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La acinetobacter es considerado como el componente ideal de los consorcios de

degradación de los hidrocarburos debido a que descompone un gran número de alcanos


además de producir un bioemulsificante que facilita el acceso a los hidrocarburos para las
demás cepas del consorcio. Observaciones al microscopio han mostrado que
Acinetobacter construye capas membranosas amorfas sobre los sustratos hidrófobos para
poder establecer un contacto con estos últimos. Después del contacto, sucede un
reconocimiento seguido por una oxidación y transformación del hidrocarburo para
prepararlo para las rutas metabólicas de la célula. Es así que los microorganismos
productores de emulsificantes lo utilizan para controlar las propiedades de su superficie
con el fin de anclarse o liberarse de un sustrato determinado. La carencia de nutrientes
estimula muchas veces a las bacterias para que liberen emulsificantes y aumenten las
probabilidades de encontrar un sustrato adecuado para las necesidades
de crecimiento (Braibant, 2004).

El Marine Biotechnology Institut de Japón obtuvo pruebas sobre la actividad


complementaria entre Acinetobacter sp. y Pseudomonas putida para la degradación de
las fracciones de alcanos y aromáticos del Arabian Light Crude Oil (ALCO). El
Acinetobacter sp. consume los alcanos (C8-C20) y los alquilbencenos de largas cadenas
laterales y libera los productos de la ß-oxidación en el medio; estos últimos serven de co-
sustratos para P. putida para que pueda consumir, a su vez, el benceno y los
alquilbencenos de cadenas laterales cortas del ALCO (Komukai-Nakamura et al., 1996).

 Condiciones de crecimiento:
- Temperatura de incubación: 30°C
- Agitación: 200 rpm constante
- pH: Neutro

Todas las cepas se cultivarán inicialmente en 100 ml de medio líquido Luria Bertani (LB)
líquido en erlenmeyers de 250 ml con agitación durante una noche. El día siguiente, la
pureza del cultivo se verificará al microscopio y el cultivo puro se repartirá en pequeños
tubos con glicerol al 40% v/v para conservarlo a –80°C. Luego las cinco cepas se
cultivarán en medio LB líquido con el fin de realizar un seguimiento de la densidad óptica
a 660 nm, del pH y de la viabilidad (UFC/ml) de las cepas en un transcurso de 24 horas
para construir una curva de crecimiento.

 Medio de crecimiento: Las cepas se cultivaron en medio Luria Bertani líquido y las
pruebas con hidrocarburos se realizaron sobre medio mineral líquido.

 Tipo de hidrocarburo: Benceno, ciclohexano, decano, diésel, hexadecano, octano,


tolueno, xileno. La concentración de los hidrocarburos es de 0,5% v/v con el fin de
probar la biodegradación realizada.
 Reactor: Reactor STR
- Medio: Medio mineral 2 L
- Temperatura: 30°C
- Agitación: 500 ppm
- pH: 7
- Aireación: Inyección continua de aire a un débito de 1 l/min.

Se preparan dos litros de medio de cultivo MM2 sin hidrocarburo en un reactor de tipo
BIOSTAT®B. Después se esterilizará a 121°C durante 20 minutos, las condiciones de
cultivo serán 30°C, 500 rpm, pH 7 y una inyección continua de aire a un débito de 1 l/min.
Después del ajuste, se agregarán 10 ml del hidrocarburo y se inoculará, se realizará un
registro continuo de los parámetros de fermentación (temperatura, pH, consumo de ácido
y de base, pO2 y velocidad de agitación), los cuales se realizarán con un software Micro
Fermentation Control System (MFCS) de B. Braun con el fin de obtener un gráfico sobre
la evolución de las condiciones del cultivo.

 Tipo de surfactante:

 Como se extraen los surfactantes: