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AÑO DEL DIÁLOGO Y RECONCILIACIÓN NACIONAL

FACULTAD DE CIENCIA BIOLÓGICAS

DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE CIENCIAS


BIOLÓGICAS

GRUPO N° 3

INFORME DE GENETICA
DOCENTE: Blga. Felícita Karina Camargo Paredes
SUB-GRUPO: CARIOTIPOS
Integrantes:
 Carbonel Sinarahua ,Matthews Randall
 Huyhua Salcedo ,Wendy Ruth
 Muñoz Galaga ,Jeffrey Almir
 Perales Gutiérrez , Elizabeth
 Rodríguez Rodríguez ,Justo Josue

Tema: OBTENCIÓN DE CROMOSOMAS POLITENICOS


EN DROSOPHILA MELANOGASTER
Universidad Nacional “San Luis Gonzaga” de Ica
Facultad de Ciencias Biológicas

OBTENCIÓN DE CROMOSOMAS POLITENICOS EN DROSOPHILA


MELANOGASTER

I.INTRODUCCIÓN:
En 1881 E.G. Balbiani encontró estructuras peculiares en los núcleos de ciertas células
secretoras de los dípteros. Sin embargo no fueron reconocidas como cromosomas sino
hasta 1933 cuando Th. Painter, E. Heitz y H. Bauer establecieron que dichas estructuras
eran realmente cromosomas gigantes.
Se ha comprobado la presencia de este tipo de cromosomas en tejidos secretores tales
como túbulos de Malpighi, recto, intestino y glándulas salivales de los dípteros.
Los cromosomas gigantes se forman mediante un proceso conocido como endomitosis,
es decir, son el resultado de la sinapsis de los cromosomas homólogos, seguida por la
replicación de los cromosomas sin que posteriormente ocurra división celular,
constituyendo así los llamados cromosomas politénicos.
Se considera que en estos cromosomas atípicos pueden estar representadas hasta más
de 1000 copias de la misma cromátida. Este estrecho apareamiento hace evidente la
presencia de bandas oscuras las cuales varían en ancho y morfología, alternadas con
regiones más claras conocidas como interbandas en patrones característicos a cada
cromosoma y, en consecuencia, propias de cada especie de Drosophila.
En adición a lo anterior hay regiones que en ocasiones aparecen como "abultamientos"
constituyendo los llamados "puffs" y zonas ampliamente distendidas denominadas
"anillos de Balbiani".
Los "puffs" se originan por el desdoblamiento de las fibras en regiones de transcripción
activa, es decir, regiones de intensa actividad genética.
Recientemente se ha encontrado en Drosophila que en general cada banda contiene el
material genético de un gene simple. Drosophila contiene cuatro pares de cromosomas,
los cuales en las células somáticas en metafase se observan como sigue: un par de
ellos, los del par 4, son muy cortos y tienen forma de varilla; dos pares, los cromosomas
2 y 3 son largos y con centrómeros localizados en el centro, metacéntricos, lo que les
confiere una forma de V; finalmente, existe un par de cromosomas sexuales, el par 1,
que debido a sus centrómeros terminales tiene el aspecto de dos varillas largas en la
hembra que es XX, mientras que en el macho que es XY, además del cromosoma X en
varilla se presenta otro cuerpo en forma de bastón con un gancho en su extremo, el
cromosoma Y .

II. OBJETIVOS:
1) Conocer y usar el microscopio estereoscópico mediante la extracción de glándulas
salivales de larvas de Drosophila.
2) Preparar cromosomas politénicos a partir de glándulas salivales de Drosophila.
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III. MATERIALES.
 Láminas portaobjeto
 Laminillas cubreobjetos
 Goteros
 Estiletes confeccionados
 Larvas de Drosophila melanogaster.
 Estuche de disección
 Estereoscopio, lupas
 Microscopio óptico
 Reactivos: Targa, Fármer
 Colorante Orceína lactoacética.
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IV. PROCEDIMIENTO.

1. Elegir larvas grandes y someterlas en unas gotas de agua sobre un


portaobjetos para eliminar restos de comida.

2. Colocar la larva limpia en un portaobjetos con una gota de agua.


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3. Situar el portaobjeto en la plataforma del microscopio de disección. Recordando


que las glándulas salivales se encuentran unidas entre sí por la parte anterior en
un conducto único que se comunica con la faringe.

4. Extraer las glándulas, sujetando la parte posterior de la larva con unas pinzas y
se decapita con una aguja enmangada. Las glándulas aparecerán como dos
saquitos transparentes, situados a ambos lados del esófago, y unidos a tejido
graso.

5. O también, aplicando presión en la región media de la larva, con un estilete, de


tal manera que quede inmovilizada. Con otro estilete debe extraerse la glándula
retirando suavemente los ganchos bucales, decapitando a la larva.
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6. Aislar las glándulas lo mejor posible pero con cuidado de no dañarlas. No hay
problema el hecho de que quede un poco de tejido graso adherido.

7. Quitar un poco de líquido que rodea a la glándula cuidándola de no perderla.


8. Fijar las glándulas agregando gotas del reactivo Targa por 10 minutos.
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9. Remover la membrana de las células de la glándula agregado el reactivo Fármer


por 2 minutos.
10. Teñir los núcleos de las células glandulares añadiendo el colorante Orceína
lactoacética por 30 minutos. Agregando de 3 más gotas de colorante.

11. Cubrir el preparado con una laminilla cubreobjetos y efectuar el “squash”, dando
golpes suaves con el borrador de un lápiz para que las células se separen, y
para que los cromosomas se extiendan, cuidando que la muestra no se pierda.
12. Observar al microscopio compuesto con aumento de 100X y 400X.
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V.CONCLUSIONES

 En la presente practica se logró conocer y llevar a cabo la técnica citogenética

más empleada en el reconocimiento de cromosomas politenicos en larvas de

Drosophila melanogaster, que por lo general pueden observarse de una manera

relativamente sencilla al microscopio.

 Con este procedimiento que incluye aprender a manejar el microscopio

estereoscópico, se pudo observar e identificar cromosomas gigantes en células

de glándulas salivales de Drosophila melanogaster. La presencia de estos

cromosomas se da como consecuencias de replicaciones de materia

cromosómico, que no se separa, dando lugar a estructuras cromosomales

gigantes.

LOS PRINCIPALES USOS DE LOS CROMOSOMAS POLIUTENICOS SON EN:

 La localización de genes.

 La identificación de cambios estructurales en cromosomas.

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