Guia de Laboratorio de Fisicoquimica 2018B

GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO
FISICOQUÍMICA
Ing. Florinella Muñoz, PhD

Ing. Christian Sandoval, MSc
Guía de Prácticas de Laboratorio - Fisicoquímica
Escuela Politécnica Nacional

Facultad de Ingeniería Química y Agroindustria
Departamento de Ciencias Nucleares
Semestre 2018 – B
Actualizado en septiembre de 2018
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1. ÍNDICE
1. ÍNDICE 3
2. INTRODUCCIÓN 4
3. SEGURIDAD EN EL LABORATORIO 4
3.1. ACERCA DEL ESTUDIANTE 4

3.2. ACERCA DE LOS REACTIVOS QUÍMICOS 5
3.3. ¿CÓMO REACCIONAR EN CASO DE ACCIDENTES? 7
4. INSTRUCCIONES GENERALES 9
5. EVALUACIÓN 9
6. BIBLIOGRAFÍA BÁSICA 9
7. PRÁCTICAS DE LABORATORIO 10
7.1. P1. DESCOMPOSICIÓN CATALÍTICA DEL PERÓXIDO DE HIDRÓGENO 10

7.2. P2. CINÉTICA DE LA DECOLORACIÓN DE LA FENOLFTALEÍNA 12
7.3. P3. CINÉTICA ENZIMÁTICA: DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE LA CONSTANTE DE
MICHAELIS-MENTEN 13
7.4. P4. MONTAJE Y ESTUDIO DE DIVERSAS CELDAS ELECTROQUÍMICAS 15
7.5. P5. ISOTERMAS DE ADSORCIÓN 17
7.6. P6. TENSIÓN SUPERFICIAL 18
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2. INTRODUCCIÓN
Ingeniería Química es una disciplina que traslada los resultados obtenidos en el laboratorio al
diseño de procesos industriales que permiten transformar las materias primas en productos
elaborados, los cuales pretenden mejorar la calidad de vida del ser humano. Es por ello una
disciplina mundialmente reconocida desde hace muchos años.
Conocer acerca del trabajo en el laboratorio es por tanto importante en la formación del
ingeniero, pues ello le permite acercarse a los fenómenos físicos y químicos de manera
controlada antes de ponerlos en práctica a nivel industrial. Además, cabe recalcar que muchos
de los datos que sirven como sustento para un diseño son obtenidos de experiencias en
laboratorio.
Este manual ha sido diseñado con el propósito de poner en práctica la teoría adquirida en esta
asignatura. Además, de que el estudiante adquiera la experticia necesaria para desenvolverse en
un laboratorio de manera segura y con el conocimiento necesario para poder reaccionar ante un
incidente con base en las fichas de seguridad de cada uno de los reactivos utilizados. El
estudiante trabajará con una gran variedad de reactivos químicos, aprenderá acerca de sus
características, manejo, y disposición final.
Adicionalmente, las prácticas de laboratorio pretenden desarrollar el espíritu investigativo y

crítico del estudiante.
3. SEGURIDAD EN EL LABORATORIO
La seguridad es muy importante al momento de trabajar en un laboratorio, como ya se mencionó
el estudiante estará en constante contacto con reactivos químicos los cuales deben ser
manejados con base en sus fichas de seguridad para evitar cualquier incidente. A lo largo de esta
sección se mencionarán algunas reglas a seguir durante el trabajo en las prácticas
experimentales.
3.1. Acerca del Estudiante

• Es obligatorio el uso de equipos de protección personal, entre ellos: mandil de manga larga,
guantes de nitrilo, mascarilla para vapores orgánicos y gafas de seguridad. No se permite el
uso de zapatos abiertos, licras y ropa corta o suelta que pueda engancharse durante un
experimento o prender sobre una llama.
• NO utilizar lentes de contacto, ni siquiera bajo las gafas de seguridad. Los irritantes
químicos pueden introducirse bajo los lentes y causar daños irreparables a los ojos.
• En caso de tener cabello largo, mantenerlo alejado de la llama y recogerlo.
• Las mochilas, ropa, etc. deberán ser colocados en los estantes para dichos objetos.
• El trabajo en el laboratorio debe ser realizado con seriedad, las bromas están estrictamente
prohibidas. Además, el estudiante no deberá realizar ninguna actividad diferente a la
práctica.
• La presencia de personas ajenas a la práctica está estrictamente prohibida.
• No se permite fumar, comer o beber en el laboratorio.
• El uso de dispositivos electrónicos (salvo autorización del profesor de la materia) están
prohibidos.
• Siempre al terminar la práctica lavarse las manos con abundante agua y jabón.
• Tomar la cantidad de reactivo que vaya a utilizar. Los reactivos son costosos, y no
conviene gastarlos innecesariamente.
• Después de utilizar cualquier equipo (balanza, pH-metro, agitador, etc.) se debe asegurar
que estén limpios y apagados.
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• Durante la realización de las prácticas, el puesto de trabajo debe mantenerse LIMPIO Y

SECO.
3.2. Acerca de los Reactivos Químicos

De acuerdo con su uso los reactivos químicos se pueden clasificar de diversas maneras, una de
ellas es con base en la pureza de estos. Dentro de esta clasificación se puede mencionar:
Grado técnico: Los reactivos de grado técnico se emplean generalmente para análisis
cualitativo ya que su pureza no está comprobada, también se los conoce como grado comercial,
pues son el tipo de reactivo que se utiliza en un proceso industrial.
Grado USP (United States Pharmacopeia): Estas substancias tampoco son aconsejables para
su uso en procesos analíticos, sin embargo, cumplen las especificaciones que exigen las normas
de los Estados Unidos en cuanto a contenidos máximos de contaminantes no peligrosos.
Grado Reactivo o Analítico (ACS): Estos reactivos cumplen las especificaciones del Reagent
Chemical Committee of the American Chemical Society (ACS), se pueden emplear en el trabajo
analítico generalmente se presentan con una etiqueta donde aparecen los porcentajes máximos
de impureza permitidos por dicha entidad internacional.
Grado estándar primario: Son reactivos de alta pureza y los resultados de los análisis
realizados sobre ellos aparecen en las etiquetas. Se emplean como patrones primarios en la
preparación de soluciones estándares.
Otros reactivos químicos: Son substancias que se preparan para su uso en aplicaciones
específicas, como solventes para espectroscopia y para cromatografía líquida de alta eficiencia.
En las etiquetas llevan la información pertinente.
Es importante que el estudiante conozca esta clasificación puesto que de acuerdo con la práctica
a realizar se requerirá que los reactivos tengan un grado de pureza determinado.
Los reactivos químicos por otra parte también pueden clasificarse por su peligrosidad, esta
clasificación es muy importante para conocer cómo manejar una substancia y cómo reaccionar
en caso de algún incidente. A continuación, se presentan los pictogramas de seguridad más
usados asociados al tipo de reactivo químico.
Explosivos: Son substancias que pueden explotar al estar en contacto con

una llama o fuente de ignición. Ej.: trinitro tolueno (TNT), nitroglicerina.
Corrosivos: Sustancias que en contacto con los tejidos vivos puedan ejercer
sobre ellos una acción destructiva. Ej: Ácido Sulfúrico.
Comburentes: Son substancias y preparados que tienen la capacidad de

incendiar a otros (originan una reacción fuertemente exotérmica). Facilitan la
combustión y hace difícil apagar el fuego. Ej: peróxidos, permanganatos.
Inflamables: Son compuestos que se pueden encender fácilmente incluso sin

aporte de energía, tienen generalmente bajos puntos de ignición. Ej: gasolina,
tolueno.
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Gas: sustancias gaseosas o líquidas que se envasan a presiones superiores de

200 kPa y que pueden explotar con el calor. Ej. Ambientadores caseros
Irritación cutánea: Sustancias y preparados que al estar en contacto con la

piel pueden penetrar a través de la misma y causar daños graves, agudos o
crónicos en la salud. Ej: Amoniaco.
Tóxicos: Sustancias que por inhalación, ingestión o penetración cutánea

pueden ocasionar efectos para la salud graves, agudos o crónicos, e incluso la
muerte. Ej: monóxido de carbono, cianuro
Peligroso por aspiración: Sustancias que por inhalación, ingestión o

penetración cutánea pueden ocasionar efectos para la salud graves o agudos.
Ej: monóxido de carbono, cianuro
Peligroso para el medio ambiente: Sustancias o preparados que pueden

provocar daños al ecosistema a corto o mediano plazo.
De acuerdo con esta información se presentan a continuación las normas para trabajar con
reactivos en el laboratorio.
• Está terminantemente prohibido sacar reactivos del laboratorio.

• Antes de usar cualquier reactivo químico se debe chequear sus propiedades (flamabilidad,
toxicidad, etc.) en manuales, libros, fichas de seguridad etc. De manera general, todo
reactivo (sólido o líquido) debe ser manejado con cuidado.
• Los productos químicos NUNCA se tocan directamente con las manos
• Los líquidos nunca se pipetean con la boca, para ello se proporcionará al estudiante de
propipetas en caso de que se lo requiera.
• Siempre manipular el equipo caliente con guantes de asbesto o pinzas para evitar
quemaduras.
• Usar frecuentemente la campana de extracción (encender los extractores) cuando se realice
mezclas y actividades específicas.
• No colocar solventes volátiles en vasos, ni por cortos períodos de tiempo.
• Los líquidos que se van a utilizar deben ponerse primero en un vaso de precipitación, para
luego medirlos en la probeta y luego ponerlos en el recipiente de reacción. Nunca poner
directo del frasco al recipiente de medida ni introducir pipetas en los mismos se
pueden contaminar los reactivos que tienen un alto costo comercial o producir
reacciones indeseadas.
• Nunca se debe desatender un experimento mientras se calienta o reacciona rápidamente.
AVISE inmediatamente al profesor cualquier ACCIDENTE, por mínimo que sea.
• Cuando un sistema esté en etapa de mezclado, medición de volúmenes, reacción o
calentamiento no se lo debe mirar a corta distancia.
• Lubricar siempre los tubos de vidrio, termómetros y embudos antes de introducirlos en los
tapones o corchos. Recuerde que el mal uso del equipo y su montaje es el primer paso para
un accidente.
• Añadir siempre los ácidos al agua, nunca lo contrario.
• Una vez utilizados tapar inmediatamente los frascos de los reactivos.
• Los desechos deben ser dispuestos tal como el profesor lo indique, generalmente, los
sólidos se desechan en el basurero, los líquidos en el lavabo para lo cual se deja correr una
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gran cantidad de agua. Los líquidos insolubles, y sólidos o líquidos tóxicos o peligrosos se
guardan en recipientes adecuados.
• NO apuntar a nadie, ni a sí mismo, al abrir los frascos de reactivos y los embudos de
separación.
• Tener cuidado al trabajar con sustancias inflamables, hacerlo en lugares ventilados y lejos
de fuentes de calor (mecheros, reverberos, muflas, resistencias, serpentines eléctricos, etc.)
Nunca calentarlas aún en cantidades pequeñas con o cerca de una llama; a menos que el
solvente esté en un frasco bajo reflujo o unido a un sistema de destilación. No verter
solventes inflamables de un recipiente a otro cuando se halle cerca una llama.
• Nunca calentar sistemas cerrados.
• Nunca pesar los sólidos (especialmente NaOH, es altamente corrosivo) directamente en el
plato de la balanza; usar siempre un recipiente de vidrio o papel.
• NO REETIQUETAR ninguna botella o recipiente.
3.3. ¿Cómo reaccionar en caso de accidentes?

Para evitar un incendio: Seguir paso a paso las indicaciones dadas por él o la ayudante,
cuando exista advertencia de productos altamente inflamables seguir las instrucciones dadas
respecto a cuándo encender mecheros, cuando apagarlos y recordar a los otros tales
indicaciones, verificar que las mangueras estén en buen estado para evitar fugas, alejar los
reactivos de la llama. Note siempre la posición del extintor, ducha y botiquín de primeros
auxilios
Fuego en el laboratorio: Cerrar la entrada de gas inmediatamente, evacuar el laboratorio por la

salida principal o por la salida de emergencia si no es posible por la principal. Avisar a todos los
compañeros de trabajo sin que se extienda el pánico y conservando siempre la calma.
Fuego pequeño: Cerrar la entrada de gas inmediatamente, si el fuego es pequeño y localizado,

apagarlo utilizando un extintor adecuado, arena o cubriendo el fuego con un recipiente de
tamaño adecuado que lo ahogue. Retirar los productos químicos inflamables que estén cerca del
fuego. No utilizar nunca agua para extinguir un fuego provocado por la inflamación de un
disolvente.
Fuego grande: Cerrar la entrada de gas inmediatamente, aislar el fuego utilizar los extintores
adecuados Si el fuego no se puede controlar rápidamente, avisar a los bomberos y evacuar el
edificio.
Fuego en el cuerpo: Si se incendia la ropa estirarse en el suelo y rodar sobre sí mismo para
apagar las llamas. No correr ni intentar llegar a la ducha de seguridad si no está muy cerca. Es
responsabilidad ayudar a alguien que se esté quemado Cubrirlo con una manta anti fuego,
conducirlo hasta la ducha de seguridad, si está cerca o hacerle rodar por el suelo. No utilizar
nunca un extintor sobre una persona Una vez apagado el fuego, mantener a la persona tendida y
proporcionarle asistencia médica.
Quemaduras: Las pequeñas quemaduras producidas por material caliente, baños, placas o mantas
calefactores, etc, se tratarán lavado la zona afectada con agua fría durante 10 - 15 minutos. Las
quemaduras más graves requieren atención médica inmediata. No utilizar cremas y pomadas grasas
en las quemaduras graves.
Cortes: Los cortes producidos por la rotura de material de cristal son un riesgo común en el
laboratorio. Estos cortes se tienen que lavar bien, con abundante agua, corriente, durante 10
minutos como mínimo. Si son pequeños y dejan de sangrar en poco tiempo, lavarlos con agua y
jabón y taparlos con una venda u oposito adecuado. Si son grandes y no paran de sangrar,
requiere asistencia médica inmediata.
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Derrame de productos químicos sobre la piel: Los productos químicos que se hayan vertido
sobre la piel han de ser lavados inmediatamente con agua corriente abundante, como mínimo
durante 15 minutos. Las duchas de seguridad instaladas en los laboratorios serán utilizadas en
aquellos casos en que la zona afectada del cuerpo sea grande y no sea suficiente el lavado en un
fregadero. Es necesario sacar toda la ropa contaminada a la persona afectada lo antes posible
mientras esté bajo la ducha. Recuerda que la rapidez en el lavado es muy importante para
reducir la gravedad y la extensión de la herida. Proporcionar asistencia médica a la persona
afectada.
Corrosiones en la piel:
• Por ácidos: Cortar lo más rápidamente posible la ropa. Lavar con agua corriente
abundante la zona afectada. Neutralizar la acidez con bicarbonato sódico durante 15-20
minutos. Sacar el exceso de pasta formada, secar y cubrir la parte afectada con
linimento óleo – calcáreo o parecido.
• Por álcalis: Lavar la zona afectada con agua corriente abundante y aclararla con una
disolución saturada de ácido bórico o con una disolución de ácido acético al 15%. Secar
y cubrir la zona afectada con una pomada de ácido tánico.
Corrosiones en los ojos: En este caso el tiempo es esencial (menos de 10 segundos) Cuanto
antes se lave el ojo, menos grave será el daño producido. Lavar los dos ojos con agua corriente
abundante durante 15 minutos como mínimo en una ducha de ojos y, si no hay, con un frasco
para lavar los ojos. Es necesario mantener los ojos abiertos con la ayuda de los dedos para
facilitar el lavado debajo de los párpados. Es necesario recibir asistencia médica, por pequeña
que parezca la lesión.
Ingestión de productos químicos: Antes de cualquier actuación concreta pedir asistencia

médica. Si el paciente está inconsciente, ponerlo en posición inclinada, con la cabeza de lado,
con la lengua hacia fuera. Si está consciente, mantenerlo apoyado. Preparar para practicarle la
respiración boca a boca. No proporcionar bebidas alcohólicas precipitadamente sin conocer la
identidad del producto ingerido. El alcohol en la mayoría de los casos aumenta la absorción de
los productos tóxicos. No provocar el vómito si el producto ingerido es corrosivo.
Inhalación de productos químicos: Conducir inmediatamente a la persona afectada a un sitio

con aire fresco. Requiere asistencia médica lo antes posible. Al primer síntoma de dificultad
respiratoria, iniciar la respiración artificial boca a boca. El oxígeno se ha de administrar
únicamente por personal entrenado. Continuar la respiración artificial hasta que el médico lo
aconseje. Tratar de identificar el vapor tóxico. Si se trata de un gas, utilizar el tipo adecuado de
máscara para gases durante el tiempo que dure el rescate del accidentado. Si la máscara
disponible no es la adecuada, será necesario mantener la respiración el máximo posible mientras
se esté en contacto con los vapores tóxicos.
Derrames de reactivos químicos: Si el derrame es pequeño limpiar inmediatamente cualquier

sustancia derramada (excepto mercurio u otra sustancia peligrosa, las cuales deben ser
reportadas al encargado). En caso de derrames ácidos, dependiendo de las dimensiones del
derrame, pueden usarse toallas de papel y espolvorearse bicarbonato de sodio. Lavar con
abundante agua y secar el área. Si los derrames son alcalinos entonces conviene espolvorear
bicarbonato de sodio, o lavar con ácido acético diluido. Lavar el área con abundante agua y
secar.
IMPORTANTE: NO bloquear los pasillos, ni las salidas para que las personas puedan
circular fácilmente por el laboratorio y salir en caso de emergencia. El incumplimiento de
cualquiera de las reglas antes mencionadas involucra la expulsión del laboratorio y la no
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realización de la práctica. Si tiene alguna duda pregunte, no ponga en riesgo su vida ni la

de los demás.
4. INSTRUCCIONES GENERALES
• Las prácticas del Laboratorio de Análisis Instrumental son semestrales y tienen como co-
requisito la materia de Análisis Instrumental.
• Para aprobar el laboratorio, cada estudiante deberá realizar TODAS las prácticas, presentar
un informe por cada una de ellas. Para recuperar una práctica no realizada se deberá
presentar una solicitud con la justificación correspondiente validada por la oficina de
Bienestar Estudiantil en el plazo máximo de 48 horas.
• Durante la práctica se evaluará el fundamento teórico y el procedimiento como parte de la
participación, cabe indicar que el coloquio puede ser individual o grupal.
• Las prácticas de laboratorio comienzan a la hora indicada. El coloquio se tomará 5 minutos
después. En caso de retraso no se podrá rendir el coloquio.
• La práctica solo se podrá realizar en presencia del profesor y/o del ayudante.
• Las prácticas se realizarán en grupos a los cuales se les entregará el material correspondiente
el mismo día de su realización, TODOS los miembros del grupo serán responsables del
material, cualquier pérdida, extravío o deterioro del mismo deberán reponerlo con uno de las
MISMAS CARACTERÍSTICAS.
• Los informes deberán ser presentados según el formato establecido. La bibliografía se
redactará según el formato de tesis de la FIQA (APA 6ta edición).
• La discusión debe tratar sobre los resultados, analizar sus posibles causas y compararlos con
otras investigaciones desarrolladas acerca del tema (bibliografía).
5. EVALUACIÓN
Cada práctica se calificará sobre 10 puntos en los cuales se evaluará la participación, el informe
y el coloquio como se detalla en la Tabla 1.
Elemento de Descripción del Elemento de Evaluación % Nota % Nota

Evaluación Bim I Bim II
Informes de
De acuerdo con las instrucciones generales 70 70
laboratorio
Se evalúa los conocimientos referentes a cada
Coloquios 30 30
práctica.
TOTAL 100 100
6. BIBLIOGRAFÍA BÁSICA
• ATKINS, P. y DE PAULO, J. 2006. Physical Chemistry, Octava edición, W. H. Freeman

and Company: USA-New York.
• MARON, S. y PRUTTON, C. 2003. Fundamentos de Fisicoquímica. Tomo I, Vigésimo
Quinta Reimpresión, Editorial Limusa: México.
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7. PRÁCTICAS DE LABORATORIO
7.1. P1. Descomposición Catalítica del Peróxido de Hidrógeno
Preguntas Antes de la Práctica
• Explique qué es la velocidad de reacción y describa los factores que influyen en ella.
• ¿Qué es el tiempo de vida media y cómo se calcula en para una reacción de primer
orden?
• ¿Cuál es el efecto que produce un catalizador en una reacción?
• Dé ejemplos (3) de reacciones de primer orden. Explíquelos brevemente.
Objetivo
Determinar la influencia que ejercen distintos tipos de catalizadores sobre la constante cinética
de la reacción de descomposición del peróxido de hidrógeno.
Introducción
El peróxido de hidrógeno se descompone de acuerdo con la siguiente reacción:
2H2O2 → 2H2O + O2
La velocidad de reacción es acelerada por varios catalizadores entre los cuales se puede
mencionar: dióxido de manganeso, cloruro férrico, o una mezcla de cloruro férrico y cloruro
cúprico, éste último compuesto actúa como promotor catalítico.
El curso de la reacción puede seguirse mediante una titulación redox de alícuotas de la mezcla
con una solución estándar de permanganato de potasio a varios intervalos de tiempo.
Equipos y reactivos
Materiales y Equipos * Reactivos

5 Erlenmeyer Agua destilada
2 buretas de 25 [mL] Peróxido de hidrógeno
1 pipeta de 10mL Cloruro Férrico
1 pera de succión Ácido clorhídrico
3 vasos de precipitación Cloruro Cúprico
1 cronómetro Ácido sulfúrico (concentrado)
Permanganato de potasio 0.02M
* En este apartado se detalla la cantidad de material de vidrio que se requiere lo cual no debe constar en el informe escrito
Está información es únicamente para ayuda del ayudante de la materia
Procedimiento Experimental
1. Preparar la solución de peróxido de hidrógeno al 0,3%, tomar 3 alícuotas de 75mL de

esta solución y colocar una en cada Erlenmeyer.
2. En el primer Erlenmeyer agregar 15mL de agua destilada y agitar (en este punto
cronometrar el tiempo). Titular la solución a los 30, 45, 60 y 105 minutos para lo cual
tomar 5 ml de esta, colocarla en un matraz Erlenmeyer que contenga 25 mL de agua y 1
mL de ácido sulfúrico y titular con permanganato de potasio (la titulación debe ser
rápida, el punto de viraje se obtendrá cuando la solución tenga un color rosado tenue).
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3. En el segundo Erlenmeyer agregar 10 mL de catalizador de cloruro férrico, 5 ml de

agua destilada y agitar (Tiempo 0). Titular la solución a los 15, 30, 45, 60, 90 y 105
minutos de acuerdo con el procedimiento explicado en el literal 2.
4. En el tercer Erlenmeyer agregar 10 mL de catalizador de cloruro férrico, 5 ml de
catalizador de cloruro cúprico y agitar (Tiempo 0). Titular la solución a los 15, 30, 45,
60, 90 y 105 minutos de acuerdo con el procedimiento explicado en el literal 2.
Cálculos y análisis de resultados
1. Gráfica de concentración de peróxido de hidrógeno vs tiempo.

2. La constante de velocidad para cada caso.
3. Comparar el efecto de los catalizadores sobre la reacción y discutir los resultados de las
constantes de velocidad obtenidas en cada caso.
Nota: no es necesario colocar todas las gráficas en el cuerpo del informe, únicamente se colocan
las gráficas que aportan a la discusión, el resto se las puede colocar en la sección de Anexos.
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7.2. P2. Cinética de la Decoloración de la Fenolftaleína
• ¿Qué es la fenolftaleína? ¿cuál es su estructura y cómo cambia esta con el pH?

• ¿Qué es una reacción de pseudo primer orden? ¿Qué condiciones deben existir para que
una reacción sea considerada de pseudo primer orden? ¿cómo se calcula la constante de
segundo orden bajo estas condiciones?
• ¿Qué es la fuerza iónica? ¿cómo se calcula? ¿cómo afecta a la velocidad de reacción?
Objetivo
Determinar la influencia de la fuerza iónica sobre la cinética de decoloración de la fenolftaleína

en medio básico y calcular los parámetros cinéticos de la misma.
Equipos y reactivos

Celdas de cuarzo Solución 0,3 M de NaCI
Espectrofotómetro UV-VIS Solución 0,3 M de NaOH
Cuentagotas Dilución alcohólica de fenolftaleína (l g/L)
4 vasos de precipitación
1. Para la práctica estarán preparadas soluciones de hidróxido de sodio 0.3 M y cloruro de

sodio 0.3 M a partir de las cuales se prepararán 5 soluciones de la siguiente manera:
Solución 1: 30 ml de solución 0,3 M de NaOH

Solución 2: 20 ml de solución 0,3 M de NaOH + 10 ml de solución 0,3 M de NaCl
2. Colocar en la celda la primera solución, con la cual se encerará el espectrofotómetro

HACH a la longitud de onda de 550 nm.
3. Agregar aproximadamente una o dos gotas de la solución de fenolftaleína y leer la
absorbancia en el espectrofotómetro hasta que la misma tenga un valor máximo de 1,5 e
iniciar el cronómetro.
4. Tomar datos de absorbancia cada 30 segundos durante los primeros 5 minutos y luego
cada minuto hasta los 10 minutos, finalmente tomar datos a los 15 y 20 minutos.
1. Calcule la fuerza iónica de cada uno de los medios en los que se coloca la fenolftaleína.
2. Hallar la constante de la reacción de pseudo primer orden para cada una de las 4
concentraciones de sosa (Realizar el tratamiento de datos correspondiente y las gráficas
necesarias).
3. Hallar la constante de la reacción de segundo orden.
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7.3. P3. Cinética Enzimática: Determinación Espectrofotométrica de la

Constante de Michaelis-Menten
• Explique el modelo cinético de Michaelis y Menten y deduzca la fórmula para el cálculo

de su constante y de la velocidad de reacción.
• Realice representaciones gráficas del modelo de Michaelis y Menten e indique los
parámetros que se pueden observar en estas.
• Indique la reacción de proteólisis de BAPNA catalizada por la tripsina. Con base en
esto, ¿por qué es posible seguir la cinética de esta reacción por un método
espectrofotométrico midiendo absorbancia a una longitud de onda igual a 400nm?
• ¿Qué es la actividad proteolítica de una enzima?
• ¿Cuál es la relación entre la actividad proteolítica de la enzima y la velocidad de
reacción?
Objetivo
Determinar la constante de Michaelis-Menten y la velocidad máxima inicial de la reacción de

proteólisis de un sustrato específico.
Materiales, equipos y reactivos

Celda de volumen reducido Soluciones de BApNA en dimetilformamida
de cuarzo (2, 4, 6, 8, y 10 [mg/mL])
Espectrofotómetro UV-VIS. Solución de una enzima.
Micropipeta Solución tampón (fosfato de sodio 50 mM,
pH=7,5).
1. Colocar 3,15 mL de solución tampón de fosfato de sodio 50 mM y 0,05 mL de la

solución de 2 mg/mL de sustrato (BApNA) en la celda del espectrofotómetro y encerar
el equipo. Tomar datos de densidad óptica cada 15 segundos durante 3 minutos a la
longitud de onda de 400 nm, con lo cual se determina si existe actividad óptica del
sustrato.
2. Colocar en la celda del espectrofotómetro 3,05 mL de solución tampón de fosfato de
sodio, 0.05 mL de la solución de 2 mg/mL de sustrato (BApNA) y 0,1 mL de la
solución de tripsina 5 mg/mL. Tomar datos de densidad óptica cada 15 segundos
durante 3 minutos a la longitud de onda de 400 nm, con lo cual se determina la actividad
de la enzima.
3. Repetir el proceso para todas las diluciones de BApNA.
1. Graficar la densidad óptica vs el tiempo para cada concentración de sustrato solo y con
acción enzimática.
2. Determinar la diferencia de la densidad óptica de la mezcla con acción enzimática
∆𝐷𝑂400 para cada concentración de sustrato, lo cual se calcula mediante la resta de la
pendiente de la gráfica densidad óptica vs el tiempo con acción enzimática menos la
pendiente de la gráfica solo con sustrato.
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3. Hallar la actividad proteolítica de la enzima para cada concentración de sustrato

mediante la siguiente fórmula:
∆𝐷𝑂400 1000 ∙ 𝑉𝐶
𝐴𝐵 = ∙
∆𝑡 𝜀 ∙ 𝐿 ∙ 𝑉𝑒
Donde:
• 𝐴𝐵 es la actividad proteolítica con BAPNA en U/mL. U se define para el experimento

como μmol de p-Nitroanilina producidas por minuto a temperatura ambiente.
• ∆𝐷𝑂400 es la diferencia de la DO de la mezcla de reacción con el extracto enzimático
en un tiempo determinado.
• 1000 es el factor de conversión de M a μmol/mL
• ∆𝑡 es el tiempo en el que se mide el avance de la reacción (para el valor de ∆𝐷𝑂400)
• 𝑉𝐶 es el volumen de la mezcla en μL
• 𝑉𝑒 es el volumen de la solución de enzima colocada en la celda en μL
• 𝜀 es el coeficiente de extinción de la p-Nitroanilina a 400nm (8800M-1cm-1)
• L es la longitud de la celda [cm]
4. Hallar la constante de Michaelis-Menten y la velocidad máxima a partir de los datos de

actividad proteolítica y concentración de sustrato. Realizar las gráficas y cálculos
correspondientes.
Nota: No es necesario colocar todas las gráficas en el cuerpo del informe, únicamente se
colocan las gráficas que aportan a la discusión, el resto se las puede colocar en la sección de
Anexos.
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7.4. P4. Montaje y Estudio de Diversas Celdas Electroquímicas

• ¿Qué es electroquímica?
• ¿Cuál es el significado de potencial de celda?
• Deduzca la ecuación:
𝑅𝑇
𝐸 = 𝐸 0 − ( ) ∙ ln𝑄
𝑛𝐹
• ¿Por qué los electrones fluyen en una celda galvánica?
• ¿Por qué se necesita un puente salino para la celda electroquímica?
• ¿Qué propiedad física describe la constante Faraday?
• ¿Por qué fluyen los electrones en una celda de concentración?
• ¿Qué usos se le da a la electroquímica?
Objetivo
Determinar experimentalmente los potenciales de celda de distintas celdas galvánicas y de

concentración y comparar estos valores con los teóricos.
Equipos y reactivos

Matraces de 100mL Sulfato de cobre, CuSO4
Vasos de precipitación de 100mL Sulfato de zinc, ZnSO4
Electrodos de grafito, zinc y cobre. Yodo, I2
Multímetro con pinzas de lagarto Yoduro de potasio, KI
Papel filtro Cloruro férrico, FeCl3
Sulfato ferroso, FeSO4
Cloruro de potasio, KCl
1. Preparar las siguientes soluciones:
• 100 mL de CuSO4, 0,1 M

• 100 mL de ZnSO4, 0,1 M
• 100 mL de KI 0,1 M; I2, 0,02 M
• 100 mL de FeCl3, 0,02 M
• 100 mL de FeSO4, 0,1 M
• 50 mL de KCl, 0,1 M
Para la preparación de la solución de KI e I2, primero se prepara una solución 0,1M de KI,
luego se disuelve el yodo en esta solución (el KI aumenta la solubilidad del I2 en el agua).
La solución de FeCl3 se debe preparar disolviendo el nitrato férrico en un poco de agua,

luego se debe agregar entre 15 y 20 mL de ácido clorhídrico concentrado, y finalmente
aforar con agua.
2. Preparar las siguientes semi-celdas en vasos de precipitación de 100 mL.
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Semicelda Cu2+/Cu
Colocar una barra de Cu limpio (previamente lijado) e introducirlo en 25 mL de solución

de CuSO4 0,1 M.
Semicelda Zn2+/Zn
Colocar una barra de Zn limpio (previamente lijado) e introducirlo en 25 mL de solución

de ZnSO4 0,1 M.
Semicelda I2/2I-
Colocar 25 mL de la solución de KI 0,1 M e I2, 0,02 M e introducir un electrodo limpio de

grafito.
Semicelda Fe3+/Fe2+
Colocar una mezcla de 10 mL de solución de Fe(NO3)3 0,1 M y 10 mL de solución de

FeSO4 0,1 M e introducir un electrodo limpio de grafito.
3. Montar las celdas a través de la unión de un par de semiceldas por un puente salino. El
puente salino se puede preparar con un tubo acodado en U con una solución de KCl e
introduciendo cada extremo en una de las semiceldas o con un papel filtro remojado con
la solución de KCl. Una vez hecho esto medir la diferencia de potencial entre los dos
electrodos con el uso de un voltímetro.
Se montarán las siguientes celdas, midiendo su diferencia de potencial, con el voltímetro, y

se anota el resultado
Semicelda Zn2+/Zn con semicelda Cu2+/Cu

Semicelda I2/2I- con semicelda Cu2+/Cu
Semicelda Zn2+/Zn con semicelda I2/2I-
Semicelda I2/2I- con semicelda Fe3+/Fe2+
Semicelda Fe3+/Fe2+ con semicelda Cu2+/Cu
Semicelda Zn2+/Zn con semicelda Fe3+/Fe2+
Cálculos
• Incluir como datos teóricos en el informe los potenciales de las semiceldas con las que
se trabajó.
• Reportar los voltajes obtenidos y calcular el E teórico y experimental para cada celda y
calcular el error.
16
7.5. P5. Isotermas de Adsorción

• ¿Qué usos industriales se le da a la adsorción y cuál es la importancia de la adsorción en

el tratamiento de efluentes contaminados con colorantes?
• ¿Cuáles son los factores que afectan a la adsorción?
• Explique brevemente las Isotermas de Freundlich y la de Langmuir, anexar sus gráficas
características y las consideraciones de cada una, e indicar las diferencias y semejanzas.
• ¿Cuáles son las características de los colorantes azoicos? ¿Qué efectos causan al medio
ambiente en caso de descarga?
• ¿Qué es el punto de carga cero de un catalizador? Explique su relación con la adsorción
Objetivo
Determinar la cantidad de masa adsorbida de colorante por unidad de masa de dióxido de titanio
(TiO2) y Comprobar las isotermas de adsorción de Freundlich y Langmuir mediante los gráficos
logarítmicos.
Equipos y reactivos

Celdas de cuarzo Dióxido de titanio
Espectrofotómetro UV-VIS. Solución 200 [ppm] de azul BRL
Agitador. Agua destilada
10 Erlenmeyer de 250 [mL]
10 balones de aforo de 250 [mL]
10 embudos
10 tubos para centrífuga
Centrífuga
Piceta de 500 [mL]
1. A partir de la solución madre de 200 [ppm] de colorante acondicionada a cada pH de

trabajo (2,5 y 7,0 y 9,0) preparar soluciones de 150, 100, 80, 60 y 40 ppm
2. Realizar las curvas de calibración para el colorante (absorbancia vs concentración) a la
longitud de onda de 565 nm con un rango de concentración de 10 – 50 [ppm] a los pH
de trabajo.
3. Colocar 200 mL de las soluciones de azul BRL acondicionadas a los pH de trabajo en
los Erlenmeyer y adicionar la cantidad de TiO2 requerida para que la concentración del
óxido sea de 0.1 g/L.
4. Colocar los Erlenmeyer en un agitador y agitarlos durante una hora.
5. Centrifugar el contenido de los Erlenmeyer a 5000 rpm durante 30 min.
6. Medir la absorbancia de cada solución centrifugada.
Cálculos
Verificar a qué isoterma se ajustan mejor los datos, a la de Freundlich o a la de Langmuir. Con
base en las constantes de adsorción determinar la influencia del pH en este fenómeno.
17
7.6. P6. Tensión Superficial

• Explique dos métodos para la determinación de la tensión superficial

• ¿Cuál es la importancia de la tensión superficial en la naturaleza? Explique dos
ejemplos
• ¿Qué son los surfactantes? ¿Qué tipos de surfactantes existe?
Objetivo
Relacionar la tensión superficial con el ascenso capilar de un líquido y observar la influencia de

diversos solutos sobre la tensión superficial del agua.
Introducción
Una fuerza que usan los árboles para bombear el agua desde la raíz hasta las hojas es la tensión
superficial (γ). Esta es la fuerza que impide que se rompa la superficie del agua y actúa
perpendicularmente a una línea dibujada en la superficie y tiende a romper la superficie:
γ = Ep/A
Donde:
Ep = energía potencial
Esta fuerza es la responsable de la capilaridad, que es el ascenso de un líquido en un tubo

debido a la tensión superficial que actúa a lo largo de la superficie de contacto con las paredes
del tubo. Para el agua y la mayoría de los demás líquidos:
h = 2 γ /ρ g r
Donde:
r = radio del tubo,
g = aceleración de la gravedad,
ρ = densidad del líquido,
γ = tensión superficial,
h = altura del líquido en el capilar.
Equipos y reactivos

Regla graduada Agua
Papel milimetrado Etanol
5 cajas Petri Tensoactivo (Jabón comercial)
5 tubos capilares Soluciones 10 y 30% de Na2CO3
termómetro Colorante de alimentos
1. Colocar las diferentes substancias en cajas Petri para facilitar la medición.

2. Introducir un tubo capilar y medir la altura que asciende cada sustancia
18
Cálculos
1. Con los datos obtenidos calcular la tensión superficial de cada sustancia

2. Comparar los datos obtenidos con los valores teóricos (si aplica) y determinar la
influencia que ejercen los tensoactivos o las sales sobre la tensión superficial del agua.
19

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GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO

Ing. Florinella Muñoz, PhD

Escuela Politécnica Nacional

3.1. ACERCA DEL ESTUDIANTE 4

7.1. P1. DESCOMPOSICIÓN CATALÍTICA DEL PERÓXIDO DE HIDRÓGENO 10

Adicionalmente, las prácticas de laboratorio pretenden desarrollar el espíritu investigativo y

3.1. Acerca del Estudiante

• Durante la realización de las prácticas, el puesto de trabajo debe mantenerse LIMPIO Y

3.2. Acerca de los Reactivos Químicos

Explosivos: Son substancias que pueden explotar al estar en contacto con

Comburentes: Son substancias y preparados que tienen la capacidad de

Inflamables: Son compuestos que se pueden encender fácilmente incluso sin

Gas: sustancias gaseosas o líquidas que se envasan a presiones superiores de

Irritación cutánea: Sustancias y preparados que al estar en contacto con la

Tóxicos: Sustancias que por inhalación, ingestión o penetración cutánea

Peligroso por aspiración: Sustancias que por inhalación, ingestión o

Peligroso para el medio ambiente: Sustancias o preparados que pueden

• Está terminantemente prohibido sacar reactivos del laboratorio.

3.3. ¿Cómo reaccionar en caso de accidentes?

Fuego en el laboratorio: Cerrar la entrada de gas inmediatamente, evacuar el laboratorio por la

Fuego pequeño: Cerrar la entrada de gas inmediatamente, si el fuego es pequeño y localizado,

Ingestión de productos químicos: Antes de cualquier actuación concreta pedir asistencia

Inhalación de productos químicos: Conducir inmediatamente a la persona afectada a un sitio

Derrames de reactivos químicos: Si el derrame es pequeño limpiar inmediatamente cualquier

realización de la práctica. Si tiene alguna duda pregunte, no ponga en riesgo su vida ni la

Elemento de Descripción del Elemento de Evaluación % Nota % Nota

• ATKINS, P. y DE PAULO, J. 2006. Physical Chemistry, Octava edición, W. H. Freeman

El peróxido de hidrógeno se descompone de acuerdo con la siguiente reacción:

Materiales y Equipos * Reactivos

1. Preparar la solución de peróxido de hidrógeno al 0,3%, tomar 3 alícuotas de 75mL de

3. En el segundo Erlenmeyer agregar 10 mL de catalizador de cloruro férrico, 5 ml de

Cálculos y análisis de resultados

1. Gráfica de concentración de peróxido de hidrógeno vs tiempo.

7.2. P2. Cinética de la Decoloración de la Fenolftaleína

Preguntas Antes de la Práctica

• ¿Qué es la fenolftaleína? ¿cuál es su estructura y cómo cambia esta con el pH?

Determinar la influencia de la fuerza iónica sobre la cinética de decoloración de la fenolftaleína

Materiales y Equipos * Reactivos

1. Para la práctica estarán preparadas soluciones de hidróxido de sodio 0.3 M y cloruro de

Solución 1: 30 ml de solución 0,3 M de NaOH

2. Colocar en la celda la primera solución, con la cual se encerará el espectrofotómetro

Cálculos y análisis de resultados

7.3. P3. Cinética Enzimática: Determinación Espectrofotométrica de la

• Explique el modelo cinético de Michaelis y Menten y deduzca la fórmula para el cálculo

Determinar la constante de Michaelis-Menten y la velocidad máxima inicial de la reacción de

Materiales, equipos y reactivos

Materiales y Equipos * Reactivos

1. Colocar 3,15 mL de solución tampón de fosfato de sodio 50 mM y 0,05 mL de la

Cálculos y análisis de resultados

3. Hallar la actividad proteolítica de la enzima para cada concentración de sustrato

• 𝐴𝐵 es la actividad proteolítica con BAPNA en U/mL. U se define para el experimento

4. Hallar la constante de Michaelis-Menten y la velocidad máxima a partir de los datos de

7.4. P4. Montaje y Estudio de Diversas Celdas Electroquímicas

Determinar experimentalmente los potenciales de celda de distintas celdas galvánicas y de

Materiales y Equipos * Reactivos

1. Preparar las siguientes soluciones:

• 100 mL de CuSO4, 0,1 M

La solución de FeCl3 se debe preparar disolviendo el nitrato férrico en un poco de agua,

2. Preparar las siguientes semi-celdas en vasos de precipitación de 100 mL.

Colocar una barra de Cu limpio (previamente lijado) e introducirlo en 25 mL de solución

Colocar una barra de Zn limpio (previamente lijado) e introducirlo en 25 mL de solución

Colocar 25 mL de la solución de KI 0,1 M e I2, 0,02 M e introducir un electrodo limpio de

Colocar una mezcla de 10 mL de solución de Fe(NO3)3 0,1 M y 10 mL de solución de

Se montarán las siguientes celdas, midiendo su diferencia de potencial, con el voltímetro, y