La resolución de un microscopio óptico, se define como la
distancia más pequeña entre dos puntos del espécimen que todavía puede distinguirse como dos formas separadas. Está directamente relacionada con el aumento útil del microscopio y el límite de percepción en los detalles de la muestra, aunque es un valor subjetivo en microscopía debido al gran aumento; una imagen puede parecer fuera de foco, pero aún debe resolverse con la capacidad máxima del objetivo ayudando a los componentes ópticos. Debido a la naturaleza ondulatoria de la luz y la difracción asociada con estos fenómenos, la resolución de un objetivo de microscopio se determina por el ángulo de las ondas de luz que son capaces de entrar en la lente frontal y por lo tanto el instrumento se dice que es de difracción limitada. Este límite es puramente teórico, pero incluso un objetivo teóricamente sin errores de imagen tiene una resolución finita.