A = .b.C

Espectroscopia de absorción molecular

Cuando la Luz atraviesa una sustancia, una parte de la Luz es absorbida selectivamente por la
sustancia de acuerdo a su estructura molecular.

Todas las sustancias presentan un nivel de energía normal conocido como estado basal o de baja
energía. Esta energía es característica de las moléculas constituyentes de la sustancia.

Cuando la Luz presenta una Energía igual a la diferencia entre la energía en estado basal y estados
excitados (E1, E2...), los electrones en el estado fundamental son transferidos al estado excitado,
por lo tanto, parte de la energía de la Luz correspondiente a dicha longitud de onda es absorbida por
la sustancia.

Los electrones excitados pierden energía por el proceso de radiación de calor y retornan a su estado
inicial. [3]

Espectro de absorción de una muestra

El Espectro de Absorción de una sustancia se obtiene registrando el valor de absorbancia del

compuesto a diferentes longitudes de onda. Al graficar los valores de cada una de las Longitudes de
Onda (abcisa) vs. el valor de su respectiva absorbancia (ordenada), obtendremos el espectro de
Absorción o Transmisión. [3]

Espectroscopia UV – VIS
Instrumentación

Un espectrofotómetro es un instrumento para medir la transmitancia o absorbancia de una muestra,

en función de la longitud de onda de la radiación electromagnética. Los componentes clave de un
espectrofotómetro, son: [3]

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A. Una fuente, que genera una banda ancha de radiación electromagnética.

B. Un monocromador, que incluye un dispositivo de dispersión que selecciona una longitud de
onda particular de la radiación de la fuente.
C. Un área de muestra.
D. Uno o más detectores, para medir la intensidad de la radiación.
E. Otros componentes ópticos, como lentes o espejos, transmiten la luz a través del instrumento.

Normas para el uso del espectrofotómetro

- Estos instrumentos son delicados y se debe manejar con cuidado. Si hay un botón que no
funciona no hay que forzarlo.
- Las cubetas de sílice son caras y fáciles de romper, por ello se debe tener cuidado al usarlas.
Se debe tocar solo por sus caras rugosas, no por las pulidas, y debe permanecer limpias. [3]

3.- PARTE EXPERIMENTAL

4.- RESULTADOS

5.- DISCUSIÓN

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6.- CONCLUSIONES
 Se logró operar de manera adecuada el espectrofotómetro de absorción UV-visible modelo
GENESYS 10S UV-VIS PHARO 300 – MERK de manera manual y automatizada.
 Se obtuvo una curva espectral transmitancia vs. Longitud de onda y otra curva espectral
absorbancia vs. Longitud de onda a partir del análisis de una solución diluida de
azosulfamida utilizando un espectrofotómetro de absorción UV-visible modelo PHARO 300
–MERRK.

7.- REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

1. Gómez S, Sierra I, Pérez D. Análisis Instrumental. 1° ed. España: Netbiblo; 2009.
2. Pérez P. Análisis de elementos-traza por espectrofotometría de absorción molecular.
Córdoba: San Pablo; 1983. págs. 123-129.
3. Douglas A, Skoog D, Holler J. Principio de análisis instrumental. 6° ed. México: Edamsa;
2008.

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