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OBSERVACIÓN DE MITOSIS EN CÉLULAS VEGETALES

DAYANA MEJÍA (1611314)

BARBARA NOSSA (1611300)
CAMIL CELY (1611302)
LAURA NIETO ( 1611306)

UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA SANTANDER

GENÉTICA MOLECULAR
INGENIERÍA BIOTECNOLÓGICA
SAN JOSÉ DE CÚCUTA
2018
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INTRODUCCION
La división celular es un proceso por el cual a partir de una célula madre se producen dos

células hijas que genética, estructural y fundamentalmente son iguales entre si e iguales a la

propia célula madre. Para estudiar los parámetros del ciclo celular se utilizan tejidos en constante

renovación (tejidos en proliferación), en los que la duración total del ciclo con determinadas

condiciones es constante. En las plantas la mitosis se produce sobre todo en los meristemos, que

son los tejidos que permiten el crecimiento de la planta y que se encuentran, entre otros lugares,

en los extremos de los tallos y de las raíces.

El objeto de la presente práctica es identificar las células que se encuentran en mitosis y las

distintas fases de esta mediante la tinción y observación de meristemos de raíz.

OBJETIVOS
 Identificar los principales cambios morfológicos que se presentan durante la profase,
metafase, anafase, telofase y citocinesis en células meristemáticas de raíces de cebolla.
 Evaluar la importancia de la división celular en el desarrollo y crecimiento de un
organismo.
 Identificar mediante observación microscópica las diferentes fases de la mitosis en raíz.
MATERIALES EQUIPOS

 Raíces de cebolla o frijol  Microscopio

 Viales
 Portaobjetos y cubre objetos
 Papel filtro
 Hojilla o tijeras
 Pinzas
 Agua destilada
 Colchicina 0,05-0,5%
 Solución fijadora: Carnoy
 Solución de hidrolisis
 Orceina-acetica
 Aceite de inmersión y papel para
lentes
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PROCEDIMIENTO

OBSERVACIÓN DE MITOSIS EN CELULAS

VEGETALES

1.PRETRATAMIENTO 2. FIJACIÓN

1.Se fijan en Etanol 3p Acido

1. Usando una pinza de punta
acético y se deja a temperatura
bien fina se colectan las raíces
ambiente por 10 minutos.
aprox 2cm de longitud.
2. Se lavan con agua destilada.
3. Se coloca en frascos o viales
conteniendo Colchicina durante 3.HIDRÓLISIS
30min.
4. Luego eliminar la solución.
. 1. Se colocan las muestras en solución
de hidrólisis ácido acético al 45% y
ácido clorhídrico a 50°C.
4. COLORACIÓN Y
APLASTADO 2. En una incubadora liberando la
tensión superficial para que por medio
del aplastamiento se consiguen laminas
muy finas del tejido.

1. Se colocan las raíces en un portaobjetos. 3. Lavar con agua destilada.

2. Se agrega orceína-acética durante 15

minutos.
3. Se procede al aplastamiento o squash de
forma suave evitando movimientos del cubre
objetos.
5. OBSERVACIÓN EN
EL MICROSCOPIO
OBJETIVO DE 40X
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RESULTADOS
Se observaron al microscopio las diferentes células y las fases de la mitosis mostrando a
continuación separadas por sus fases así:

Figura 1. Células en telofase. En la figura 1 se evidencia con círculos células que se encuentran en

telofase, los cromosomas alcanzan los polos opuestos y el huso comienza a dispersarse. Luego se forman

sendas envolturas nucleares que se vuelven a formar alrededor de los dos conjuntos de cromosomas, que

una vez más se vuelven difusos. En cada núcleo reaparecen los nucléolos.
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Figura 2. Células en anafase. Anafase, la etapa más rápida de la mitosis, los centrómeros se separan

simultáneamente en todos los pares de cromátidas.

Figura 3. Células en metafase. Los pares de cromátidas se mueven dentro del huso, aparentemente

conducidos por las fibras del huso, como si fueran atraídos por un polo y luego por el otro.
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Figura 4. Células en profase. En la profase los centriolos se separan. Entre los pares de centriolos,
formándose a medida que estos se separan, están los micros túbulos que se transforman en las fibras
polares del huso.

DISCUSIONES
En este laboratorio se estudió el ciclo celular, además de esto se explicaron los procesos que

tienen lugar en este ciclo; como son la interfase y la mitosis. La interfase se subdivide en tres

fases que son: la fase G1, fase S y la fase G2. Y la mitosis donde ocurre cuatro sub etapas que

son: profase, metafase, anafase y telofase. Para poder dar como resultado dos células hijas.

Para comprobar las fases de la mitosis, se colocó previamente una cebolla en un vaso con agua,

luego de dos o tres días la cebolla tenía unas raíces las cuales utilizamos para evidenciar la

mitosis. A estas raíces se le hicieron unas preparaciones para su mejor observación al

microscopio.
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Al agregar el ácido clorhídrico y se deja actuar para que rompiera el núcleo y aparecieran los

cromosomas. La orceina-acetica fija o detiene la mitosis y también colorea las raíces de la

cebolla para ser llevadas al microscopio, además, esta misma ablanda los tejidos de las raíces,

facilitando el aplastamiento del tejido de las raíces y permite que se disgregue el materia. (López,

et al. 1983). En las muestras que realizamos obtuvimos unos resultados de poca calidad y una de

las razones que probablemente afectaron nuestros resultados, fue que el colorante que se utilizo

pudo estar viejo y no coloreo de la forma esperada a las células, ya que el grupo de la tarde

obtuvo resultados similares (poca coloración) incluso habiéndolo dejado más tiempo que

nosotros.

Por otro lado, no se obtuvo buenas muestras debido a que el tamaño de la muestra de las

raíces de la cebolla era más grandes de lo requerido; ya que, según como se indica en la guía de

laboratorio de Biología Celular de la Ing. Diana Cárdenas de la universidad Francisco de Paula

Santander indica que son 0,5cm de largo para poder encontrar células maduras que apenas estén

iniciando su ciclo de división celular.

Aunque el corte de la raíz de cebolla captura muchas células en diferentes fases del ciclo celular,

hay que tener presente que el ciclo celular es un proceso continuo. Los científicos han dividido el

proceso en 5 fases ya mencionadas, cada una caracterizada por importantes eventos, pero estas

divisiones son arbitrarias. Por esto, en las observaciones al microscopio, no se logró captar todas

las etapas, pero logramos concluir que en nuestra práctica de laboratorio la fase con mayor

porcentaje de visualización fue la etapa de la interfase y profase.

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CONCLUSIONES

 De esta práctica se puede concluir que la mayoría de células observadas estaban en

interfase y esto concuerda con la teoría debido a que normalmente el 90% de las células

se encuentran en esta fase

 Logramos identificar todas las fases a pesar de que la muestra no estaba muy buena y el

resultado no fue el esperado.

 También podemos concluir que el éxito de esta práctica depende de la calidad de la

muestra, la buena preparación de esta y el colorante a usar.

BIBLIOGRAFIA

 Cárdenas, D. Biología celular ingeniería biotecnológica [Mensaje en un blog].

Recuperado de : https://biologiacelularingbiotecnologia.jimdo.com/gu%C3%ADas-de-

clase/

 López, O at al. 1983. Informe de entrenamiento realizado en el centro de investigación de

costa rica.