UNIVERSIDAD MAYOR DE SAN SIMÓN

FACULTAD DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA

RECUENTO TOTAL DE
BACTERIAS AEROBICAS
MESÓFILAS
PRACTICA 1º

NOMBRE: FRANCO VASQUEZ ALEJANDRA

DOCENTE: LIC. FLORES RIOS ABRAHAM
AUXILIAR: UNIV. INGRID
GRUPO: MARTES

COCHABAMBA - BOLIVIA

RECUENTO TOTAL DE BACTERIAS AERÓBICAS MESÓFILAS

1. INTRODUCCION
 En el recuento de microorganismos aerobios mesofilos se estima la flora total, ósea
número de células viables o unidades formadoras de colonias (U.F.C) en un alimento,
sin especificar los tipos de microorganismos.
Esta determinación refleja la calidad sanitaria de los productos analizados indicando,
además de las condiciones higiénicas del mismo.
Los recuentos de microorganismos viables se basan en el número de colonias que se
desarrollan en placas previamente inoculadas con una cantidad conocida de alimento e
incubadas en unas condiciones ambientales determinadas. Estos recuentos no pueden
considerarse como recuentos totales ya que solo son susceptibles del contaje aquellos
microorganismos capaces de crecer en las condiciones establecidas. Se puede
conseguir una amplia gama de condiciones variando la temperatura, la atmósfera, la
composición del medio y el tiempo de incubación.

2. OBJETIVOS:
2.1. OBJETIVO GENERAL: Reconocer o verificar si el rango de carga microbiana
observada en la placa de cultivo está dentro de parámetros de normas nacionales
o internacionales para el respectivo producto analizado (Carne molida)
2.2. OBJETIVOS ESPECIFICOS:
 Mejorar las habilidades para la manipulación de instrumentos en los procesos
de cultivo de microorganismos
 Emplear nuestros conceptos y conocimientos teóricos para la demostración de
presencia de carga microbiana en la muestra designada
 Manejar conceptos y términos adecuados referentes a la práctica de cultivo de
la muestra designada
 Reconocer y prevenir posibles formas de contaminación a la muestra y al
cultivo durante el análisis
3. MARCO TEORICO:
3.1. DEFINICION: Son las bacterias que descomponen la materia orgánica a
temperaturas que oscilan entre 30 y 40 ºC. El agua es utilizada como medio
de eliminación de excretas y otros desechos, estos son las llamadas
bacterias mesofilicas.
3.2. CARACTERÍSTICAS
Bacterias aerobias mesófilas:
 Se multiplican en aerobiosis
 Temperatura de incubación entre los 20 y los 37°C
 Pueden ser patógenas o saprofitas
Recuentos altos en alimentos estables a menudo indican materias primas
contaminadas o tratamientos no satisfactorios desde el punto de vista
sanitario.
En los productos perecederos pueden indicar también condiciones
inadecuadas de tiempo/temperatura durante su almacenamiento.
La presencia de un número elevado de bacterias aerobias mesófilas que
crecen bien a temperatura corporal o próxima a ella, significa qué pueden
haberse dado condiciones favorables a la multiplicación de los
microorganismos patógenos de origen humano o animal.
 Todas las Bacterias patógenas conocidas vehiculadas por los alimentos son
mesófilas y en algunos casos contribuyen con su presencia a los recuentos
en placa encontrados.
3.3. IMPORTANCIA
Las bacterias mesofilicas aerobias proporcionan información acerca del
número de bacterias viables, por lo que representan un recurso valioso
adicional para determinar el grado de exposición de los alimentos a la
contaminación por microorganismos. El recuento de estos organismos
representa un respaldo al significado atribuido a los resultados de los análisis
de los coliformes. Durante la determinación de bacterias mesófilas aerobias,
se observaron valores muy variados dentro de los diferentes lugares de
muestreo, esta variación puede deberse a factores tales como: la frescura del
pescado, la temperatura y el tiempo de almacenamiento

3.4. UN RECUENTO ELEVADO PUEDE SIGNIFICAR:

 Excesiva contaminación de la materia prima.
 Deficiente manipulación durante el proceso de elaboración.
 La posibilidad de que existan patógenos, pues estos son mesofilos.
 La inmediata alteración del producto.
 El recuento de mesofilos nos indica las condiciones de salubridad de
algunos alimentos.
4. PROCEDIMIENTO
4.1. MATERIALES

MATERIALES REACTIVOS
4tubos de ensayo de 600 ml matraces de 250 ml 25 gr de chorizo parrillero
4 tapas de tubos de ensayo 1 encendedor 2lt de Agua destilada
1 Pipeta de 10 ml 1 rotulador permanente 9 gr Sal fina de mesa
5 pipetas de 2 ml c/u Papel aluminio Alcohol 97
3 placas Petri Incubadora Alcohol para desinfectar
2 cucharas Autoclave Solución desinfectante
1 par de tijeras 1 gradilla 12,34 gr de Agar PCA
1 Balanza 1Recipiente para desinfección
1 mechero Trapos y secadores
1 bolsa de stomacher

4.2. PROCEDIMIENTO
 Preparamos todo el material, solución salina y el agar para llevar a
autoclave para la esterilización correspondiente a 121ºC durante 15
minutos, cabe recalcar que ambas preparaciones fueron para toda la
clase, y cada grupo tuvo una cantidad determinada de ambas
soluciones, siendo así, se preparó 2 L de solución salina y 530 ml de
agar, cabe mencionar que todo matraz estaba rotulando con la cantidad
y el nombre del respectivo contenido.
 Realizamos la desinfección del lugar de trabajo, preparamos el área para
el análisis y encendimos el mechero para evitar una contaminación,
todo el trabajo se realizó con la presencia de mechero encendido.
 Después de sacar el material, solución salina y agar del autoclave ya
esterilizado Preparamos los tubos con la dilución correspondiente a 9
ml de solución salina por tubo; rotulamos tanto los tubos con la dilución
(-2,-3,-4,-5); y las cajas Petri con la dilución de: (-1,-3-5).
 Pesamos 25 gr de la muestra (picada y homogeneizada) a analizar en
una bolsa de Stomacher, luego mezclamos con 225 ml de la solución
salina y dejamos reposar por 30 segundos y rotulamos la dilución de la
bolsa como -1.
 nota: esterilizamos las bocas de los tubos en los pasos a seguir más
adelante, flameando levemente en el mechero después de destapar el
mismo y al taparlo.
 Con una pipeta de 2 ml, extrajimos 2 ml de la solución madre (dilución
-1), vertimos 1 ml en el tubo con dilución -2 agitamos suavemente para
diluir correctamente, y el otro ml en el centro de la caja Petri -1,
desechamos la pipeta en un recipiente con desinfectante, cerrar y
reservamos la bolsa de Stomacher con la dilución -1.
 Con otra pipeta de 2 ml extrajimos 1 ml del tubo de dilución -2 y
vertimos en el tubo de -3 homogeneizamos correctamente,
desechamos la pipeta utilizada en el recipiente con desinfectante.
 Del tubo -3, extrajimos 2ml con una pipeta adecuada, vertimos 1 ml en
el tubo de dilución -4 luego mezclamos la solución y el otro en la caja
Petri -3, desechamos la pipeta utilizada.
 Tomamos 1 ml de la dilución -3 con una pipeta y vertimos en el tubo -4,
desechamos la pipeta y homogeneizamos la mezcla.
 Con una pipeta de 2 ml extrajimos del tubo -4, 1 ml de muestra y lo
vertimos en el tubo -5.
 Tomamos 1 ml de la dilución -5 con una pipeta de 2 ml y lo vertimos en
la placa con el mismo número de dilución.
 Vertimos el agar, aproximadamente 20 – 25 ml por placa, o hasta notar
que el espesor es de 2 – 3 mm (no debe estar muy caliente, o matará
toda la carga microbiana) en las placas Petri en orden según su dilución
con cuidado de no abrir demasiado las tapas y cerca del mechero,
mezclamos con movimientos circulares suaves las cajas Petri sobre el
mesón, sin levantar las cajas , llevar a incubadora, y volvimos en 24 y 48
horas para revisar el crecimiento microbiano en colonias.
 Cada 24 y 48 horas se hará un recuento de las placas, -3 y -5 la placa -1
es rotulamos como incontable desde las 24 horas después del cultivo.

5. DATOS, CALCULOS Y RESULTADOS:
5.1. DATOS

Placa y Numero de Colonias

Tiempo de
Incubacion [hrs] -1 -3 -5
24 Incontable Incontable 48
48 Incontable Incontable 70

5.2. RESULTADOS: Elegimos la placa 5 porque entra dentro del rango del Recuento
total de bacterias aerobias mesofilas que es 30 - 300

70 x 103 = 7,0 x 104 UFC/g

6. CONCLUSIONES:

Según DIGESA (Dirección General de Salud Ambiental e Inocuidad Alimentaria) de

Perú el rango de aceptación de microorganismos mesofilos en alimentos como carnes
con adición de algún componente tiene una tolerancia de mínimo 106 a máximo
7
10 ; tomando en cuenta este parámetro y siendo publicado hace 4 años por
DIGESA institución reconocida y vigente hasta ahora en el vecino país, Perú, se afirma
que el producto carne molida es apto para el consumo de la población con una carga
microbiana de 7,0 x 104 UFC/g