PRACTICA N°14

ANÁLISIS FÍSICO QUÍMICO DE ACEITES ESENCIALES

1. Características físico químicas del aceite esencial
Composición química
El aceite esencial de albahaca tiene un gran variedad de compuestos químicos,
dependiendo a factores como la variedad u origen, las hojas, periodo de siembre y
cosecha, pero en general contiene principalmente monoterpenos y fenilpropanoides;
monoterpenos oxigenados, hidrocarburos monoterpenos oxigenados y aromáticos,
hisdrocarburos sesquiterpenos, sesquiterpenos oxigenados y compuestos alifáticos.

Propiedades Físicas
Aceites esenciales de albahaca
Primavera Verano Otoño Invierno
Porcentaje de 0.7±0.1 0.5±0.0 0.6±0.0 0.8±0.1
rendimiento
Indice de 1.5017±0.003 1.5045±0.003 1.4995±0.002 15015±0.1
refracion
Densidad (g/ml) 0.97±0.01 0.95±0.02 0.97±0.02 0.96±0.01
25ºC
Adaptado de Ijaz et al. (2008)

2. Aplicaciones del aceite esencial

Propiedad antioxidante
Debido a su mecanismo de acción el aceite esencial de albahaca es clasificado como
antioxidante primario, debido a que actúa removiendo o inactivando los radicales libres
producidos durante la reacción de oxidación a través de la donación de átomos de
hidrogeno, interrumpiendo así la reacción en cadena, se han llevado a cabo diversos
métodos para determinar la capacidad antioxidante, de extractos y aceites esenciales in
vitro.
Propiedad antibacterial
El poder antimicrobiano de la albahaca se atribuye a la actividad biológica de algunos de
us componentes tales como el linalol. 1,8-cineol, eugenol, y alcanfor. Si se toma en cuenta
que la albahaca contiene un gran número de compuestos químicos, es difícil afirmar que
su actividad antimicrobiana está dada por un solo mecanismo.
El poder antibacterial del aceite esencial de albahaca ha sido probado en bacterias Gram-
positivas(Micrococcus flavus, Sarcina lutea, Staphylococcus aureus, S. epidermis y
Bacilus subtilis) y bacterias Gram-negativas( Escherichia Coli, Pseudomona aureaginosa,
Salmonella typhi, S. enteriditis y Shigella sonei). De manera genral ambos tipos de
bacterias son sensibles al aceite esencial de albahaca, sin embargo las bacterias Gram-
positivas han mostrado una mayor sensibilidad.
 I. Resultados y discusiones

 Determinacion de la acidez del aceite escencial de albahaca

Gasto = 0.25 ml
Peso de la muestra = 4.00 gr.
𝐺 ∗ 𝑁 ∗ 56.1
𝐼. 𝐴. =
𝑊
𝑂. 6 ∗ 0.1 ∗ 56.1
𝐼. 𝐴. =
4
𝐼. 𝐴. = 0.8415

 Determinacion de la densidad del aceite escencial de romero

Peso del picnometro lleno: 11.1315

Muestra del aceite: 1.9652
Volumen del picnometro: 10 g/cm3

(𝑃𝑒𝑠𝑜 𝑑𝑒𝑙 𝑝𝑖𝑐𝑛𝑜𝑚𝑒𝑡𝑟𝑜 + 𝑀𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑑𝑒 𝑎𝑐𝑒𝑖𝑡𝑒) − (𝑀𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑑𝑒 𝑎𝑐𝑒𝑖𝑡𝑒)

𝐷=
𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑑𝑒𝑙 𝑝𝑖𝑐𝑛𝑜𝑚𝑒𝑡𝑟𝑜
(11.1315) − (1.9652)
𝐷=
10
𝐷 = 0.9166 𝑔/𝑐𝑚3
Comparando con la densidad teórica encontrado es menor a 0.95 g/cm3

 Índice refractométrico
La medida se hizo a 25º C usando un refractómetro Abbe el cual nos dio un valor de:
𝐼. 𝑅. = 1.473
Comparándola con la información bibliográfica este valor se encuentra dentro del rango.

Conclusiones
 La caracterización fisicoquímica de los aceites esenciales nos ayuda a analizar qué
proceso de refinación posterior se deben realizar para conservar y alargar la vida
útil de este producto.
  El índice de acidez se encontró un valor de 0.8415, la densidad fue de 0.95 gr/cm3
y el índice de refracción 1.473

II. Cuestionario

1. ¿Qué otros análisis físicos químicos pueden realizar para controlar la calidad
de los aceites esenciales?

tipo de análisis métodos usados

organolépticos olor
color
sabor
ensayos botánicos macroscópicos
histoquímicas
índice de estomas
micrografía del polvo
pureza materia extraña
humedad
cenizas totales, insolubles en ácidos
metales pesados
pesticidas, agroquímicos
fisicoquímicos cualitativos reacciones de caracterización
análisis cromatografico por CG, HPLC Y
TLC
cuantitativos materia extraíble por distintos solventes
determinacion de contenido de aceite
esencial
contenido de otros constituyentes
activos
higiénicos microbiológico microorganismos aerobios totales
s (bacteria, mohos, levaduras)
escherichia coli (ausencia)
otros aflatoxinas (ausencia)

Conclusión

 Las características estudiadas deben ser suficientemente descriptivas del producto

para que permitan detectar aquellas desviaciones que se consideren suficientes para
rechazar el lote.
 Se utilizan diferentes parámetros analíticos y los valores obtenidos para una
muestra se comparan con los establecidos en la correspondiente norma, que habrá sido
dictada por algún organismo de normalización o; en su efecto, por el propio interesado.
Fuente:

 https://es.slideshare.net/profegildi/anlisis-y-control-de-aceites-esenciales

2. ¿Qué entiende Ud. Por índice de rotación?

El análisis se realizó en el laboratorio de SERVILAB de la Universidad Nacional San

Agustín de Arequipa. El equipo utilizado fue refractómetro ABBE, marca Ivymen
System, Modelo RI-71, cuyo principio es la relación de aire, sustancia medida a 20ºC. A
la muestra preparada se le verificó la acción del agente desecador por una serie de
modificaciones del índice de refracción, después de cada desecado. (Norma Técnica
Peruana: NTP 319.075:1974).

Conclusión
 Pruebas analíticas para determinar la pureza del aceite esencial.

Bibliografía
 file:///C:/Users/USER/Downloads/Dialnet-
ExtractionCharacterizationAndEvaluationOfAntibacte-5113830.pdf

3. ¿Definir que es rotación óptica?

La rotación óptica específica es una propiedad tan importante y característica de un

compuesto como lo son sus puntos de fusión, de ebullición y su densidad. Así, el
conocimiento de la pureza óptica específica, definida como la relación entre la rotación
óptica específica medida y la del enantiómero puro, permite determinar distintos tipos
de adulteraciones, tales como adición de compuestos sintéticos o componentes de
diferentes orígenes botánicos, los cuales podrían dañar drásticamente las propiedades
biológicas u olfatorias, íntimamente relacionadas con la naturaleza estereoquímica de
los mismos. Por ejemplo, el valor de la rotación óptica específica del (+)-citronelal es
+12,5° (Bedoukian, 1986), mientras que para mezclas racémicas es, lógicamente 0°. La
rotación óptica específica del citronelal asociada a una conveniente purificación,
permite la cuantificación de la pureza óptica del mismo. En el presente trabajo se evaluó
la pureza óptica del citronelal presente en los aceites esenciales de citronela
(Cymbopogon nardus (L.) Rendle) y eucalipto citriodora (Eucalyptus citriodora, Hook),
del noreste argentino, determinando la rotación óptica específica de los componentes
aislados.

Conclusión
 Este análisis permite determinar distintos tipos de adulteraciones, tales como
adición de compuestos sintéticos o componentes de diferentes orígenes
botánicos, los cuales podrían dañar drásticamente las propiedades biológicas
u olfatorias.

Fuente:
  http://www.scielo.cl/pdf/infotec/v26n4/art05.pdf

4. ¿A qué se conoce como índice de éster?

Representa la masa en mg de KOH necesaria para saponificar los glicéridos

Presentes en 1 g de grasa. Podemos aproximarlo mediante la siguiente expresión:
IE = (IS - IA)
El IE permite obtener una mejor aproximación del peso molecular promedio de los
triglicéridos de una grasa.

Fuente:
 http://www.fio.unicen.edu.ar/usuario/gmanrique/images/Grasas_y_Aceites.p
df

5. Mencionar las principales características físicas químicas del aceite esencial

del orégano, manzanilla y hierba luisa

a) Cedrón – hierba luisa

b) Orégano

c) Manzanilla
Conclusión
 Los componentes químicos de los diferentes aceites esenciales son diferentes casi
en su totalidad presentando diferentes grupos de térpenos.
 El aceite esencial de cedrón y orégano presentan linanol en proporciones diferentes.

Bibliografía

 http://www.alimentosargentinos.gob.ar/contenido/sectores/aromaticas/productos/M
anzanilla_2010_09Sep.pdf

 http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0718-
07642013000400005&lang=pt

 http://www.bdigital.unal.edu.co/2869/1/ivonneximenaceronsalazar.2009.pdf

6. ¿Determine los todos los análisis que se realizan a los aceites esenciales y como
debe realizarse un fraccionamiento del mismo? Adjuntar las técnicas de análisis
Las exigencias de los controles de calidad difieren según el uso final que se le dé al aceite
esencial.
Antiguamente, esta identificación se convertía en una larga y tediosa operación, que
consumía muchísimo tiempo, ya que requería el aislamiento y purificación de cada
componente por técnicas combinadas de destilación fraccionada, TLC, CC,
cristalización, etc.
Por ello se usaban más comunmente para el control, la determinación de sus constantes
físicas (principalmente solubilidad, densidad, poder rotatorio e índice de refracción) o
algunos índices químicos (de acidez, de éster, de acetilo, de fenoles, etc.).
En las últimas décadas, el desarrollo de técnicas instrumentales de análisis y su
acoplamiento a sistemas informáticos y bases de datos, ha cambiado sustancialmente el
panorama, agilizando de forma notable la identificación de los componentes de las
esencias.
Han contribuido especialmente a este cambio, el desarrollo de:
• Técnicas cromatográficas de alta resolución, principalmente la cromatografía de gases
con columnas capilares.
• Técnicas espectroscópicas, particularmente la espectrometría de masas (EM), la
espectroscopía infrarroja (IR) y la espectroscopia de resonancia magnética nuclear
(RMN).
• Sistemas cromatográficos acoplados a técnicas espectroscópicas, especialmente la
cromatografía de gases acoplada a la espectrometría de masas (CG-MS) y la
cromatografía de gases acoplada a la espectroscopía infrarroja (CG-FTIR)

Fuente:
- https://es.slideshare.net/profegildi/anlisis-y-control-de-aceites-
esenciales?from_action=save
7. ¿Describa las normas internacionales de calidad para los aceites esenciales?
NOM-F-366-S-1980 "ACEITE ESENCIAL DE ZACATE LIMON"

O INTRODUCCION

Las especificaciones que se señalan a continuación, sólo podrán satisfacerse cuando en la elaboración del producto
objeto de esta norma, se utilicen materias primas e ingredientes de calidad, se apliquen buenas técnicas de elaboración,
se realicen en locales e instalaciones bajo condiciones higiénicas, que aseguren que el producto es apto para el
consumo humano de acuerdo con el Código Sanitario de los Estados Unidos Mexicanos, sus Reglamentos y demás
disposiciones de la Secretaría de Salubridad y Asistencia.

1 OBJETIVO Y CAMPO DE APLICACIÓN

Esta Horma Oficial Mexicana establece las especificaciones que debe cumplir el producto denominado aceite esencial
de zacate limón, empleado en la elaboración de sabores en la industria alimentara, farmacéutica y en la preparación
de fragancias para la industria perfumera, así como materia prima para la obtención de citral y síntesis de otros
productos aromáticos.

2 REFERENCIAS
Esta Norma se complementa con las siguientes Normas Oficiales Mexicanas vigentes:
NOM-F-67 Aceite esencial - Determinación de rotación
óptica. (Determinación de rotación óptica en
aceites esenciales).
NOM-F-77 Aceites esenciales - Determinación de residuos
a la evaporación. (Determinación de residuos a
la elaboración en aceites esenciales).
NOM-K-90 Aceites esenciales - terminalogía Terminalogía
en aceites esenciales).
NOM-K-114 Aceites esenciales - Método de muestreo,
(Método de muestreo en aceites esenciales).
NOM-K-114 Aceites esenciales - Etiquetado y marcado
en recipientes. (El quetado y marcado de
recipientes para aceites esenciales).
NOM-EE-21 Aceites esenciales - Envases. (Envases
para aceites esenciales).
NOM-K-129 Aceites esenciales y productos aromáticos
- Determinación del índice de
refracción. (Determinación de la
densidad relativa en aceites esenciales
y productos aromáticos).
NOM-K-245 Aceites esenciales - Preparación de la
Muestra. (Preparados de la muestra de
aceites esenciales).
NOM-K-363 Aceites esenciales - Determinación de
compuestos carbonílicos - Método del
clorhidrato de hidroxilamina. (Determinación
de compuestos carbonílicos en aceites
esenciales). (Método de clorhidrato de
hidroxilamina).
NOM-K-420 Aceite esencial y productos aromáticos
- Determinación de la densidad relativa.
(Determinación de la densidad relativa
en aceites esenciales y productos aromáticos.
NOM-K-81 Aceites esenciales - Determinación de
la solubilidad en etanol. (Determinación
de la solubilidad en etanol en
aceites esenciales).
NOM-K-459 Aceites esenciales - Determinación de plomo
- Método de la ditizona. (Determinador de
plomo en aceites esenciales, Método de la
ditizina).
NOM-F-354-S Aceites esenciales y productos aromáticos -
Determinación de metales pesados. (Determinación
de metales pesados en aceites esenciales y
poductos aromáticos).

3 DEFINICION

Se entiende por aceite esencial de zacate limón (Cymbopogon citratus (Staff) Andropogan nardos varceriferus), al
aceite obtenido por destilación con arrastre de vapor de agua de los pastos Cymbopogon, originarios de México.
4 CLASIFICACION
El producto obtenido de esta norma se clasifica en un tipo con un sólo grado de calidad.
5 ESPECIFICACIONES
El aceite esencial de zacate limón en su único tipo y grado de calidad debe cumplir con las siguientes especificaciones:
5.1 Sensoriales.
Aspecto: líquido cristalino, viscoso.
Color; varía del amarillo pálido al café pálido o naranja.
Olor: característico. fuertemente a citral.
Sabor: Característico, libre de sabores extraños.
5.2 Físicas y químicas.
Las especificaciones físicas y químicas se indican en la Tabla 1.
TABLA 1
Especificaciones Mínimo Máximo
Rotación óptica a 293 K (20°C) -3° + 1°
Indice de refracción 293 K (20°C) 1,4830 1,4890
Densidad relativa a 298 K (25°C) 0.869 0.894
 Contenido de compuestos carbonflicos
expresados como citral mg./kg. (ppm). 750
Residuos a la evaporación mg./kg.(ppm). 70
Plomo mg./kg. (ppm). 10
Metales pesados expresados como plomo
mg./kg. (ppm). 40
Solubilidad en estanol a 293 K (20°C). debe pasar la prueba
NOTA: Los aceites esenciales recientemente destilados son solubles en etanol de una concentración de 700 cm3/1,
La solubilidad de los aceites disminuye con el tiempo hasta ser insoluble en Estado de 900 cm3/1.
6 MUESTREO
6.1 Cuando se requiera el muestreo del producto, éste podrá ser establecido de común acuerdo entre productor y
comprador, recomendándose el uso de la Norma Oficial Mexicana NOM-R-18.
6.2 Muestreo oficial.
El muestreo para efectos oficiales estará sujeto a la legislación y disposiciones de la Dependencia oficial
correspondiente.
6 La cantidad mínima de muestra debe ser de 40 cm3.
7 METODOS DE PRUEBA
Para la verificación de las especificaciones físicas y químicas que se establecen en esta norma se deben aplicar las
Normas Oficiales Mexicanas que se indican en el capítulo de Referencia (véase 2).
7.1 Rotación óptica a 293 K (20°C).
Si la determinación se efectúa entre 291 K (18°C) y 303 K (30°C) no es necesario hacer ninguna corrección.
7.2 Indice de refracción 293 K (20°C).
Si la determinación no se efectúa a 293 K (20°C) el índice de refracción debe corregirse utilizando al factor de
corrección F-0.0004 por °C.
7.3 Densidad relativa a 298 K (25°C) / 298 K (25°C)
Si la determinación no se efectúa a 298 K (25°C) la densidad relativa debe corregirse utilizando el factor de corrección
F-0.0006 por °C.
7.4 Residuo a la evaporación.
La cantidad de muestra debe ser de 5 g. con precisión de 0.001 g.
7.5 Contenido de compuestos carbonílicos, expresados como citral.
La cantidad de muestra debe ser de 1.5 g. con precisión de 0.001 g. el tiempo de agitación debe ser de 15 minutos
solución de KOH 0.5 N miliequivalente de citral 0.15224.
7.6 Solubilidad en etanol.
Etanol de 700 cm.3/1, 800 cm.3/1 y 900 cm.3/1.
La prueba debe efectuarse a 293 K (20°C).
8 MARCADO, ETIQUETADO Y ENVASADO.
8.1 Marcado y etiquetado.
Debe cumplir con las prescripciones que se indican en la norma NOM-K-114.
8.2 Envasado.
Debe cumplir con las prescripciones que se indican en la norma NOM-EE-21.
9 ALMACENAMIENTO
El producto terminado debe conservarse en locales que reúnan los requisitos sanitarios que señala la Secretaría de
Salubridad y Asistencia.

Conclusión: Esta es una norma de calidad mexicana para aceite esencial de zacate de
limón, en nuestro país actualmente no hay normas establecidas para este tipo de productos
ya que la producción de aceites esenciales es bajísima a comparación de otros países.
Fuente: http://dof.gob.mx/nota_detalle.php?codigo=4858816&fecha=18/08/1980

8. ¿Describa las operaciones a realizar a los aceites esenciales para evitar el deterioro
de extraerlo?
a) Rectificación.
Es el proceso más común, consiste en fraccionar en una columna de rectificación
obteniéndose porciones que son analizadas individualmente. Aquellas que tengan una
misma calidad se juntan.
Generalmente un AE se fracciona en tres partes
- Cabeza o fracción liviana
- Corazón o parte media
- Fracciones pesadas
b) Fraccionamiento
Semejante al anterior, pero con una partición más específica. Por ejemplo, los aceites
esenciales con 60-70% de citral se fraccionan tratando de eliminar los compuestos que lo
acompañan para obtener un 90-97% de pureza.
c) Desterpenado
Al eliminar los terpenos, cuando estos no tienen la propiedad organoléptica que se
persigue, mejora la solubilidad en agua del aceite esencial y concentra el sabor y el olor.
d) Descerado
Cuando un aceite esencial es extraído por expresión y no por arrastre por vapor, contiene,
además de la fracción volátil terpénica, compuestos como las ceras del epicarpio de los
frutos.
e) Filtrado
Para eliminar las impurezas de los aceites esenciales crudos se filtran con ayuda de tierras
filtrantes u otros materiales que retienen el agua residual (sulfato de sodio anhidro,
carbonato de magnesio, etc.)
f) Decoloración.
Para esencias con colores fuertes
- Patchulí
- Palo santo
- Clavo
g) Lavado
Para mejorar el olor desagradable debido a la presencia de ácidos y fenoles se lava con
soluciones de hidróxido de sodio al 1% o carbonato de sodio al 10%.
h) Estandarización
No es un proceso industrial en sí, surge como una necesidad de homogenizar o normalizar
la calidad de un producto debido a la infinidad de variables que modifican sus
características. Se realiza para cumplir con las exigencias de la industria la cual requiere
las mismas características independientemente del origen, año y época de cosecha
i) Aislamiento de Productos Específicos
Algunas esencias son comercializadas para aislarles algunos componentes mayoritarios
como el eugenol de la esencia de clavo o el cedrol de la del cedro.
Fuente: http://ocw.upm.es/ingenieria-agroforestal/uso-industrial-de-plantas-aromaticas-
y-medicinales/contenidos/material-de-clase/tema7.pdf
9. ¿Cómo se debe almacenar y envasar los aceites esenciales para evitar su
deterioro?
El almacenamiento debe realizarse en recipientes adaptados a los aceites esenciales, que
se mantengan alejados de la luz y a temperaturas que no superen los 25 grados. Los aceites
esenciales son extractos frágiles. Siempre protegidos de la luz y en su envase original de
cristal.
Aun cuando algunos aceites esenciales pueden sufrir oxidación y/o perder sus
propiedades terapéuticas en un lapso de 8 a 12 meses (principalmente los cítricos), otros
maduran y mejoran con el tiempo, preservando intactas sus propiedades durante años.
Los aceites esenciales no devienen rancios como sí lo hacen las plantas de las que se
extraen o como los aceites carriers extraídos de semillas. Sin embargo, sí pueden
deteriorarse y perder sus cualidades aromáticas y, por tanto, su valor terapéutico a través
del tiempo.
Independiente de cuánto tiempo es esperable que un aceite esencial permanezca estable,
la vida útil de sus principios activos dependerá de su correcto almacenamiento y
manipulación. Las siguientes son las sugerencias básicas para el correcto almacenamiento
de los AE:
- Sensibilidad a la luz y al calor: Los AE son altamente sensibles a la luz y al calor, por
tanto se deben conservar alejados de la luz solar directa, idealmente en un lugar oscuro,
y en un lugar fresco. Para una máxima durabilidad, pueden guardarse en el refrigerador.
- Volatilidad: Los AE son muy volátiles, esto es, se evaporan fácilmente, por tanto se
debe minimizar su contacto con el aire. Para ello, se deben mantener en sus envases
siempre muy bien cerrados y ser extremadamente cuidadosos al manipularlos, cuidando
de cerrarlos inmediatamente luego de utilizarlos. En caso de adquirir aceites en envases
de mayor tamaño (30 ml o más), se sugiere ir traspasando cantidades pequeñas de aceite
esencial a un envase lo más pequeño posible para su uso y manipulación cotidiana.
- Materialidad de los envases: No deben almacenarse los AE en envases plásticos ya
que algunos son tan fuertes que pueden corroer y derretir el plástico y/o absorber toxinas
o impurezas del mismo. Por el contrario, deben conservarse en envases de vidrio oscuro
que no permitan el paso de luz.
Fuente:
- http://www.neuroscent.cl/tienda/index.php/conservacion-y-almacenamiento-de-los-
aceites-esenciales
10. ¿Cómo se realizan las pruebas de identificación de constituyentes de los aceites
esenciales? Principalmente cromatografía de gases y espectro de masas?
Cromatografía de Gases (CGL)
La cromatografía de gases o cromatografía gas – líquido (CGL) se emplea para sustancias
o volatilizables, como son los aceites esenciales. Se emplea como fase móvil un gas, y
como fase estacionaria un líquido contenido en una columna capilar, de diámetro muy
pequeño y varios metros de longitud, que va enrollada en el interior del cromatógrafo. Se
trabaja a alta temperatura, para que los componentes de la mezcla se mantengan
volatilizados.
Es la técnica más selectiva y la recomendada por la Farmacopea Europea como el método
estándar para el análisis los mismos. Permite separar e identificar aceites esenciales,
alcanfor, ácidos vegetales, algunos alcaloides como los del opio y tabaco, resinas de
cannabis, y compuestos esteroideos como sapogeninas y heterósidos cardiotónicos.
Es un método a la vez cuantitativo y cualitativo. Esta técnica, acoplada con
Espectrometría de Masas (GC-MS), permite obtener el espectro de masas de cada
componente, con el cual se obtiene el peso molecular e información estructural. Existen
bases de datos con los espectros de masas de muchos componentes.
Más recientemente se han desarrollado columnas cromatográficas quirales para la
separación de componentes ópticamente activos.
Espectrometría de Masas
En relación con el estudio de aceites esenciales el acoplamiento de la cromatografía de
gases (CGL) a la Espectrometría de Masa (GC-MS) es el que ha recibido mayor atención
desde su introducción.
La técnica acoplada GC-MS permite obtener el espectro de masas de cada componente
separado por CGL. Se obtiene el dato de su peso molecular e información estructural.
Existen bases de datos con los espectros de masas para la identificación química de
muchos de los componentes de un aceite esencial u otros tipos de sustancias.