Medios de cultivo

Introducción.- Uno de los sistemas más importantes para la identificación de

microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales
preparadas en el laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos
es el Medio de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo. Se han
preparado más de 10.000 medios de cultivo diferentes.

Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir
una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presión de oxígeno
adecuadas, así como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante.

La mayoría de las bacterias patógenas requieren nutrientes complejos similares en

composición a los líquidos orgánicos del cuerpo humano. Por eso, la base de muchos
medios de cultivo es una infusión de extractos de carne y Peptona a la que se añadirán otros
ingredientes.

Objetivo.- Aprender a preparar correctamente los principales medios de cultivo que se utilizan en
el laboratorio de Bacteriología como instrumento de suma importancia en la diagnostico de
bacterias patógenas dentro de los individuos

Materiales

- Stok Nº 1

- Stok Nº2

- Stok Nº3

- STOK Nº4

- Stok Nº5

- Bap

- Aguitador

- Vara aguitadora
- Balanza

- Agua destilada

- Auto clave

Metodologia.-Para poder realizar un medio de cultivo :

1º Pesar 20ml de las 5 clases destockmas

2º 1 litreo de agua destilada

3º 10 ml de Bap

4º Pasamos al agitador para poder tener una mezcla

5º Enfriar la muestra

6º Repartir el medio de cultivo en copas

7º Llevar a la autoclave a una temperatura de 120grados

Resultados.- Es un medio de cultivo que posteriormente nos servirá para poder infectar

una planta

Conclusiones.- En este laboratorio se aprendió a preparar un medio de cultivo y de

materiales pueden ser hechos, los distintos tipos de cultivo y pueden desarrollarse en la

laboratorio

Recomendaciones.- Se recomienda tener listos los instrumentos y mucho cuidadoco0n las

muestras en la medición

Anexos
 MEDIOS DE CULTIVO SOLIDO

Introduccion.-Una forma muy útil de poder aislar, identificar y conservar los

microorganismos es mediante el uso de medios de cultivo, inicialmente ideados por Pasteur
(que como ya sabemos se considera el padre de la microbiología), quien se dio cuenta que
los microorganismos podían crecer en soluciones que tuvieran azúcar y una fuente de
nitrógeno.

De ese tiempo hasta acá, ha pasado mucha agua debajo del puente y actualmente existen
medios muy especializados para microorganismos muy exigentes. La forma más sencilla de
clasificar los medios de cultivo es por su consistencia…entonces aparecen los medios de
cultivo sólidos y los medios de cultivo líquidos o también llamados caldos. En ambos
medios debe haber una buena cantidad de nutrientes que faciliten el crecimiento
bacteriano… y entonces cual es la diferencia?….pues la diferencia radica en la presencia de
una sustancia que se llama Agar o “Agar-Agar” y que es la encargada de darle la solidez y
consistencia al medio. Esta sustancia proviene, principalmente, de un alga llamada
Gelidium, aunque muchos otros géneros pueden servir como fuente de este polisacárido (es
decir, un azúcar grande formado por la unión de azúcares pequeños). Y como se obtiene del
alga?…Se toman sus semillas, se lavan, se secan, se realizan procesos de extracción,
filtración, purificación y desecación para que queden hojuelas o polvo y luego si
adicionarla al medio de cultivo.

OBJETIVOS.- Aprender a preparar un medio de cultivo solido

Materiales y Reactivos

- Auto clave
- Aguitador y calentador eléctrico
- Balanza de presicion
- Varilla de metal
- Probeta
- Caja Petri

Reactivos

- Gelatina sin sabor

- Azucar
- Agua
- Estracto de cebolla
Metodoligia.-

1.- Tener los instrumentos

2.-Pesar 10gr de gelatina sin sabor y depositar en la probeta

3.- Extraer 10ml de extracto de cebolla

4.- Aforar la solución hasta 1 litro

5.- Hacer calentar y agitar la preparación

6.- Dejar enfriar la preparación para vaciar a las cajas Petri

7.- Tapar la muestra

8.- Llevar al auto clave posteriormente sacar y guardar a un lugar a temperatura moderada

Resultdos.- Mencionar que tuvimos un medio de cultivo para identificación y cultivo de

bacteria

Conclusiones.-

-Aprendimos un medio de cultivo correcto

Observamos que se puede realizar un medio de c uktivo de los estractos de papa, carne y
cebolla

Anexos
-*-

-+

9*
 Tincion de Gram

INTRODUCCION.- La tinción de Gram, también conocida como coloración de Gram, es

una técnica de laboratorio que se utiliza rutinariamente en los estudios microbiológicos de
las bacterias. Fue diseñada por Christian Gram, un científico danés, en el año 1884. El
objetivo de Gram era conseguir una prueba con la que fuera posible diferenciar diferentes
grupos de bacterias para así poder estudiarlas y clasificarlas. La prueba resultó todo un
éxito y pronto se convirtió en una técnica muy útil no solo para el estudio de las bacterias,
sino también para poder identificarlas rápidamente en una infección y seleccionar el
antibiótico más adecuado para tratarla.

La técnica se basa en aplicar una serie de colorantes a una muestra de cualquier origen
(esputo, orina, pus, etcétera) que supuestamente contenga bacterias no identificadas. Los
colorantes tiñen la pared de las bacterias de color morado y, tras unos minutos, se realiza un
lavado del colorante. Después de eso puede que el colorante permanezca en la pared
bacteriana o que se haya ido. En el primer caso permanecería el color morado, y se trataría
de bacterias Gram positivas y, en el segundo, la pared tendría un color rosado, y serían
Gram negativas.

Objetivos.- Aprender a efectuar la tinción de gramy ccomprender su importancia

Distinguir los 2 grupos mas grandes en bacterias

Mteriales.-

-Microscopio compuesto binocular

Aceite de inmencion

Reactivos para la tinsion de gram

Violeta de de ganancia

Lugol agua en mangada

Pinza

Caja Petri
Porta objetos

Mechero

Gotero

Muetras de bacterias

Metodoligia

1.- Poner una gota de la bacteria en el porta objeto

2.- Con el cubreobjeto realizar una acción para sacar el exedente y tener una muetra
uniforme

3.- Pasar la muestra de la bactertia por el mechero unas 3 veces hasta que este seco

4.- Poner 1 a 2 gotas de solucionde genciana de violeta y dejar actuar de 30 a 40 y 5

minutos

5.- Lavar con un chorro de agua la muestra

6.- Posteriormente secar con papel filtro para sacar excedenteen el envés del porta objeto
pero sin tocar la muestra

7.- En otr muestra colocar 1 o 2 gotas del logolyy dejar actuar unos minutos

8.- Sacar co9n el gotero un poco de solución decoloradora alcohol cetona y dejar 10
seundos

9.- Nuevamente lavar y secar el exedentes de asgua sin dañar la muestra

10.- Luego cubrir con 1 o 2 gotas de fucsina y dejar 20 segundos

112.- Djar actuar y secar a temperatura ambiente

12.- Observsar en el microscopio de inmersión mínimamente 1000X bacterias GRAM

Conclusión y Recomendación .- Gracias a la TINCION DE GRAM se pudo reconocer s

importancia , bacterias en la muestra

Recomndar matar las bacterias antes de ecvhar a la basura por qe se puede prolongar