UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

ESCUELA DE POST GRADO

UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA

MOLINA
ESCUELA DE POSTGRADO
MAESTRÍA EN CIENCIAS AMBIENTALES

CURSO:
MÉTODOS DE MEDICIÓN AMBIENTAL
ENSAYOS DE LABORATORIO
PARTE 1

Profesor: Mg.Sc. Ing. Juan Carlos Palma

La Molina, 2018

Mg. Sc. Juan Carlos Palma. 1

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Ensayo 1
Volumetría ácido-base
Determinación de la alcalinidad en aguas naturales

FUNDAMENTOS
Alcalinidad del agua es la capacidad ácida-neutralizante de este. Esto es la suma de
todas las bases titulables. La medida del valor puede variar con el punto final del pH
usado. La alcalinidad es una medida de las propiedades agregadas del agua y puede
ser interpretada en términos de sustancias específicas cuando la composición química
de la muestra es conocida. No se debe cometer el error de considerar a la alcalinidad o
acidez como pH.

La alcalinidad es importante en la vida acuática debido a que este protege, tiene un

efecto tampón a los cambios rápidos de pH. Para la protección de la vida acuática la
alcalinidad o capacidad buffer no debería ser menor de 20 mg/L.

El método para la determinación de la Alcalinidad a utilizar en la presente práctica es el

método Standard Methods 2320 B

TOMA DE MUESTRA Y ALMACENAMIENTO

Colectar las muestras en frascos de polietileno o de vidrio borosilicatado y almacenar a
temperatura de 4 °C, llenar completamente el frasco sin dejar espacio. Debido a que las
muestras de agua pueden estar sujetas a la acción microbiana y perder o ganar CO2 al
estar expuestos al aire, analizar la muestra preferentemente en el día de la toma de
muestra.

REACTIVOS
a) Disolución de ácido clorhídrico (0,1 M). Diluir 8,3 mL de ácido clorhídrico
concentrado en 1L con agua libre de CO2.
b) Disolución de ácido clorhídrico (0,02 M). Diluir 200 mL de ácido clorhídrico en 1
L de agua.
c) Disolución indicadora de naranja de metilo. Pesar aproximadamente y con
precisión 0,5 g del colorante naranja de metilo y aforar a 1L con agua. Filtrar la
disolución fría para remover cualquier precipitado que se forme. O bien, pesar

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aproximadamente y con precisión 0,5 g de la sal de sodio y diluir a 1 L con agua,

si es necesario filtrar cuando esté fría la disolución.
d) Disolución indicadora de fenolftaleína. Pesar aproximadamente y con precisión
5,0 g de fenolftaleína y disolver en 500 mL de etanol, añadir 500 mL de agua con
agitación constante. Filtrar si hay formación de precipitado.
PROCEDIMIENTO
a) Transferir 100 mL de muestra en un matraz erlenmeyer de 250 mL.
b) Adicionar 2 gotas de disolución indicadora de fenolftaleína
c) Titular con la disolución valorada de ácido (0,02 M) hasta el vire de la
fenolftaleína (de rosa a incoloro), registrar los mililitros gastados (alcalinidad a la
fenolftaleína). Adicionar 2 gotas de la disolución indicadora de naranja de metilo.
d) Continuar con la titulación hasta alcanzar el vire del naranja de metilo. (de canela
a amarillo), alcalinidad total.
e) Registrar los volúmenes para ambos puntos finales.

CALCULOS

Calcular la alcalinidad, tomando en cuenta el vire de los indicadores.

A  N  50000
Alcalinizad mg CaCO3/L 
mL muestra
A: Es el volumen total gastado de ácido en la titulación al vire del anaranjado de metilo
en mL;
N: Es la normalidad de la disolución de ácido;
100: Es el volumen de la muestra en mL;
50: Es el factor para convertir eq/L a mg CaCO3/L, y
1 000: Es el factor para convertir mL a L.

Relaciones de alcalinidad
Alcalinidad por Alcalinidad por Bicarbonato
Resultados de Hidróxido Carbonate como Concentración
la Titulación
como CaCO3 CaCO3 como CaCO3

P=0 0 0 T
P < ½T 0 2P T – 2P
P = ½T 0 2P 0
P > ½T 2P – T 2(T – P) 0
P=T T 0 0
P: Alcalinidad con Fenolftaleína; T: alcalinidad total

CUESTIONARIO
1) Al determinar la alcalinidad de 10 mL de una muestra de superficial, se gastó 0
mL de ácido clorhídrico 0,02 N al titular en presencia de fenolftaleína, y se gastó
4 mL del ácido al titular en presencia de anaranjado de metilo. ¿Cuál es el valor
de la alcalinidad?¿En este caso la alcalinidad de que especie depende?
2) ¿Qué significa tener un bajo valor de alcalinidad?
3) Clasifique la alcalinidad de la muestra de agua del ejercicio 1 y de la práctica
especificando claramente la referencia usada para juzgar los valores. .

Ensayo 2

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Volumetría por precipitación

Determinación de cloruros en aguas naturales

I. INTRODUCCIÓN

Los cloruros son los aniones más comunes en aguas naturales; son muy
solubles en agua. Provienen de la disolución de sales como el cloruro de
sodio que es el más abundante en la naturaleza. Por ejemplo encontramos
cloruros en todo tipo de agua (de mar, potable, manantiales, ríos, etc.);
también encontramos cloruros en yacimientos de sal y se le ha dado uso
diverso; domestica e industrialmente se usa la sal de mesa; muchos
productos procesados usan la sal como complemento (quesos, salsas, etc.):
La cuantificación de cloruros es entonces frecuentemente solicitado y de
interés practico. Los cloruros cuando reaccionan con ciertos cationes,
especialmente con iones plata Ag+, precipitan; es decir, el cloruro de plata es
totalmente diferente al cloruro de sodio; el cloruro de plata es muy insoluble.
Este carácter insoluble se expresa por la solubilidad de la sal o por el valor
de la constante de producto de solubilidad. Esta cualidad se aprovecha para
su identificación y cuantificación. Por ejemplo si queremos saber
rápidamente, en el momento, si el agua que esta usando es destilada (o
desionizada) o no agregamos unas gotas de nitrato de plata (que es la fuente
de plata soluble) y si hay presencia de cloruros (por que hay sales)
inmediatamente ocurre la aparición de un precipitado blanquecino que es
indicador de que el agua esta con coluros. En el laboratorio se mide la
cantidad de iones plata que se gasta para precipitar todos los cloruros de un
peso o volumen de muestra y con ello indirectamente la concentración de
este en la muestra. En la presente práctica utilizaremos como muestra agua
de mar y agua potable.

II. OBJETIVO

Determinar el porcentaje % (p/v) y partes por millón (ppm) de cloruros en

aguas naturales utilizando la volumetría por precipitación por el método de
mohr.

III. FUNDAMENTO

¿Cómo averiguamos el peso de cloruros en una determinada cantidad de

muestra de agua?. Pues se averigua la cantidad de iones plata, en términos
de milimoles, que se gasta para precipitar todos los cloruros que hay en un
determinado volumen de muestra tomada en base a la reacción química:

Ag + + Cl - --------------- AgCl (precipitado blanco)

# mmoles de Cl - en la muestra = # mmoles de Ag+ gastado x F.E.

Gráficamente:

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mmoles Cl - mmoles Ag +
en la muestra en el valorante

Una formula general para el calculo de la concentración de cloruros es:

El porcentaje de cloruros y partes por millón (p/v) de una muestra de agua
se puede calcular utilizando las siguientes relaciones:

% Cl- (p/v) = W(g) de Cl- en la muestra x 100 y

W(mL) de muestra de agua

ppm Cl- (p/v) = w(g) de Cl- en la muestra x 106

V(mL) de muestra de agua

Luego el peso de cloruros se averigua con la relación:

w(g) de cloruros = # de mmoles de Cl - x peso de 1 mmol de cloruros

Transformando las unidades de expresión partes por millón de cloruros

también significa miligramos de cloruros por litro de agua de la muestra.

% Cl- (p/v) = VAgNO3 x M AgNO3 x peso de 1 mmol de Cl- x 100

V(mL) de muestra de agua

ppm Cl- (p/v) = VAgNO3 x M AgNO3 x peso de 1 mmol de Cl- x 106

V(mL) de muestra de agua

¿Cómo se detecta el punto de equivalencia? Como en los otros casos de

volumetría, con un tercer reactivo indicador de color; es decir utilizando un
tercer reactivo; en este caso este tercer reactivo reacciona con los iones plata
que también precipita pero con la ventaja que justo después que hayan
precipitado todos los cloruros de la muestra (un caso de mucha coordinación
natural); este tercer reactivo se trata de los iones cromato, CrO42- , usándose
cromato de potasio en solución como fuente; las reacciones que ocurren son:

Ag + + Cl - ------------------- AgCl (precipitado blanco)

2Ag+ + CrO4 2- ------------- 2 Ag2CrO4 (precipitado rojo ladrillo)

El precipitado rojo ladrillo que en contraste con el precipitado blanco de

cloruro de plata indica el punto final de la valoración. También en este caso
podemos decir que hay una aplicación de la “ley natural del mas fuerte”; la
fortaleza se refiere a la mayor afinidad de los iones cloruro para precipitar con
los iones plata; ambos iones, cloruros y cromatos, son afines por la plata,

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pero la plata es mas a fin, por consiguiente aparece primero el precipitado de

cloruro de plata y luego el de cromato de plata y por eso aparece primero.
Las sales insolubles en realidad no son 100,00 % insolubles; lo que sucede
que hay una muy pequeña cantidad que se solubiliza o disuelve; esta “muy
pequeña cantidad” varía con el tipo de sal. La solubilidad de las sales
“insolubles” se mide por su constante de producto de solubilidad, Kps, cuyo
valor guarda relación con la solubilidad (simbolicemos con S y se expresa en
moles / litro); a mayor solubilidad (S), mayor valor de Kps (para un mismo tipo
de disociación iónica); por ejemplo:

a.) Para la sal de cloruro de cloruro de plata:

AgCl(s) --------------- Ag+ + Cl-
S mol/L S mol/L S mol/L

Kps =  Ag+ Cl-  = S x S = S2 = 1,8 x 10-10

b.) Para la sal de cromato de plata

Ag2CrO4 ------------- 2 Ag+ + CrO42-
S mol/L 2S mol/L S mol/L

Kps =  Ag+ CrO42-  = (2S)2 x S = 4S3 = 1,1 x 10-12

Requerimiento de las condiciones del medio donde ocurrirá la

reacción.- Es importante señalar que debe controlarse el pH del medio
donde ocurrirá la reacción; el pH del medio debe corresponder al ligeramente
neutro a ligeramente alcalino (pH no mayor a 8,5 ); esto debido a que si el
pH es muy alcalino la plata precipita como hidróxido de plata y se comete
error en la cuantificación; y si el medio es muy ácido el cromato se transforma
a dicromato y en estas condiciones no precipita con la plata y no cumple su
papel de indicador coloreado (nunca aparece color);

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IV. REQUERIMIENTOS

MATERIALES

 02 Matraz erlenmeyer
 01 Matraz volumétrico de 50 mL
 01 Matraz volumétrico de 100 mL
 01 Bureta de 25 mL
 01 Frasco lavador
 Pipetas de 2, 3, 5, 10 y 20 mL

REACTIVOS
 Muestra de agua de mar o de pozo
 Muestra de agua potable
 Solución de HNO3 alrededor de 0,01 M
 Solución de NaOH alrededor de 0,01 M
 Solución estandarizada de AgNO3 0,1 M o lo indicado en la etiqueta
 Solución de fenoftaleina
 Solución de K2CrO4 al 2 %

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V. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Preparación del valorante AgNO3

 Alistar la bureta de 25 mL tomando precauciones de limpieza.
 Enjuagar con un poco de la solución de AgNO3 valorante.
 Enrasar la bureta con la solución de AgNO3.

Preparación de la muestra de agua de mar

Debido a que la concentración de cloruros en el agua de mar es bastante alta
(por eso se expresa en porcentaje), es recomendable hacer una dilución de
la muestra ; podría tomarse una fracción muy pequeña , pero la probabilidad
de cometer error es mayor, en este caso entonces haremos una dilución;
 Alistar 01 matraz volumétrico de 50 mL
 Identificar con R1
 Tomar una alícuota de 5 o 10 mL de la muestra de agua de mar
 Agregar al matraz volumétrico y enrasar con agua destilada .
 Agitar el matraz volumétrico por unos 10 segundos
 Tomar una alícuota de 20 o 25 mL
 Transferir al matraz de 250 mL
 Agregar unas tres a cuatro gotas de fenoftaleina. Si la solución se torna
coloreada agregar gotas de ácido nítrico; o gotas de NaOH si la
solución se torna incolora, en ambos casos agregar hasta que la
solución quede ligeramente rosado.
 Agregar unas 10 gotas del indicador K2CrO4
 Agitar ligeramente.

Proceso de titulación

 Dejar caer gota a gota la solución de nitrato de plata desde la

bureta mientras va agitando; se notara la aparición de un color rojo
ladrillo que rápidamente desaparece.
 Seguir titulando hasta que el color rojo ladrillo permanezca
constante.
 Registrar los resultados.

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Solución de AgNO3 estandarizada

Alícuota de dilución de muestra

con Cl y gotas de CrO42-

Preparación y titulación de la muestra de agua potable

Debido a que la concentración de cloruros en el agua potable es pequeña

(por eso es mas fácil expresar en partes por millón) no es necesario hacer
una dilución previa; al contrario es necesario tomar un volumen mayor.

 Alistar un matraz volumétrico de 50 o 100 mL

 Identificar con R1.
 Tomar 50 o 100 mL de muestra de agua potable
 Agregar de tres a cuatro gotas de fenoftaleína para averiguar el pH
del medio.
 Proceder de la misma manera que para el caso del agua de mar a
partir de agregar HNO3 o NaOH, hasta que la solución este lista
para titular.
 Titular de la manera que para el agua de mar.
 Registrar los datos.

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VI. RESULTADOS

Cuadro 1. Resultados de las repeticiones de agua potable o de río.

PROCEDENCIA DE
MUESTRA:.................................................................................

Datos R1 R2 R3
Volumen de muestra
Volumen de dilución
Volumen de alícuota
Volumen de AgNO3 gastado
# de milimoles de cloruros en la
muestra
Peso de cloruros en la muestra
% de Cloruros (p/v)

ppm de cloruros

Promedio de ppm de cloruros

Cuadro 2. Resultados de las repeticiones de Agua Potable

PROCEDENCIA DE MUESTRA:--------------------------------------------------------------

Datos R1 R2 R3
Volumen de muestra
Volumen de AgNO3 gastado
# de milimoles de cloruros en la
muestra
Peso de cloruros en la muestra
% de Cloruros (p/v)

ppm de cloruros

Promedio de ppm de cloruros

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VII. CUESTIONARIO

1. ¿Por qué no se usa HCl en vez de HNO3 cuando se va ha neutralizar la

solución problema antes de proceder a la titulación o qué recomendación
práctica haría en caso de usarse HCl?

2. ¿Cuántas veces más concentrado es la concentración de cloruros en la

muestra de agua en comparación a la otra muestra de agua?

3. Una muestra de 15 mL de agua de mar se tituló directamente con 53,6

mL de nitrato de plata 0,6300 M. Calcular los gramos de cloruro de sodio
por litro de agua de mar.

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Ensayo 3
Volumetría por formación de complejos
Determinación de la Dureza Total en aguas naturales

FUNDAMENTOS
La dureza del agua es una expresión de la suma de los cationes Ca2+ y Mg2+ en
una muestra de agua. Estos cationes forman sales insolubles con jabones
disminuyendo su efectividad, también forman depósitos de sarro en los
calentadores de agua. La forma de expresar la dureza del agua es en mg/L de
CaCO3. Una excelente forma de determinar la dureza del agua es por titulación
complexométrica con una solución del ácido etilendiamintetraacético EDTA.

Cuando un ligando forma complejos con dos iones metálicos en una solución, el
ligando formará complejos preferentemente con el ion metálico que produce el
complejo con mayor constante de estabilidad. En el caso de la determinación de
la dureza. La titulación con el EDTA formará complejos con el Ca2+ y el Mg2+.

Ca2+ + EDTA4-  (EDTA-Ca)2-: K = 10+10.7

Mg2+ + EDTA-2  (EDTA-Mg)2-: K = 10+8.7

Figura 1. Complejo formado entre el ion Ca2+ y el ligando EDTA.

Debido a que la constante de estabilidad del calcio es significativamente mayor

que la del Magnesio, la reacción con el calcio procede hasta completarse antes
de que el EDTA reaccione con el Magnesio.

Cuando un ligando que forma un complejo muy estable con un ion metálico es
adicionado a la solución del ion metálico acomplejado con otro ligando de
complejo menos estable, el agente complejante más fuerte tiende a
descomponer el complejo existente y formar un nuevo complejo con el ion
metálico.

Al añadir el agente complejante Negro de Ericromo T (NET) a una solución que

contiene Mg2+ y Ca2+, se forma un complejo con el Mg2+. El complejo NET-Mg
(K = 10+7) es más débil que el complejo EDTA-Mg (K=10+8.7).

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Figura 2. Complejo NET-Mg color rojo

El color del complejo NET-Mg es rojo, y el color del NET no acomplejado es azul.
Una solución con exceso de NET es púrpura. En la determinación de la Dureza
la adición del EDTA, se produce un cambio de color del púrpura al azul cuando
el color rojo del complejo NET-Mg es consumido totalmente.

El método para la determinación de la Dureza Total a utilizar en la presente práctica es

el método Standard Methods 2340C.

Para agua de bebida la dureza puede ser clasificada como:

Suave 0-60 mg/L
Medio 60-120 mg/L
Dura 120-180 mg/L
Muy dura >180 mg/L

TOMA DE MUESTRA

Tomar una muestra de 100 mL en un recipiente de plástico o vidrio, si se va a guardar

por cierto tiempo se adiciona HNO3 hasta pH<2, tiempo máximo de almacenamiento 6
meses.

PROCEDIMIENTO
a. En un matraz erlenmeyer colocar 5 - 20 mL de muestra.
b. Adicionar 1 mL de buffer pH 10 y un punta de espátula de indicador NET.
c. Titular la muestra utilizando solución valorada de EDTA, el final de la titulación
se observa cuando se produce el viraje de color rojo intenso a un color azul.

CALCULOS
VEDTA  M EDTA  10 5
mg CaCO3 / L 
V (ml muestra)

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NORMAS TÉCNICAS PERUANAS RELACIONADAS

Agua Potable
NTP 214.003.87
Estándar de Calidad Ambiental del Agua del Perú.

CUESTIONARIO

1) 20 mL de una muestra de agua de pozo de la Universidad gasto 1.2 mL de

EDTA 0.2 M.¿Cuál es la dureza total de la muestra?¿Esta muestra cumplirá
con la NTP 214.003.87?
2) ¿Por qué se representa la dureza en unidades de mg CaCO3/L?
3) ¿Qué efectos en la salud puede ocasionar tomar agua con elevados
valores de dureza?
4) ¿Podría utilizar un tratamiento por intercambiadores iónicos, para
aguas con dureza de 800 mg/L?
5) Una muestra de agua ha reportado el siguiente análisis:

Especie Na+ K+ NH Ca2 Mg2+ Ba2 F- NO Cl- SO HC

1
 2
O 13
+ +
Química 3
4 4
Concentra 10,2 1,1 1,3 168 164, 0,3 0,9 0,8 6,3 30,1 284
c 5 5 9 8 6 2 5 4 6
mgCaCO3/
L

Determinar la dureza total

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Ensayo 4
Volumetría redox
Determinación de Oxígeno Disuelto – Método Winkler
FUNDAMENTOS
Los niveles de oxígeno disuelto (OD) en aguas naturales y residuales dependen de la
actividad física, química y bioquímica en el cuerpo de agua. El análisis del oxígeno
disuelto es un test importante en el control de la contaminación del agua y procesos de
tratamientos de aguas residuales.
El método para la determinación de OD a utilizar en la presente práctica es el método
iodométrico de Winkler Standard Methods 4500-O C

Reacciones involucradas
MnSO4 + 2KOH + 4KI  Mn(OH)2 + K2SO4 + 4KI
2 Mn(OH)2 + O2 + 4KI + 2H2O  2Mn(OH)4 + 4KI
2 Mn(OH)4 + 4 H2SO4 + 4KI  2 Mn(SO4)2 + 8 H2O + 4 KI
2 Mn(SO4)2 + 4KI  2 Mn(SO4) + 2 K2SO4 + 2I2
2 Na2S2O3 + I2  Na2S4O6 + 2 NaI

TOMA DE MUESTRA
Colectar las muestras cuidadosamente, el método de toma de muestra depende del tipo
de fuente a muestrear, la muestra no debe ser agitada o tener contacto con el aire,
debido a que estas condiciones provocan cambio en el contenido gaseoso. Muestras
profundas de ríos, lagos o reservorios y muestras de agua caliente, necesitan especiales
precauciones para eliminar cambios en la presión y temperatura.
Muestras superficiales de agua son tomadas en botellas de 300 mL de capacidad con
tapas esmeriladas, evitar que la muestra entre en contacto con el aire o sea agitada.

PRESERVACIÓN DE MUESTRA
Determinar el OD inmediatamente en muestras que contienen apreciable demanda de
oxígeno o iodo. Muestras que no contienen demanda de iodo pueden ser almacenadas
por algunas horas sin cambio alguno después de la adición de la solución de sulfato
manganoso (MnSO4), solución de yoduro álcali y H2SO4, seguido por agitación. Proteger
las muestras de la luz solar y titular lo más pronto posible.
REACTIVOS
a. Solución de sulfato manganoso: Disolver 480 g de MnSO4.4H2O, en agua
destilada, filtrar y diluir en 1 L. La solución de MnSO4 no debe tener un color con
el almidón cuando se adiciona la solución de KI.
b. Reactivo álcali yoduro de azida: Disolver 500 g de NaOH y 135 g de NaI en agua
destilada y diluir en 1 L. Adicionar 10 g de NaN3, disueltos en 40 mL de agua
destilada.
c. Ácido sulfúrico concentrado (H2SO4).
d. Almidón: Disolver 2 g de almidón en 100 mL de agua destilada caliente.

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e. Titulante estándar de tiosulfato de sodio (Na2S2O3): Disolver 6,205 g de

Na2S2O3.5H2O en agua destilada. Adicionar 1,5 mL de NaOH 6N y diluir a 1 L.
PROCEDIMIENTO
1. A la muestra colectada en una botella de 300 mL, adicionar 1 mL de solución de
MnSO4, seguidamente adicionar 1 mL del reactivo álcali ioduro de azida. Tapar
cuidadosamente para eliminar burbujas de aire y mezclar moviendo la botella por
algunos minutos. Cuando el precipitado ha sedimentado suficientemente
(aproximadamente la mitad del volumen de la botella), adicionar 1 mL de H2SO4
concentrado. Volver a tapar y mezclar agitando el envase varias veces hasta la
disolución completa. Titular un volumen correspondiente a 200 mL de la muestra
original después de la corrección por pérdida de la muestra reemplazada con los
reactivos. Debido a que en total se agregó 2 mL de reactivos en una botella de 300
mL, titularemos:
200  300
 201mL
300  2
2. Titular con solución de Na2S2O3 0.025 M a un color amarillo pálido. Adicionar unas
gotas de solución de almidón y continuar la titulación hasta que desaparezca el color
azul.

CÁLCULO
Para la titulación de 200 mL de muestra, 1 mL de Na2S2O3 0.025 M = 1 mg OD/ L.

LEGISLACIÓN PERUANA RELACIONADA

Aguas Naturales

Aguas Residuales
No aplica

CUESTIONARIO

1) Al determinar el contenido de Oxígeno Disuelto de una muestra de agua

subterránea se obtuvo un gasto de 3 mL de solución de Na2S2O3 0.025M.
¿Cuál es el valor del oxígeno disuelto?
2) ¿Cómo varía el contenido de Oxígeno Disuelto (mg/L) en el agua con la
temperatura, conductividad eléctrica y los msnm del agua –considere la Ley
de Henry? ¿Cuál considera Ud. que es la razón de tener una temperatura
máxima permisible de 35ºC en la D.S. Nº 003-2002 – PRODUCE?
3) Exactamente 100 kg de caña de azúcar (dextrosa) C12H22O11, han sido
descargados accidentalmente a un pequeño canal saturado con
oxígeno a 25 ºC (solubilidad del oxígeno a 25 ºC es 8 mg/L). ¿Cuántos
litros de agua podrían estar contaminados, (suponer que se ha
removido todo el oxígeno disuelto)?

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