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GRUPO: 5QV2
SECCIÓN: 1 EQUIPO: 3
INTEGRANTES:
Figura 2. Regiones del plásmido F: la replicación se inicia en el sitio oriV, el sitio oriT indica el
origen de la transferencia de información genética. Las secuencias de inserción IS3 e IS2
controlan la inserción del cromosoma bacteriano y la escisión de éste.
Cruza Hfr x F-: En las cepas Hfr (alta frecuencia de recombinación) el factor F
está integrado al cromosoma bacteriano. Las células Hfr se comportan como
células F+, forman pili sexuales y se conjugan con las células F-. En la conjugación
entre células Hfr y F-, el factor F integrado se rompe y el extremo de la cadena rota
se mueve hacia la bacteria F-. En las células Hfr, el factor F se une al cromosoma
bacteriano, de modo que el cromosoma lo sigue hasta la célula receptora. La
cantidad de cromosoma bacteriano que se transfiere depende del tiempo en el que
ambas células permanecen en la conjugación. Una vez dentro de la célula
receptora la cadena del DNA donante puede producirse un entrecruzamiento entre
la cadena y el cromosoma original de la célula F-. La célula F- casi nunca se
convierte en F+ o Hfr porque el factor F se rompe en la mitad durante el comienzo
de la transferencia de la cadena, dejando una parte de F al comienzo y otra parte
al final de la cadena que va a transferirse. Para convertirse en F+ o Hfr la célula
receptora deberecibir un factor F completo, que supone la transferencia completa
del cromosoma bacteriano. Esto sucede rara vez, porque la mayoría de las
bacterias que se conjugan se separan antes de que la transferencia del
cromosoma se haya completado.
F+ F- F+
Hfr F- F-
F’ F- F’ o F’’
Bacteriófago M13:
• Es un virus compuesto por una molécula de ADN monocatenario circular.
• La proteína de recubrimiento menor P3 permite que el fago se una a un
receptor presente en la punta de los pilli del hospedador Escherichia coli.
• Las bacterias infectadas continúan vivas (ciclo no lítico); aunque su
velocidad de crecimiento decrece.
OBJETIVOS:
Cuantificar la transferencia de material genético por medio de la conjugación
en bacterias Gram –
Establecer las diferencias entre las transconjugantes que se obtienen a partir
de células donadoras Hfr y F´ y con receptoras Rec+ y Rec-.
RESULTADOS:
Tabla 3. Resultados de la cuenta viable de las diferentes cepas utilizadas.
Cepa Equipo Dilución No. De colonias Titulo (UFC/ml)
3 10-4 10-5 I, I 470, 547 5.08×108
JC4046 4 10-4 10-5 205, 213 42, 35 2.3×107
5 10 -4 10 -5 464, 440 116, 127 5.21×107
6 10-4 10-5 96, 97 37, 9 1.09×107
1 10-4 10-5 203, 173 11, 9 1.8×107
CSH62 2 10 -4 10 -5 560, 487 391, 240 7.6×107
3 10-4 10-5 I, I ND, 157 1.57×108
4 10 -4 10 -5 I, I ND, 27 2.7×107
1 10-4 10-5 26, 47 6, 13 4.18×106
RC712 2 10 -4 10 -5 I, I 751, 722 7.36×108
5 10-4 10-5 706, 692 0, 0 6.99×107
6 10-4 10-5 240, 213 107, 126 3.12×107
KL323 3 10 -4 10 -5 123, 119 17, 18 1.25×107
4 10-4 10-5 132, 99 16, 12 1.17×107
I= incontables.
ND= No determinado
G10 100 0 0
10-1 0
G9 100 0,0
0
4 G8 10-1 I,I
10-2 I,I
10-3 140,138 1.4 x106
G9 100 0 0
G10 100 0 0
CEPA EQUIPO MEDIO DILUCIÓN NÚMERO DE TÍTULO
COLONIAS (UFC/mL)
CSH62 X 1 G8 100 312,280 2.73 x103
RC712 10 -1 3,6
G9 100 0,0 0