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• Matriz mitocondrial:
• las enzimas del complejo de piruvato deshidrogenasa,
• enzimas del ciclo del ácido cítrico,
• enzimas de la -oxidación de ácidos grasos,
• enzimas de la oxidación de aminoácidos,
• DNA,
• Ribosomas,
• ATP, ADP, Pi, Mg2+, Ca2+, K+,
• intermediarios metabólicos solubles.
http://www.mitoproteome.org/html/data
base.html
Acoplado al
transporte de
electrones hay una
de H+ hacia el
espacio
intermembranal
Componentes proteicos de la cadena de transporte de electrones
Purificación de los
complejos respiratorios:
El complejo I: NADH:quinol óxido-reductasa
Deshidrogenasas dependientes de
NAD o de FAD
El complejo II:
Succinato:ubiquinona
deshidrogenasa
Tiene 4 subunidades
Cataliza la oxidación de
succinato a fumarato,
reduce a una quinona
El complejo III ó complejo bc1
citocromo c1:
un cruce
transmembra-
nal, un hemo
covalentemen
te unido
citocromo b:
8 cruces
transmembra
Proteína fierro-
nales, dos
azufre: un
hemos
cruce
transmembra-
nal, un centro
2Fe-2S
QUINOL-CITOCROMO C (PLASTOCIANINA) ÓXIDO-REDUCTASA
sitio Qp:
oxidación del quinol
grupos:
ubiquinol, FeS
hemo bL
sitio Qn:
reducción de la
quinona
grupos:
ubiquinona,
hemo bH
El ciclo Q del bc1:
2H+ matriz
sitio Qn(-)
o
sitio de Q Qn.- QH2
reducción
de la quinona
e- -
eantimicina
citbH
citbL
QH
QH22
mixotiazol
sitio Qp(+)
o e- e- ISP
Q cit c1
sitio de Qp.-
oxidación
del quinol estigmatelina
cit c
.- 2H+
O2 O2 4H+ espacio intermembranal
El complejo bc1 tiene una estructura dimérica:
citocromo c1
citocromo b
Proteína
Fe-S
grupos redox
• cristalizado en: bovino, conejo, pollo y levadura
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El complejo IV: citocromo c oxido-reductasa
Complejo de Paraccocus
La reacción de reducción de oxígeno y el bombeo de protones por el complejo IV:
Espacio
intermembranal
Membrana
interna
Matriz
La cadena respiratoria mitocondrial:
(los complejos cristalizados)
2H+
cit c
1/2 O2
+ 4H+ H2O
QH2 QH2
Q
Fumarato
Succinato H+
H+
ADP+Pi
ATP
El acoplamiento quimio-osmótico:
cómo resulta la síntesis de ATP a partir
de la oxidación de sustratos
El autor de la hipótesis quimiosmótica:
La fuerza protón-motriz:
Mitchell P. (1961) Nature 191, 141
2.-Generación de la fuerza protón-motriz
Energía química Energía
mitocondria y luminosa
++++ ++++
bacterias aeróbicas cloroplasto y
bacterias
----- ----- fotosintéticas
H+ H+
3.- ADP
Pi
Acoplamiento
H+ H+= + RT/nF pH
Quimi-osmótico
ATP
Rotación del
Y flagelo
1.- Membrana
impermeable
4.-transporte a protones
acoplado H+ X H+
Simport Ca++ antiport
uniport
Qué es la fosforilación oxidativa:
CLOROPLASTO MITOCONDRIA
Jagendorf A.T. & Uribe E. (1966) Thayer, W.S. & Hinkle, P. C. (1975)
Brookhaven Symp. In Biol. 19, 215 JBC 250, 5330
Tres sistemas
de
transducción
de energía
Síntesis de ATP por la ATPsintasa:
una máquina molecular de síntesis.
El complejo V: La
ATP sintetasa
Fo: 10-14 c,
1a, 2b.
Los segmentos F1, Fo cristalizados:
Walker J.E. et al (1994)
Nature 370, 621
F1
F0
Diferencias estructurales dadas
por la unión de ATP, ausencia de
ATP ó ADP y Pi.
La ATP sintasa vista desde la
zona que ve hacia el espacio
intermembranal.
La síntesis de ATP
Mecanismo de requiere de movimiento
liberación del en el segmento F1
ATP por el sector ocasionado por la
F1 de la subunidad en
ATPsintasa movimiento.
Comprobación de que la subunidad gira
Noji H. et al (1997) Nature 386, 299
Rotación del filamento de actina en cuadros
(2004)
NATURE 427, 465.
La síntesis de ATP
puede ser hecha
mecánicamente sin el
sector Fo
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Otras proteínas mitocondriales
Proteínas mitocondriales que no tienen que ver con la cadena respiratoria
La mitocondria es un organelo que importa la gran mayoría
de sus proteínas.
Proteínas de la cadena respiratoria que están codificados en el genoma
mitocondrial
El genoma mitocondrial humano
Cristales de oxaloacetato en mitocondrias de pacientes con miopatías mitocondriales
Cómo se estudia el transporte
de proteínas a la mitocondria
El sistema translocador de proteínas en bacterias:
Proteínas secretadas como toxinas:
El sistema de importación
de proteínas en la
mitocondria:
Importando una proteína citosólica a la mitocondria
Estudio in vitro
del transporte de
una proteína a la
que se le ha
unido el
inhibidor
metotrexato
Sitios de
unión entre
la membrana
interna y la
externa
Péptidos señal
de proteínas
mitocondriales
El complejo III
Ubiquinol:citocromo c
reductasa
El complejo III:
ubiquinol:citocromo c oxido-reductasa