Professional Documents
Culture Documents
Informe de Laboratorio 2:
Soluciones buffers y capacidad amortiguadora de un aminoácido.
Asignatura : Bioquímica
Victor Urbano
Sección : L2
Para que lo anterior sea posible existen unas disoluciones que ofrecen una gran
resistencia a la modificación de pH y por ello se denominan disoluciones buffer o
amortiguadoras. Esta capacidad reside en el hecho de que el equilibrio químico de un
electrolito débil viene regulado, en definitiva, por la constante de equilibrio. Si la
concentración de uno de los iones intervine en dicha constante se modifica, el equilibrio
se desplaza en el sentido de contrarrestar dicha acción.
Para obtener un buffer se requieren incorporar dos especies a una misma solución, una
capaz de neutralizar la adición de protones y un ácido capaz de neutralizar la adición de
hidroxilos. Según los requerimientos, el pH del buffer puede ser determinado de forma
teórica a partir de la ecuación de Henderson- Hasselbalch.(3)
Se procedió a preparar un set de 6 tubos de ensayo, para ello se etiquetó cada uno y con
la ayuda de una micropipeta se recolectaron los siguientes volúmenes de materiales:
Solución/Tubo 1 2 3 4 5 6
Una vez teniendo todos los contenidos en los tubos, se adicionó 3 gotas del indicador de
pH azul de Bromotimol, luego se tapó con papel film y se precedió a homogenizar.
Finalmente se registraron los colores obtenidos en la tabla 3.1
A continuación, se llenó una bureta de 25mL con una solución de NaOH (0.1 M). Acto
seguido se colocó el baso precipitado bajo la bureta, procurando que esta esté cerrada y
se incorporaron alícuotas de 1 mL de NaOH a la solución de glicina. Luego se midió el pH,
se registró en la tabla 3.2.
12
10
pH 6
0
0 0.0005 0.001 0.0015 0.002 0.0025 0.003
equivalencia [OH-]
5.1 Se concluyó que la solución buffer fosfato presenta una mayor capacidad de
amortiguación respecto a la capacidad del agua.
5.2 Se observó que el aminoácido diluido presenta dos puntos de inflexión, donde se
logró determinar el punto isoeléctrico pI=6.
Referencias
(1) Garrido, A., Teijón, J., Blanco, D., Villaverde, C., Mendoza, C. and Ramírez, J.
(2006). Fundamentos de bioquímica estructural. Madrid: Tébar, pp.40-41.
(2) Gismondi, M., Mas, E., Mikkelsen, K., Pertierra, A., Preciado, M., Rondinone, S.
and Pirolo, D. (2007). Fundamentos de Bioquímica. 2nd ed. Madrid: editorial
medica panamericana, p.35.
(3) Saaavedra Alejandra, (2018). Guía de laboratorio de bioquímica Actividad N°2:
“Soluciones buffers y capacidad amortiguadora de un aminoácido.”
(4) Veronica Gonzales Núñez. (2012) 4. Curvas de titulación de aminoácidos.
Universidad de Salamanca.