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INTRODUCCION

Para poder llegar a uno de los procesos más importantes de la biología molecular
llamada “electroforesis”, tuvimos que formar la base de todo proceso en biología
molecular en la cual, seleccionamos el método adecuado para la extracción de ADN
“salting out” y así poder continuar con la determinación de la concentración de ADN de
la muestra biología obtenida , para luego poder concluir con el método de
“electroforesis”, comenzaremos dividiendo el procesos en 3 secciones, con la
preparación del TBE, que va a permitir equilibrar y estabilizar el pH en la cual
trabajaremos a una solución stock de 10x y a un volumen de 500 ml, entonces
utilizando la fórmula de concentraciones o regla de tres simple, utilizaremos 12, 5 ml de
TBE, ya que es fundamental iniciar con la preparación del TBE por que nos va permitir
equilibrar y estabilizar el pH y utilizar el TBE en la preparación de gel de agarosa, solo
utilizamos 1 gr de gel de agarosa, continuamos con la preparación de la muestra,
cargando el sobrenadante en el tubo eppendorf (10 micro litros ) más el buffer de
corrida ( 5 micro litros ) este último es importante porque va a permitir hacer correr al
ADN y para eso le da densidad, por ultimo llegamos a la última parte en la cual el gel de
agarosa que habíamos preparado muy parecido al de la gelatina será el espacio donde
dispensaremos nuestra muestra y hay que tener en cuenta que la cámara de
electroforesis va a tener 2 polos el cual el cable rojo es el positivo y el cable negro
negativo, como ya sabemos el ADN al tener una carga negativa debería dispensarse en
el polo negativo para que corra hacia el polo positivo, los carriles van a tener un orden,
ya que en el primer carril se dispensa el buffer patrón que va a ser nuestro control que
nos permitirá saber si nuestros análisis están dentro de los valores de referencia o
correctos, entonces para que el ADN pueda correr le damos un voltaje de 80 V durante
30 min, esperamos para poder ver la corrida en 30 min, pero solo llegaremos a la parte
en la que ubicamos la muestra en la cámara de electroforesis ya que no contamos con un
transiluminador de luz ultravioleta para poder visualizarlos con el bromuro de etidio
(intercala los enlaces fosfato del ADN ), ahora si para dar unas acotaciones, hay que
tener en cuenta que para que tengamos éxito en este proceso, hay que preparar y cargar
bien la muestra.