Professional Documents
Culture Documents
LIMA – PERU
2017
i
DEDICATORIA
ii
AGRADECIMIENTOS
iii
RESUMEN
iv
ABSTRACT
Object: Determinate what is the effect of high temperature (≥100 ºC) above
the antioxidant activity of watery extract of N. commune (cushuro). Method:
the antioxidant activity of the watery extract of N. commune (cushuro)
(10g/75ml) was measure by the method of 2,2-diphenyl-1 picrylhydrazyl
(DPPH) one at environment temperature (A) and another at boiling
temperature (≥ 100ºC) in two different exposure times (E1= 10 minutes and
E2= 15 minutes). Technic: from each sample (A, E1 and E2) aliquots of
different volumes X1= 0.025ml, X2= 0.050ml, X3= 0.075ml and X4= 0.1ml
were taken, to which was added methanol in different volumes and DPPH
solution, the tubes were shaken and taken into the dark for a period of 20
minutes. The samples were read in the spectrophotometer at an
absorbance of 517 nm. Results: the relationship between the concentration
and the reduction of DPPH in the tree samples was also observed (p>0,05),
the radical DPPH being reduced in greater proportion by the samples at
higher concentration (100μl) AX4 = 76.6 %, E1X4 = 62.7% and for E2X4 =
55.0%. For the samples at environment temperature an I.C.50 = 13.4mg/ml
was obtained, for those submitted to boiling temperature for 10 minutes an
I.C.50 = 28.8 mg/ml and for sample submitted at boiling temperature for 15
minutes the I.C.50 value was 55,4mg/ml. Conclusions: that the boiling
temperature affects the antioxidant capacity of the N. commune (cushuro),
as well as the longer exposure time at high temperatures the lower its
antioxidant capacity.
v
ÍNDICE
CARÁTULA……………...………………..……….…………………..…. i
DEDICATORIA………………………………....…………….……….…. ii
AGRADECIMIENTO………...……………….………………..….…..…. v
RESUMEN………………………………………………………………… iv
ABSTRACT……………...…………..…………………………….….….. v
ÍNDICE……………………………………………………………..….…... vi
ÍNDICE DE TABLAS……………...…………………………….……….. ix
ÍNDICE DE FIGURAS……………………………………………………. x
ÍNDICE DE GRÁFICOS……………………………………..…………... xi
ANEXOS………………………………………………………..……….… xii
INTRODUCCIÓN………………………………………………….……... xiv
vi
1.5. Justificación e Importancia de la Investigación………………..… 5
2.1. Antecedentes…………………………………………..……….…... 7
2.2.7. Cianobacterias………………………………………………. 33
. 3.1.1. Nivel.….……………………..……………………………..... 51
3.1.2. Diseño..…………………………………………………….... 51
vii
3.1.3. Método……………………………………….……………..... 51
. 3.2.1. Población………………..…………………………………... 52
3.2.2. Muestra…………………….………………………….…….. 52
Datos……………………………………………………………….... 53
3.4.1. Técnicas...…………………………………………….….….. 53
3.4.3. Procedimientos………………………….......……………… 54
DE RESULTADOS……………………………………...……….………. 58
4.1 Resultados………………………………..………………….……… 58
DISCUSIÓN………………………………...…………………………...… 65
CONCLUSIONES………………………………………………………... 68
RECOMENDACIONES……………………………………….……......... 69
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS………………………....………… 70
ANEXOS………………………………………………………….……….. 77
viii
ÍNDICE DE TABLAS
funcional……………………………………….…………… 31
la investigación............................................................... 52
investigación…………………………...………………...… 53
ix
ÍNDICE DE FIGURAS
(REDOX)……..…….…………………………….….…... 14
(cushuro)……………………………...………………….. 41
(DPPH)…………………………………….………..……. 47
media (C.I.50)…….…………………..……………..……. 48
commune (cushuro)……………………………………... 55
x
ÍNDICE DE GRÁFICOS
DPPH…………………….……………………………. 59
DPPH…………………….………………………….… 60
método de DPPH………………………...…………… 61
(cushuro)…………………...……………………..…... 63
xi
ANEXOS
método DPPH……..……………………………..…...… 79
temperatura ambiente…………..……………………... 79
xii
sometido a temperatura de ebullición por 15
minutos…………………………………………………... 81
DPPH…………………………………………………… 82
(cushuro)…………………………..……………………..
(cushuro)…......……………………..……....…….……. 82
xiii
INTRODUCCIÓN
Así también se ha demostrado que llevar una dieta que incluya una gran
cantidad de sustancias antioxidantes ayuda a prevenir la aparición de
dichas enfermedades.4 Este postulado ha creado una tendencia por el
consumo de “alimentos funcionales”; lo que ha incentivado diversos
estudios en recursos vegetales de uso común, así como también un interés
en el estudio de alimentos nativos.5,6
Considerando que el Perú posee una gran biodiversidad, existe aún una
amplia variedad de alimentos nativos que necesitan ser objeto de estudios
para determinar sus propiedades nutritivas y beneficiosas para la salud.7
Entre estos alimentos podemos mencionar el N. commune (cushuro), que
ha sido utilizado como parte de la dieta y medicina de civilizaciones
antiguas, el cual suele consumirse en zonas rurales en diferentes
preparaciones gastronómicas frías o calientes, como es de conocimiento
que altas temperaturas ocasionan alteraciones en la composición de los
alimentos.8,9 Siendo el objetivo de esta investigación, el determinar la
capacidad antioxidante del N. commune (cushuro) y la influencia de la
temperatura sobre la misma, con el fin de promover su consumo como un
alimento funcional de bajo costo y que pueda ser incluido en la dieta en
diversas presentaciones.
xiv
CAPÍTULO I
1
Estos alimentos conocidos actualmente con el término de “alimentos
funcionales”, término acuñado en Japón por los años 80, se refiere a
alimentos que contengan compuestos bioactivos –metabolitos secundarios
fisiológicamente activos- también conocidos como “fitonutrientes”; que a su
vez no posean componentes tóxicos y que tengan propiedades benéficas
para la salud reduciendo el riesgo de desarrollar enfermedades asociadas
al estrés oxidativo.13,14
2
El N. commune (cushuro) no requiere una producción tecnificada, suele
proliferar en lagos y lagunas de la zona andina del país y su consumo es
limitado a los centros poblados adyacentes a dichos cuerpos acuíferos,
donde los pobladores lo consumen en sopas, guisos y ensaladas.19
Teniendo en cuenta la forma de consumo y que la exposición a
temperaturas altas afecta la biodisponibilidad de los nutrientes y de otros
componentes contenidos en los alimentos, se pretende determinar cuál es
el efecto de la temperatura de ebullición (100ºC) sobre la capacidad
antioxidante de este alimento.20,21
3
1.3. Objetivos de la Investigación
4
1.4.2. Hipótesis Específicas
5
Esta investigación busca esclarecer el efecto de la temperatura de
ebullición (≥100ºC) sobre la capacidad antioxidante y a la vez si el
tiempo de exposición tiene inferencia en la misma.
6
CAPÍTULO II
MARCO TEÓRICO
2.1. Antecedentes
7
que el extracto acuoso liofilizado de N. sphaericum (cushuro)
constituye una buena fuente natural de antioxidantes. 18
En otra investigación elaborada por Doroteo V., Díaz C., Terry C.,
Rojas R., denominada “COMPUESTOS FENÓLICOS Y ACTIVIDAD
ANTIOXIDANTE IN VITRO DE SEIS PLANTAS PERUANAS”
realizada en el año 2012 desarrollada en la Unidad de Investigación
en Productos Naturales, Laboratorios de Investigación y Desarrollo,
Facultad de Ciencias y Filosofía de la Universidad Cayetano Heredia.
Donde se trabajó con los extractos hidroalcohólicos de uña de gato,
maíz morado, yacón, maca, ratania y aguaymanto los cuales fueron
sometidos a distintos ensayos para la determinación de la capacidad
antioxidante entre ellos el ensayo de inhibición de radicales de DPPH
y para la concentración de compuestos fenólicos se trabajó con el
método de Folin-Ciocalteu. Los resultados para la prueba del DPPH
los extractos más activos fueron los de ratania y uña de gato (I.C. 50=
10,45 y 12,05 µg/mL, respectivamente) y para la determinación del
contenido fenólico total, ambos extractos presentaron mayor
reducción del ac. gálico (la ratania 30,1mg/g extractos y la uña de gato
con 17,3 mg A.G./g extracto). En este estudio se concluyó que tanto
la ratania y la uña de gato muestran un alto potencial para el desarrollo
de nutracéuticos.22
8
Venezuela, donde el objetivo del estudio fue determinar el efecto del
escaldado y la deshidratación osmótica sobre el contenido de
polifenoles totales, taninos y la capacidad antioxidante de la P.
domestica (ciruela criolla) en sus variedades amarilla y roja. La
capacidad antioxidante se determinó por la eficiencia antirradical (EA)
y el método de poder reductor férrico (FRP). El contenido de
polifenoles totales y los taninos fueron mayores en la variedad roja
que en la amarilla. En las dos variedades, el mayor contenido de
polifenoles se encontró en la pulpa, mientras que los taninos se
encontraron en mayor proporción en las cáscaras, la variedad roja
presentó mayor capacidad antioxidante. El escaldado incrementó el
contenido de polifenoles, mientras que los taninos y la EA
disminuyeron, el poder reductor no se vio afectado por los
tratamientos. Para la deshidratación osmótica se obtuvo una
disminución significativa de los taninos y la eficiencia antirradical,
mientras que los polifenoles y el poder reductor no se vieron afectados
por el procesamiento. En lo que se concluyó que el escaldado es una
buena alternativa de consumo y conservación en la P. domestica
(ciruela criolla).23
9
etanólico de N. commune (cushuro), tuvo mayor actividad antioxidante
en relación al extracto de la S. platensis (spirulina) y de las otras
especies estudiadas. También a través de la cromatografía en
columna del extracto de N. commune (cushuro), se logró aislar seis
componentes de los cuales cuatro fueron alcaloides ya conocidos y
dos compuestos carotenoides derivados de la β-ionona, la
nostocionona -aislada por primera vez en forma de un polvo amorfo
de color naranja- y la 3-oxo-β-inonoa. A través del método de
oxidación por β-caroteno se determinó que ambos componentes
poseen un potente efecto antioxidante, siendo la nostocionona el
compuesto que presentó mayor capacidad antioxidante.21
10
2.2. Bases Teóricas
11
inversión en salud, generan disminución en la productividad, el ahorro
y la oferta de mano de obra entre otros.10,25
Se considera a las ENT como uno de los mayores desafíos del siglo
XXI para la salud y el desarrollo, estas patologías afectan el potencial
humano generando discapacidad y defunciones prematuras, de las
defunciones por ENT mas del 40% de las mismas fueron muertes
prematuras (<70 años de edad) en el 2012. Por esta situación la OMS
absorta a los países a crear y aplicar políticas en salud pública con la
intención de frenar el aumento en la morbimortalidad de estas
patologías.11,25
12
En el año 2011 los países miembros de la OMS acordaron la creación
de “El plan de acción mundial sobre las enfermedades no trasmisibles
2013-2020”, que busca frenar el avance en la prevalencia de estas
patologías, en este documento se reconoce como factores de riesgo
al consumo excesivo de tabaco, el consumo excesivo de alcohol,
dietas inadecuadas, insuficiente actividad física, aumento de la
presión arterial, aumento de los niveles de colesterol, aumento de los
niveles de glucosa sanguínea, aumento del sobrepeso y obesidad
sobre todo en personas jóvenes; lo más resaltantes es que estos
factores se caracterizan por ser prevenibles, controlables y
reversibles.24,25
13
OX1 = Agente oxidante (cede electrones); Red1= Agente reductor (acepta
electrones); Ox2 = Compuesto reducido; Red2 = Compuesto oxidado.
Fuente: Estrés oxidativo, antioxidantes y enfermedad; Sanchez V., Mendez N. – 2013.
14
del colágeno, prostaglandinas y hormonas tiroideas, la
vasodilatación y fundamentalmente como actúan barrera de
defensa del organismo ante virus y bacterias (leucocitos
polimorfonucleares) por mencionar solo algunos.30-32
15
Tabla nº 01: Clasificación de los radicales libres.
Superóxido (·O2)
Perhidroxilo (·HO2)
Hidroxilo (·OH)
Peróxido de hidrogeno (H2O2)
RADICALES LIBRE
Especies reactivas de
oxigeno (ERO) Oxí
geno singlete (1O2)
Ozono (O3)
Acido hipocloroso (HClO)
Óxido nítrico (·NO)
Dióxido nítrico (·NO2)
Especies reactivas de
Catión nitrosonio (NO+)
oxigeno (ERO)
Anión nitroxilo (NO-)
Peróxido nitrito (·ONOO-)
Fuente: Autoría propia – 2017.
16
colágeno, prostaglandinas, disminuyen la síntesis de catecolaminas
por las glándulas suprarrenales, entre otras.27,32,34
17
La fuente principal de producción endógena de especies reactivas de
oxigeno es la cadena de respiratoria mitocondrial -cadena de
transporte de electrones para la producción de adenosina trifosfato
(ATP)- se ha postulado que a nivel de los complejos II y III se produce
una fuga de 1-5% de los electrones transportados generando la
reducción monoelectrónica del oxígeno molecular (O 2) dando lugar a
la formación del radical superóxido (·O2-) el cual a través de diferentes
reacciones da lugar a otros ERO (Figura nº 02).33,35
a. Primarios o inorgánicos
b. Secundarios u orgánicos
c. Intermediarios estables
18
Tabla nº 02: Clasificación de las especies reactivas de
oxígeno.
ESPECIES REACTIVAS
inorgánicos Anión superóxido (·O2-)
DE OXIGENOS
Secundarios
Lipoperoxidos
u orgánicos
Peróxido de hidrogeno
Intermediarios
(H2O2)
no estables
Acido hipocloroso (OHCl)
Fuente: autoría propia - 2017.
19
Fuente: Estrés oxidativo; origen, evolución y consecuencias de la toxicidad del oxígeno.
Lucia Constanza Corrales – 2012.
Fuente: Los radicales libre y las defensas antioxidantes; María Montero – 1996.
20
ser un elemento indispensable para la vida produce metabolitos
citotóxicos; es por eso que los organismos aeróbios han desarrollado
una serie de mecanismos de defensa que buscan evitar la formación
o neutralizar la acción de estas especies reactivas, estos son
conocidos como sistemas antioxidantes.35,36
a. Mecanismo preventivo
21
b. Mecanismo reparador
c. Mecanismo secuestrador
22
intracelular (mitocondrias, peroxisoma, citosol);
posee dos funciones específicas, es catalítica y
peroxidativa, cataliza la reacción del peróxido de
hidrogeno a agua.27,36
b. Sistemas no enzimáticos
23
metabolismo de los aminoácidos; posee una alta
capacidad neutralizadora de radicales libres, reduce
el H2O2 en agua en presencia de la GPx,
transformándose en glutatión oxidado (GSS) el cual
es reducido enzimáticamente a GSH por el glutatión
reductasa.29,36
Moléculas que disminuyen la concentración de
metales de transición necesario para la reacción de
Haber-Weiss., tales como transportadores de metales
(transferrina y la ceruloplasmina) y quelantes de
hierro (deferroxina).32,36
24
liposolubles; reduce las concentraciones de oxigeno
singlete y •OH, impidiendo que interaccionen con los
dobles enlaces conjugados de las cadenas
insaturadas de los lípidos.30,36
Superóxido dismutasa
(SOD)
Enzima de
Catalasas (Cat)
Sistemas acción directa
Glutatión peroxidasa
antioxidantes
(GPx)
enzimáticos
Enzimas no Glutatión reductasa
vinculadas Proteasas
ANTIOXIDANTES
directamente Transferasas
Glutatión reducido (GSH)
Moléculas
Endógenos
transportadoras de
metales
Sistemas Vitamina E (a-tocoferol)
antioxidantes no Vitamina C (Ac.
enzimáticos Ascórbico)
Exógenos Vitamina A (b-carotenos)
Polifenoles (flavonoides y
taninos)
Metales (Fe, Cu, Mg, etc)
Fuente: Autoría propia – 2017.
25
2.2.5. Estrés Oxidativo
Más del 95% del oxígeno consumido por las células se reduce a través
de cadena respiratorio mitocondrial, aproximadamente entre un 1 –
2% puede generar especies reactivas de oxígeno.36,37
a. Oxidación proteica
26
residuos de fenilalanina, tirosina, triptófano, histidina y
metionina; originando entrecruzamientos de cadenas
peptídicas, rompimiento de enlaces peptídicos, formación
de grupos carbonilos, pérdida de la afinidad por los metales
e incremento en la hidrofobicidad de las mismas; estas
modificaciones generan cambios en la estructura, actividad
y función de las mismas, tal como inhibición de la actividad
enzimática y hormonal, un incremento de la susceptibilidad
a la agregación y proteólisis, aumento o disminución de la
captación celular y también altera el transporte de iones y
la inmunogénesis.36,38
b. Oxidación lipídica
27
nitrogenadas, originando deleciones que son causantes de
mutaciones, reordenamientos cromosómicos,
activación/inactivación de genes también pueden afectar la
biosíntesis de las cadenas de ADN; además puede alterar
funciones celulares dañando genes que codifican proteínas
específicas y también producir errores durante la
transcripción y traducción del ácido ribonucleico (ARN)
entre otras alteraciones genéticas.31,38
d. Oxidación de polisacáridos
28
siendo las enfermedades coronarias las que provocan mayor
cantidad de defunciones a nivel mundial.28,33,38
29
beneficiosa sobre algunos procesos fisiológicos y reduzcan el riesgo
de padecer alguna enfermedad.5,39
.
Actualmente la definición más utilizada para estos alimentos es la del
ILSI (International Life Science Institute), que los denomina como
aquellos “alimentos que posean efectos beneficiosos para la salud
sobre una o más funciones del organismo, más allá de sus
propiedades nutricionales habituales, de modo que pueda contribuir a
mejorar el estado general de salud o a reducir el riesgo de padecer
alguna enfermedad, o ambas cosas”, se puede añadir que puede ser
un alimento natural o procesado, que contenga compuestos
bioactivos que afecten funciones biológicas de forma positiva y
específica, promoviendo efectos fisiológicos y psicológicos
beneficiosos, además de contar con respaldo científico.41-43
30
2.2.6.1. Criterios para determinar la funcionalidad de un
alimento
31
2.2.6.2. Alimentos funcionales y fitonutrientes
2.2.7. Cianobacterias
32
ausencia de membrana nuclear y orgánulos; pero también con las
plantas al realizar fotosíntesis oxigénica y con otros organismos de
mayor orden en el reino animal por la capacidad de almacenar
azúcares complejos similares al glucógeno en su pared celular,
además de lípidos y proteínas como fuente de reserva.14,49
33
La clasificación taxonómica se basa en la combinación de
características morfológicas, fisiológicas y bioquímicas. Se han
registrado cerca de 1000 especies de este tipo de
microrganismo, destacando entre estos los géneros nostocales
y oscillatoriales como el N. commune (cushuro) y la S. platensis
(spirulina) respectivamente.49,51
34
2.2.7.3. Aporte nutricional
35
Aunque se debe tener en consideración que el valor nutricional
como el de compuestos bioactivos dependerá de la especie, del
espacio de crecimiento y de factores ambientales como altitud,
temperatura, exposición solar, pH, entre otros. Así como es
importante también conocer que existen especies comestibles y
otras potencialmente toxicas que pueden generar efectos
negativos en humanos y animales.8,57
36
péptidos, alcaloides, coenzimas; como las cianobactinas
pequeños péptidos cíclicos utilizados para la elaboración de
medicamentes antipalúdicos y antitumorales; y se considera que
aún existen muchos metabolitos por ser aislados.14,57
37
La S. platensis (spirulina), es una cianobacteria de morfología
unicelular, filamentosa en espiral, a lo que debe su nombre,
perteneciente a la familia oscillatoraceae. Suelen proliferar en
lagunas alcalinas de Asia, África, América del sur y México,
donde se ha tecnificado su producción.58,59
38
ácido graso polinsaturado con propiedades terapéuticas;
utilizado para tratar enfermedades de la piel, enfermedades
vasculares, Parkinson y esclerosis múltiple.60
39
a estas; su actividad extractiva ampliamente distribuida en ámbitos
rurales de las regiones de Ancash, Cuzco, Puno, Junín, Amazonas,
Lima, La Libertad y Tumbes. Representa una fuente alimenticia de
fácil acceso, de muy bajo costo y crecimiento sencillo que
complementa la alimentación de los pobladores en zonas alto
andinas.18,52,61
40
En relaciona al rango de color, se han podido observar colonias
desde verde, amarilla-verde, marrón, verde oscuro a negro y
raramente rojo; esta característica está determinada por los
pigmentos que presenta, principalmente por la concentración de
α-clorofila (verde), ficocianina (azul) y ficoeritrina (rojo) y que al
combinarse dan origen a estas diversas tonalidades; aunque
existe una especie verde-gris que contienen neurotóxinas. Se ha
determinado que el grosor de la capa gelatinosa y su color
contribuyen a su apariencia.14,51,61
41
2.2.8.2. Clasificación taxonómica
REINO MONERA.
DIVISIÓN Cyanobacteria
CLASE Cyanophyceae.
SUBCLASE Nostocophycideae.
ORDEN Nostocales.
FAMILIA Nostocaceae.
GÉNERO Nostoc
42
Tales valores son semejantes a los establecidos en las tablas
peruanas de composición de los alimentos (Tabla nº 06).16,49,62
NUTRIENTE VALOR
Fósforo (mg) 64
43
2.2.8.4. Propiedades benéficas para la salud
44
vitaminas y minerales las hace interesante para la industria de
alimentos y farmacológica.58,61,62
45
etilbenzotiazolin sulfonato] (ABTS). Donde la actividad
secuestradora de átomos de hidrógeno o electrones de los
radicales de los reactivos de DPPH y ABTS, sirve como
indicador del potencial de capacidad antioxidante de un
compuesto.14,63
46
·DPPH (reduce) originando el cambio de color al disminuir la
concentración del radical libre, mientras mayor sea la actividad
antioxidante mayor será la pérdida de color (Figura nº 07).
Además, la solución del reactivo tiene a una absorbancia
máxima de 517 nm, el valor de la absorbancia es reducida en
contacto con antioxidantes. Este cambio de absorbancias
determina la actividad secuestradora del radical, la cual se
calcula usando el C.I.50 mediante el porcentaje de reducción del
DPPH (Figura nº 08).20,61-63
47
%RED-DPPH: porcentaje de reducción del DPPH; A0 = absorbancia del estándar; A1
= absorbancia de la muestra.
Fuente: Efecto del procesamiento sobre la capacidad antioxidante de la ciruela criolla
(Prunus domestica)” por Yolmar Valero, Jhoana Colina, Emilio Ineichen - 2012
48
ha observado cambios significativos en la concentración y
disponibilidad de compuestos bioactivos.9,65
49
Flavonoides; son compuestos polifenólicos que comúnmente
presenta un grupo cetona, sintetizados a partir de una molécula
de fenilalanina y tres de malonil-CoA, con potencial antioixdante.
50
CAPÍTULO III
METODOLOGIA DE LA INVESTIGACION
3.1.2. Diseño
3.1.3. Método
51
3.2 Población y Muestra de la Investigación
3.2.1. Población
3.2.2. Muestra
la investigación.
Temperatura ambiente 25 °C
52
3.3.2. Variable Dependiente: se consideró como variable
dependiente la capacidad antioxidante del extracto acuoso de
N. commune (cushuro) (Tabla nº 08).
3.4.1. Técnicas
53
3.4.2. Instrumentos de recolección de datos
3.4.3. Procedimientos
54
(sobrenadante) de los solutos (precipitado). El tubo 1 (A) se
mantuvo a temperatura ambiente (Figura nº 10).
55
Fuente: Mg. Quiroz K. – 2017.
56
Fuente: Mg. Quiroz K. – 2017.
57
CAPÍTULO IV: PRESENTACIÓN, ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN DE
RESULTADOS
4.1. Resultados
58
Al evaluar la capacidad antioxidante según el método DPPH para el
extracto acuoso de N. commune (cushuro) a temperatura ambiente en
diferentes concentraciones se obtuvieron los porcentajes de
reducción del DPPH (Anexo nº 03). En el gráfico nº 01, se observa
una relación directa entre la concentración del extracto acuoso y el %
red-DPPH, al ser analizados estadísticamente se calculó una
concentración media de 62,5% ±28,8 y un porcentaje de reducción de
DPPH medio de 64,5% ±8.56, se aplicó la prueba de Pearson
obteniendo un valor r= 0,933 que nos indica que existe una relación
fuerte entre las variables y un valor de significancia de p=0.000
(Anexo nº 03), por lo que se deduce que a mayor concentración del
extracto acuoso de N. commune (cushuro) mayor será el porcentaje
de reducción del DPPH.
59
Al evaluar la capacidad antioxidante según el método DPPH para el
extracto acuoso de N. commune (cushuro) a temperatura ambiente en
diferentes concentraciones se obtuvieron los porcentajes de
reducción del DPPH (Anexo nº 04). En el gráfico nº 02, se observa
una relación directa entre la concentración del extracto acuoso y el %
red-DPPH, al ser analizados estadísticamente se calculó una
concentración media de 62,5% ±28,8 y un porcentaje de reducción de
DPPH medio de 55.9% ±5.11, se aplicó la prueba de Pearson
obteniendo un valor r= 0,977 que nos indica que existe una relación
fuerte entre las variables y un valor de significancia de p=0.000 (Anexo
nº 05), por lo que se mantiene la relación directa de que a mayor
concentración del extracto acuoso de N. commune (cushuro) mayor
será el porcentaje de reducción del DPPH.
60
Al evaluar la capacidad antioxidante según el método DPPH para el
extracto acuoso de N. commune (cushuro) a temperatura ambiente en
diferentes concentraciones se obtuvieron diferentes porcentajes de
reducción del DPPH (Anexo nº 06). En el gráfico nº 03, se observa
una relación directa entre la concentración del extracto acuoso y el %
red-DPPH, al ser analizados estadísticamente se calculó un
porcentaje de reducción de DPPH medio de 50,65% ±3,42. Se aplicó
la prueba de Pearson obteniendo un valor r= 0,986 que nos indica que
existe una relación fuerte entre las variables y un valor de significancia
p=0.000 (Anexo nº 07), por lo que se mantiene la relación directa de
que a mayor concentración del extracto acuoso de N. commune
(cushuro) mayor será el porcentaje de reducción del DPPH.
70
60
%RED-DPPH
50
40
30
20
10
0 20 40 60 80 100 120
CONCENTRACIÓN (µl)
10 MINUTOS 15 MINUTOS
61
Se calcularon las diferencias entre los valores de reducción de DPPH
(Anexo nº 08) donde se logró apreciar el efecto del tiempo de
exposición a temperatura de ebullición sobre la capacidad
antioxidante, En el gráfico n° 04 se observa que el porcentaje de
reducción del DPPH disminuye a mayor tiempo de exposición a
temperatura de ebullición, siendo la mayor variación entre la muestra
sometida a ebullición por 10 minutos (E1X4) y por 15 minutos (E2X4)
con una diferencia de 7,7% De igual forma se mantiene la relación
directa entre el porcentaje de reducción del DPPH y la concentración
de las muestras.
85
75
65
55
%RED-DPPH
45
35
25
0 20 40 60 80 100 120
CONCENTRACIÓN (µl)
62
En relación a los valores de reducción del DPPH de los extractos
acuosos de N. commune (cushuro)a temperatura ambiente (A), el E.A.
sometido a temperatura de ebullición por 10 minutos (E1) y el E.A.
sometido a temperatura de ebullición por 15 minutos (E2), en el gráfico
nº 05 se observa la relación directa de mayor concentración mayor %
de reducción de DPPH para las tres muestras, y que a mayor
temperatura y tiempo de exposición el porcentaje de reducción del
DPPH disminuye.
Para la determinación del C.I.50 para cada una de las muestras (A, E1
y E2) se hizo uso del software Excel 2016. El C.I.50 nos indica la menor
cantidad de muestra que se necesita para neutralizar el 50% del
DPPH (Tabla n° 08).
63
Los valores C.I.50 de las muestras fueron calculas utilizando las rectas
de ajuste de las gráficas (Anexo nº 09). En el gráfico nº 06 se observa
que la muestra a temperatura ambiente posee una buena capacidad
antioxidante C.I.50 =13,4 mg/ml, evidenciando que necesita menor
concentración de la muestra para inhibir el efecto radicalario del
DPPH; la muestra a temperatura de ebullición por 10 minutos (E1)
obtuvo un C.I.50 =28.8 mg/ml evidenciándose un aumento en relación
a la muestra A, lo que indica que la capacidad antioxidante se ve
reducida así mismo para la muestra a temperatura de ebullición por
15 minutos (E2) el valor C.I.50 = 55,4 mg/ml (Anexo nº 10). Al ser
analizados estadísticamente se calculó un C.I.50 medio de 32,53%
±18,11. Se aplicó la prueba de Pearson obteniendo un valor r= 0,988
que nos indica que existe una relación fuerte entre las variables y un
valor de significancia de p=0.000 (Anexo nº 11), por lo que se deduce
la relación directa que a mayor temperatura mayor será el coeficiente
de inhibición medio (C.I.50) del extracto acuoso de N. commune
(cushuro), lo que nos indica que el tiempo de ebullición afecta
negativamente la capacidad antioxidante del N. commune (cushuro).
64
DISCUSIÓN
65
que los mayores valores de reducción de DPPH se obtuvieron a la
concentración a mayor concentración (100µl/ml.) para cada una de las
muestras analizadas.
66
ebullición por 10 minutos y finalmente con un C.I.50= 55,4mg/ml en
temperatura de ebullición por 15 minutos, observándose la influencia
negativa de la temperatura de ebullición y el tiempo de exposición sobre la
capacidad antioxidante del N. commune (cushuro).
Esta investigación aporta información nueva que puede ser tomada como
base para investigaciones futuras. Hay que considerar que los resultados
pueden variar de acuerdo al origen, procesamiento, tipo de extracto, entre
otros factores y que es necesario profundizar en la investigación de los
componentes antioxidantes de manera individual, para fomentar el
consumo de N. commune (cushuro) en la población.
67
CONCLUSIONES
68
RECOMENDACIONES
69
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
8. Rasmussen H.E.., Blobaun K.R., Park Y., Ehlers S.J., Fan L., Lee
J. Lipid extract of Nostoc Commune var. Sphaeroides Kützing, a blue-
green alga. Inhibits the activation of sterol regulatory element binding
proteins in HepG2 cells. The journal of nutrition. 2008; 138(3): 476 –
81.
70
10. Ramos W., Venegas D., Honorio H., Pesantes J., Arrasco J., Yagui
M. Enfermedades no transmisibles: Efecto de las grandes transiciones
y los determinantes sociales, Rev. Perú Epidemiol. 2014; 18(1): 1 –
10.
15. Jyoti C., Wethroe K., Harshitha B.C. Evaluation of the antioxidant
and microbial properties of Nostoc Linckia isolated from Kukkarahalli
lake, Mysore. International Journal of Applied Biology and
Pharmaceutical Technology. 2011; 5(4): 240 – 248.
16. Cepoi L., Rudi L., Miscu V., Cojocari A., Chiriac T., Sadovnic D.
Antioxidant activity of etanol extracts from Spirulina and Nostoc;
Buletinul ASM. 2010; 311(2): 169 – 175.
71
19. Yi D., Zujun Y. Evaluation of morphological variation and biomass
growth of Nostoc Commune under laboratory conditions. Journal of
Environmental Biology. 2014; 35; 485 – 489.
20. Cruzado M., Pastor M., Castro N., Cedron J.C. Determinación de
compuestos fenólicos y actividad antioxidante de extractos acuosos
de alcachofa. Rev.Soc. Quim. Perú. 2013; 79(1); 57 – 63.
21. Valero Y., Colina J., Ineichin E. Efecto del procesamiento sobre la
capacidad antioxidante de la ciruela criolla (Prunus Domestica).
ALAN. 2012; 62(4): 363 – 371.
22. Doroteo V., Díaz C., Terry C., Rojas R. Compuestos fenólicos y
actividad antioxidante invitro de seis platas peruanas. Rev. Soc. Quim.
Perú. 2013; 79(1): 13 – 20.
23. Ninomiya M., Satoh H., Yamaguchi Y., Takenaka H., Koketsu M.
Antioxidative activity and chemical constituents of edible terrestrial
alga Nostoc Commune Vauch; Biosci. Biotechnol. Biochem. 2011;
75(11): 2175 – 2177.
72
29. Benítez D.E. Vitaminas y oxidorreductasas antioxidantes: defensa
ante el estrés oxidativo. Rev. Cubana Invest. Biomed. [en línea]. 2006.
[fecha de acceso 15 agosto 216]. 25(2). URL disponible en:
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864-
03002006000200010&lng=es&nrm=iso
30. López A., Fernando C., Lazarova Z., Bañuelos R., Sanchez S.H.
Antioxidantes, un paradigma en el tratamiento de enfermedades. Rev.
ANACEM. 2012; 6(1): 48 – 53.
32. Cruz J., Licea M.E., Hernández P., Abraham E.A., Yanes M. Estrés
oxidativo y diabetes mellitus. Rev. Mex. Patol. Clin. 2011; 58(1): 4 –
15.
73
38. Lozada S.M., García L. Estrés oxidativo y antioxidantes: cómo
mantener el equilibrio. Rev. Asoc. Colomb. Dermatol. 2009; 17(3):
172-179.
40. Olagnero G., Abad A., Bendersky S., Genevois C., Montonati M.,
Granzella L. Alimentos funcionales: fibra, prebióticos, probióticos y
simbióticos. DIAETA (B. Aires). 2007; 25(121): 20 – 30.
45. Gonzales L.G., Perea J.M., Ortega R.M. Los alimentos funcionales
en el contexto de la dieta mediterránea. Mediterráneo Económico.
2015; 27: 139 – 160.
74
48. Neyra L. Alimentos funcionales. Biotempo. 2007; 7: 46 – 54.
52. Jurado B., Fuertes C.M, Thomas G.E., Ramos E., Arroyo J.L.,
Cardenas L, Cáceres R., Inocente M.A., Alvarado B., Rivera B.M.,
Ramírez M.A., Ostos H. Estudio fisicoquímico, microbiológico y
toxicológico de los polisacáridos del Nostoc Commune y Nostoc
Sphaericum. Rev. Per. Quím. Ing. Quím. 2014; 17(1); 15 – 22.
53. Núñez J., Mendoza A. Fatty acids composition and nutritional effect
in rats of Cushuro (Nostoc Sphaericum Vaucher).
Pharmacologyonline. 2006; 3: 676 – 682.
54. Wright D., Prickett T., Helm R., Potts M. Form species Nostoc
Commune (cianobacteria). International journal of systematic and
evolutionary microbiology. 2001; 51; 1839 – 1852.
57. Vacek J., Hrback J., Kopecky J., Vostalova. Cytotoxicity and Pro-
Apoptotic Activity of 2,2´-Bis[4,5-bis(4-hydroxybenzyl)-2-(4-
hydroxyphenyl)cyclopent-4-en-1,3-dione], a Phenolic
Cyclopentenedione Isolated from the Cyanobacterium
75
Strain Nostoc sp. str. Lukešová 27/97. Molecules. 2011; 16(5), 4254 –
4263.
62. Fan Lu C., Qiang C., Zheng H.W., Chang, Yang W. Colonies of
Nostoc Commune, methods for cultivating edible Nostoc Commune
and edible Nostoc Commune formulations and their use for promoting
health. U.S. Patent 05-03314.2007.
76
Anexo nº 01: MATRIZ DE CONSISTENCIA: “Efecto de la temperatura sobre la capacidad antioxidante del N. commune (cushuro).
Temperatura
¿Cuál es el efecto de la Determinar cuál es el efecto de DIMENSIONES
La temperatura de ebullición Analítico
temperatura de ebullición sobre la temperatura de ebullición
modifica la capacidad de Longitudinal
T° ambiente N. commune
la capacidad antioxidante del sobre la capacidad antioxidante Deductivo
extracto acuoso del N. T° de ebullición (cushuro)
extracto acuoso del N. del extracto acuoso del N. Prospectivo
commune (cushuro). INDICADORES
commune (cushuro)? commune (cushuro).
25°C
≥100°C por 10’
≥100°C por 15’
ESPECIFICOS ESPECIFICOS ESPECIFICAS NIVEL DISEÑO DEPENDIENTE MUESTRA
P.E.1. ¿Cuál es la capacidad O.E.1. Determinar cuál es la H.E.1 El extracto acuoso de Capacidad
antioxidante del extracto acuoso capacidad antioxidante del N. commune (cushuro) a antioxidante
de N. commune (cushuro)a extracto acuoso de cushuro N. temperatura ambiente posee
temperatura ambiente? commune (cushuro) a una alta capacidad
DIMENSIÓN
temperatura ambiente. antioxidante.
Extractos
O.E.2. Determinar cuál es el H.E.2 La capacidad
P.E.2. ¿Cuál es el efecto de acuosos de una
efecto de la temperatura de antioxidante del extracto
la temperatura de ebullición por muestra a
ebullición por 10 minutos sobre acuoso de N. commune
10 minutos sobre la capacidad C.I.50 temperatura
la capacidad antioxidante del (cushuro)se modifica al ser
antioxidante del extracto acuoso
extracto acuoso de N. sometido a temperatura de Explicativo Experimental ambiente y otra
de N. commune (cushuro)?
commune (cushuro). ebullición por 10 minutos. sometida a
. temperatura de
ebullición de N.
INDICADORES
O.E.3. Determinar cuál es el commune
H.E.3 La capacidad
P.E.3. ¿Cuál es el efecto de efecto de la temperatura de (cushuro).
antioxidante del extracto
la temperatura de ebullición por ebullición por 10 minutos sobre
acuoso de N. commune > C.I. 50
15 minutos sobre la capacidad la capacidad antioxidante del
(cushuro) se modifica al ser
antioxidante del extracto acuoso extracto acuoso de N.
sometido a temperatura de
de N. commune (cushuro)? commune (cushuro).
ebullición por 15 minutos.
< C.I. 50
77
Anexo nº 02: Ficha de recolección de datos
MUESTRA:_________________________________________________
TRATAMIENTO:_____________________________________________
MUESTRA
ABS* ABS ABS ABS
M1
M2
M3
M4
*ABS: absorbancia
78
Anexo nº 03: Porcentaje de reducción del extracto acuoso de N.
commune (cushuro) en distintas concentraciones
sometido a temperatura ambiente mediante el método
DPPH.
CONCENTRACIÓN % RED-DPPH
(µl)
25 54.2
50 60.4
75 66.8
100 76.6
%RED-DPPH: porcentaje de reducción del DPPH.
Fuente: Autoría propia – 2017.
Desviación
Media estándar N
Concentración (ul/ml) 62,5000 28,86751 16
% Reducción del DPPH 64,5000 8,55726 16
Fuente: Autoría propia – 2017.
Correlaciones
Concentración % Reducción
(ul/ml) del DPPH
Correlación de
1 ,993**
Pearson
Sig. (bilateral) ,000
Concentración (ul/ml) N 16 16
Correlación de
,993** 1
Pearson
Sig. (bilateral) ,000
% Reducción del DPPH N 16 16
**. La correlación es significativa en el nivel 0,01 (bilateral).
Fuente: Autoría propia – 2017.
79
Anexo nº 05: Porcentaje de reducción del extracto acuoso de N.
commune (cushuro) en distintas concentraciones
sometido a temperatura de ebullición por 10 minutos
mediante el método DPPH.
Desviación
Media N
estándar
% Reducción del DPPH 55,900 5,1074 16
Concentración (ul/ml) 62,500 28,8675 16
Fuente: Autoría propia – 2017.
Correlaciones
% Reducción Concentración
del DPPH (ul/ml)
Correlación de Pearson 1 ,977**
% Reducción del DPPH Sig. (bilateral) ,000
N 16 16
Correlación de Pearson ,977** 1
Concentración (ul/ml) Sig. (bilateral) ,000
N 16 16
**. La correlación es significativa en el nivel 0,01 (bilateral).
Fuente: Autoría propia – 2017.
80
Anexo nº 07: Porcentaje de reducción del extracto acuoso de N.
commune (cushuro) en distintas concentraciones
sometido a temperatura de ebullición por 15 minutos
mediante el método de DPPH.
CONCENTRACIÓN % RED-DPPH
(µl)
25 45.8
50 50.1
75 51.7
100 55.0
Fuente: Autoría propia – 2017.
Desviación
Media N
estándar
Concentración
62,5000 28,86751 16
(ul/ml)
% Reducción del
50,6500 3,41955 16
DPPH
Fuente: Autoría propia – 2017.
Correlaciones
% Reducción
Concentración (ul/ml)
del DPPH
Correlación de Pearson 1 ,986**
Concentración
Sig. (bilateral) ,000
(ul/ml)
N 16 16
Correlación de Pearson ,986** 1
% Reducción del
Sig. (bilateral) ,000
DPPH
N 16 16
**. La correlación es significativa en el nivel 0,01 (bilateral).
Fuente: Autoría propia – 2017.
81
Anexo nº 09: Porcentaje de reducción de los extractos acuoso de N.
commune (cushuro) sometidos a temperatura de
ebullición por 10 y 15 minutos mediante el método de
DPPH.
Desviación
Media estándar N
C.I.50 32,5333 18,11987 12
Temperatura 2,0000 ,85280 12
Fuente: Autoría propia – 2017.
82
Correlaciones
C.I.50 Temperatura
Correlación de Pearson 1 ,988**
C.I.50 Sig. (bilateral) ,000
N 12 12
Correlación de Pearson ,988** 1
Temperatura Sig. (bilateral) ,000
N 12 12
**. La correlación es significativa en el nivel 0,01 (bilateral).
Fuente: Autoría propia – 2017.
83
Anexo nº 012: Lista de abreviaturas.
DPPH: 2,2-difenil-1-picrilhidrazilo.
Ac.: Ácido.
nm: Nanómetro.
84
ABTS: 2,2-azinobis-[3 etilbenzotiazolin-6-sulfónico]
REDOX: Oxido-reducción.
Vit.: Vitamina.
85