Guia Bcym 2018 - II

CONTENIDO
Pág.
Normas para el estudiante del curso de Biología Celular y Molecular 03
Introducción 05
Instrucciones para el desarrollo de las prácticas 06
Práctica Nº 1: Principios de Bioseguridad en el laboratorio 08
Práctica Nº 2: Fundamento de Microscopía 14

Práctica Nº 3: Permeabilidad de la Membrana Citoplasmática.
(Ósmosis) 23
Práctica Nº 4: Permeabilidad de la Membrana Citoplasmática.

(Difusión y diálisis) 27
Práctica Nº 5: La célula procarióta y eucariótica: reconocimiento de estructuras 30
Práctica Nº 6: Obtención y análisis de fracciones celulares 36
Práctica Nº 7: Metabolismo Celular: Proceso de respiración celular 39
Práctica Nº 8: Extracción del ADN 42
Práctica Nº 9: Fundamentos de la Reacción en cadena de la polimerasa (PCR). 45
Práctica Nº 10: Fundamentos de Electroforesis 48
Práctica Nº 11: Ciclo celular: Mitosis y Meiosis 52
Práctica Nº 12: Ciclo celular: Mitosis y Meiosis 56
Referencias Bibliográficas 63
NORMAS PARA EL ESTUDIANTE DEL CURSO DE
BIOLOGÍA CELULAR
El estudiante debe INGRESAR AL LABORATORIO CON MANDIL LARGO, LIMPIO,

ABOTONADO Y BIEN PLANCHADO mientras dure la práctica. Debe usar pantalón largo,
zapatos o zapatillas y las chicas deben tener el cabello amarrado.
LLEGAR PUNTUAL a las prácticas es señal de respeto hacia los profesores y compañeros.
Sólo se dará 10 minutos de tolerancia.
Debe entrar ÚNICAMENTE CON LOS MATERIALES NECESARIOS, como cuaderno de

trabajo, lápices, lapiceros, etc. y el material solicitado por el Docente para cada práctica.
ESTUDIAR los conceptos teóricos que servirán para el desarrollo de la práctica correspondiente
antes de ingresar al laboratorio. Se tomarán pasos todas las clases de laboratorio que comprenderán
dos preguntas de lo desarrollado la práctica anterior y una pregunta de la práctica a realizarse.
Los alimentos, bebidas, maletines y/o mochilas están prohibidos dentro del laboratorio, siendo
los LABORATORIOS AMBIENTES DE TRABAJO Y ESTUDIO.
El uso de celulares durante las clases distrae e incomoda a los demás, antes de ingresar al
laboratorio, asegúrese de apagar su teléfono móvil.
Los grupos de laboratorio son de máximo 3 alumnos, todos los integrantes del grupo son
responsables del contenido de los informes, por lo tanto, la calificación es para todo el grupo.
Es indispensable para un correcto análisis en los informes, el uso de textos y artículos que
provean las bases teóricas que fundamenten los temas que se han de tratar. En caso de usar
fuentes de Internet el estudiante debe cerciorarse que ésta sea respaldada por instituciones de
prestigio que aseguren la veracidad de la información suministrada. Todos los trabajos
entregados deben tener sus referencias citadas según el sistema Vancouver.
El fraude es el engaño por parte del estudiante en el desarrollo de una actividad académica o
institucional para obtener un provecho indebido, como copiar trabajos realizados por otras personas
(compañeros, estudiantes de ciclos pasados, autores o documentos bajados de internet), sin indicar
de quien provienen; usar ayudas no autorizadas durante los exámenes, poner su nombre en el
trabajo en el que no participó. También comete falta el estudiante que ayude a otra persona a
cometerlo, por ejemplo; prestándole un trabajo ya elaborado para que lo entregue como propio,
soplarle las respuestas o ponerle en un trabajo cuando este no lo ha realizado.
Es responsabilidad de cada grupo traer el material para cada práctica (revisar la guía), de lo
contrario no podrán realizar el laboratorio y la calificación se verá afectada.
El alumno ES RESPONSABLE de cualquier accidente que ocurra con el material y/o equipo con el
que trabaje, debiendo reponer dicho material a la brevedad posible. Cualquier accidente con vidrios,
reactivos, cultivos biológicos y/o similares deberá comunicarse al responsable del laboratorio o
al profesor de prácticas a fin de tomar las medidas adecuadas.
El ORDEN Y LA LIMPIEZA son obligatorios en el laboratorio de Biología Celular y

Molecular, asegúrese de aplicarlos durante y después de la práctica, debiendo dejar el lugar
usado como usted lo encontró.
MANTENGA LOS EQUIPOS EN SU SITIO, moverlos podría dañarlos. Salvo indicaciones

expresas del docente de aula, los equipos permanecerán en sus respectivos lugares, en caso de
observar cualquier anomalía informar al docente inmediatamente. Si al finalizar la práctica se
encuentran microscopios con láminas que debieron ser desechadas con anterioridad, el profesor
bajará puntos a la nota de trabajo en el laboratorio del día a toda la mesa.
Por su seguridad y la de sus compañeros se tienen que cumplir en todas las clases las normas
de BIOSEGURIDAD.
Realizada la práctica ANOTAR Y/O DIBUJAR las experiencias observadas, este proceso le
ayudará para realizar los informes respectivos y para el repaso respectivo.
Los laboratorios SON AMBIENTES DE TRABAJO: Para las demostraciones de sentimientos

y juegos habrá otros momentos oportunos.
LA MANIPULACIÓN DE LOS EQUIPOS SE HARÁ EXCLUSIVAMENTE POR EL

PROFESOR que solicitará la ayuda del responsable de laboratorio si fuera necesario. Los alumnos
sólo podrán manipular los equipos dirigidos por el docente o el responsable de laboratorio
INTRODUCCIÓN
Todos los seres vivientes están formados por células; y estas a su vez están formadas por biomoléculas;
pero el número y la variedad de cada una de estas moléculas y células difieren grandemente entre los
distintos organismos. Algunos organismos se componen de solamente una célula. Otros como los seres
humanos, se componen de billones de células. La Biología como ciencia, enmarca los principios básicos
del conocimiento requerido sobre el estudio de los seres vivos. Se trata de una ciencia natural que ha ido
forjando, a través del tiempo la lucha constante, por conocer y transformar la naturaleza. A través de su
desarrollo, ha surgido una diversidad de campos especializados dentro de lo que destaca la Biología
Celular y Molecular que se encarga del estudio de los componentes moleculares de las células y su
relación con otras ramas de la Biología como la Genética, con sus estudios del genoma humano, la
clonación de animales, la terapia génica y la transgénica como también el desarrollo de animales y
vegetales transgénicos, avances muy importantes en las Ciencias de la Salud.
A fin de conocer mejor las complejas y delicadas estructuras de los seres vivos, es necesario el contacto
directo con los muestras que se van a estudiar, por lo que es importante relacionar la teoría con la práctica;
para lo cual brindamos el presente Manual de Biología Celular y Molecular, detallándose las experiencias de
laboratorio con principios muy sencillos y fáciles de comprender, para que el estudiante tenga un material
didáctico de trabajo que le servirá de guía para realizar sus experiencias de laboratorio.
El Manual tiene dos objetivos fundamentales: en primer lugar; introducir al estudiante en el desarrollo de
procedimientos experimentales que le permitan estudiar la célula como unidad estructural, funcional y reproductiva
de los sistemas vivos, así como los procesos metabólicos que mantienen y renuevan su organización; y en segundo
lugar, desarrollar en el estudiante habilidades para buscar, seleccionar, organizar e interpretar la información
experimental; conduciéndolo a la formulación de interrogantes sobre una realidad, con base en la teoría ya
existente y así alcanzar soluciones a preguntas planteadas en los procesos biológicos.
Los autores
INSTRUCCIONES PARA EL DESARROLLO DE LAS
PRÁCTICAS
 Lee la guía de práctica previa al desarrollo de la experiencia en el laboratorio.


 Investiga previamente sobre los conceptos básicos del tema a desarrollar en la práctica.

 Escucha atentamente las indicaciones de los docentes y sigue las instrucciones del manual
de prácticas.

 En caso de que las pruebas experimentales sean individuales realiza todas las pruebas
mencionadas en el manual en forma independiente.

 En el caso de las experiencias grupales, trabaja en coordinación con tu grupo, realizando
una distribución equitativa de las tareas asignadas, cumpliendo con rapidez y eficiencia, ya
que de tu trabajo depende todo el grupo.

 Realiza cuidadosamente tus pruebas experimentales, entendiendo el porqué de los hechos acaecidos.

 Al efectuar cada uno de los pasos del desarrollo experimental, observa minuciosamente tus
experimentos y anota y/o esquematiza con claridad los cambios ocurridos (color, volumen,
aumentos observados, emisión de gases, texturas, etc.), así como los resultados finales.
Estos resultados son de forma individual y deberán ser entregados a los docentes el día de
la práctica para su revisión y firma, siendo anexados en el informe final.

 Discute y analiza con los miembros de tu grupo el porqué de estos resultados y las conclusiones
preliminares, encontrando patrones, explicando sucesos, hechos y construyendo deducciones.

 Desarrolla en forma grupal o individual según las indicaciones de los docentes el informe
de práctica, utilizando fuentes de información de nivel universitario que expliquen de
forma sustentada tus resultados y conclusiones desarrolladas que será entregado al ingresar
al laboratorio de la clase siguiente.

 Resuelve los cuestionarios que tienen como objetivo reforzar los conceptos aprendidos en teoría y
práctica, porque estas preguntas serán consideradas ara tomar en los pasos al inicio de la práctica.
 Cita tus referencias según el sistema Vancouver.

 Las resultados prácticas desarrolladas por uno o un grupo de ESTUDIANTES NO
PUEDEN SER TRANSFERIBLES A OTROS.
FICHA DE EVALUACIÓN DE LA PRÁCTICA:
Nº ……….
Nombre del Estudiante:…………………………………………………………………….
Mesa:………………………Fecha:…………………………………………………………
Puntaje COMPETENCIAS A EVALUAR 0 1 2
2 Llega con puntualidad / tarde / no asiste a la práctica (F y T)
Ingresa al laboratorio debidamente y cumple las normas de

2
Bioseguridad.
Entrega el informe desarrollado de la práctica anterior al
ingreso al aula y trae todos los materiales que requiere para el
2
desarrollo de las prácticas indicadas en el Manual de
laboratorio.
Trabaja en equipo cumpliendo con eficiencia el rol que le toca en

2
la experiencia y en el desarrollo del informe de laboratorio.
Esquematiza y toma nota de sus resultados y participa

1
activamente en el análisis de los resultados obtenidos
Muestra respeto a las opiniones de sus docentes y/o compañeros
1
de trabajo
Participa activamente en el desarrollo de los conceptos teóricos
2
que se brindan en la primera parte de la sesión.
Participa activamente en el desarrollo de la experiencia
2 demostrando interés, habilidad y destreza en las preparaciones
experimentales.
Muestra Interés por su aprendizaje y sobre todo en relación a la
1
práctica desarrollada.
15 NOTA
CRITERIOS QUE SE TOMARÁN EN CUENTA PARA LA
EVALUACIÓN DE LOS INFORMES DE PRÁCTICA
ITEMS A EVALUAR PUNTOS

1. Carátula y presentación
1
2. Introducción (marco teórico y objetivos

de la práctica) 1
3. Procedimiento experimental (materiales y

métodos usados) 1
4. Resultados.
5
5. Análisis y discusión de los resultados

5
6. Conclusiones
5
7. Referencias usadas en la preparación del

informe (citadas según sistema
2
Vancouver)
NOTA
PRÁCTICA Nº 1
PRINCIPIOS DE BIOSEGURIDAD EN EL
LABORATORIO
En cualquier laboratorio, se deben de seguir normas y procedimientos para que las personas que
laboran en dicho ambiente no pongan en riesgo su salud y la de la comunidad que lo rodea. Dicho
conjunto de medidas específicas a seguir es lo que se conoce como Bioseguridad.
Por tanto, podemos definir bioseguridad como el conjunto de medidas preventivas orientadas a
mantener, controlar y reducir factores de riesgo laborables procedentes de agentes de riesgo
(biológicos, físicos o químicos) con el objetivo de proteger la salud y la seguridad del personal que
labora en un determinado establecimiento de salud, laboratorio de diagnóstico o de enseñanza
universitaria.
PRINCIPIOS BÁSICOS DE BIOSEGURIDAD

Se debe tener presente que la sangre humana y los fluidos corporales deberán ser tratados como si
estuvieran potencialmente contaminados con patógenos transmisibles por sangre como el VIH y
VHB. Se asume que cualquier contacto directo con estos fluidos puede resultar en infección y por
lo tanto se requiere que cada trabajador utilice su equipo de protección personal.
Con el fin de evitar accidentes laborales se den tener en cuenta los siguientes principios:
1. Universalidad. Se debe asumir como potencialmente infectante, todo paciente o residuo
biológico.
Principio Universal: “TODA MUESTRA BIOLOGICA DEBE SER ASUMIDO COMO UN FACTOR DE
RIESGO INFECCIOSO”
2. Uso de barreras para la protección personal y disminuir los riesgos, para ello se usan
guantes, lentes protectores, mandil, etc.
3. Lavado de manos.
4. Manejo seguro de los residuos sólidos, con el fin de eliminar los residuos biocontaminados
y lograr una buena segregación de la basura.
AGENTES DE RIESGO
Durante el desarrollo de su trabajo en el laboratorio, dependiendo del tipo de laboratorio y del tipo de
actividad que en este se realiza, el personal puede enfrentarse a diversas situaciones de peligro que
ocasionen efectos adversos a la salud. Estas situaciones de peligro se deben a la exposición a ciertos
agentes causantes de daños físicos o enfermedades que pueden ser transmitidas. Estos agentes de riesgo
pueden ser agrupados en tres categorías, en relación a su naturaleza y características:
Agentes de riesgo biológicos
Consiste en la presencia de un organismo, o la sustancia derivada de un organismo, que provoca
una amenaza a la salud humana. Esto puede incluir transmisión por ingestión, inhalación,
inoculación, o por contacto directo a través de piel o mucosas. Entre estos agentes de riesgo se
incluyen bacterias, hongos, parásitos, virus, priones, como también, tejidos y fluidos de organismos
vivientes que porten o puedan portar ese material, que pueden resultar patógenos.
Agentes de riesgos físicos y mecánicos

Son estados energéticos con un efecto nocivo, de acuerdo a la intensidad y el tiempo de exposición a los
mismos, para la salud humana. Entre los cuales encontramos, temperaturas extremas (altas y bajas) que
pueden ser capaces de ocasionar quemaduras, las radiaciones (ionizantes y no ionizantes), objetos
punzo-cortantes (vidrios resquebrajados de recipientes dañados o tubos rotos, hojas de bisturí, navajas,
etc.), electricidad, el ruido producido por aparatos que ocasiona disminución de la audición, mala
iluminación, carga física, vibración, uso de muebles de trabajo inadecuados.
Agentes de riesgo químicos

Es aquel riesgo susceptible de ser producido por una exposición no controlada a productos
químicos, la cual puede producir efectos locales y sistémicos según la naturaleza del producto, la
vía de entrada en el organismo, el tiempo de exposición, etc. Los agentes de riesgo químicos
pueden a su vez ser clasificados de acuerdo a sus características y su modo de acción:
  Corrosivos que causan destrucción o alteración a los tejidos
 Tóxicos, cuyos efectos se manifiestan según la vía de exposición, por inhalación, ingestión
 o contacto directo con piel o mucosas
  Carcinogénicos o mutagénicos
  Inflamables y explosivos
 Etc.
La Organización Mundial de la Salud (OMS) teniendo en cuenta los peligros relativos asociados a
los organismos patógenos que son manipulados en los laboratorios ha realizado una clasificación
de los microorganismos infecciosos por grupos de riesgo en 4 grupos. Los factores utilizados
para agruparlos se basan en: (a) patogenicidad, (b) dosis infectiva, (c) modo de transmisión, (d)
rango de hospedero, (e) disponibilidad de medidas de prevención efectivas y, (f) disponibilidad de
tratamiento efectivo.
Y teniendo en cuenta esta clasificación, los laboratorios son divididos en 4 niveles de bioseguridad o
de contención, que consisten en la combinación de tres elementos: técnica microbiológica, equipo de
seguridad y diseño de la instalación. Cada nivel de bioseguridad tiene barreras establecidas para ofrecer
protección contra los microorganismos, las cuales aumentan con cada nivel. Los laboratorios de nivel de
bioseguridad 1 trabajan con agentes menos peligrosos y requieren de menos precauciones, mientras los
laboratorios de bioseguridad nivel 4 tienen los métodos más estrictos.
En la tabla Nº1 se detalla los diferentes niveles de bioseguridad de un laboratorio y algunos
aspectos relacionados con cada uno de ellos.
Manual de Práctica de Biología Celular
10
Tabla Nº 1: Niveles de bioseguridad
Nivel de
Grupo de riesgo
bioseguridad Agentes de riesgo biológico Tipo de laboratorio Medidas de bioseguridad
(GR)
(BSL)
GR1, riesgo
Bacillus subtilis, Bacillus
individual y Enseñanza básica, Precauciones universales, se trabaja en la mesa de
BSL-1 (Básico) licheniformis, ciertas cepas de E.
poblacional nulo o investigación laboratorio al descubierto
colino patogénicas
bajo
Piletas de lavado de manos, instalaciones de
Campylobacter jejuni, Helicobacter descontaminación de desechos, acceso restringido,
GR2, riesgo señales de advertencia. Personal vacunado,
pylori, Neisseria gonorrhoeae, Servicios de atención
individual capacitado y bajo vigilancia médica. El riesgo
BSL-2 (Básico) Blastomyces dermatitidis, Coccidia, primaria, diagnóstico,
moderado, primario del personal está relacionado con
Toxoplasma gondii, Adenovirus, investigación
poblacional bajo exposiciones accidentales a sangre, fluidos
Papovavirus corporales, etc., que pueden contener un agente
infeccioso.
Acceso restringido al laboratorio, personal
Coxiella burnetii, Mycobacterium
altamente capacitado en el manejo de agentes (con
tuberculosis, VIH, bacterias
potencial de transmisión respiratoria),
GR3, riesgo multirresistentes como
BSL-3 Diagnóstico especial, descontaminación de todos los desechos, cambio de
individual elevado, Staphylococcusa ureus resistente a
(Contención) investigación ropas de protección de laboratorio y su
poblacional bajo meticilina (MRSA) y Streptococcus
descontaminación antes de ser lavadas. Pre-
pyogenes resistente a eritromicina
cámaras, puertas dobles de ingreso, flujo de aire
(SPRE).
negativo.
Personal altamente capacitado, acceso más
BSL-4 GR4, riesgo
Virus del Ebola, virus Marburg, Unidad de patógenos restringido, duchas químicas, uso de trajes
(Contención individual y
virus Lassa, virus Junín. peligrosos especiales, cambio de ropa. Laboratorios en zonas
máxima) poblacional alto
aislados.
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MANEJO DE RESIDUOS SOLIDOS DE ESTABLECIMIENTOS DE SALUD
Para hacer un correcto manejo sanitario de los residuos sólidos es necesario, en primer lugar,
realizar una adecuada clasificación/segregación previa de los mismos. Dicha clasificación permite
la separación de residuos contaminados con agentes patógenos o tóxicos del resto de residuos. La
clasificación se basa en la naturaleza y los riesgos asociados, y se divide en tres categorías: Clase A
(Residuo Biocontaminado), clase B (Residuo especial) y Clase C (Residuo Común) (Tabla Nº2).
Tabla Nº2: Clasificación de residuos sólidos sanitarios
Clase Ejemplo Color de Bolsa

Cultivos, vacunas vencidas o
inutilizadas. Muestras de sangre,
suero, tejidos, órganos. Residuos
quirúrgicos y patológicos. Material Rojo.
Aquellos generados en el
punzocortante que estuvieron en
A proceso de atención e
contacto con pacientes o agentes
investigación médica
infecciosos. Animales
contaminados. Residuos
contaminados provenientes de la
atención al paciente.
Aquellos con potencial Residuos químicos peligrosos.
peligro por lo corrosivo, Residuos farmacéuticos (vencidos,
B inflamable, tóxico, desactualizados, no utilizados). Amarilla
explosivo y reactivo para Residuos radioactivos.
la persona expuesta.
Residuos generados por
Todo material que no administración, limpieza de
C puede clasificarse en las jardines, patios, áreas públicas, Negra
categorías A y B. restos de la preparación de
alimentos.
Bolsas rojas: áreas Bolsas amarillas: áreas Bolsas negras: residuos

biocontaminadas especiales comunes
12
La segregación de los residuos en las diferentes categorías es considerada una etapa fundamental
para las siguientes etapas del ciclo de manejo de residuos: segregación y almacenamiento primario,
almacenamiento intermedio, transporte interno, almacenamiento final, tratamiento, recolección
final y por último, disposición final (Figura Nº1).
Figura Nº1: Ciclo del manejo de residuos sólidos hospitalarios
FUENTE: MINSA – Norma técnica: Procedimientos para el manejo de residuos sólidos hospitalarios (R.M.
N°217-2004/MINSA)
PRECAUCIONES UNIVERSALES
1. Lavarse siempre las manos con abundante agua y jabón.

2. Usar barreras de protección como guardapolvo largo, guantes, mascarilla, etc. y de ser posible
llevar el cabello recogido.
3. Evitar lesiones por agujas, bisturís y otros instrumentos cortantes durante los procedimientos y
limpieza del material utilizado.
4. Desinfectar, esterilizar y descartar adecuadamente los instrumentos después de usarlos.
Joyce del Pino, Rafael Alvis, Danae Liviac, Gisella Guillén

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COMPETENCIAS
  Desarrolla actitudes responsables en el trabajo en el laboratorio.

 Define las normas que se deben adoptar dentro de los laboratorios de la Universidad Científica
 del Sur para prevenir accidentes.
 Analiza cuáles son los riesgos a los que puede estar expuesto durante el aprendizaje en el
laboratorio.

14
PRÁCTICA Nº 2
FUNDAMENTOS DE MICROSCOPÍA
El ojo humano con una visión en óptimas condiciones solo puede observar elementos cuyo tamaño
sean mayores a 0,1 mm Para poder visualizar y catalogar las dimensiones por debajo de dicho
tamaño, surgió la necesidad de crear instrumentos y técnicas adecuadas que permitan explorar el
campo de la Biología Celular. Por esta razón, aparecen en primer lugar las lupas y los microscopios
simples, muy útiles para el estudio de estructuras macroscópicas pero insuficientes para poder
realizar un estudio de estructuras celulares. Para cumplir con este fin, aparece el microscopio óptico
común o microscopio compuesto. El microscopio óptico compuesto no es más que un sistema
óptico de lentes convergentes que cumplen la función de aumentar la imagen de un objeto.
Fuente: LABORATORIODE BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR, UNIVERSIDAD CIENTIFICA DEL

SURhttp://www.cientifica.edu.pe

15
Fuente: GENOMA SUR – INTRODUCCIÓN A LA CÉLULA

http://www.genomasur.com/lecturas/Guia01.htm
EL MICROSCOPIO ÓPTICO
Parte mecánico y sus componentes:
  Pie o base: se encuentra en la parte inferior del aparato, proporcionándole estabilidad.

  Columna o brazo: estructura metálica que sostiene a las demás piezas del microscopio.
 Platina: placa horizontal donde se coloca el portaobjetos con la muestra y es sujetada por un
sistema de pinzas que permiten deslizar el portaobjetos en dos sentidos perpendiculares.
 Además, posee una perforación central para el paso de los rayos de luz.
 Diafragma: Está asociado a la platina ubicado entre la fuente de luz y el condensador. Es una
membrana metálica que se abre o cierra, cuya función es regular la intensidad de luz que
 atraviesa el objeto y eliminar los rayos periféricos que distorsionan las imágenes.
 Tornillos macro y micrométrico: son las que desplazan la platina en un sentido vertical
posibilitando el enfoque. El tornillo macrométrico es el que da un ajuste grueso, con
movimientos amplios de la platina (cm, mm). El micrométrico permite un ajuste fino, casi
 imperceptible (μm) para lograr una imagen nítida de la muestra a observar.
  Revolver: sitio donde se montan los objetivos.
 Cabezal: soporta el revólver y los oculares. Pueden ser mono, binocular o trinocular. Los
cabezales trinoculares son poseen un adaptador para una cámara fotográfica.
Parte óptico y sus componentes:
 Condensador: Lente o sistema de lentes de forma cónica que posee un sistema de dos lentes
convergentes que utilizan para hacer eficiente la iluminación, de manera que la mayor parte de
los rayos luminosos de la fuente atraviesen el preparado y entren en el sistema óptico del
 microscopio.
  Ocular: es la lente o sistema de lentes más cercana al ojo del observador, montada en un tubo
monocular o en dos tubos binocular. Las lentes llevan impreso el número de aumentos: 6X, 10X
 y 15X; El más común es el de 10X. (“X” se lee “por”).
 Objetivo: es la lente más cercana al objeto a observar. En el revólver existen cuatro o cinco
objetivos montados de distintos aumentos. Estos llevan escrito el aumento que puede alcanzarse
con ellos, usualmente son de 4X, 10X, 40X, y 100X. Los cuatro primeros se denominan lentes
secos y la última, lente húmedo o de inmersión, ya que debe sumergirse en aceite de origen
 sintético cuyo índice de refracción sea próximo al del vidrio.
*Fuente de luz o lámpara. Los haces de luz pueden ser natural o artificial, cuando es natural (solar)
un espejo situado en la base del microscopio recoge la luz del medio y la refleja a través del objeto

16
y del sistema de lentes. La luz artificial la constituye generalmente un foco de luz halógena
ubicado en el microscopio y conectado a un circuito eléctrico de bajo voltaje (6 a 12V).
CONCEPTOS BÁSICOS
Aumento total (AT): es la imagen obtenida de un objeto que se obtiene al multiplicar el aumento
del lente objetivo utilizada por el aumento de la lente ocular.
AT= Aumento objetivo (4x, 10x, 40x y 100x) X el aumento del ocular (10X).
Poder de resolución (PR): es la capacidad de un instrumento óptico, en este caso el microscopio,
para visualizar los detalles de un objeto; es decir, es la capacidad de poder distinguir dos puntos
muy próximos como separados desde una distancia determinada.
ENFOQUE
 Asegúrese primero de que el microscopio esté sobre una base sólida y se encuentre conectado a
 una toma de corriente eléctrica.
  Utilice siempre el objetivo de menor aumento (4X), para el primer enfoque de una muestra.
  Encienda la fuente de luz, lleve el condensador a una distancia de 1 a 2 mm de la platina
  Verifique que el diafragma esté abierto y el objetivo perpendicular a la platina.
 Coloque una de las láminas preparadas sobre la platina y asegúrela con las pinzas del sistema de
 desplazamiento que tiene la platina.
  Procure que la muestra que va a ser observada se encuentre en el centro del orificio de la platina.
 Gire el tornillo macrométrico hasta obtener una distancia de 1 a 2 cm entre el objetivo y la lámina
 preparada. ESTA OPERACIÓN DEBE HACERLA SIN COLOCAR SUS OJOS SOBRE EL
 OCULAR.
 Ahora coloque los ojos sobre los oculares y manténgalos abiertos, ajuste el sistema de
 binoculares a su distancia ocular, de modo que observe un solo y gran campo de luz.
 Siga moviendo la platina hacia arriba utilizando el tornillo macrométrico hasta que visualice la
 muestra en la lámina que preparó. Este enfoque se llama ENFOQUE GRUESO.
 Empiece a girar, con los dedos pulgar e índice de ambas manos, el tornillo micrométrico hasta
que pueda observar nítidamente la muestra, esto es el ENFOQUE FINO, que se ajusta a la
 visión de cada observador.
  Rote el revólver para cambiar de objetivo.
  Manipule el tornillo micrométrico y enfoque nuevamente la muestra que esté observando.
 En el caso de que use el objetivo de inmersión, una vez que haya enfocado su muestra con el
objetivo de 40X, previo al cambio con el objetivo de 100X, se agrega una gota de aceite de cedro, se
ubica el objetivo y se enfoca la muestra usando el tornillo micrométrico con mucho cuidado.
COMPETENCIAS
1. Identifica las partes del microscopio óptico.
2. Reconoce los diferentes componentes del microscopio.
3. Conoce las características del microscopio óptico.
4. Efectúa el enfoque fino y observar el detalle de la muestra.
5. Realiza preparaciones en el laboratorio.

17
MATERIALES
MATERIALES DEL LABORATORIO
 Microscopios ópticos  4 tijeras
 Papel lente  1 caja de láminas porta objeto y
 1 Goteros laminillas cubre objeto.
 4 hojas de afeitar
MATERIALES DEL ESTUDIANTE

 1 Corcho natural  Hoja de diario
PROCEDIMIENTOS
Preparación de muestras:
 Tome una lámina portaobjeto limpia, estas láminas y los cubreobjetos siempre debe tomarlos
 por los bordes usando los dedos pulgar e índice.
 Con una navaja corte una lámina delgada de corcho, colóquelo en el centro de la lámina
 portaobjeto. Enfoque a 40X, 100X y 400X. Esquematice a 400X.
 Repita la misma operación en otra lámina y coloque esta vez la letra “e” minúscula recortada
de un diario cualquiera. Asegúrese de colocar la letra como usted la lee (e). Enfoque a 40X,
 100X y 400X. Esquematice a 40 y 100X
.

18
TIPOS DE MICROSCOPÍA (continuación)

COMPETENCIAS
1. Reconoce la importancia delos diferentes tipos de microscopio.
2. Conoce las características del microscopio de campo oscuro, contraste de fases,
fluorescencia y microscopios electrónicos, en el estudio de los sistemas biológicos.
3. Reconoce el impacto que produjo en el estudio de los sistemas biológicos el desarrollo de
la microscopia electrónica.
MARCO TEÓRICO
El uso de determinados componentes colocados en el condensador o en los objetivos se interponen

al haz luminoso emitidos por la lámpara, filtrando u obstaculizando la luz y dan lugar a los distintos
tipos de microscopía óptica como la de campo claro, campo oscuro y contraste de fases. Estos tipos
de dispositivos en un microscopio de contraste de fases manipulan físicamente los haces luminosos
seleccionando parte de las ondas de las que se compone dicho haz, lo que provoca una imagen
contrastada de la muestra sin necesidad de teñirla. En el caso de la microscopia de fluorescencia, se
utiliza una lámpara que emite un haz luminoso fuera del rango de la luz visible y se aprovecha esta
propiedad de filtrar los haces de luz para poder manejar la longitud de onda que incide y emite una
muestra determinada mediante filtros. Actualmente, el microscopio de fluorescencia más utilizado
es el de epifluorescencia, que simplemente indica que la luz filtrada no atraviesa la muestra, sino
que incide sobre ella a través del lente objetivo, y esta misma lente es la encargada de recoger la luz
que emite la muestra excitada.
Otro tipo de microscopía es la Microscopía Electrónica, cuya principal virtud radica en la potencia
amplificadora que no posee un microscopio óptico, debido a que la microscopia óptica está limitada
por la longitud de onda de la luz visible (alrededor de 4000 ángstroms). En cambio, un microscopio
electrónico utiliza electrones para iluminar un objeto, siendo la longitud de onda de un electrón de
0,5 ángstroms; razón por la cual en un microscopio electrónico se puede mostrar estructuras mucho
más pequeñas. La imagen que se produce es por la dispersión de los electrones, mientras que en el
microscopio óptico la imagen que se produce es por absorción de los fotones. Es decir, la imagen
que se puede observar se debe a la diferente absorción de la luz por las distintas estructuras de la
muestra, mientras que en el microscopio electrónico la formación de la imagen está en función de
la dispersión y, por consiguiente, perdida de los electrones. Existen dos tipos básicos de
microscopios electrónicos: el microscopio electrónico de transmisión (Transmission Electron
Microscope, TEM) y el microscopio electrónico de barrido (Scanning Electron Microscope, SEM).
En el microscopio electrónico de transmisión (MET), la observación de una muestra biológica se

necesita realizar cortes histológicos ultrafinos. Los haces de electrones se dirigen hacia la muestra que
se desea aumentar y uno de estos electrones que es emitido por la lámpara rebota o es absorbido por el
objeto y otros la atraviesan formando una imagen aumentada de la muestra en estudio. Los microscopios
electrónicos de transmisión pueden aumentar un objeto hasta un millón de veces.
En un microscopio electrónico de barrido (MEB), las imágenes que se crean es una imagen ampliada de
la superficie de un objeto a observar. En este tipo de microscopio la ventaja que se tiene es que no
necesario realizar un corte del objeto en capas para poder observarlo, sino que se puede colocar

19
un fragmento o la muestra completa dependiendo del tamaño con muy pocos preparativos. La MEB
explora la superficie de la muestra a evaluar y provee una imagen punto por punto, al contrario de
que ofrece la MET, que examina una gran parte de la muestra cada vez. Su funcionamiento se basa
en recorrer la muestra con un haz muy concentrado de electrones. Los microscopios electrónicos de
barrido pueden ampliar los objetos 200.000 veces.
TIPOS DE MICROSCOPIOS
MICROSCOPIO UTILIDAD
Óptico de campo claro Para observar muestras teñidas.
Para la observación de microorganismos

vivos, invisibles a la microscopia de campo
Óptico de campo oscuro
claro debido a que no se tiñen con facilidad,
porque se distorsiona su visualización.
Para facilitar la visualización de estructuras

Óptico de Contraste de fases
internas de muestras vivas no teñidas
Observar estructuras internas específicas

Óptico de Fluorescencia mediante la utilización de fluorocromos o
anticuerpos marcados.
Examinar virus o la ultraestructura interna de

Electrónico de transmisión cortes delgados de células (aumento de 10000
- 100000X)
Estudiar las características de las superficies

Electrónico de barrido
externas de organismos, células y virus.
Fuente: Comunicación personal.
MATERIALES
 Placas fotografías usando los diferentes tipos de microscopio óptico y electrónico.
PROCEDIMIENTOS
 Teniendo en cuenta la información presente en la explicación del docente, analice las
siguientes fotografías de muestras observadas mediante microscopía.

20
Tipo de microscopia utilizada

………………………………….
Tipo de microscopio utilizado
………………………….………
1000X
Fuente: Angiogénesis en tumores de células germinales testiculares

http://www.conganat.org/3congreso/cvhap/comunicaciones/059/index.htm

…………..…………………….
…………….……………………
100000X
Fuente: Microscopio virtual

http://www.biologia.edu.ar/microscopia/meb.htm

21

…………….……………………
……………..……………………
1000X


…………….……………………
……………..……………………
100000X


22

…………….……………………
…………….……………………
1000X


…………….……………………
…………….……………………
400X


23
PRÁCTICA Nº 3
PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA
CITOPLASMÁTICA. (ÓSMOSIS)
Fuente: http://php.med.unsw.edu.au/cellbiology/index.php?title=Cell_Membranes_and_Compartments
La membrana celular es una estructura supramolecular que está presente en todos los tipos
celulares. Está constituida básicamente por una bicapa fosfolípidica, en donde se insertan proteínas
(periféricas o integrales). Algunas células pueden presentar carbohidratos asociados a lípidos y/o
proteínas, encontrándoselas en la monocapa externa y en menor porcentaje.
La membrana celular rodea a las células dándole una individualidad, debido a que separa dos
medios acuosos: la región intracelular llamada citoplasma y la externa o región extracelular. Esta
membrana es un filtro, altamente selectivo, que controla la entrada de nutrientes y la salida de los
productos residuales, debido a esta propiedad es considerada como semipermeable.
En la actualidad se considera al modelo de “Mosaico Fluido” (Singer y Nicholson, 1972) como la
estructura básica de las membranas. Este modelo propone que los lípidos se disponen formando una
verdadera bicapa que permite desplazamientos, donde las proteínas integrales se insertan tomando
contacto con la superficie extra e intracelular. Uno de los conceptos básicos de este modelo es que
la bicapa permite desplazamientos considerables de sus componentes. Por lo tanto, la doble capa no
es estática, sino que es capaz de permitir y propiciar un movimiento a lo largo del plano estructural
de la membrana. Una de las características más relevantes de la organización molecular de las
membranas es la asimetría de todos sus componentes, lo cual significa que en ambas mitades de la
bicapa los componentes se distribuyen de diferente manera.
Las funciones de la membrana son de transporte (el intercambio de materia entre el interior de la
célula y su medio externo), reconocimiento y comunicación (gracias a moléculas situadas en la
parte externa de la membrana, que actúan como receptoras de sustancias.

24
ÓSMOSIS Y PRESIÓN OSMÓTICA
El componente principal de la célula es el agua, que actúa como solvente de solutos orgánicos e
inorgánicos.
El movimiento de moléculas de agua de una zona de mayor concentración a una zona de menor
concentración de agua a través de una membrana semipermeable (es decir, el agua se mueve de un
lugar donde hay mucha agua a un lugar donde hay poca agua). El proceso de ósmosis involucra
necesariamente la presencia de una membrana semipermeable que separa dos zonas con
concentraciones diferentes (Figura 2).
El movimiento del agua a través de las membranas biológicas es siempre pasivo (sin gasto de
energía), la fuerza que dirige este movimiento se conoce como presión osmótica.
Fuentes: http://keepinapbiologyreal.wikispaces.com/Osmosis
Figura 2. Proceso de ósmosis
Cuando la célula se encuentra en una solución cuya concentración de solutos es menor que la del medio
interno de la célula, se dice que la célula está en una solución hipotónica y como consecuencia, el agua
entra a la célula causando que se expanda. Si la concentración de solutos es mayor fuera de la célula, se
dice que la célula está en una solución hipertónica; provocando que la célula pierda agua y pierda
tamaño. Si las concentraciones de soluto son iguales en ambos lados de la membrana, se dice que la
célula está en una solución isotónica, donde el movimiento neto es cero.
Las células animales y vegetales funcionan óptimamente en ambientes isotónicos. Las células
vegetales cuando se les coloca en una solución hipotónica, la vacuola se llena de agua y ocurre un
fenómeno llamado turgencia, mientras que en las células animales el agua tiende a entrar,
provocando que las células se hinchen y lleguen incluso a estallar, fenómeno llamado lisis. Por otra
parte, si la célula vegetal se le coloca en una solución hipertónica, pierde agua y la célula sufre el
fenómeno denominado plasmólisis al separarse la membrana celular de la pared celular, lo cual
suele ser letal; mientras, la célula animal pasaría por un fenómeno de crenación (Figura 3).

25
En Célula Vegetal
Fuente: http://bio1100.nicerweb.com/Locked/media/ch04/tonicp.html
En Célula Animal
Fuente: http://catalog.flatworldknowledge.com/bookhub/4309?e=averill_1.0-ch13_s05
Figura 3: Efecto de diferentes concentraciones de solución salina en células animales y células vegetales
COMPETENCIAS
1. Identifica la característica de permeabilidad de la membrana celular.

2. Reconoce e identificar soluciones hipotónicas, isotónicas e hipertónicas.
3. Diferencia las respuestas celulares a diferentes concentraciones salinas.
4. Deduce como la pared celular afecta el comportamiento osmótico de la célula.
5. Desarrolla habilidades en el trabajo de laboratorio

26
MATERIALES
  4 Goteros  4 Sacabocados
  100 ml de Solución NaCl 0.2%  1 Balanza
 (0.015M)  4 Lancetas
  100 ml de Solución NaCl 0.8%  1 frasco de 100 ml de Alcohol yodado
 (0.15M)  1 paquete de torundas de algodón
  100 ml de Solución NaCl 0.9%  1 caja de láminas portaobjetos
  100 ml de Solución NaCl 5% (0.3M)  1 caja de laminas cubreobjetos
 3 beaker de 100 ml 


MATERIALES DEL ESTUDIANTE 
  1 papa mediana  4 hojas de afeitar
 1 rama de hojas de Elodea sp  4 plumones marcador
PROCEDIMIENTOS
1. Efecto de soluciones hipotónicas, hipertónicas e isotónicas en células vegetales (Elodea

sp): Colocar una hoja de Elodea sp sobre una lámina portaobjeto, colocar una gota de solución
salina al 0.2%, rotular la lámina con el marcador y cubrir la muestra con una laminilla.
Observar al microscopio a 40X, 100X y 400X. Esquematice sus observaciones a 400X. Repetir
el procedimiento con las soluciones al 0.8 % y 5%. Esquematizar sus observaciones.
2. Efecto de soluciones hipotónicas, hipertónicas e isotónicas en células animales (glóbulos

rojos). Limpiar y desinfectar con alcohol la pulpa del dedo anular. Punzar con la lanceta estéril
y colocar en cada lámina portaobjeto una gota de sangre. A cada lámina agregar 1 gota de
solución de NaCl: a la primera NaCl 0.9%; a la segunda, NaCl 0.2% y a la tercera, NaCl 5%.
Marcar cada uno de los preparados. Observar al microscopio y esquematizar a 400X.
3. Osmolaridad en las células vegetales: Se observará como los diferentes tipos de soluciones
afectan el equilibrio y el funcionamiento de las células vegetales. La osmolaridad se expresa
como moles de soluto por litro de solución; mientras más alta es la osmolaridad, mayor es la
concentración de soluto.
Preparar 3 beakers de 40 mL rotulados para cada solución. Usar un cortador cilíndrico para
sacar 1 cilindro de la papa de 5cm de largo. Cortar de cada cilindro 9 rueditas uniformes de
aproximadamente 5mm de grosor, separarlas en tres grupos y pesar cada grupo por separado y
tocar la textura inicial. Anotar los datos. Transferir a los vasos rotulados con las soluciones de
NaCl 0.015, 0.15 y 0.30M y anotar el tiempo en que se inicia Incubar por 30 minutos a
temperatura ambiente. Retirar cada grupo de rueditas de las soluciones en que están sumergidas
a una hoja de papel secante. Anotar si hubo cambios en textura y pesarlas nuevamente.
Analizar y discutir los resultados.

27
PRÁCTICA Nº 4
PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA
CITOPLASMÁTICA (DIFUSIÓN Y DIÁLISIS)
DIFUSIÓN
Es el movimiento de moléculas de una región de alta concentración a otra de menor concentración
producido por la energía cinética de las moléculas. Todas las moléculas de gases y líquidos tienden
a moverse o difundirse en todas direcciones hasta que se encuentran distribuidas regularmente por
todo el espacio disponible.
La difusión no requiere gasto de energía por parte de la célula y por lo tanto es un movimiento pasivo.
La velocidad de difusión depende del tamaño de las moléculas y de la temperatura, la causa de la
difusión es el movimiento térmico de las moléculas. Con el crecimiento de la temperatura de la
solución, la velocidad de difusión, por lo común, aumenta.
Fuente: http://en.wikipedia.org/wiki/Diffusion
Fuente: http://www.tutorvista.com/content/biology/biology-iii/biomembranes/physical-processes.php
Fig. 4. En la difusión, las moléculas tienden a esparcirse y separarse lentamente con el tiempo. Las
moléculas se mueven a favor del gradiente de concentración.

28
DIÁLISIS
Es la difusión de moléculas de bajo peso molecular a través de una membrana semipermeable,
éstas se desplazan desde la solución más concentrada a la más diluida. (Figura 5). Es el fundamento
de la hemodiálisis que intenta sustituir la filtración renal deteriorada.
Fuentes: The purification of proteins is an essential first step in understanding their function
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/bookshelf/br.fcgi?book=stryer&part=A438
Fig. 5. En el proceso de diálisis, las moléculas de bajo peso molecular son capaces de atravesar la
membrana semipermeable, moviéndose a favor del gradiente de concentración.
COMPETENCIAS
1. Identifica la característica de permeabilidad de la membrana celular.
2. Describe los mecanismos de difusión y diálisis a nivel molecular.
3. Enumera factores que afectan la velocidad de difusión.
4. Desarrolla habilidades en el trabajo de laboratorio
MATERIALES
 40 ml de agua helada  40 ml de solución de almidón al 1%

 40 ml de agua caliente  Agua destilada
 100 ml de Reactivo de Biuret  3 Beakers 100 ml
 50 ml de Colorante Azul de Metileno  2 Beaker 500 ml
 100 ml de Nitrato de plata  2 tubos de ensayo
 1 L de Solución de Lugol  1 embudo
  40 ml de solución de albúmina 1.5%
 40 ml de solución de Cloruro de
Sodio al 30%

 20 cm de pabilo  4 hojas de afeitar
 2 Palitos de anticucho  2 buches limpios de pollo
 1 huevo

29
PROCEDIMIENTO.
1. Difusión# 1(factor temperatura): En este experimento, se estudiará el movimiento browniano

de las moléculas y el efecto de la temperatura. Colocar en un beaker, 40 ml de agua a
temperatura ambiente; en otro, 40 mL de agua helada y un tercero, 40 mL de agua caliente.
Añadir simultáneamente a cada uno de ellos una gota de colorante azul de metileno (sin mover
demasiado el agua) y observar el comportamiento de la gota en el agua. Anotar sus
observaciones.
2. Diálisis #1 (de afuera hacia adentro): Atar con pabilo un extremo del buche y por el otro
extremo añadir, usando un embudo, 40 mL de solución de almidón al 1%. Cerrar el orificio del
buche que quedó abierto con pabilo y con ayuda de un palito de anticucho, colocar en un
beaker que contenga 150 mL de agua con varias gotas de solución de Lugol hasta tener un
color dorado. Dejar actuar durante 30 minutos. Retirar del beaker y anotar los cambios de color
dentro del buche.
3. Diálisis #2 (de adentro hacia afuera): Atar con pabilo un extremo del buche, por el otro extremo
añadir, usando un embudo, 40 mL de solución de Cloruro de Sodio al 30% y 40 mL de solución de
albúmina al 0.5%. Cerrar con pabilo el extremo que quedó abierto, mezclar y con ayuda del palito
de madera, colocar en un beaker que contenga 150 mL de agua destilada. Dejar actuar por 30
minutos. Retirar del beaker y proceder a verter 6 ml de la mezcla de dentro del buche a un tubo de
ensayo y adicionar 4 gotas de reactivo de Biuret. Repetir el procedimiento con la solución del
beaker. Anotar los cambios de color en cada uno de los tubos. Además, a la solución del beaker
añadir cinco gotas de solución de nitrato de plata (AgNO3) y anotar los cambios de color.

30
PRÁCTICA Nº 5
LA CÉLULA EUCARIÓTICA Y PROCARIOTA:

RECONOCIMIENTO DE ESTRUCTURAS
La Teoría Celular establece que todos los seres vivos están constituidos por células, que todos los
seres vivos son la expresión de cada una de las células que lo constituyen, que una célula sólo
proviene de una ya existente y que la célula es la unidad básica de todo ser vivo. Se han
identificado hasta el momento dos tipos celulares: la célula procariota (que se caracteriza
principalmente por que el material genético constituido por ADN desnudo y que se encuentra libre
en el citoplasma celular), y la célula eucariota (que se caracteriza porque el material genético
formado de ADN asociado a proteínas se encuentra separado del citoplasma por una membrana
denominada membrana nuclear), pero ambos tipos celulares comparten estructuras en común: la
membrana celular, el citosol o hialoplasma, el citoesqueleto, los ribosomas y el material genético.
La célula eucariota presenta mayor tamaño y organización que la célula procariota y en su

citoplasma se encuentran estructuras celulares que van a cumplir diversas funciones que se conocen
con el nombre de organelas celulares, inclusiones citoplasmáticas, sustancias ergásticas y/u otras
estructuras.
Las células procariotas son por lo general muy pequeñas, con una estructura interna relativamente
muy simple. Casi todas las células procariotas están rodeadas por una pared relativamente dura
llamada peptidoglucano. Son cosmopolitas. El citoplasma de la mayor parte de procariotas es en
apariencia relativamente homogéneo. En general, el ADN está enrollado, adherido a la membrana
plasmática y concentrada en una región de la célula, llamada nucleoide. Los procariotas incluyen
los reinos Monera (simple bacterias) y Archaea. Carecen de las características "organelas"
envueltas en membrana subcelular de los eucariotas, pero pueden contener sistemas de membrana
dentro de la pared celular. Las células procarióticas pueden tener pigmentos fotosintéticos tales
como los encontrados en las cianobacterias ("bacterias azules"). Algunas células procariotas tienen
flagelos externos en forma de látigo para la locomoción o pili como pelos para adherirse. Las
células procariotas tienen múltiples formas: cocos (redonda), bacilos (bastones), y espiralada o
espiroquetas (células helicoidales).
En la célula eucariota se pueden distinguir dos tipos de células, la célula eucariota animal y la
célula eucariota vegetal. Estas células tienen estructuras en común como: la membrana celular,
citosol, citoesqueleto, retículo endoplasmático, aparato de Golgi, mitocondrias y núcleo; pero
también tienen estructuras propias que las caracterizan, por ejemplo: la célula eucariota animal
presenta centriolos y estructuras locomotoras como los cilios y flagelos, mientras que las células
vegetales se caracterizan por la presencia de una pared celular compuesta principalmente
carbohidratos y plastidios que pueden tener o no pigmentos.
Todas las organelas celulares trabajan coordinadamente para el funcionamiento general y preciso
de la célula, muchas veces resulta difícil entender este proceso de forma dinámica y con todas las
estructuras celulares trabajando a la vez y en estrecha colaboración logrando que la célula se
convierta en una máquina biológica perfecta que cumple sus funciones vitales de forma precisa y
constante, convirtiéndose en la pieza base de los organismos multicelulares.

31
La membrana celular delimita el territorio celular y como se ha observado en prácticas anteriores es

la puerta de entrada y salida celular, la pared celular presente en las células vegetales es una
estructura de sostén y protección. El citoplasma celular está formado por el hialoplasma,
citoesqueleto y organelas celulares. El hialoplasma es un medio acuoso, con un 85% de agua en el
cual esta disuelta gran cantidad de moléculas formando una solución coloidal; prótidos
(aminoácidos, enzimas, proteínas estructurales), lípidos, glúcidos (polisacáridos, metabolitos),
ácidos nucleicos (nucleótidos, nucleósidos, ADN, ARN, ARNt, ARNr) sales e iones.
El movimiento ciliar está adaptado al medio líquido y es cumplido por pequeños apéndices
especialmente diferenciados. Se trata de filamentos contráctiles variables en número y tamaño, que
reciben el nombre de flagelos, si son escasos y largos y cilios, si son cortos y numerosos. En los
protozoarios, hay centenares o miles de pequeños cilios cuyo movimiento permite al organismo
desplazarse con rapidez en el medio líquido. En algunos protozoarios especiales los cilios se
fusionan y forman apéndices cónicos más gruesos denominados cirros.
En Protozoarios, toda la clase flagelados se caracteriza por la presencia de flagelos. Entre los
metazoarios, solo los espermatozoides tienen la propiedad de desplazarse como células aisladas por
medio de esos apéndices.
Las mitocondrias son organelas proveedoras de energía y los plastidios con pigmento cumplen la
función de dar color a las estructuras vegetales además de la fotosíntesis (cloroplastos), mientras
que los plastidios sin pigmento llamados también leucoplastos guardan los productos obtenidos
durante la fotosíntesis.
COMPETENCIAS
1. Reconoce e identificar una célula procariota
2. Identifica y reconocer células eucariotas.
3. Diferencia una célula procariótica de una célula eucariótica.
4. Identifica las estructuras celulares en las células eucariotas.
5. Identifica y diferenciar las células eucariotas animales y vegetales.
6. Identifica las estructuras propias de las células eucariotas animales y vegetales.
7. Maneja el material biológico siguiendo las normas de bioseguridad.
8. Diferencia los distintos tipos de microscopía en el reconocimiento de estructuras celulares.
9. Maneja muestras biológicas húmedas y coloreadas para su observación microscópica.
MATERIALES
 Microscopio de campo claro  100 ml de Solución de rojo neutro

 4 Goteros  5 ml de aceite de inmersión
 1 caja de láminas y laminillas  1 pliego de papel lente
 4 hojas de afeitar  100 ml de Lugol
 1 Láminas fijadas de espermatozoides  4 pinzas de punta fina
 100 ml de Colorante verde de Janus

32
  50 ml de agua del pantano

  1 cebolla
  1 rama de Elodeasp
 1 Plumón marcador
PROCEDIMIENTO
1. OBSERVACIÓN DE ESTRUCTURAS DE CÉLULAS PROCARIOTAS
 Células Procarióticas. Se observarán láminas fijadas de bacterias coloreadas con coloración

Gram al microscopio óptico con el objetivo de inmersión (100X). Observe la forma y tamaño
de las células. Esquematice.
Coco
Gram+
Bacilo Gram-
1000 X
Fuente: Laboratorio de Biología. Universidad Científica del Sur
2. OBSERVACIÓN DE ESTRUCTURAS DE CÉLULAS VEGETALES
 Núcleo, Nucléolo y pared celular: En una lámina portaobjeto coloque una gota de lugol sobre
ella un fragmento de catáfilo de cebolla extraído con una pinza. El fragmento tomado debe ser
transparente y debe colocarse completamente extendido sobre la lámina. Ponga una lámina
cubreobjetos y sin aplicar presión elimine cuidadosamente el exceso de líquido con ayuda de
un papel secante. Observe al microscopio y esquematice sus observaciones a 100X y 400X.

33
Nucleólo
Pared celular
Núcleo
400 X
400 X
Célula de catafilo de cebolla Allium cepa
 Observación de plastidios y ciclosis: Coloque una hoja de Elodeasp en una lámina, añadir una
gota de agua y observa al microscopio. Esquematice a 400X.
4000 XX
Cloroplastos (clorifila) en Elodea sp.
3. OBSERVACIÓN DE ESTRUCTURAS DE CÉLULAS ANIMALES:
 Núcleo, citoplasma y mitocondrias: Con un hisopo estéril haga un raspado de epitelio bucal y
estire la muestra en una lámina porta objeto y déjelo secar a medio ambiente durante tres
minutos. Cubra la muestra con Verde de Janus y déjelo reposar cinco minutos luego elimine el
exceso de colorante. Observe el citoplasma claro, limitado por la membrana, el núcleo más
teñido y las mitocondrias pueden ser observadas de color azul-verdoso. Esta coloración se debe
al sistema citocromo-oxidasa, en cambio en el citoplasma el colorante es reducido a su
leucobase. Esquematice a 400X.

34
Mitocondria
Núcleo
Citoplasma
1000 X
CÉLULAS DE EPITELIO BUCAL
 Cilios y flagelos:
Observación de cilios en Protozoarios: Coloca una gota del cultivo de Protozoarios sobre una
lámina portaobjeto y cúbrala con una laminilla. Observe el movimiento de los cilios.
Cilios
1000 X
CILIADO Loxophyllum sp.

35
 Observación de flagelos: Coloque una lámina fijada de espermatozoides en el microscopio y
obsérvela a 1000x. Esquematice.
Flagelo
1000 X
ESPERMATOZOIDE HUMANO

36
PRÁCTICA Nº 6
OBTENCIÓN Y ANÁLISIS DE FRACCIONES

CELULARES
Fuente: Separación de mezclas

http://quimicalibre.com/separacion-de-mezclas-cromatografia-y-centrifugacion/
Las diferentes metodologías utilizadas para el estudio de la composición celular, entre ellas las
técnicas bioquímicas, fisiológicas y citológicas. Permiten analizar en gran medida la anatomía y
localización de las estructuras y organelas celulares. Sin embargo, si se desea profundizar en la
funcionabilidad de cada componente celular se deben realizar ensayos bioquímicos y fisiológicos.
Generalmente el primer paso es obtener fracciones enriquecidas con las distintas estructuras u
organelas.
Una de las técnicas más utilizadas para obtener dichas fracciones es el Fraccionamiento Celular, el
cual es un conjunto de procedimientos que tienen como principal objetivo obtener fracciones puras
o enriquecidas de un determinado componente celular, ya sea éste una organela como el núcleo,
mitocondrias, lisosomas, peroxisomas, etc. Y dependiendo del estudio que se desee elaborar la
fracción celular también puede estar compuesta por restos de membrana celular o por complejos
multiproteicos como el citoesqueleto de actina, microtúbulos y poros nucleares. Todo proceso de
Fraccionamiento Celular tiene tres etapas:

37
HOMOGENIZADO
Ruptura de las células o tejidos para obtener un lisado celular (o tisular), de tal modo que se liberen sus
componentes, en particular sus organelas, sin que estos sufran mayores daños y que se encuentren en
condiciones adecuadas para su purificación. Para el caso de la ruptura celular, también existen diversas
alternativas como es; el método mecánico, donde se hace uso de instrumentos como el mortero, pinzas,
homogeneizadores y ultrasonido que permiten la disgregación y lisis celular. Pero si se desea partir de
un cultivo celular, no es necesario separar las células y se pasa directamente a la lisis celular. En el caso
del método químico, el uso de detergentes, enzimas y el shock osmótico. También cumplen con la
función de romper y lisar la membrana celular.
FILTRADO
Proceso que consiste en la separación de componentes no deseados presentes en la suspensión

celular mediante un medio poroso, que retiene sólidos y permite el pasaje del líquido. Dependiendo
de la naturaleza del contaminante, esto puede ser tan simple como verter el homogeneizado a través
de una gasa y recoger el filtrado en el otro lado.
CENTRIFUGADO
Una vez que se tienen todos los componentes celulares libres, es necesario separarlos en fracciones, es
decir, realizar su fraccionamiento y el método más utilizado para este fin es la centrifugación de
gradiente de densidad o también el de centrifugación diferencial; cuando los diferentes componentes
celulares se encuentran suspendidos en un líquido, tienden a sedimentar hacia el fondo por el efecto de
la gravedad. Para acelerar este proceso, se puede colocar a un tubo conteniendo esta suspensión en un
rotor giratorio, de forma de someter a las partículas a una fuerza centrífuga.
COMPETENCIAS
1. Identifica las fracciones celulares a partir de hígado de pollo.
2. Deduce el rendimiento y pureza de cada fracción.
3. Conoce la técnica de fraccionamiento celular para el estudio de las organelas celulares.
4. Usa colorantes que identifiquen organelas específicas celulares.
5. Distingue los tipos de microscopía de campo claro y fluorescencia en las muestras preparadas.
MATERIALES:
• 1 Mortero • 100 ml de Buffer Tris 10 mM pH 7,5

• 1 Gasa • 1,5 ml de Colorante DAPI
• 16 tubos ependorf de 1,5mL • 1,5 ml de Mytotracker
• 2 beaker de 100 ml • 1 caja de láminas y laminillas
• 100 ml de Verde de Janus • Microscopio de campo
• 1 Cubetas con hielo claro y de fluorescencia.
• 1 beaker de 50 ml

38
• 10 gr. de hígado de pollo
PROCEDIMIENTO
1. Colocar el hígado en el mortero, asegúrese de moler bien y de extraer los ligamentos

conjuntamente con la grasa. Realice una pasta uniforme del hígado y seguidamente
adicione 20 ml de la solución Tris 10 mM pH 7,5. Con una gasa filtre en un beaker limpio.
2. Transvasar 250 µl del extracto a 2 tubos eppendorf y agregue 500 µl de la solución de
buffer Tris 10 mM pH 7,5. Rotulándose con la palabra núcleo. Centrifugue a 3000 rpm
durante 3 minutos. (El pellet que ha quedado se denomina fracción nuclear y resuspender
en 200 µl de Tris 10 mM pH 7,5).
3. Coloque el sobrenadante del proceso anterior a 2 ependorf nuevos y márquelos con la
palabra mitocondrias. Centrifugar a 10000 rpm durante 8 minutos. (El pellet que ha
quedado se denomina fracción mitocondrial, eliminar el sobrenadante y resuspender el
pellet en 200 µl de buffer Tris 10 mM pH 7,5).
4. Ahora observaremos la fracción nuclear. Para ello colocamos 10 µl del resuspendido del
tubo marcado como núcleo, en una lámina porta objeto y le adicionamos una gota de Azul
de metileno y cubrir con una lámina cubreobjeto. Hacer las observaciones en el
microscopio de campo claro y realice sus esquemas. En otra lámina adicionar 10 µl del
colorante DAPI y cubrir con una lámina cubreobjeto., dejar reposar por 2 min. Observe en
el microscopio de fluorescencia y realice sus esquemas.
5. Observación de mitocondrias. Tomar el tubo marcado como mitocondrias y en un ependorf
de 0,5 ml adicione 5 µl del resuspendido y 5 µl del colorante mytotracker dejándolo
incubar por 10 min a 37°C. En otro ependorf de 0,5 µl realice la misma operación y
adicione 5 µl del colorante verde de Janus. Realice un frotis y observe al microscopio de
fluorescencia y de campo claro. Esquematizar a 400X

39
PRÁCTICA Nº 7
METABOLISMO CELULAR: PROCESO DE

RESPIRACIÓN CELULAR
Posteriormente a los mecanismos de nutrición y digestión celular, las células usan las moléculas
producto de estos procesos como fuente para la elaboración de energía que es necesaria para la
actividad celular, para lo cual pasan procesos como la desaminación de los aminoácidos, la beta-
oxidación de los ácidos grasos y el glucólisis que tienen como objetivo la formación de ácido
pirúvico y otras moléculas necesarias para los procesos de respiración celular. El ácido pirúvico
obtenido de estos procesos, principalmente de la glucólisis, puede dependiendo del individuo y del
medio en el cual se encuentra ir a dos rutas metabólicas:
La ruta aeróbica denominada también catabolismo aerobio degradándose completamente hasta

CO2 y agua, este mecanismo se realiza en las mitocondrias que actúan como centrales energéticas
de la célula y sintetizan ATP producto de esta degradación.
La otra ruta mencionada es el proceso anaeróbico llamada también catabolismo anaeróbico, que
en ausencia de oxígeno transforma el ácido pirúvico en otras moléculas degradándose parcialmente,
esta ruta tiene dos procesos más estudiados: el catabolismo láctico que por acción de la lactato
deshidrogenasa se transforma en ácido láctico y la vía alcohólica donde el ácido pirúvico se
descarboxila formando un acetaldehído y este es reducido por acción del NADH a alcohol etílico.
Este último tipo de fermentación la realizan algunas especies de levaduras como la Saccharomyces
cerevisae que son utilizadas en la industria de la panificación y en la industria cervecera, estas
levaduras tienen la capacidad de poder realizar los dos tipos de respiración dependiendo de la
abundancia de nutrientes en el medio, cuando se encuentran en un medio rico en carbohidratos
escogen la ruta anaeróbica.
En la presente práctica, utilizando un respirómetro artesanal, se observará la acción de diferentes

carbohidratos como facilitadores en el proceso de respiración celular anaeróbica y la acción de un
antimetabolito que interferirá en el proceso de respiración celular inhibiendo una de las etapas de la
glucólisis.
La acción del inhibidor sobre la respiración celular: La enzima enolasa cataliza la reacción que
convierte el 2 fosfoglicerato (2PG) en fosfoenolpiruvato (PEP), la enolasa para reaccionar requiere
de la presencia de iones de magnesio que mantiene su estructura y de iones manganeso como
cofactor. En el siguiente experimento se usará el flúor para precipitar los iones magnesio y así
inhibir la reacción. Esta inhibición se puede detectar como una disminución en la velocidad del
proceso respiratorio, (disminución en la producción del CO2) en las células de levadura. Debido a
que los fluoruros son extremadamente venenosos para los humanos, maneje las soluciones con
sumo cuidado en este ejercicio y asegúrese de lavarse las manos tan pronto como termine.

40
COMPETENCIAS
1. Comprende los procesos de respiración celular
2. Investiga el efecto de un antimetabolito en la respiración celular
3. Demuestra la acción de algunos carbohidratos como facilitadores de la respiración
anaeróbica
MATERIALES:

 9 Tubos de ensayo pequeños  3 ml de NaF 0.01 molar
 9 Tubos de base grandes  3 ml de NaF 0.10 molar
 1 L Agua destilada  8 Pipetas de plástico
 3 ml de Solución de glucosa al 5%  4 Gradillas
 3 ml de Solución de fructosa al 5%  4 Varillas de vidrio
 3 ml de Solución de sacarosa al 5%  1 Plumón marcador para vidrio
 3 ml de Solución de almidón al 5%  1 Incubadora a 37°C

  100 gr de levaduras seca
 1 regla milimetrada
PROCEDIMIENTO
Fabricación de un Respirómetro artesanal

Para construir un respirómetro simple, siga las siguientes instrucciones: llene con agua uno de los
pequeños tubos de ensayo (en el experimento se usa la suspensión de levaduras y las otras
sustancias en lugar de agua). Invierta el tubo de ensayo sobre el tubo de base plana. Hágalo
rápidamente, de tal manera que se derrame la menor cantidad posible de líquido del tubo de ensayo.
Si hay burbuja de aire, se mide con la regla graduada en milímetros; si éste contiene células de
levadura respirando, el dióxido de carbono tenderá a acumularse desplazando así más líquido.
Después de un rato, el volumen de la cámara de aire constituye una medida de la cantidad de
respiración que haya tenido lugar.
Preparación de las muestras experimentales
1. Preparación de muestras utilizando diferentes carbohidratos
Rotule los tubos de ensayo numerándolos del 1 al 5 por el lado curvo, manténgalos boca abajo
mientras inscribe el número. Llénelos como se indica en la siguiente tabla:
REACTIVO 1 2 3 4 5
Levadura 3 mL 3mL 3 mL 3 mL 3mL
Agua destilada 5 mL
Glucosa 5 mL
Fructosa 5 mL
Almidón 5 mL
Sacarosa 5 mL

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2. Preparación de muestras utilizando antimetabolitos
Rotule los tubos de ensayo numerándolos del 1 al 5 por el lado curvo, manténgalos boca abajo
mientras inscribe el número. Llénelos como se indica en la siguiente tabla:
REACTIVO 1 2 3 4 5
Levadura 3 mL 3 mL 3 mL 3 mL 3 mL
Agua destilada 5 mL
Glucosa 5 mL 2 mL 2 mL 2 mL
NaF (0,01 M) 3mL
NaF (0,05 M) 3 mL
NaF (0,10 M) 3 mL
*Llenar el tubo hasta el borde

Invierta cada tubo de ensayo dentro de un tubo de base plana para armar el respirómetro. Mida la
cámara de aire formada y anote sus resultados en la tabla de esta página como “lectura inicial”.
Lleve los respirómetros a incubadora a 37ºC durante una hora. Vuelva a medir la cámara de gas de
cada tubo y anote los resultados bajo la columna “lectura final” en la misma tabla.
RESULTADOS
TABLA DE RESULTADOS MUESTRA 1
Longitud Inicial Longitud Final ( L. Final – L. Inicial)

TUBO (mm) (mm) (Producción de CO2)
Tubo 1
Tubo 2
Tubo 3
Tubo 4
Tubo 5
TABLA DE RESULTADOS MUESTRA 2
Longitud Longitud Final ( L. Final – L. Inicial

TUBO Inicial (mm) (mm) (Producción de CO2)
Tubo 1
Tubo 2
Tubo 3
Tubo 4
Tubo 5

42
PRÁCTICA Nº 8
EXTRACCIÓN DE ADN
Fuente: AccuPrep® Genomic DNA Extraction Kit

http://bioneer.com.au/Products/DNA-RNA-Preparation-Kits/Single-Spin-Column-type-Nucleic-Acid-Extraction-Ki/Genomic-DNA-
Extraction-Kits-(1)/Genomic-DNA-Extraction-Kits.aspx
La biología molecular es una de las herramientas más útiles de las que se vale hoy en día la ciencia
y la medicina moderna, la extracción de ADN es un tipo de metodología que mediante la
manipulación del material genético ha permitido, entre otras cosas, el desarrollo de la clonación de
secuencias de ADN para el estudio de mutaciones que estén involucradas en las diferentes
patologías humanas, mapeo y secuenciación de genes con fines terapéuticos. Con este
conocimiento se logra el desarrollo de la terapia genética, el análisis de diversidad molecular de
especies, análisis forenses y de paternidad.
COMPETENCIAS
1. Extrae ADN a partir de muestras biológicas.

2. Conoce las diferentes técnicas de aislamiento de ADN.
3. Analiza cada proceso de la técnica de aislamiento de ADN.

43
MATERIALES
Extracción del ADN  1 caja de puntas de 10 -100 µl y de
100 -1 000 µl
 1 Kit de extracción de ADN  16 tubos ependorf de 1,5 mL
 Micropipetas de 20 – 100, 100 - 1000  Microcentrífuga16000 rpm
µl.  Vortex.
PROCEDIMIENTO
Extracción de ADN usando kit de extracción Purelink-genomic (Invitrogen)
Extraccion de ADN de sangre Total.

1. A un tubo ependorff, adicionar una muestra de 20 µl de sangre fresca o congelada.
2. Transferir 20 µl de células o sangre a un tubo que contiene 20 µl proteinasa K.
3. Añadir 20 µl de RNasa a la muestra. Someter a vórtex por 15 segundos e incubar a temperatura
ambiente durante 2 min.
4. Añadir 100 µl de Buffer lisis y homogenizar utilizando vórtex por 15 segundos.
5. Incubar a 55 ° C durante 10 min.
6. Añadir 100 µl de etanol 96-100%. Mezclar en el vórtex por 15 segundos.
7. Incubar la lisis por 5 min a temperatura ambiente.
Proceso de purificación:
1. Colocar la lisis (260 µl) en la columna de extracción.
2. Centrifugar la columna a 8500 rpm por 1 min, descartar el filtrado por la columna y colocar la
columna en un nuevo tubo de lavado.
3. Lavar la columna con 200ul de buffer de lavado, centrifugar a 8500 rpm por 1 min y eliminar el
filtrado.
4. Colocar la columna en un nuevo tubo de lavado, adicionar 200ul de buffer de lavado y centrifugar la
columna a velocidad máxima por 3 min para poder filtrar cualquier residuo del buffer de lavado.
5. Colocar la columna en un nuevo tubo de recolección (1,5ml).
6. Añadir 100 µl de Buffer de elución a la columna.
7. Incubar a temperatura ambiente durante 1 min. Centrifugar la columna a velocidad máxima
durante 1 min a temperatura ambiente.
8. Para recuperar más ADN, realizar una segunda etapa de elución utilizando el mismo volumen
de buffer de elución (opcional)
9. Incubar a temperatura ambiente por 1 min. Centrifugar a velocidad máxima por 1 min (opcional)
10. El tubo contiene ADN genómico purificado.
11. Almacenar el ADN purificado a -80ºC para otras aplicaciones.
Extracción del ADN mediante resina CHELEX - 100
1. Colectar una muestra de tejido, sangre o raspado bucal en un tubo ependorf de 1,5 ml
conteniendo 500 μl de buffer TE, dejar reposar por 2 min.
2. Resuspender las células con toque de vortex por 3 min.
3. Al pellet celular obtenido se le adiciona 500 μl de una solución de resina Chelex- 100 al 10%.
Se agite en un vortex por 3 min.

44
4. Dejar incubando a 55ºC en agitación continua durante 30 min.

5. A continuación, la mezcla se introduce durante 10 min a 100ºC para intensificar la
desnaturalización de las proteínas.
6. Agitar en el vórtex por 30 seg y se centrifuga a 10000 rpm durante 5 min.
7. Extraer el sobrenadante donde se encuentra el ADN (fase acuosa) y trasladarlo a otro tubo
ependorf, en la parte inferior se encontrará la resina Chelex-100, las proteínas desnaturalizadas
y otros elementos.
8. El tubo ependorf conteniendo el sobrenadante se guardará en un congelador a -20ºC.
EXTRACCIÓN DE ADN (continuación)
Cuantificación de ácidos nucleicos (Qubit)
Para la cuantificación de ácidos nucleicos existen diferentes metodologías, como es el caso de la

espectrofotometría que nos permite medir el ADN en microgramos, y la fluorometría de mayor
sensibilidad que nos permite medir pequeñas cantidades de ADN expresando los resultados en
nanogramos.
MATERIALES
Extracción del ADN
 Qubit Kit (cuantificación de ADN)  50 puntas de 10 -100 µl y de 100 -1

 Micropipetas de 20 – 100, 100 - 1000 000 µl
µl.  20 tubos de PCR (250 µl)
 1 Vortex
PROCEDIMIENTO
1. En un tubo ependorf de PCR colocar 1 µl de la muestra en 199 µl de buffer.

2. Calibrar el Qubit según se indique el manual.
3. Medir las todas las muestras y anotar los resultados y comparar los resultados.

45
PRÁCTICA Nº 9
FUNDAMENTOS DE LA REACCIÓN EN CADENA DE

LA POLIMERASA (PCR)
La reacción en cadena de la polimerasa, cuyas siglas en ingles son PCR (Polymerase Chain
Reaction) es una técnica muy usada en el campo de la biología molecular, la cual fue desarrollada
por Kary Mullis en 1986. El objetivo de esta técnica es obtener un gran número de copias de un
fragmento de ADN particular mediante una amplificación in vitro. Es una técnica de amplificación
selectiva, la cual se basa en la capacidad de la enzima ADN polimerasa en fabricar una cadena de
ADN complementaria a una ya existente.
Para realizar la técnica de PCR se necesita de:

 Desoxinucleotidostrifosfato (dNTPs), mezcla de los cuatro desoxinucleotidos (dATP, dCTP,
 dTTP y dGTP) que son el sustrato para la síntesis del nuevo ADN.
 Cebadores (primers), oligonucleótidos complementarios a una de las hebras del ADN,
 delimitando la zona de ADN que se quiere amplificar.
 ADN polimerasa, enzima termoestable (Taq polimerasa) que se encarga de la síntesis de la
 cadena de ADN.
  ADN molde, molécula que contiene la región de ADN que se va a amplificar.
 Solución tampón o buffer, solución que permite el adecuado funcionamiento de la ADN
 polimerasa.
 Iones divalente (Mg++)
Cada ciclo de PCR consiste en tres etapas: la primera, donde el ADN molde es incubado a altas
temperaturas para desnaturalizarlo y de esta manera permitir el fácil acceso de los cebadores al
ADN molde; la segunda o etapa de alineamiento, donde los cebadores hibridan con sus secuencias
complementarias del ADN molde y, por último, la etapa de elongación en la cual el ADN
polimerasa sintetiza de los fragmentos de ADN a partir de los cebadores que ya se han alienado. La
detección del producto de una PCR se realiza normalmente mediante una corrida electroforética.
Es por eso que el PCR es una herramienta que se ha desarrollado para ofrecer una alternativa para
el estudio del ADN. Debido al impacto dentro de la comunidad científica porque ofrece las
siguientes cualidades.
 Sensibilidad: hace referencia a la mínima cantidad de ADN que es necesario para que se
 produzca la amplificación.
  Especificidad: solo se obtiene un solo producto amplificado.
  Eficiencia: amplificación máxima que se puede obtener en un número determinado de ciclos.
 Fidelidad: se refiere a los errores que comete la ADN polimerasa durante la amplificación.

46
PROCESO DEL PCR
Fuente: Fundamentos de PCR
http://pseudomonas-syringae.org/outreach/Module_3_Home.htm/
Dentro de las aplicaciones de esta técnica se pueden mencionar el diagnóstico de enfermedades

infecciosas, en el diagnóstico prenatal de enfermedades genéticas, diagnóstico de cáncer, en
técnicas de clonaje y secuenciación de ADN genómico, los análisis forenses, identificación de
sospechosos con pequeñas muestras de sangre, semen o pelo, identificación de padres en litigios de
paternidad, microbiología ambiental,

47
COMPETENCIAS
1. Conoce los fundamentos en lo que se basa la técnica de PCR.

2. Conoce la importancia del uso de la técnica de PCR para el diagnóstico de enfermedades en
los seres humanos.
3. Explica cómo se genera un fragmento especifico de ADN genómico humano utilizando la
técnica de PCR.
MATERIALES
 1,5 ml de Agua estéril
 Micropipetas de 20 – 100, 100 - 1000  4 Muestras de ADN
 µl.  1 kit - Mix de PCR (taq polimerasa,
  50 puntas de 10 -100 µl y de dNTPs, primer, Mg, agua)

 100 -1 000 µl  1 kit (Primers Alfa tubiluna y Beta
  16 tubos ependorf de 1,5 mL actina).
  1 Microcentrífuga16000 rpm
 1 Termociclador
PROCEDIMIENTO
1. En un tubo de PCR colocar 25 µl de solución de reacción final (mix de PCR):
Componente Concentración a la que se Concentración final en la Volumen a

conserva reacción añadir (μl)
Agua ------ ------- 12
Tampón 10X 1X 7,5
MgCl2 25 mM 1 mM 1
Primers R 10 μM 0,4 μM 1
Primers F 10 μM 0,4 μM 1
dNTPS 10 mM 0,4 mM 1
Taq 5 unidades/μl 1 unidad/25 μl 0,5
ADN ------ ------ 1
Concentración final de la reacción 25
2. Centrifugar brevemente para mezclar bien los componentes.

3. Colocar los ependorf con la solución de mix de PCR en el termociclador, el cual ya debe
tener programado las condiciones de amplificación.
Desnaturalización Hibridación Elongación N° de ciclos Mantener a

94°C por 1 min 52°C por 1 min 72°C 30 seg 30 4°C
4. Finalizada el proceso de amplificación, retirar los ependorf del termociclador y guardar las
muestras a 4°C si el amplificado se llegara a utilizar en un lapso de poco tiempo. Si no fuese
el caso mantener a – 20°C.

48
PRÁCTICA Nº 10
FUNDAMENTOS DE ELECTROFORESIS
La electroforesis es una técnica va a permitir la separación de moléculas como proteínas y ácidos

nucleicos a través una matriz (gel), la cual va a funcionar como un filtro o matriz molecular
permitiendo separar moléculas en un campo eléctrico, de acuerdo al tamaño o peso molecular, la
carga neta y la estructura tridimensional que poseen. Por lo cual, moléculas de ADN de tamaño
diferente van a emigrar de forma distinta en un gel de electroforesis; siendo la distancia recorrida
por cada fragmento de ADN inversamente proporcional al logaritmo de su peso molecular. Los
materiales usados como matriz o soporte son los polímeros como la agarosa, la poliacrilamida,
papel (celulosa), almidón y acetato de celulosa.
Los ácidos nucleicos (ADN, ARN) están cargados negativamente debido a los grupos fosfatos, por
lo cual cuando se aplica una corriente eléctrica a una matriz de gel que contiene las muestras de
ácidos nucleicos que se encuentra en una solución a pH neutro o básico, entonces los fragmentos de
ácidos nucleicos migrarán hacia el polo positivo o ánodo.
La separación de los fragmentos de ADN por electroforesis se regula a través de la concentración
de agarosa (o poliacrilamida) en el gel y el voltaje aplicado durante la corrida electroforética; por lo
tanto, los fragmentos de menor tamaño migran más rápido hacia el ánodo que aquellos de mayor
tamaño y el incremento del voltaje aumenta proporcionalmente la velocidad de migración de los
fragmentos en el gel.
La poliacrilamida es un soporte muy usado cuando se realiza una electroforesis de muestras de
ácidos nucleicos debido a que es transparente, elástico, tienen una porosidad controlable y permiten
una buena visualización de las bandas durante un tiempo prolongado. Los geles de poliacrilamida
se forman por polimerización de la acrilamida con la bisacrilamida. Estos geles suelen emplearse
cuando los fragmentos de ADN que van a ser visualizados son de bajo peso molecular (menos de
1000 pares de base), mientras que para fragmentos de mayor peso molecular se emplea los geles de
agarosa.
El tamaño del poro formado por el gel depende de la concentración de los acrilamida: a mayor
concentración, menor tamaño del poro y se dificulta el movimiento de los fragmentos a lo largo del
gel permitiendo de esta manera obtener una mayor resolución en los fragmentos pequeño. Una
desventaja que posee la acrilamida sobre la agarosa es que es un compuesto tóxico pero su poder de
resolución es mayor. Todas las moléculas de ADN al tener carga negativa van a migrar hacia el
polo positivo pero al entrar en los polos del gel, las moléculas más grandes van a tener un
movimiento más lento debido a su dificultad para pasar entre los poros, mientras las moléculas más
pequeñas lo hacen más rápidamente y llegan antes al polo positivo.
Una electroforesis típica consiste en preparar un gel de agarosa a una determinada concentración,
mezclar las muestras que se van a analizar con un colorante adecuado que va permitir el frente de
corrida de la electroforesis, colocar las muestras en el gel, realizar la corrida electroforética y por
último, visualizar los ácidos nucleicos para lo cual se emplea un determinado colorante, puede ser
Sybr Green, Red gel y Bromuro de etidio.

49
A
A. Preparación del gel; B. Cargar la muestra en el gel; C. Revelado del gel de agarosa
Fuente: Corrida electroforética
http://stp.insht.es:86/stp/basequim/012-electroforesis-en-gel-de-agarosa-exposici%C3%B3n
La electroforesis en ácidos nucleicos en geles de agarosa permite determinar el peso molecular de los
ácidos nucleicos, para lo cual es necesario utilizar marcadores de tamaño molecular conocido y de esta
manera de acuerdo a la posición del fragmento del ADN en el gel de agarosa poder calcular los pesos
moleculares de las muestras de ADN analizadas. También permite analizar los fragmentos de ADN
cortados con enzimas de restricción, aislar y recuperar fragmentos de ADN purificados.
COMPETENCIAS
1. Aprecia la técnica de electroforesis en gel.
2. Comprende los conceptos que están involucrados en la separación de ácidos nucleicos en una
corrida electroforética.
3. Observa la muestra de ADN aislada de la práctica anterior.
MATERIALES
 Muestra de ADN obtenida de la  4 gradillas para tubos de 1,5 mL.

 práctica anterior.  50 puntas para volúmenes de 0,5 - 20
  5 µl Marcador de peso molecular.  μl.
 1 Cámara de electroforesis y  40 ml de agarosa al 2 %.
accesorios (peines, soporte, tabla  1 L de Buffer Tris – borato – EDTA
 niveladora, etc).  1X (TBE) pH 8-8.3.
  1 Fuente de poder.  1,5 ml de Buffer carga para ADN.
  Micropipetas para volúmenes de 0,5 -  40 µl Colorante Sybr green
 20 μl.  1 Transiluminador de luz UV.
 4 juegos de guantes.

50
PROCEDIMIENTO
• Asegurarse de usar guantes durante la manipulación de las muestras, los reactivos y el
equipo.
• Preparar 50 ml de agarosa al 2% y adicionar 20 μl de colorante Sybr green, dejar

polimerizar por 10 min aproximadamente. Sumergir el sistema conteniendo los geles
polimerizados en su tanque (cámara electroforética) con el buffer TBE 1X para ADN. Al
momento de sumergir los geles en el tanque, asegurarse que los pocillos del gel estén
totalmente saturados de buffer.
• Sobre un pedazo de lámina extensible de parafilm, preparar una mezcla de 5 μl ADN con 1μl de
buffer carga repartida en alícuotas de acuerdo al número de muestras que se colocarán en los
pocillos (considerar el uso de un marcador de peso molecular estándar de ADN).
• Con el uso de puntas de 20 μl proceder a cargar cuidadosamente la muestra en los pocillos

del gel de agarosa evitando la contaminación del pocillo contiguo.
• Finalizada la colocación de las muestras ADN en los pocillos, cubrir el tanque con la tapa y
conectar los cables de los electrodos en la fuente de poder. Encender la fuente de poder y
proceder a seleccionar el voltaje adecuado (puede estar comprendido entre 75 a 120 voltios).
• Luego de seleccionar las condiciones de voltaje, iniciar el proceso de la electroforesis.

Durante el proceso se evidenciarán dos frentes de corrida de diferente color y distancia de
migración. Ambos colores, azul oscuro y azul claro corresponden a los colorantes azul de
bromofenol y xilenecianol, que conforman el buffer de la muestra. El xilenecianol en geles
de agarosa al 2 % migra de manera similar a un fragmento de ADN de 160 pares de base
(pb), mientras que el azul de bromofenol a esta misma concentración de agarosa es
equivalente a un fragmento de 45 pb.
• Transcurrido el tiempo de corrida de la electroforesis, proceder al desmontaje del equipo

empezando con la desconexión de los electrodos de la fuente de poder, removiendo el
sistema que contiene el gel de agarosa.
• Remover el gel del soporte, para realizar este proceso se requiere tener mucho cuidado,
pues el gel es muy frágil y puede romperse con facilidad.
• Desplazar el gel hacia el transiluminador para el revelado, encender el equipo y verificar

que este a una longitud de onda de 420 nm.
• Dejar hasta que empiecen a aparecer las bandas y registrar el resultado final.
• Observar los resultados obtenidos y discutir.

51
RESULTADO ESPERADO
M
2000
1900
1800
1700
1500
1600
1500
1400
1300
1200
1100
1000
900
800
700
600
500
400
300
200
100
M: marcador de peso molecular.

Carril Nº 1,2,3,4,5,6,7: muestras problemas de ADN.

52
PRÁCTICA Nº 11
CICLO CELULAR: MITOSIS
Fuente: http://esperanzacuartoeso.blogspot.com/
Las células se generan a partir de otras células y la única forma de producir más células es por
división de las ya existentes. Este ciclo de reproducción celular en el cual la célula duplica su
contenido (duplicación) y luego se divide en dos (división) es conocido como ciclo celular. Este
proceso se divide en dos fases: INTERFASE Y DIVISIÓN CELULAR
LA INTERFASE, se divide en:
 G1, llamada la fase de crecimiento, se inicia con una célula hija que proviene de la división
celular anterior. Se produce mucha actividad en la célula, la cual aumenta de tamaño,
sintetiza nuevo material citoplasmático sobre todo proteínas y ARN, los cuales se
 necesitaran para continuar con el ciclo celular.
 S, o fase de síntesis de ADN, es la fase en que tiene lugar la duplicación del ADN. Cuando
acaba este periodo el núcleo contiene el doble de proteínas nucleares y de ADN que con el
 que había iniciado, cada cromosoma ahora tiene dos cromátidas hermanas.
 G2, o segunda fase de crecimiento, en ella se sigue sintetizando ARN y proteínas que se
necesitaran para la fase de mitosis. El final de este periodo queda marcado por la aparición

53
de cambios en la estructura celular, cambios visibles en el microscopio óptico y que nos
indican el principio de la Mitosis o división celular.
LA DIVISIÓN CELULAR
 Cariocinesis
MITOSIS
La mitosis es la fase del ciclo celular en el cual las moléculas replicadas de ADN durante la
Interfase, se reparten el material nuclear (cariocinesis), dando lugar a la formación de dos núcleos
hijos con la misma dotación genética entre sí y que la célula que las dio origen. Al final de la
mitosis suele acompañarse por un proceso de citocinesis, que es la división del citoplasma en dos,
permitiendo que se formen dos células hijas. Esta cariocinesis ocurre en células somáticas.
Gracias a este proceso de división celular, las células son capaces de multiplicarse, participar en
procesos de desarrollo, de crecimiento y de regeneración celular.
La mitosis se puede dividir en cuatro etapas: profase, metafase, anafase, telofase, cada una de ellas
caracterizada por una serie particular de sucesos.
Profase. En esta fase, los cromosomas duplicados se preparan para la separación y la maquinaria
mitótica se ensambla. El material genético se condensa permitiendo observar los cromosomas como
filamentos dobles (cromátidas hermanas) unidos por un estrangulamiento (centrómero). Al final de
la profase han desaparecido la membrana nuclear y el nucléolo.
1000 X
Metafase. Los cromosomas están alineados en la placa ecuatorial de la célula (placa metafásica),
en la parte media entre los dos polos. Las cromátidas de cada cromosoma están conectadas por su
cinetocoro con las fibras del huso, los cuales son jalados hacia los extremos.
1000 X

54
Anafase. La anafase comienza cuando las cromátidas hermanas de cada cromosoma se separan e
inician su movimiento hacia los polos opuestos de la célula. El acortamiento de las fibras del huso y
la división del cinetocoro contribuye a la separación de los cromosomas. La anafase constituye una
fase importante de la división celular porque en ella se debe realizar la correcta distribución de las
dos copias de la información genética original.
1000 X
Telofase. Durante la telofase las células hijas regresan a la condición de Interfase. Las cromátidas
llegan a los polos y comienzan a descondensarse, en esta fase donde se reconstruye la membrana
nuclear alrededor de cada conjunto cromosómico lo cual definirá los nuevos núcleos hijos.
1000 X
Fuentes: MITOSIS
http://www.etitudela.com/profesores/rma/celula/04f7af9d590edee08/04f7af9d5f0dc0808/04f7af9d5f0dc3a0a/index.html
A continuación tiene lugar la división del citoplasma o Citocinesis.
COMPETENCIAS
1. Observa y reconocer las fases de la Mitosis
MATERIALES
 
1 juego de 24 láminas fijadas de células meristemáticas de Allium cepa
PROCEDIMIENTO
1. Llevar la lámina al microscopio, localizar las células que presentan estructuras filamentosas
intensamente teñidas e identifique las fases de la mitosis. Esquematizar sus observaciones.

55
Fuente: Mitosis
http://www.bio.miami.edu/dana/250/25009_4print.html

56
PRÁCTICA Nº 12
CICLO CELULAR: MEIOSIS
Fuente: http://ptbestaribiology.blogspot.com/2011/05/what-is-meiosis.html
La MEIOSIS es un tipo de división celular por el cual la dotación cromosómica queda dividida
exactamente por la mitad. En este proceso, dos divisiones celulares sucesivas (DIVISIÓN I Y
DIVISIÓN II) ocurren después de un ciclo de replicación de ADN dando lugar a cuatro células
haploides a partir de una diploide.
Esta división ocurre en células germinales, que se localizan en los órganos reproductores, las
gónadas, y cuya función es la formación de células sexuales o gametos, los que se forman al
dividirse por meiosis.
DIVISIÓN MEIÓTICA I (reduccional). Se divide en:
Profase I. Fase más compleja y larga de la Meiosis, la cual se subdivide 5 fases:
 Leptoteno. Se inicia con la CONDENSACIÓN de los cromátidas, observándoselas como

filamentos aparentemente simples. Duplicación de centrómero, formación del huso,
 disgregación de la envoltura nuclear y nucléolo.
 Cigoteno. APAREAMIENTO (SINAPSIS) de los cromátidas, la cual empieza por los
 telómeros,formación de los BIVALENTES (cada par de homólogos duplicado)
 Paquiteno. Los cromosomas comienzan a condensarse, se realiza el intercambio cromosómico
(CROSSING OVER) entre los cromosomas homólogos. A medida que los cromosomas
homólogos continúan acortándose y engrosándose, se puede observar que estas formaciones
están formadas por 4 cromátidas y se les denomina TÉTRADAS.

 Diploteno. Los cromosomas homólogos empiezan a separarse pero quedan unos puntos de
unión entre ellos, denominados QUIASMAS. Los quiasmas son la manifestación citológica de
donde se produjeron entrecruzamiento.

57
 Diacinesis. Los quiasmas se desplazan hacia los extremos del bivalente, fenómeno llamado
TERMINALIZACIÓN. Los cromosomas se unen a las fibras del huso.
Metafase I. La membrana nuclear desaparece, las tétradas se ordenan en el plano ecuatorial, se

forma el huso acromático, los centríolos, si existen, están en los polos.
Anafase I. Los cromosomas homólogos (tétradas) se separan totalmente y se mueven hacia polos
opuestos guiados por las fibras del huso. Desaparecen los quiasmas.
Telofase I. Los cromosomas se ubican en cada polo de la célula. Los cromosomas empiezan a
descondensarse, se forma la envoltura nuclear, dando lugar a núcleos que poseen un número
haploide de cromosomas, cada uno formado por dos cromátidas.
Fuentes: Meiosis
http://www.tokresource.org/tok_classes/biobiobio/biomenu/meiosis/index.htm

58
Citocinesis. División del citoplasma en dos células hijas. No hay interfase, la segunda división
empieza inmediatamente.
ESQUEMA DE RECOMBINACIÓN GÉNICA

Fuentes: Recombination – Synapsis
http://www.mhhe.com/biosci/ap/ap_prep/bioD6b.html
DIVISIÓN MEIÓTICA II (ecuacional). Esta división se básicamente una división mitótica, pero
sin ninguna replicación de ADN. Este proceso de división ocurre de manera simultánea en ambas
células hijas, resultado de la primera división. Se divide en cuatro fases:
Profase II. Comienza a desaparecer la envoltura nuclear y el nucléolo, la cromatina comienza a

condensarse, los centriolos se desplazan hacia los polos, se forma el huso.
Metafase II. Las fibras del huso se unen a los cinetocóros de los cromosomas y los dirigen hacia
el plano ecuatorial de la célula.

59
Anafase II. El centrómero se divide y las cromátidas hermanas son desplazada hacia polos
opuestos arrastradas por las fibras del huso.
Telofase II. Cada uno de los polos recibe un juego haploide de cromosomas, se forman los nuevos
núcleos.
Citocinesis Que origina cuatro células, cada una con número haploide de cromosomas (n) y
constituidas de una sola cromátide. Estas células formarán los gametos.
Fuentes: Meiosis
http://www.tokresource.org/tok_classes/biobiobio/biomenu/meiosis/index.htm
COMPETENCIAS
1. Identifica las fases de la Meiosis

2. Reconoce la importancia de la Meiosis en la variabilidad genética
3. Investiga las consecuencias genéticas de la Meiosis
MATERIALES
 
1 juego de 13 láminas fijadas de células germinales Zea mays

60
PROCEDIMIENTO
1. Llevar la lámina al microscopio e identificar las fases. Esquematizar sus observaciones.

LEPTOTENO ZIGOTENO PAQUITENO DIPLOTENO DIACINESIS
1000 X 1000 X 1000 X 1000 X 1000 X
Fuente: PLANTS AND ANIMALS CELLS LAPBOOK

http://www.squidoo.com/cell-lapbook

61
1000 X 1000 X
METAFASE I ANAFASE I
1000 X 1000 X
TELOFASE I PROFASE II
1000 X 1000 X
METAFASE II ANAFASE II

62
1000 X 1000 X
TELOFASE II CITOCINESIS

63
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
 Alberts B, Jonson A, Bray D, Lewis J, Raff M, Roberts K. y Walter P. Biología molecular

de la célula. 5ta ed. Barcelona-España: Ediciones Omega; 2010.

 Alexander P, Bahret M, Chaves J, Courts G y SkolkyD'Alessio N. Biología.
EnglewoodCliffs. New Yersey: Editorial Prentice Hall; 1992.

 Atlas de Biología: los mecanismos de la vida. Barcelona: Cultural; 1998.

 Audesirk T, Audesirk G y Byers B. Biología: la vida en la tierra. 6ta ed. México: Pearson
Educación; 2003.

 Bernstein R y Bernstein S. Biología. 10ma ed. Colombia: Mc Graw Hill Interamericana;
1998.

 Curtis H, Barnes N, Schnek A y Massarini A. Biología. 7ma ed. en español. Buenos Aires.
Editorial Médica Panamericana. 2008.

 De Robertis E, Hib J y Ponzio R. Biología celular y molecular. 12ava ed. Buenos Aires:
Editorial El Ateneo; 1997.

 Karp G. Biología celular y Molecular. 4ta ed. México D.F: Mc Graw Hill Interamericana;
2005.

 Paniagua Gómez-Alvarez R, Nistal Martín de Serrano M y Sesma Egozcue M. Citología e
histología vegetal y animal : biología de las células y tejidos animales y vegetales. 3ra ed.
Madrid : Mc Graw Hill Interamericana; 2002.

 Smith C y Wood E.Biología celular. Wilmintong, Delaware- EUA: Editorial Addison-Wesley
Iberoamericana SA. 1998.

 Smith, C. y Wood, E. Biología molecular y biotecnología. Wilmintong, Delaware- EUA:
Editorial Addison-Wesley Iberoamericana SA. 1998.

 Solomon E, Berg L, Martin D y Villee C. Biología de Villee. 4ta ed. México D.F:
Editorial Mc Graw Hill Interamericana; 1998.

 Villee C. Biología. 8va ed. México D. F: Mc Graw Hill Interamericana; 1996.

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CONTENIDO

Normas para el estudiante del curso de Biología Celular y Molecular 03

Instrucciones para el desarrollo de las prácticas 06

Práctica Nº 1: Principios de Bioseguridad en el laboratorio 08

Práctica Nº 2: Fundamento de Microscopía 14

Práctica Nº 4: Permeabilidad de la Membrana Citoplasmática.

Práctica Nº 5: La célula procarióta y eucariótica: reconocimiento de estructuras 30

Práctica Nº 6: Obtención y análisis de fracciones celulares 36

Práctica Nº 7: Metabolismo Celular: Proceso de respiración celular 39

Práctica Nº 8: Extracción del ADN 42

Práctica Nº 9: Fundamentos de la Reacción en cadena de la polimerasa (PCR). 45

Práctica Nº 10: Fundamentos de Electroforesis 48

Práctica Nº 11: Ciclo celular: Mitosis y Meiosis 52

Práctica Nº 12: Ciclo celular: Mitosis y Meiosis 56

El estudiante debe INGRESAR AL LABORATORIO CON MANDIL LARGO, LIMPIO,

Debe entrar ÚNICAMENTE CON LOS MATERIALES NECESARIOS, como cuaderno de

El ORDEN Y LA LIMPIEZA son obligatorios en el laboratorio de Biología Celular y

MANTENGA LOS EQUIPOS EN SU SITIO, moverlos podría dañarlos. Salvo indicaciones

Los laboratorios SON AMBIENTES DE TRABAJO: Para las demostraciones de sentimientos

LA MANIPULACIÓN DE LOS EQUIPOS SE HARÁ EXCLUSIVAMENTE POR EL

 Lee la guía de práctica previa al desarrollo de la experiencia en el laboratorio.

Nombre del Estudiante:…………………………………………………………………….

Puntaje COMPETENCIAS A EVALUAR 0 1 2

2 Llega con puntualidad / tarde / no asiste a la práctica (F y T)

Ingresa al laboratorio debidamente y cumple las normas de

Trabaja en equipo cumpliendo con eficiencia el rol que le toca en

Esquematiza y toma nota de sus resultados y participa

ITEMS A EVALUAR PUNTOS

2. Introducción (marco teórico y objetivos

3. Procedimiento experimental (materiales y

5. Análisis y discusión de los resultados

7. Referencias usadas en la preparación del

PRINCIPIOS BÁSICOS DE BIOSEGURIDAD

Agentes de riesgos físicos y mecánicos

Agentes de riesgo químicos

Tabla Nº 1: Niveles de bioseguridad

MANEJO DE RESIDUOS SOLIDOS DE ESTABLECIMIENTOS DE SALUD

Tabla Nº2: Clasificación de residuos sólidos sanitarios

Clase Ejemplo Color de Bolsa

Bolsas rojas: áreas Bolsas amarillas: áreas Bolsas negras: residuos

Figura Nº1: Ciclo del manejo de residuos sólidos hospitalarios

1. Lavarse siempre las manos con abundante agua y jabón.

Joyce del Pino, Rafael Alvis, Danae Liviac, Gisella Guillén

  Desarrolla actitudes responsables en el trabajo en el laboratorio.

Joyce del Pino, Rafael Alvis, Danae Liviac, Gisella Guillén

Fuente: LABORATORIODE BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR, UNIVERSIDAD CIENTIFICA DEL

Joyce del Pino, Rafael Alvis, Danae Liviac, Gisella Guillén

Fuente: GENOMA SUR – INTRODUCCIÓN A LA CÉLULA

Parte mecánico y sus componentes:

  Pie o base: se encuentra en la parte inferior del aparato, proporcionándole estabilidad.

Parte óptico y sus componentes:

Joyce del Pino, Rafael Alvis, Danae Liviac, Gisella Guillén

Joyce del Pino, Rafael Alvis, Danae Liviac, Gisella Guillén

MATERIALES DEL ESTUDIANTE

Joyce del Pino, Rafael Alvis, Danae Liviac, Gisella Guillén

TIPOS DE MICROSCOPÍA (continuación)

El uso de determinados componentes colocados en el condensador o en los objetivos se interponen

En el microscopio electrónico de transmisión (MET), la observación de una muestra biológica se

Joyce del Pino, Rafael Alvis, Danae Liviac, Gisella Guillén

Óptico de campo claro Para observar muestras teñidas.

Para la observación de microorganismos

Para facilitar la visualización de estructuras

Observar estructuras internas específicas

Examinar virus o la ultraestructura interna de