Tema Nº 3

Metabolitos primarios y disolventes

1. Obtención de metabolitos primarios y disolventes

 2. Ácidos orgánicos:
a. tartárico,
b. Cítrico.
Se produce microbiológicamente por fermentación utilizando el hongo Aspergillus
niger. Este hongo excreta grandes cantidades de ácido cítrico cuando el medio en
el fermentador es deficiente en hierro, ya que el hongo superproduce el ácido
cítrico como agente quelante para apoderarse del hierro. El medio de partida para
la obtención del ácido cítrico puede ser muy variado (almidón de papa, hidrolizados
de almidón, jarabe de glucosa procedente de almidón sacarizado, sacarosa, jarabe
de caña de azúcar, melazas de caña de azúcar y melazas de remolacha azucarera).
Si se utiliza almidón, las amilasas formadas por el hongo la hidrolizan a azúcares.
Los azúcares se catabolizan a través de la vía glicolítica y entran en el ciclo del
ácido cítrico, en el que tiene lugar la producción de citrato.
El proceso es aeróbico y se realiza en grandes fermentadores bien aireados. El ácido
cítrico se produce de esta forma como un metabolito típico secundario. Durante la fase
de crecimiento, la sacarosa se descompone en glucosa mas fructosa y, en el momento
que se alcanza la fase estacionaria, quedan grandes cantidades de estas hexosas, que
se convierten en ácido cítrico para contrarrestar la falta del hierro.
El desarrollo de este tipo de fermentación aeróbica industrial tuvo una gran importancia
histórica y esta tecnología se aplicó luego a otras fermentaciones de antibióticos
importantes como la penicilina.
c. fumarico,
d. acético,
El vinagre es el producto resultante de la conversión del alcohol etílico en ácido acético
por la acción de las bacterias del ácido acético que son miembros de los géneros
Acetobacter y Gluconobacter. El vinagre puede producirse a partir de cualquier
sustancia que contenga etanol. La materia prima habitual es el vino, la cerveza o el
zumo alcohólico de manzana.
Las bacterias del ácido acético son aeróbicas pero no oxidan completamente sus
dadores de electrones orgánicos hasta CO2 y agua, sino que lo hacen hasta ácido
acético, son muy tolerantes a los ácidos. El problema principal en la producción del
vinagre consiste en garantizar una aireación suficiente del medio.
Existen tres métodos diferentes para la producción del vinagre: método de Orleans o de
tinaja abierta, método de goteo (vinagre rápido) y método del burbujeo.
La tinaja se denomina generador de vinagre. El líquido alcohólico se hace goteas a
través de virutas de madera y se deja que el aire pase desde el fondo hacia arriba y a
través de las virutas. Las bacterias del ácido acético se desarrollan sobre las virutas de
madera y convierten el alcohol en ácido acético. La solución de ácido acético se acumula
en una cámara colectora y se recicla a través del generador hasta que se alcanza un
contenido en ácido acético de al menos 4%, cantidad mínima para ser considerado
“vinagre”

e. propiónico,
Se da por fermentación propionica. Esta es una fermentación realizada por especies del
género Propionibacterium en la cual los productos principales de la fermentación de la
glucosa son los ácidos propiónico y acético.
Esta es la fermentación mediante la cual se produce el queso suizo, el sabor peculiar
se lo dan los ácidos y los huecos se deben a la gran producción de CO2.
f. fórmico, butírico, láctico,
Se da por fermentación acido mixta. Este es un tipo de fermentación que es usualmente
llevada a cabo por miembros de la familia Enterobacteriaceae, incluyendo Escherichia
coli, especies de Proteus, Salmonella y Shigella. En esta vía se forman ácidos acético,
láctico, succinico y fórmico en diferentes proporciones que varían con el microorganismo
y con las condiciones de cultivo. Los microorganismos que llevan a cabo esta
fermentación dan positiva la prueba del rojo de metilo
g. aminoácidos,
Producción de ácido glutámico
Un factor muy importante para lograr un proceso de producción comercial de un
aminoácido es conseguir la excreción del mismo al medio de cultivo. En general, los
organismos no excretan los metabolitos indispensables como los aminoácidos.
Aumentando la excreción se evitarían concentraciones relativamente altas dentro de la
célula, que podrían ocasionar inhibición por retroalimentación, aún en mutantes
resistentes.
Una forma de obtener un nivel elevado de excreción de un aminoácido es el que se
utiliza en la obtención del ácido glutámico. La producción y excreción del ácido glutámico
depende de la permeabilidad celular. El organismo productor del ácido glutámico,
Corynebacterium glutamicum, requiere la vitamina biotina, factor indispensable en la
biosíntesis de los ácidos grasos. La deficiencia en biotina daña la
membrana celular como resultado de una producción deficiente de fosfolípidos y bajo
estas condiciones se excreta el ácido glutámico intracelular. El medio empleado para la
producción del ácido glutámico contiene en una primera etapa suficiente biotina para
obtener un buen desarrollo del microoganismo y en una segunda etapa la deficiencia de
biotina asegura la excreción de ácido glutámico al medio.
El descubrimiento del papel de la deficiencia en biotina en la producción del ácido
glutámico ha permitido el desarrollo de métodos racionales para la formulación de un
medio para producir este aminoácido.
Once aminoácidos se sintetizan a partir de los intermediarios del ciclo de Krebs y otros.
Las bacterias sin embargo pueden sintetizar el conjunto básico de los 20 aminoacidos,
descritos en la tabla:

h. nucleótidos,
i. 2,3-butendiol,
Se da por fermentación butanodiolica. Este es un tipo de fermentación que es llevada
a cabo por ciertos miembros de la familia Enterobacteriaceae por ejemplo: Klebsiella y
Enterobacter. La glucosa es fermentada con la formación de 2,3 butanodiol y además
se producen pequeñas cantidades de los productos formados en la vía ácido mixta. La
cantidad de ácido producida es insuficiente para dar positiva la prueba del rojo de
metilo. Los productores de butanodiol dan positiva la prueba de Voges Proskauer
j. acetona,
 k. propanol,
l. isopropanol,
m. butanol,
n. Etanol
Es un tipo de fermentación que es realizada por un amplio rango de hongos filamentosos
(mohos) como Aspergillus, Mucor y Fusarium y hongos unicelulares (levaduras) como
Saccharomyces. En esta fermentación el ácido pirúvico proveniente de la glicólisis es
decarboxilado a acetaldehido en una reacción catalizada por la enzima piruvato
decarboxilasa y TPP (Tiamina pirofosfato); el acetaldehido es reducido a etanol por una
alcohol deshidrogenasa dependiente de NAD, resultando en la reoxidación del NADH2
formado durante la glicólisis.
La fermentación alcohólica por especies de Saccharomyces se ha usado para la
producción de cerveza, vino y otras bebidas alcohólicas. El CO2 producido por las
levaduras es utilizado para el levantamiento de la masa del pan
El uso de levadura seca en la producción de bebidas alcohólicas es un proceso
ancestral. La mayor parte de los zumos de fruta sufren una fermentación natural
ocasionada por las levaduras “silvestres” que están presentes en la fruta. A partir de
estas fermentaciones naturales se han seleccionado algunas levaduras para conseguir
una producción más controlada. Las bebidas alcohólicas más importantes son el vino,
producido por la fermentación del zumo de fruta, la cerveza, producido por la
fermentación de cereales malteados, y las bebidas destiladas, producidas por
concentración, mediante destilación, del alcohol procedente de una fermentación.

Los Vinos en general proceden de la uva. En los vinos secos se ha fermentado casi
todos los azúcares del zumo o mosto; en los vinos dulces, se deja parte del azúcar, o
bien se añade azúcar después de la fermentación. En un vino fortificado se le agrega
algún licor después de la fermentación. En un vino espumoso se encuentra presente el
CO2 que surge de una fermentación final que realiza la levadura directamente dentro
de la botella. Existen variedades:
- Bebidas alcohólicas destiladas
- Whisky, destilado de bebidas con malta;
- brandy es el destilado del vino;
- ron, destilado de melazas fermentadas;
- vodka destilado de cereales de papa fermentados.
La fabricación de cerveza pasa por las siguientes etapas:
a, b) Calderas de cobre donde el mosto se mezcla con el lúpulo y luego se lo lleva a
ebullición. Desde la caldera, el líquido se pasa a grandes tanques de fermentación, en
los que la levadura fermenta la glucosa y da lugar a etanol más CO2.
c) En cervezas tipo lager, la cerveza se almacena barias semanas a baja temperatura
en tanques, donde se produce la sedimentación de partículas, incluidas las células de
levadura.
d) La cerveza se filtra y se deposita en tanques de almacenamiento a partir de los
que se envasa en barriles pequeños, en botellas o en latas.
 3. Proceso de producción
a. Características de los microorganismos empleados en la
producción de metabolitos primarios y disolventes
Las características de los microorganismos de este grupo son:
- Tener tolerancia a los solventes
- Tener capacidad biocatalizadora
- Capaces de flocular
- Fermentar azucares rápidamente
- Alta velocidad de crecimiento
- Genéticamente estable
- Libre de contaminantes
- Requerimiento nutricional simple y barato
- Fácil conservación
- Inocuo para personas, animales y plantas
- Susceptible de manipulación genetica

b. Uso de mutantes auxotróficos

Son cepas de microorganismos capaces de proliferar en un medio de cultivo al cual se
ha añadido una sustancia especifica como resultado de una mutación.

4. Descripción y análisis de medios de cultivo y condiciones para la

producción en laboratorio e industrial
a. Condiciones de la produccion en laboratorio e industrial
5. Fundamento bioquímico de las biosíntesis y esquemas de producción
a. Panorama general de reacciones
VIA BIOQUIMICA DE PRODUCCION DE ETANOL
VIA BIOQUIMICA DE PRODUCCION DE ACETONA-BUTANOL
VIA BIOQUIMICA DE PRODUCCION DE LOS DIFERENTES
METABOLITOS PRIMARIOS
VIA BIOQUIMICA DE PRODUCCION DE BUTANOL

6. Comparación de procesos microbianos con procesos químicos de

síntesis y análisis de las ventajas.
Este subtitulo te permitirá ganar puntaje, si logras determinar una ventaja o
desventaja.