PRÁCTICA No.

1: BIOSEGURIDAD Y ESTERILIZACIÓN EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

Autores y códigos: Escandón Vargas Brenda Valeria 411026, Rodríguez Giraldo David Santiago
412547, Mauricio …… Fecha: 12-08-2015

Objetivo general: Conocer los conceptos básicos y metodologías de desinfección y

esterilización y aplicarlos en los materiales implementados en el laboratorio de Microbiología.

Materiales e Forma de preparación del material Método

insumos apropiado para la
esterilización
Cajas Petri Limpiar, desinfectar y envolver en papel Craft Calor Húmedo:
Autoclave
Pipetas Pasteur Limpiar, desinfectar y se le coloca en la boquilla un
plásticas trocito de algodón que actuará como filtro, evitando
la contaminación del operario con los Calor seco: horno
microorganismos de la muestra y que éste a su vez
contamine la muestra.
Pipetas de vidrio Limpiar, desinfectar y poner un pedacito de algodón Calor Húmedo:
en el extremo superior y luego envolver en papel Autoclave
Craft
Erlenmeyer y/ Limpiar, desinfectar y tapar la boca con algodón o con Calor Húmedo:
Beaker papel aluminio sujetándolo con un caucho Autoclave
Hisopos de Limpiar, desinfectar y envolver en papel Craft Calor Húmedo:
algodón Autoclave
Agua destilada El agua destilada utilizada en la preparación de
medios de cultivos y para reconstituir reactivos, debe Calor húmedo:
tener un control de calidad básico que incluye los Autoclave
parámetros químicos y bacterianos.

Solución de Se filtra la solución, donde se desecha lo filtrado y se Radiaciones y/o

antibióticos titula el liquido sobrenadante para neutralizar Filtración
Carbohidratos Se necesitan productos dispersantes para poder Calor húmedo:
limpiarlos. Autoclave

Bajalenguas (o Se envuelven en papel aluminio y/o papel craft Calor seco: Horno
depresor lingual)
Probeta vidrio Limpiar, desinfectar y tapar la boca con algodón o con Calor Húmedo:
papel aluminio sujetándolo con un caucho Autoclave
Asa Se rosea con alcohol y luego se flamea con la llama Calor Seco:
bacteriológica. del mechero Directo a la llama
Asa Digralsky o Se rosea con alcohol y luego se flamea con la llama Calor Seco:
hockey de vidrio del mechero Directo a la llama
Pinzas metálicas Se rosea con alcohol y luego se flamea con la llama Calor Seco:
del mechero Directo a la llama
Tubos de ensayo Limpiar, desinfectar y tapar la boca con algodón o Calor Húmedo:
poner la tapa Autoclave
Papel filtro De por si el material se encontraba preparado pero Calor húmedo o
son compuestos por sustancias como ésteres de calor seco
celulosa o polímeros plásticos
Suelo Recolección de muestra de suelo Calor Directo
DISCUSIÓN

La desinfección y esterilización es de vital importancia para cualquier práctica de laboratorio,

porque la presencia de cualquier microorganismo puede alterar, contaminar y afectar los
medios de cultivos o demás muestras que están presente en el laboratorio. El material de
vidrio y plástico se debe clasificar, para lograr una efectiva esterilización; para los
instrumentos de vidrio es recomendable realizar su esterilización en un horno, debido a que no
se van a presentar problemas por oxidación o corrosión. Mientras que para los materiales de
plásticos es mejor llevarlos al autoclave para evitar que este tipo de instrumentos se derrita
por efectos del calor.

CONSULTA

1. Liste al menos tres microorganismos representativos para cada uno de los cuatro niveles de
contingencia en los laboratorios de microbiología, mencionando la importancia que representa
para su área de formación.

Niveles de contingencia Microorganismo Importancia

Nivel 1 Lactobacillus caseishirota, En la Agroindustria el
Saccharomyces, impacto es más positivo, ya
Bifidobacterium que algunos de estos
microorganismos son
Nivel 2 Staphylococcus s., Salmonella utilizados para trasformar
sp, Toxoplasma sp sustratos en productos y
Nivel 3 Micobacterium tuberculosis, generar un valor agregado en
Brucella abortus, Coxiella las propiedades
burneti. organolépticas.
Nivel 4 Amarita phalloides, Claviceps Para la Agronomia ……
pupúrea, Mycobacterium
bovis.

2. ¿Qué medidas podría tomar usted para verificar la efectividad de la esterilización en

autoclave?

Para que sea eficaz, se deben controlar muy bien las variables de proceso, ser estrictos con el
tiempo, la temperatura para que la acción del calor sea la necesaria para eliminar todo tipo de
microorganismo. Además se puede medir su eficacia a través de indicadores biológicos y
químicos.

3. ¿Defina liofilización?

Liofilización, es un proceso en el que se congela el producto y una vez congelado se introduce

en una cámara de vacío para realizar la separación del agua por sublimación. De esta manera
se elimina el agua desde el estado sólido al gaseoso del ambiente sin pasar por el estado
líquido.
4. ¿Defina sonicación?

La sonicación es un procedimiento en el cual se aplica energía (ultrasonidos) para agitar las

partículas de una muestra. En suspensiones liquidas producen cambios de presión generando
un fenómeno de cavitación.

Es un método eficaz para mejorar el diagnóstico microbiológico de las infecciones protéticas.

5. ¿Defina tindalización?

Es un método de esterilización fraccionada para microorganismo que se inactivan a más de

100 ºC. Consiste en someter el material a varios ciclos (3 o 4) de dos fases sucesivas cada uno:
a) el material se calienta a una temperatura entre 50 y 100 ºC, durante 1 o 2 horas;
b) el material se incuba en una estufa, a 30-37ºC durante 24 horas.

En la primera fase mueren todas las células vegetativas de la muestra, pero permanecen
viables las esporas, que quedan activadas para germinar. En el segundo ciclo se produce la
germinación de esas esporas. Al repetir el ciclo, nuevamente, mueren las células vegetativas
procedentes de la germinación en la fase anterior; y así sucesivamente.

6.¿Qué metodología de esterilización es la adecuada para cada una de las siguientes muestras
ambientales? (i) Medios de cultivo sólidos contaminados con Salmonella sp., (ii) muestras de
agua residual doméstica, (iii) hisopos utilizados en muestreo de manipuladores de alimentos,
(iv) tejidos de procedencia animal y origen desconocido, (v) suelo, (vi) suelo inoculado con
patógenos de plantas y (vii) antibióticos?

 Medios de cultivo sólidos contaminados con Salmonella sp: mediante calor húmedo
(autoclave).
 Muestras de agua residual domestica: mediante filtración.
 Hisopos utilizados en muestreo de manipuladores de alimentos: mediante calor seco,
envueltos en papel aluminio y luego en papel craft (horno).
 Tejidos de procedencia animal y origen desconocido: calor húmedo (autoclave).
 Suelo: mediante calor húmedo (autoclave).
 Suelo inoculado con patógenos de plantas: calor húmedo (autoclave).
 Antibióticos: Filtración y/o rayos UV.

CONCLUSIONES

 Al esterilizar los materiales y desinfectar el sitio de trabajo podemos obtener un

trabajo seguro y ordenado, evitando perdidas y riesgos a la hora de manipular los
materiales.
 Se logró reconocer y saber el modo de uso de los materiales de laboratorio, además de
tener en cuenta las normas de bioseguridad que debemos seguir en un laboratorio de
investigación, para evitar accidentas inesperados al momento de realizar una práctica.
REFERENCIAS

 Rojas-Triviño, A. (2011). Conceptos y Prácticas de Microbiología General. Ed. UNAL S.P.

13-22p.
 Maria Garrido Garcia. Gaceta dental. Efectividad y seguridad de los procesos de
esterilización. Consultado el 14 de agosto de 2015. Disponible en línea:
http://www.gacetadental.com/2013/04/efectividad-y-seguridad-de-los-procesos-de-
esterilizacion-en-odontologia-23956/
 Inmaculada Fernández Moreno. Control de Infecciones Corporación Sanitaria Parc Taulí.
Sabadell. Tiene la sonicación un papel en el control de brotes? Consultado el 14 de agosto
de 2015. Disponible en línea:
http://www.seimc.org/contenidos/gruposdeestudio/geih/dcientificos/ponencias/2013/geih-
pn-2013-01-2.pdf
 Técnica de Tindalización. Procedimiento en productos cárnicos. Consultado el 14 de
agosto de 2015. Disponible en línea:
http://www.foxplay.com/co/lifestyle/recipes/3474-tecnica-
tindalizacion?ref=foxlife&folder=recetas/3474-tecnica-tindalizacion.html