Métodos Microscópicos

Este método se basa en la medición de las partículas

independientemente de su forma contra un patrón de referencia ´para
el tamaño. Para esto se toma alrededor de 0.2g de muestra y se
observa al microscopio de transmisión de electrones, de barrido
electrónico a luz, en un cuadro cuadriculado con ayuda de un
micrómetro.
El tamaño de partícula detectado dependerá de la resolución del
microscopio, llegando a ser el tamaño del orden de 0.001 a0.05 uM
Si se utiliza un microscopio de transmisión de electrones. Para fines
practicas basta con un microscopio con objetivos de 40 a 100X donde
se puede hacer conteos de tamaños de partículas desde 0.5 – 1000
uM
Esta técnica requiere experiencia del análisis en la preparación y
conteo de partículas
Diámetros equivalentes: diámetro del área proyectada, da; diámetro
del perímetro proyectado, dp; diámetro de Feret, df; y diámetro de
Martin, dM.
Preparación de la muestra y condiciones de análisis: las muestras
preparadas para microscopia óptica deben dispersarse de forma
adecuada en el portaobjetos para evitar el análisis de partículas
aglomeradas. Las muestras para microscopia electrónica de barrido
se preparan por fijación a cabos de aluminio antes de revestirlas con
unas partículas de oro de unos pocos nm de grosor.
Las muestras para microscopia electrónica de transmisión suelen
incluirse en resina para cortarlas con un micrótomo y situarlas sobre
una rejilla metálica antes de proceder al revestimiento metálico.
Fundamento de la medición: el análisis del tamaño con microscopio
óptico se hace a partir de las imágenes bidimensionales de las
partículas que, en general, se supone están orientadas
aleatoriamente en tres dimensiones del espacio .
Método de la zona sensible a la corriente eléctrica (contador Coulter):
Preparación de la muestra y condiciones del análisis: Las muestras
de polvo se dispersan en un electrolito, donde forman una
suspensión muy diluida, que suele someterse a una agitación por
ultrasonidos durante un cierto periodo para romper los aglomerados
de partículas para ayudar a desglomerar las partículas también
puede añadirse un dispersante
Diámetro equivalente: diámetro del volumen, dv.
Fundamento de la medición: se hace pasar la suspensión de
partículas por un agujero de una dimensión exacta que se practica
con un conjunto de cristales de zafiro en la pared de un tubo de vidrio
hueco. Los electrodos, situados a cada lado del agujero y rodeados
por una solución electrolítica, monitorizan el cambio de la señal
eléctrica que ocurre cuando una partícula ocupa momentáneamente
el orificio y desplaza un volumen de electrolito idéntico al suyo.
El volumen del liquido electrolito desplazado del agujero por la
presencia de una partícula produce un cambio de la resistencia
eléctrica entre los electrodos que es proporcional al volumen de la
partícula. El cambio de la resistencia se transforma en un pulso de
voltaje que se amplifica y procesa electrónicamente.
Métodos de dispersión de luz laser
Diámetros equivalentes: diámetro del área, da; diámetro del volumen,
dv
Preparación de la muestra y condiciones del análisis: dependiendo
del tipo de medición que se vaya a efectuar y del equipo utilizado, las
partículas pueden presentarse suspendidas en liquido o aire.
Fundamento de la medición: la base de los analizadores, tanto de
partículas grandes como de partículas pequeñas, es la interacción de
la luz laser con ellas
Difracción fraunhofer: cuando el tamaño de las partículas es mucho
mayor que la longitud de onda de la luz, cualquier interacción entre
las partículas y el haz luminoso hará que este se disperse en
dirección anterógrada, con un cambio pequeño del ángulo.
Este fenómeno se conoce como difracción Fraunhofer y produce
patrones de intensidad de la luz que ocurre a intervalos angulares
regulares y que son proporcionales al diámetro de la partícula que
provoca dispersión
Espectroscopia de correlación de fotones (ECF): se utiliza el principio
del movimiento de browniano para medir el tamaño de las partículas.
La ECF analiza los patrones de cambio constante de la luz laser
dispersada o difractada por las partículas en movimiento browniano
y monitoriza la velocidad de cambio de luz dispersada durante la
difusión.
Método de sedimentación
Diámetros equivalentes: diámetro de resistencia de razonamiento,
dld, una esfera con una fuerza de resistencia equivalente a una
partícula del mismo diámetro en el mismo liquido y a la misma
velocidad, diámetro de stokes dst, el diámetro de una partícula
medido durante la sedimentación a velocidad constante en
condiciones de flujo laminar
Preparación de la muestra y condiciones del análisis: la distribución
del tamaño de las partículas puede determinarse examinando el
polvo cuando sedimenta. Si el polvo es hidrófobo, quizá sea
necesario añadir un agente dispersante para facilitar el
humedecimiento.
Si el polvo es soluble en agua, será necesario utilizar líquidos no
acuosos o efectuar el análisis en un gas
Fundamento de la medición: las técnicas del análisis del tamaño por
sedimentación puede dividirse en dos grandes grupos, según el
método de medición utilizado
Pipeta de Andreasen; consiste en un cilindro graduado de 200mm
que puede albergar alrededor de 500mL de una suspensión en un
liquido. En el centro del cilindro se coloca una pipeta que se mantiene
en posición con ayuda de un tope de vidrio, de forma que el extremo
coincida con el nivel cero.
Una llave de tres vías permite que el liquido entre en un reservorio de
10mL que después puede vaciarse hacia un matraz o un tubo de
centrifugación.
 Bibliografía

Documento elaborado por:

Dr. José Calero Montoya
Lic. Tania Mercedes Díaz Pérez
Lic. Lester Gustavo Torrez Muñoz
Septiembre, 2017