Ecuaciones de diseño de biorreactor

Leyes de velocidad de levadura Saccharomyces cerevisiae

Saccharomyces cerevisiae es un hongo unicelular que es capaz de seguir dos rutas
metabólicas para obtener la energía necesaria para llevar a cabo sus procesos
vitales: la fermentación alcohólica y la respiración aerobia. La primera se caracteriza
por el desprendimiento de CO2 y la producción de etanol mediante la siguiente
ecuación general:

Saccharomyces cerevisiae
𝐶6 (𝐻2 𝑂)6 − − − − − − − − − − − − − −−→ 2𝐶𝐻3 𝐶𝐻2 𝑂𝐻 + 2𝐶𝑂2 + 57 𝐾𝑐𝑎𝑙

El modelo que más comúnmente utilizado para describir la cinética de reacción se

basa en la ley de Michaelis-Menten, introducida en 1913. En 1942, esta ley fue
adoptada empíricamente por Monod. La ley de velocidad para Saccharomyces
cerevisiae es:

𝜇𝑚á𝑥 𝐶𝐿 𝐶𝑠
𝑟𝐿 =
𝐾𝑠 + 𝐶𝑠

La tasa de muerte celular es resultado de entornos difíciles, fuerzas de corte en el

mezclado, agotamiento local de nutrimentos y presencia de sustancias tóxicas. La
ley de velocidad es

𝑟𝑑 = (𝑘𝑑 + 𝑘𝑡 )𝐶𝑐

Además del consumo de sustrato para producir nuevas células, parte del sustrato
se emplea simplemente para mantener las actividades cotidianas de las células. El
término correspondiente de utilización para mantenimiento es:

𝑀𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑠𝑢𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜 𝑐𝑜𝑛𝑠𝑢𝑚𝑖𝑑𝑎 𝑝𝑎𝑟𝑎 𝑚𝑎𝑛𝑡𝑒𝑛𝑖𝑚𝑖𝑒𝑡𝑜 𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑟

𝑚=
𝑀𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑙𝑒𝑣𝑎𝑑𝑢𝑟𝑎𝑠 . 𝑇𝑖𝑒𝑚𝑝𝑜
Estequiometría

La estequiometría del crecimiento celular es muy compleja y varía con el sistema

de microorganismos, los nutrimentos y las condiciones ambientales, como pH,
temperatura y potencial redox. Para relacionar a nivel macro, el sustrato consumido
y el producto generado, se usan los llamados, coeficientes de rendimiento, (Yield
coefficients)

𝑀𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑛𝑢𝑒𝑣𝑎𝑠 𝑙𝑒𝑣𝑎𝑑𝑢𝑟𝑎𝑠 𝑓𝑜𝑟𝑚𝑎𝑑𝑎𝑠 𝛥𝐶𝐿

𝑌𝐿/𝑠 = =−
𝑀𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑠𝑢𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜 𝑐𝑜𝑛𝑠𝑢𝑚𝑖𝑑𝑜 𝛥𝐶𝑆

𝑀𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑝𝑟𝑜𝑑𝑢𝑐𝑡𝑜 𝑓𝑜𝑟𝑚𝑎𝑑𝑜 𝛥𝐶𝑐

𝑌𝑝/𝑠 = =−
𝑀𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑠𝑢𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜 𝑐𝑜𝑛𝑠𝑢𝑚𝑖𝑑𝑜 𝛥𝐶𝑆

Balance de materia (operación Batch)

𝑉𝑒𝑙𝑜𝑐𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑉𝑒𝑙𝑜𝑐𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑉𝑒𝑙𝑜𝑐𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑉𝑒𝑙𝑜𝑐𝑖𝑑𝑎𝑑

[ 𝑑𝑒 ] = [ 𝑑𝑒 ] − [ 𝑑𝑒 ] + [ 𝑑𝑒 ]
𝑎𝑐𝑢𝑚𝑢𝑙𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛 𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑑𝑎 𝑠𝑎𝑙𝑖𝑑𝑎 𝑔𝑒𝑛𝑒𝑟𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛

𝑑[𝐶𝐿 ]
= 𝐹0 − 𝐹𝐴 + (𝑟𝐿 − 𝑟𝑑 )
𝑑𝑡

𝑑[𝐶𝐿 ]
= (𝑟𝐿 − 𝑟𝑑 ) BIOMASA
𝑑𝑡

𝑑𝐶𝑠
= 𝑌𝐿 (−𝑟𝐿 ) − 𝑚𝐶𝐿 = −𝑟𝑠 SUSTRATO
𝑑𝑡 𝑠

𝑑𝐶𝑝
= 𝑟𝑝 = 𝑌𝑝 (−𝑟𝑠 ) PRODUCTO
𝑑𝑡 𝑠
 Criterios iniciales de diseño de un biorreactor.
 Tener caracterizado morfológica y bioquímicamente el cultivo a usar.
 Características hidrodinámicas del reactor: es necesario minimizar los
fenómenos de transporte en el reactor, para evitar gradientes de nutrientes,
temperatura.
 La cinética de crecimiento bacteriana debe está ampliamente estudiada.
 Asegurar la estabilidad genética del microorganismo, impidiendo que se
estimulen mutaciones.
 Esterilización lo más barata posible, hasta el punto de que, a pesar de su
importancia, y según el proceso, se llega a obviar.
 Control de las condiciones ambientales (T, pH,P,etc...).

Construcción y modo de operación.

 Facilidad para el escalamiento.
 Inclusión de sistemas de oxigenación adecuados a las exigencias del
microorganismo.
 Sistemas de muestreo para determinar las condiciones internas del
biorreactor.
 Adopción de refrigeradores, para mantener constantes las condiciones de
temperatura (la actividad microbiana genera una gran cantidad de calor, que
puede afectar negativamente a la producción).
 Materiales no tóxicos (ni para el microorganismo ni para el consumo).

Cálculo del volumen de la cámara de cultivo

Deseando una producción de 4 litros de cultivo con un factor de corrección de 0.20
en relación con el volumen

𝑉𝑟 = (𝑓𝑠 ∗ 𝑉𝑟 ) + 𝑉

Cálculo de la altura de la cámara de cultivo

Tomando un diámetro interno del recipiente de m, utilizándola fórmula del volumen
de un cilindro tenemos:
4𝑉𝑟
ℎ=
𝜋𝐷2
Cálculo para el sistema de agitación
Para establecer las condiciones de diseño del agitador es necesario determinar la
potencia para accionar el rodete, este cálculo deberá realizarse a partir de los datos
experimentales

Diámetro del rodete

Se toma la mitad del diámetro del tanque.

𝐷𝑟 = 0.5 𝐷

Altura entre el fondo del fermentador y el rodete

Se considera 1/3 del diámetro del equipo

1
ℎ𝑓 = 𝐷
3
Longitud del eje L
Es la altura del fermentador (h) menos la distancia entre el fondo del fermentador y
el rodete (ℎ𝑓 )

𝐿 = ℎ − ℎ𝑓

Longitud de la paleta 𝑳𝒑

Se considera ¼ de la longitud del diámetro del rodete

1
𝐿𝑝 = 𝐷𝑟
4
Altura de la paleta 𝒉𝒑

Se mide 1/5 de la longitud del brazo.

1
ℎ𝑝 = 𝐷𝑟
5

Calculo de la potencia del agitador

Las variables que influyen en la potencia consumida por el agitador son:
 Dimensiones principales del tanque y del rodete: Diámetro del tanque (d),
diámetro del rodete (Dr), altura del líquido (h), distancia del fondo del tanque
hasta el rodete (hf), y dimensiones de las paletas.
 Viscosidad (µ) y densidad (ρ) del fluido.
 Velocidad de giro del agitador (N).

Estas variables se calculan a través de números adimensionales, relacionando por

medio de gráficos, estas son: el número de Reynolds y el Número de Potencia y
dependerán de geometría del agitador y de si el diseño cuenta o no de placas
deflectoras.

Calculo del número de Reynolds

𝐷𝑟 2 𝑁 𝜌
𝑁𝑅𝑒 =
𝜇

Calculo del número de Potencia

Con este antecedente se puede recurrir a tablas que relacionan el Número de
Reynolds con el Numero de potencia en función de la forma de la paleta del agitador
a usar.

𝑃
𝑁𝑝 =
𝜌 𝑁 3 𝐷𝑟 5
Calculo del coeficiente total de transferencia de calor
Las correlaciones para el coeficiente de transferencia de calor para soluciones
agitadas en el interior de un recipiente y las paredes de la chaqueta tienen la
siguiente forma:

𝑈𝐷 1 𝜇 𝑚
= 𝑎 ∗ (𝑁𝑅𝑒 )𝑏 ∗ (𝑁𝑝𝑟 )3 ∗ ( )
𝑘 𝜇𝑤
El número de Prandt es:

𝐶𝑝 ∗ 𝜇
𝑁𝑃 =
𝑘

Nomenclatura

𝑟𝐿 = velocidad de crecimiento de levadura [=] g/dm3 • s

𝐶𝑏 = concentración de levadura [=] g/dm3

𝐾𝑠 = constante de Monod [=] g/dm3

𝐶𝑠 = concentración de sustrato [=] g/dm3

𝜇𝑚á𝑥 = velocidad de reacción específica de crecimiento máxima [=] s-1

kd kt = constante de muerte específica [=] h-1.

-𝑟𝑠 = La velocidad de desaparición de sustrato [=]g/dm3 • s

𝑟𝑝 = La velocidad de formación de producto [=] g/dm3 • s

𝑟𝐿 = La velocidad de muerte de levaduras [=] g/dm3 • s

𝑁𝑅𝑒 = Numero de Reynolds.

𝐷𝑟 = Diámetro del rodete [=] m

N= velocidad de rotación [=] rps

𝜌 = densidad del fluido [=] kg/m3

µ = viscosidad [=] kg/m s

𝑉 = 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑡𝑒𝑜𝑟𝑖𝑐𝑜 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑐𝑎𝑚𝑎𝑟𝑎 𝑑𝑒 𝑐𝑢𝑙𝑡𝑖𝑣𝑜 [=] m3

𝑓𝑠 = 𝑓𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 𝑑𝑒 𝑐𝑜𝑟𝑟𝑒𝑐𝑐𝑖𝑜𝑛

𝑉𝑟 = 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑟𝑒𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑐𝑎𝑚𝑎𝑟𝑎 𝑑𝑒 𝑐𝑢𝑙𝑡𝑖𝑣𝑜 [=] m3