Professional Documents
Culture Documents
9230-FP-F-322
2. PRESENTACIÓN E INSTRUCCIONES:
Señor/a Aprendiz:
Presentar cuaderno de laboratorio con diagrama de flujo y consultas previas de la práctica.
En la práctica debe llevar elementos de seguridad (bata, gafas, guantes de nitrilo, cofia).
En 1883 el investigador danés Johann Kjeldahl desarrolló el método más usado en la actualidad para el
análisis de proteínas (método Kjeldahl) mediante la determinación del nitrógeno orgánico. En esta
técnica se digieren las proteínas y otros componentes orgánicos de los alimentos en una mezcla con
ácido sulfúrico en presencia de catalizadores. El nitrógeno orgánico total se convierte mediante esta
digestión en sulfato de amonio. La mezcla digerida se neutraliza con una base y se destila
posteriormente. El destilado se recoge en una solución de ácido bórico. Los aniones del borato así
formado se titulan con HCl (o HSO4) estandarizado para determinar el nitrógeno contenido en la muestra.
3.2 Objetivos
Comprender los fundamentos del método Kjeldahl para la determinación del contenido en
proteína de un alimento.
Conocer el procedimiento experimental del análisis de proteínas por el método Kjeldahl,
recogiendo el nitrógeno sobre ácido bórico y valorando con una disolución del ácido
clorhídrico o sulfúrico.
Materiales
Distintas muestras
Reactivos
Ácido sulfúrico concentrado
Hidróxido de sodio al 40%
Ácido bórico al 4%
Ácido clorhídrico 0.2N
Catalizadores
Sulfato de potasio anhidro 3g
Sulfato de cobre (II) pentahidratado CuSO4 .5H2O, 3,5g
Indicador
Naranja de metilo
Centro Nacional de Asistencia Técnica a la Industria – ASTIN Código:
9230-FP-F-322
Equipos
Equipo de Kjeldahl de digestión y destilación
Balón para Kjeldahl
Balanza analítica
Espátula
Probeta de 100, 200 ml
Erlenmeyer de 250ml
Vidrio reloj.
Factores para los diferentes tipos de alimentos
Métodos
Digestión
Pese exactamente1-2g de muestra con exactitud de 0.1g sobre un trozo de papel libre de amoniaco
(papel glacine o similar) luego colocar la muestra dentro del balón de digestión Kjeldahl (evitar que
se quede muestra adherida al cuello del balón)
Agregar 15 g de sulfato de potasio, 5 g de sulfato de cobre y 25ml de ácido sulfúrico concentrado.
Colocar en el aparato de digestión y calentar la mezcla la mezcla de digestión a temperatura baja
hasta que cese la formación de espuma. Aumentar progresivamente la temperatura de la hornilla
(no permitir que se escape ácido del balón por exceso de calor, puesto que se pueden producir
perdidas de nitrógeno por volatilización de las sales de amonio)
La digestión terminará cuando el color de la muestra sea verde-turquesa transparente (son
partículas visibles de muestra). Y luego continúe calentando durante 1 h y 30 min. La digestión
demora aprox. 2h. retirar los balones del equipo y dejar enfriar.
Centro Nacional de Asistencia Técnica a la Industria – ASTIN Código:
9230-FP-F-322
4. BIBLIOGRAFIA
Centro Nacional de Asistencia Técnica a la Industria – ASTIN Código:
9230-FP-F-322
https://es.slideshare.net/vegabner/determinacion-de-proteinas-mediante-el-metodo-de-
kjeldahl-nutricion