MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE FASES.

La microscopía de contraste de fase, fue desarrollada fundamentalmente por

Zernike en 1932. Se basa fundamentalmente en el retraso que se produce en
las ondas de luz al atravesar objetos de distintos índices de refracción,
aprovechando y amplificando dichos retrasos.

El microscopio de contraste de fase permite observar células sin colorear y

resulta especialmente útil para células vivas.

Este aprovecha las pequeñas diferencias de los índices de refracción en las

distintas partes de una célula y en distintas partes de una muestra de tejido. La
luz que pasa por regiones de mayor índice de refracción experimenta una
deflexión y queda fuera de fase con respecto al haz principal de ondas de luz
que pasaron la muestra. Aparea otras longitudes de onda fuera de fase por
medio de una serie de anillos ópticos del objetivo y del condensador, anula la
amplitud de la porción fuera de fase inicial del haz de luz y produce un
contraste útil sobre la imagen. Las partes oscuras de la imagen corresponden a
las porciones densas del espécimen; las partes claras de la imagen
corresponden a porciones menos densas. Por lo tanto estos microscopios se
utilizan para observar células vivas, tejidos vivos y cortes semifinos no
coloreados..

Objetivo

La microscopia de contraste de fases y la del microscopio de interferencia

nos dan la posibilidad de observar células vivas y sin ninguna preparación , ya
que al realizar otros procedimientos existe la posibilidad de que algunos de sus
componentes puedan perderse o distorsionarse por métodos como la fijación,
coloración, congelación, y otros, así, estos instrumentos ópticos ayudan a
resolver el problema.

Principio de la microscopia de contraste

Las células vivas son transparentes a la luz visible, por lo tanto los rayos de
luz pasan a través sin sufrir pérdidas en intensidad.
MICROSCOPIO DE POLARIZACIÓN

A este microscopios se le han añadido dos polarizadores (uno entre el

condensador y la muestra y el otro entre la muestra y el observador). El
material que se usa para ello es un cristal de cuarzo y un cristal de Nicol,
dejando pasar únicamente la luz que vibra en un único plano (luz polarizada).
Esta luz produce en el campo del microscopio claridad u oscuridad, según que
los dos nicoles estén paralelos o cruzados.

Este tipo de microscopio se usa para poder identificar mejor sustancias

cristalinas o fibrosas (como el citoesqueleto), sustancia amiloide, asbesto,
colágeno, cristales de uratos, queratina, sílice, y otras de origen exógeno.

MICROSCOPIO DE TRASMISIÓN

Los microscopios electrónicos más sencillos constan de dos lentes formadoras

de la imagen de forma muy parecida a los microscopios ópticos
convencionales. La iluminación proviene de un cañón de electrones emitidos
por un filamento de W o LaB6. Los electrones son acelerados al aplicar un
potencial negativo (100 kV - 1000 kV) y focalizados mediante dos lentes
condensadoras sobre una muestra delgada, transparente a los electrones.

Después de pasar a través de la muestra los electrones son recogidos y

focalizados por la lente objetivo dentro de una imagen intermedia ampliada. La
imagen es ampliada aún más gracias a las lentes proyectoras, las cuales
controlan la ampliación de la imagen en la pantalla fluorescente. La imagen
final se proyecta sobre una pantalla fluorescente o una película fotográfica.

Un TEM de dos lentes puede llegar a aumentar la imagen alrededor de 1000

veces. El poder de resolución podría llegar hasta 5 nm siempre y cuando se
consiguiera aumentos de ´50.000 lo que es posible utilizando un vidrio de
aumento sobre la imagen fluorescente en el microscopio, o un incremento
fotográfico de la imagen registrada en la película.
COLORACIÓN DE TINCIÓN SIMPLE

El tamaño de la mayoría de las células bacterianas es tal que resultan difíciles

de ver con el microscopio óptico. La principal dificultad es la falta de contraste
entre la célula y el medio que la rodea, y el medio más simple de aumentar el
contraste es la utilización de colorantes. Estos pueden emplearse para
distinguir entre tipos diferentes de células o para revelar la presencia de
determinados constituyentes celulares, tales como flagelos, esporas, cápsulas,
paredes celulares, centros de actividad respiratoria, etc.

Las células generalmente son tratadas para coagular el protoplasma antes de

teñirlas, proceso llamado fijación. Para bacterias, la fijación por el calor es lo
más corriente, aunque también puede fijarse con sustancias químicas como
formaldehido, ácidos y alcoholes. Después de la fijación, si se añade el
colorante, no se producen ulteriores cambios estructurales en el protoplasma.
La fijación se realiza habitualmente en células que han sido fijadas sobre un
portaobjetos, tratando después éste con el agente fijador, y siguiendo
inmediatamente el proceso de tinción. La fijación produce habitualmente el
encogimiento de las células; la tinción, por el contrario, hace que las células
aparezcan mayores que lo que son realmente, de manera que las medidas de
las células que han sido fijadas o teñidas no pueden realizarse con mucha
precisión.
INTRODUCCIÓN

La mayoría de la gente sabe que el pH es un valor variable entre 0 y 14 que

indica la acidez o la alcalinidad de una solución. Y, además, conoce que el
mantenimiento del pH apropiado en el flujo del riego ayuda a prevenir
reacciones químicas de fertilizantes en las líneas, que un valor de pH elevado
puede causar obstrucciones en los diferentes componentes de un sistema de
fertirrigación debidas a la formación de precipitados, que un adecuado pH
asegura una mejor asimilabilidad de los diferentes nutrientes, especialmente
fósforo y micronutrientes, etc.

¿QUÉ ES EL PH?

Es una unidad de medida aceptada y común como un " metro " es una medida
de la longitud, y un "litro" es una medida de volumen fluido El pH es una
medida de la acidez o de la alcalinidad de una sustancia . Es necesario porque,
dado que en ciertos casos no es suficiente decir que el agua está caliente, o no
es suficiente decir en ciertos casos que el jugo de limón es ácido, al saber que
su pH es 2,3 nos dice el grado exacto de acidez. Necesitamos ser específicos.
Al decir que el agua está en 91° C o 196°F expresamos exactamente lo
caliente que está.

Por lo tanto la medición de la acidez y la alcalinidad es importante, pero cómo

está el pH relacionado con estas medidas

Se expresa como el logaritmo negativo de base de 10 en la actividad de iones de

hidrógeno. Su fórmula se escribe de la siguiente manera:
¿CÓMO SE MIDE EL PH Y CUÁLES SON SUS ESCALAS?
El pH es una medida de la acidez o basicidad de una solución. El pH es la
concentración de iones o cationes hidrógeno [H+] presentes en determinada
sustancia.

La escala de pH se establece en una recta numérica que va desde el 0 hasta el

14.El número 7 corresponde a las soluciones neutras. El sector izquierdo de la
recta numérica indica acidez, que va aumentando en intensidad cuando más
lejos se está del 7.Por ejemplo una solución que tiene el pH 1 es más ácida o
más fuerte que aquella que tiene un pH 6.

De la misma manera, hacia la derecha del 7 las soluciones son básicas y son
más fuertes o más básicas cuanto más se alejan del 7. Por ejemplo, una base
que tenga pH 14 es más fuerte que una que tenga pH 8.

Objetivos

 Reconocer los diferentes colores de la muestra al agregarle reactivos.

 Reconocimiento de cloruros, almidón y glucosa.
 Determinar los pH de las diferentes muestras.

MATERIALES UTILIZADOS

 Tubos de ensayo
 PH metro
 Vasos de precipitación
 Pipetas
 Agua destilada
 Agua potable
 Naranja
 Orina, gaseosa, yogur, cal viva, vinagre, dextrosa. Queso , almidón.

REACTIVOS

 Nitrato de plata
 Benedict
 Lugol
PROCEDIMIENTO

 DETERMINACIÓN DEL PH

Primero para determinar el pH, la muestra se coloca en un tubo de

ensayo, luego tomamos un pH-metro, lo dejamos en la muestra durante
aproximadamente 2 minutos, después lo retiramos y comparamos en la
escala para saber que pH posee.

 PROCESO PARA DETERMINAR LA PRESENCIA DE CLORUROS

Primero colocamos las muestras en los tubos de ensayo, luego lo
agregamos nitrato de plata, si aparece un precipitado blanco nos
indicara la presencia de cl.

 RECONOCIMIENTO DEL ALMIDON

Para reconocer si la muestra contiene almidón solo se le debe agregar

lugol, si la muestra contiene lugol cambiara a un color azul pero la
intensidad del color depende de la concentración del almidon.

 DETERMINACIÓN DE LA PRESENCIA DE LA GLUCOSA

A la muestra que tenemos en un tubo de ensayo se le coloca el reactivo

de benedict (el cual sirve para reconocer glucosa), luego agitamos y lo
calentamos en baño maría, si la muestra contiene glucosa cambiara de
color a un rojo ladrillo.