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En la cromatografía gas-líquido (CGL) o cromatografía de gases (CG), los componentes de una muestra que se
vaporiza son fraccionados como consecuencia de ser repartidos entre una fase gaseosa móvil y una fase
estacionaria líquida mantenidas en una columna.
Se utilizan ordenadores para el control automático de la mayoría de los parámetros instrumentales, tales como
la temperatura de la columna, caudales y la inyección de la muestra. A través de un software se pueden obtener
los tiempos de retención, área y ancho de los picos.
Gas Portador: La fase móvil gaseosa debe ser químicamente inerte. El He es la fase móvil más común,
aunque también se emplea argón, nitrógeno e hidrógeno. Estos gases se suministran en tanques
presurizados. Se requieren reguladores de presión, calibradores y medidores de flujo para controlar la
velocidad de flujo del gas.
El sistema de gas portador contiene a menudo un tamiz molecular para eliminar el agua u otras impurezas
(trampas que retiran elementos que contaminan la fase móvil).
Con un medidor de pompas de jabón se puede medir la velocidad de flujo. En la trayectoria del gas se
forma una película de jabón cuando se exprime un bulbo de caucho que contiene una solución de jabón, se
mide el tiempo requerido para que esta película se mueva entre dos graduaciones en la bureta y se
convierte a velocidad de flujo.
Sistema de inyección de muestra: Para que la columna sea eficiente, es necesario que la muestra sea
de un tamaño apropiado para que pueda ser introducida en un "tapón" de vapor, la inyección lenta o las
muestras de tamaño excesivo causan un ensanchamiento de la banda y una resolución pobre.
El método más común de inyección de muestra implica el uso de una microjeringa para inyectar una
muestra líquida o gaseosa a través de un diafragma o "septum" de silicona, en una cámara de vaporización
instantánea situada en la cabeza de columna (la cámara de muestra normalmente está unos 50°C por
encima del punto de ebullición del componente menos volátil de la muestra). El líquido pasa a gas en forma
explosiva.
Saturación
T° mínima A < T° que ésta se produce una constante de reparto falsa. La viscosidad es muy grande, se
crea resistencia a la transferencia de masa.
T° máxima A > T° que ésta la fase estacionaria empieza a cambiar de estado y se escapa. Pasa al
estado gaseoso y abandona el sistema (proceso conocido como "sangrado").
- Apolar
- Semipolar
- Polar
Tipos de Columna:
a) Columnas Capilares: Las columnas capilares o capilares abiertas son de dos tipos básicas:
- capilares de pared recubierta (WCOT) : son simplemente tubos capilares con la pared interna
recubierta de una capa fina de fase estacionaria líquida. Los WCOT se construían de vidrio, luego
se introdujeron columnas tubulares abiertas de sílice fundida. Se fabrican a partir de sílice
especialmente purificada con un contenido mínimo de óxidos metálicos. Estos capilares tienen las
paredes muchos más delgados que sus equivalentes de vidrio. Se recubren con un polímero para
- capilares con soporte recubierto (SCOT): la superficie interna del capilar está revestida de una
fina capa (~ 30 m) de un material de soporte, tal como tierra de diatomeas. Este tipo de columnas
contiene varias veces la fase estacionaria de una columna capilar de pared recubierta y por tanto,
tiene una mayor capacidad de carga (no se satura tan fácilmente). La eficiencia de una columna
SCOT es menor que la WCOT, pero es sensiblemente mayor que una columna de relleno.
b) Columnas de Relleno (Empaquetadas): En estas la fase estacionaria corresponde a una película delgada
de líquido colocada en la superficie de un soporte (empaque) sólido inerte y finamente dividido, de modo tal
que el área de la superficie expuesta a la fase móvil sea lo más grande posible. El empaque sólido ideal
consiste de pequeñas partículas uniformes, esféricas, con buena resistencia mecánica y con una superficie
específica de al menos 1 m 2/g. Además, el material debe ser inerte a las elevadas temperaturas y esta
humedecido uniformemente por la fase líquida. Las actuales columnas de relleno se fabrican con tubo de
vidrio, metal (acero inoxidable, cobre, aluminio) o de teflón, con una longitud característica de 2 a 3 m y un
diámetro interno de 2 a 4 mm. Ya están fuera de uso, solo se emplean en cromatografía HPLC.
El número de platos teóricos (N) es función del largo de la columna (L). Sin embargo, N no es propio de la
columna, sino que depende también del soluto con que se trabaja, es decir, de la naturaleza del soluto. En
general, a mayor N se tiene una mejor separación.
GSC KD
Cromatografía Gas-Sólido:
La cromatografía gas-sólido se basa en la adsorción de sustancias gaseosas sobre superficies sólidas. Los
coeficientes de distribución son generalmente mucho mayores que en el caso de la cromatografía gas-líquido.
En consecuencia, la cromatografía gas-sólido es útil para la separación de especies que no se retienen en
columnas de gas-líquido, tales como los componentes del aire, sulfuro de hidrógeno, disulfuro de carbono,
óxidos de nitrógeno, monóxido de carbono, dióxido de carbono y gases nobles.
La cromatografía gas-sólido se lleva a cabo tanto en columnas de relleno como en columnas abiertas. En estas
últimas, se fija en las paredes del capilar una delgada capa del adsorbente; estas columnas a veces se
denominan columnas abiertas de pared porosa, o columnas PLOT. Se encuentran dos tipos de adsorbentes: los
tamices moleculares y los polímeros porosos.
Análisis Cualitativo:
Se debe tener un patrón para calcular Vg. Luego se compara con el Vg de la muestra y se observa si son
iguales. También se puede acudir a alguna referencia o Handbook de cromatografía.
Obsérvese que Vg a una temperatura dada depende solamente de la constante de distribución del soluto y de la
densidad del líquido que constituye la fase estacionaria, y como tal, debería ser en principio un parámetro útil
para la identificación de la especie.
El índice de retención I fue propuesto por primera vez por Kovats en 1958 como un parámetro para identificar
solutos a partir de los cromatogramas. El índice de retención para un soluto dado puede deducirse del
cromatograma de una mezcla del soluto con al menos dos alcanos normales (de cadena lineal) que tengan
unos tiempos de retención tales, que el del soluto considerado quede entre los mismos. Esto es, los alcanos
normales son los patrones en los que se basa la escala de índices de retención.
Por definición, el índice de retención para un alcano normal es igual a 100 veces el número de carbonos del
compuesto sin considerar el relleno de la columna, la temperatura u otras condiciones cromatográficas. El
índice de retención para todos aquellos compuestos que no sean alcanos normales varía, a menudo varios
cientos de unidades de índice de retención, con las variables de la columna.
El índice de retención relaciona el tiempo de retención de un soluto con los tiempos de retenciones de los
alcanos lineales. Del conjunto de alcanos lineales se busca el que tenga el pico cromatográfico inmediatamente
antes y después del compuesto problema (X).
Donde:
Aplicaciones
La GC tiene dos importantes campos de aplicación. Por una parte su capacidad para separar mezclas
orgánicas complejas, compuestos órgano metálicos y sistemas bioquímicos. Su otra aplicación es como método
para determinar cuantitativa y cualitativamente los componentes de la muestra. Para el análisis cualitativo se
suele emplear el tiempo de retención, que es único para cada compuesto dadas unas determinadas condiciones
(mismo gas portador, rampa de temperatura y flujo), o el volumen de retención. En aplicaciones cuantitativas,
integrando las áreas de cada compuesto o midiendo su altura, con los calibrados adecuados, se obtiene la
concentración o cantidad presente de cada analito.